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昆虫对病原真菌的防御机制研究进展 被引量:8
1
作者 侯成香 +1 位作者 刘挺 郭锡杰 《安徽农业科学》 CAS 2012年第23期11649-11652,共4页
从昆虫的体壁防御、先天免疫、体温升高和免疫缺陷4个方面,阐述昆虫对真菌的防御机制及其自身的防御缺陷、病原真菌对昆虫识别的逃避对策的研究进展。
关键词 昆虫 病原真菌 感染 防御机制 研究进展
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家蚕浓核病毒(镇江)株主要结构蛋白基因的克隆及表达 被引量:5
2
作者 张志芳 +2 位作者 黄可威 郭锡杰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期279-282,共4页
The major structural protein gene was cloned from Bombyx mori densovirus,Zhenjiang strain (BmDNV-ZJ),sequenced and expressed in Escherichia coli.The gene consists of 1500 nucleotides and is predicted to code a prote... The major structural protein gene was cloned from Bombyx mori densovirus,Zhenjiang strain (BmDNV-ZJ),sequenced and expressed in Escherichia coli.The gene consists of 1500 nucleotides and is predicted to code a protein of 499 amino acids.An identity of 98.1% in nucleotide sequence and 98.6% of the predicted amino acid sequence are shared with its homologue,Bombyx mori densovirus (Yamanashi isolate) VD1-ORF2,respectively.The gene was inserted into expression plasmid vector pET-28a and expressed in Escherichia coli BL21(DE3) strain under the inducible promoter Lac.The expressed 53kD product could be detected by Western blotting with viral antiserum.It suggests that the gene we cloned is a structural protein gene. 展开更多
关键词 家蚕 浓核病毒 结构蛋白 基因 克隆 表达
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家蚕对浓核病毒中国(镇江)株抵抗性机制的初步研究 被引量:5
3
作者 裘智勇 李木旺 +3 位作者 刘挺 沈兴家 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期596-601,共6页
通过生物测定和地高辛(DIG)标记的酶联免疫吸附剂测定(ELISA),初步分析了家蚕对浓核病毒中国(镇江)株(Bombyxmori densovirus,BmDNV-z)的抵抗性机制。试验表明:供试家蚕品种的消化液、血液中均不存在对BmDNV-z侵染性有影响的蛋白因子;... 通过生物测定和地高辛(DIG)标记的酶联免疫吸附剂测定(ELISA),初步分析了家蚕对浓核病毒中国(镇江)株(Bombyxmori densovirus,BmDNV-z)的抵抗性机制。试验表明:供试家蚕品种的消化液、血液中均不存在对BmDNV-z侵染性有影响的蛋白因子;抵抗性家蚕品种的中肠组织蛋白中不存在BmDNV-z的病毒受体蛋白,而感受性家蚕品种的中肠组织蛋白中可能存在对BmDNV-z侵染性有影响的蛋白因子,即感受性家蚕品种的中肠组织中可能存在BmDNV-z的病毒受体蛋白因子,且BmDNV-z与感受性家蚕品种中肠组织蛋白的结合具有组织特异性。 展开更多
关键词 家蚕 中肠组织 抵抗性 浓核病毒
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蚕室蚕具消毒剂“消杀精”的消毒效果 被引量:3
4
作者 刘挺 黄可威 《中国蚕业》 1995年第2期17-18,共2页
目前农村以家庭联产承包责任制为主的千家万户分散养蚕,病原扩散污染较为严重,迫切需要高效广谱性消毒药剂应用于生产。由于各地生产水平、生活水平和对蚕药使用习惯不同,对蚕药的要求也不同。为此,我们从降低腐蚀性、刺激性,满足不同... 目前农村以家庭联产承包责任制为主的千家万户分散养蚕,病原扩散污染较为严重,迫切需要高效广谱性消毒药剂应用于生产。由于各地生产水平、生活水平和对蚕药使用习惯不同,对蚕药的要求也不同。为此,我们从降低腐蚀性、刺激性,满足不同地区对蚕药不同要求的多样性出发,研制开发了新消毒剂消杀精。 展开更多
