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鉴别猪圆环病毒1型和2型的二重PCR方法的建立 被引量：1
1
作者 陈钜豪 陈文玉 +4 位作者 甘志鹏 刘健 赵海参 曾小娜 罗满林 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1390-1394,共5页
根据GenBank上发表的PCV-1和PCV-2序列,设计2对引物分别扩增PCV-1和PCV-2的独特区域,长度为382 bp和222 bp。将PCR产物分别克隆至pMD-18T vector,经转化、PCR鉴定和序列测定,构建了PCV-1和PCV-2的阳性质粒,并等量混合作为二重PCR阳性模... 根据GenBank上发表的PCV-1和PCV-2序列,设计2对引物分别扩增PCV-1和PCV-2的独特区域,长度为382 bp和222 bp。将PCR产物分别克隆至pMD-18T vector,经转化、PCR鉴定和序列测定,构建了PCV-1和PCV-2的阳性质粒,并等量混合作为二重PCR阳性模板。将2对PCR引物混合后,进行退火温度优化,敏感性和特异性试验,并用于临床检测。结果表明,该二重PCR方法可以特异性地鉴别PCV-1和PCV-2,最低检出量分别为0.1 ng和0.01 ng,敏感性较高。应用该方法可对临床样品进行准确、快速地诊断,为猪圆环病毒的临床诊断与流行病学调查等研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 二重PCR方法 阳性模板 流行病学调查
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雏番鸭早期干脚死亡的原因分析与对策
2
作者 黎鸿彬 梁国雄 +1 位作者 操胜 赵海参 《中国家禽》 北大核心 2015年第4期60-61,共2页
每逢寒冷季节,雏番鸭早期死亡率会有明显提高,并以干脚死亡为主。笔者结合对养殖场雏番鸭早期干脚死亡的调查情况和多年饲养管理的体会,就雏番鸭早期干脚死亡的症状、原因和预防对策进行阐述。
关键词 雏番鸭 干脚死亡 原因 对策
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猪圆环病毒3型Cap蛋白原核表达及ELISA方法建立
3
作者 李群辉 吴雨 +4 位作者 代锐 林丽苗 赵海参 洪家兵 王连想 《上海畜牧兽医通讯》 2024年第6期12-19,共8页
本研究通过设计同源重组引物扩增cap基因,并重组到pET-28a原核表达载体中;阳性质粒经IPTG诱导表达,表达蛋白经纯化后,获得截短的带有His标签的PCV3 Cap蛋白;以Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV3抗体间接ELISA检测方法;对ELISA检测方法的抗... 本研究通过设计同源重组引物扩增cap基因,并重组到pET-28a原核表达载体中;阳性质粒经IPTG诱导表达,表达蛋白经纯化后,获得截短的带有His标签的PCV3 Cap蛋白;以Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV3抗体间接ELISA检测方法;对ELISA检测方法的抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数、二抗稀释度、二抗稀释度、包被条件、封闭条件、血清反应时间、二抗反应时间、显色时间等进行优化,确定临界值(血清D_(450)≥0.239时,PCV3阳性;血清D_(450)≤0.213时,PCV3阴性;0.213<血清D_(450)<0.239时,可疑),优化的ELISA检测方法具有较好的特异性和较高的重复性。这为PCV3抗体的临床检测以及后续疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型 CAP蛋白 原核表达 ELISA
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