摘要
本研究通过设计同源重组引物扩增cap基因,并重组到pET-28a原核表达载体中;阳性质粒经IPTG诱导表达,表达蛋白经纯化后,获得截短的带有His标签的PCV3 Cap蛋白;以Cap蛋白作为包被抗原,建立PCV3抗体间接ELISA检测方法;对ELISA检测方法的抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释倍数、二抗稀释度、二抗稀释度、包被条件、封闭条件、血清反应时间、二抗反应时间、显色时间等进行优化,确定临界值(血清D_(450)≥0.239时,PCV3阳性;血清D_(450)≤0.213时,PCV3阴性;0.213<血清D_(450)<0.239时,可疑),优化的ELISA检测方法具有较好的特异性和较高的重复性。这为PCV3抗体的临床检测以及后续疫苗研究提供参考。
出处
《上海畜牧兽医通讯》
2024年第6期12-19,共8页
Shanghai Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine
基金
“十四五”广东省农业科技创新十大主攻方向“揭榜挂帅”项目(2023SDZG02)。