关键词 蚕室 蚕具 消毒剂 消杀精 消毒效果
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浓核病毒(镇江株)感受性家蚕品种中肠组织不同部位蛋白质比较分析 被引量:3
5
作者 郭锡杰 蒋云峰 +3 位作者 裘智勇 刘挺 沈兴家 《江苏科技大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2011年第2期178-182,199,共6页
为了探明浓核病毒镇江株(BmDNV-ZJ)感受性家蚕品种中肠组织不同部位对浓核病毒感受性差异的蛋白质组学机制,阐明家蚕浓核病毒的致病机理,应用等电聚焦(IFE),SDS-PAGE分离,2D P latinum软件以及质谱技术,对感受性家蚕品种中肠前、中、后... 为了探明浓核病毒镇江株(BmDNV-ZJ)感受性家蚕品种中肠组织不同部位对浓核病毒感受性差异的蛋白质组学机制,阐明家蚕浓核病毒的致病机理,应用等电聚焦(IFE),SDS-PAGE分离,2D P latinum软件以及质谱技术,对感受性家蚕品种中肠前、中、后3个区段的组织蛋白进行了比较分析.结果表明:中肠前、中、后3个区段组织蛋白的点数、位置、点形等差异较小.在中肠前部和后部组织中找出的4个差异蛋白点,分别为脂蛋白前体、囊膜氢离子泵ATP合酶B亚基、α胰蛋白酶A链和肌动蛋白;在中肠中部找出的一个差异蛋白点为Kun itz型胰蛋白酶抑制剂A链.这些蛋白点可能在BmDNV-ZJ侵染感受性家蚕中肠组织细胞中起一定的作用. 展开更多
关键词 家蚕 浓核病毒(镇江株) 中肠 蛋白质
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家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)的表达及活性研究 被引量:3
6
作者 赵盼 唐顺明 +2 位作者 刘挺 郭锡杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期2149-2155,共7页
【目的】对家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)基因进行克隆、表达,并测定表达产物的生物活性。【方法】利用PCR技术从家蚕浓核病毒镇江株(BmDNV-Z)基因组中扩增得到非结构蛋白2(NS2)基因片段,将其克隆到表达载体pET28a得到重组表达质... 【目的】对家蚕浓核病毒镇江株非结构蛋白2(NS2)基因进行克隆、表达,并测定表达产物的生物活性。【方法】利用PCR技术从家蚕浓核病毒镇江株(BmDNV-Z)基因组中扩增得到非结构蛋白2(NS2)基因片段,将其克隆到表达载体pET28a得到重组表达质粒pET28a-NS2,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,SDS-PAGE和Westernblot检测,表达产物经Ni柱纯化,经过复性检测其Helicase和ATPase活性。【结果】克隆获得了BmDNV-ZNS2基因,并在大肠杆菌中得到了成功表达,表达产物经Ni柱纯化获得了目的蛋白NS2。纯化的NS2蛋白具有Helicase活性,能将双链DNA底物解旋成为单链,并且具有一定的底物极性选择性,对于极性底物表现出更高的解旋活性。同时,纯化的NS2蛋白具有ATPase活性,其酶活力可达到0.276μmol·μg-1·h-1。【结论】BmDNV-ZNS2基因编码的病毒非结构蛋白具有Helicase和ATPase活性,并且Helicase活性具有一定的底物极性选择性,推测该基因在病毒DNA的复制过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 家蚕 浓核病毒 非结构蛋白 表达 活性
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家蚕抗菌肽cecropin A的表达特征及其体内外抑菌研究 被引量:3
7
作者 吕丁丁 耿涛 +3 位作者 侯成香 黄玉霞 郭锡杰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1368-1376,共9页
家蚕抗菌肤cecropin A(BmCecA)是家蚕体液免疫中产生的一种重要的抗菌肤。本研究利用RT-PCR技术克隆出BmCecA基因的开放阅读框(ORF),该ORF编码22个氨基酸的信号肤和37个氨基酸的成熟肤,通过蛋白结构分析该成熟肤形成经典的双亲α螺旋。... 家蚕抗菌肤cecropin A(BmCecA)是家蚕体液免疫中产生的一种重要的抗菌肤。本研究利用RT-PCR技术克隆出BmCecA基因的开放阅读框(ORF),该ORF编码22个氨基酸的信号肤和37个氨基酸的成熟肤,通过蛋白结构分析该成熟肤形成经典的双亲α螺旋。实时荧光定量PCR表明,BmCecA在5龄家蚕的体壁、马氏管、中肠、丝腺、血淋巴和脂肪体中均有表达在脂肪体中表达量最高,其次是血淋巴。通过固相合成法合成BmCecA成熟肤用质谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明其分子量约为4.05 kD,高效液相色谱检测其纯度为89.14%。用合成多肤分别对革兰氏阴性菌大肠杆菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomouas aerugiuosa)、革兰氏阳性菌球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)做体外抑菌实验,发现BmCecA对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有明显的抑菌作用。首次用BmCecA做家蚕的体内抑菌实验,结果显示注射BmCecA的家蚕存活率显著高于对照组相对于对照组,致死中时间(LT_(50))分别延长了17.85%(大肠杆菌)、37.31%(铜绿假单胞菌)、21.92%(球形节杆菌)、49.45%(枯草芽孢杆菌)差异显著。凝胶迁移实验结果说明BmCecA可能在破坏细菌细胞膜之后作用于基因组DNA和RNA,从而导致细菌的快速死亡。本研究结果有利于从分子水平上深入理解家蚕乃至其它昆虫抵御细菌侵染的防御机理,也为家蚕的抗菌育种提供理论依据。 展开更多
关键词 家蚕 CECROPIN A 抗菌活性 细菌
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蚕室蚕具消毒剂消杀灵的消毒效果 被引量:2
8
作者 刘挺 黄可威 《中国蚕业》 1997年第1期14-15,共2页
关键词 蚕室 蚕具 消毒剂 消杀灵
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家蚕浓核病毒中国(镇江)株基因组的克隆及重组质粒转染家蚕对浓核病毒的拯救 被引量:3
9
作者 付艳红 唐顺明 +2 位作者 刘挺 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期453-458,共6页
家蚕浓核病毒中国(镇江)株(BombyxmoriDensovirus Zhenjiang Strain,BmDNV-ZJ)包含VD1和VD2共2种基因组DNA。以BmDNV-ZJ感染家蚕中肠总DNA为模板,采用PCR方法扩增得到2种DNA,并将其克隆到质粒pGEM-T构建了重组质粒pGEM-VD1和pGEM-VD2。... 家蚕浓核病毒中国(镇江)株(BombyxmoriDensovirus Zhenjiang Strain,BmDNV-ZJ)包含VD1和VD2共2种基因组DNA。以BmDNV-ZJ感染家蚕中肠总DNA为模板,采用PCR方法扩增得到2种DNA,并将其克隆到质粒pGEM-T构建了重组质粒pGEM-VD1和pGEM-VD2。采用DEAE-dextran转染技术,将2种重组质粒分别导入家蚕幼虫体内,能使家蚕幼虫发病,免疫双向扩散和免疫酶组化法检测都能检出阳性反应,但转染pGEM-VD2重组质粒的家蚕幼虫发病率较低。通过重组质粒转染方法,可以使BmDNV-ZJ感受性品种和抵抗性品种都发病,但感受性品种的发病率较高。将重组质粒转染发病蚕的中肠匀浆,取上清液经口接种健康蚕幼虫,也能使其发病。上述结果表明,携带BmDNV-ZJ DNA的重组质粒在家蚕幼虫体内拯救出了感染性的病毒粒子。 展开更多
关键词 家蚕 浓核病毒 重组质粒 病毒拯救
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两个对浓核病毒(镇江株)具感性差异的家蚕品种的血液和围食膜蛋白的比较 被引量:3
10
作者 裘智勇 赵巧玲 +3 位作者 刘挺 沈兴家 郭锡杰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期274-281,共8页
家蚕品种间对浓核病毒(镇江株)具有不同的感染性,为了进一步探明家蚕对浓核病毒(镇江株)感性差异的分子机制,本文运用蛋白质电泳和质谱技术比较分析了两个对家蚕浓核病毒(镇江株)感性和抗性的近等基因系家蚕品种JS和NIL的血液和围食膜... 家蚕品种间对浓核病毒(镇江株)具有不同的感染性,为了进一步探明家蚕对浓核病毒(镇江株)感性差异的分子机制,本文运用蛋白质电泳和质谱技术比较分析了两个对家蚕浓核病毒(镇江株)感性和抗性的近等基因系家蚕品种JS和NIL的血液和围食膜组织蛋白。结果表明:这两个家蚕品种的血液和围食膜组织蛋白组成差异很小。在血液组织蛋白中发现5个差异蛋白点,其中家蚕品种JS血液中有两个差异蛋白,可能分别为酪蛋白激酶和新型组织蛋白;在NIL血液组织中发现3个差异蛋白点,其中两个可能分别为线粒体延伸因子和类丝氨酸蛋白酶,另外1个的含量极显著高于JS,为血淋巴蛋白。在围食膜蛋白中共发现4个差异蛋白点,其中JS围食膜中有1个差异蛋白可能为新型组织蛋白;其余3个蛋白点在含量上相互间存在显著差异。本研究根据组织差异蛋白的功能初步推测家蚕对浓核病毒(镇江株)感性差异与血液蛋白差异无显著相关,与围食膜蛋白差异可能有关。 展开更多
关键词 家蚕 浓核病毒(镇江株) 血液 围食膜 蛋白质组
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全杀威对蚕的病原体消毒效果研究 被引量:2
11
作者 黄可威 陆有华 +1 位作者 沈中元 《蚕业科学》 CAS CSCD 1992年第4期232-236,共5页
全杀威(又名90蚕用消毒净)是有机氯的复合散剂。400倍水溶液对家蚕病毒多角体,800倍液对家蚕病原真菌,1600倍液对家蚕病原细菌和微粒子孢子有明显的消毒效果。是广谱性高效消毒药剂。250倍液可用于蚕室、蚕具消毒;800倍液用于叶面消毒... 全杀威(又名90蚕用消毒净)是有机氯的复合散剂。400倍水溶液对家蚕病毒多角体,800倍液对家蚕病原真菌,1600倍液对家蚕病原细菌和微粒子孢子有明显的消毒效果。是广谱性高效消毒药剂。250倍液可用于蚕室、蚕具消毒;800倍液用于叶面消毒。使用时以现配现用为好。 展开更多
关键词 家蚕 全杀威 病原体 消毒
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家蚕miRNA Novel-31*上调溶血素基因的表达 被引量:1
12
作者 施莉莉 耿涛 +5 位作者 吴萍 潘中华 高坤 侯成香 郭锡杰 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期724-731,共8页
【目的】Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA。本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调... 【目的】Novel-31*是在家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,Bm CPV)感染的家蚕中发现的一个差异表达miRNA。本研究旨在验证Novel-31*对其靶基因表达的调控作用,以便进一步研究miRNA及其靶基因在昆虫免疫调节中的作用。【方法】用生物信息学方法预测Novel-31*的靶基因,荧光定量PCR分析Novel-31*及其靶基因在家蚕感染Bm CPV后不同时间点的表达变化;构建miRNA慢病毒表达载体和靶基因慢病毒表达载体,转染293T细胞,同时合成Novel-31*mimics转染家蚕培养细胞Bm N,使用荧光定量PCR检测Novel-31*对靶基因表达的调控作用。【结果】生物信息学方法预测发现,溶血素基因是Novel-31*的靶基因,其结合位点位于溶血素基因的5'UTR区域。荧光定量PCR分析表明,Novel-31*及溶血素基因在感染Bm CPV的家蚕血淋巴细胞中呈现明显的上调表达。荧光定量PCR检测表明,在Novel-31*慢病毒表达载体和溶血素基因5'UTR慢病毒表达载体转染的293T细胞中和在转染Novel-31*mimics的家蚕Bm N细胞中,溶血素基因都上调表达。【结论】溶血素基因是miRNA Novel-31*的靶基因,Novel-31*与溶血素基因5'UTR结合,上调溶血素基因的表达。 展开更多
关键词 家蚕 MIRNA Novel-31* 靶基因 慢病毒载体 溶血素
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家蚕等昆虫贮存蛋白的研究进展 被引量:1
13
作者 侯成香 郭锡杰 《中国蚕业》 2016年第4期1-5,共5页
介绍了家蚕等昆虫贮存蛋白的种类、结构和分子量,贮存蛋白在家蚕等不同昆虫体内的表达差异及调控研究进展;总结了家蚕等昆虫贮存蛋白所具有的作为蛋白质与氨基酸的储存库、参与昆虫新表皮的形成、载体运输、抗逆免疫,以及参与卵的形成... 介绍了家蚕等昆虫贮存蛋白的种类、结构和分子量,贮存蛋白在家蚕等不同昆虫体内的表达差异及调控研究进展;总结了家蚕等昆虫贮存蛋白所具有的作为蛋白质与氨基酸的储存库、参与昆虫新表皮的形成、载体运输、抗逆免疫,以及参与卵的形成和成虫蛋白的合成等功能;展望了家蚕等昆虫贮存蛋白今后的研究应用方向。 展开更多
关键词 昆虫 家蚕 贮存蛋白 脂肪体 血淋巴
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家蚕感染二分浓核病毒(镇江株)的数字基因表达谱分析 被引量:1
14
作者 高坤 尚梦珂 +2 位作者 钱荷英 郭锡杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第17期3453-3464,共12页
【目的】筛选家蚕与二分浓核病毒(Bombyx mori bidensovirus Zhenjiang strain,Bm BDV-ZJ)感染相关的差异表达基因,鉴定家蚕与病毒感染有关的调控基因,为进一步阐明家蚕抗Bm BDV-ZJ的分子机制提供理论依据。【方法】采用Illumina高通量... 【目的】筛选家蚕与二分浓核病毒(Bombyx mori bidensovirus Zhenjiang strain,Bm BDV-ZJ)感染相关的差异表达基因,鉴定家蚕与病毒感染有关的调控基因,为进一步阐明家蚕抗Bm BDV-ZJ的分子机制提供理论依据。【方法】采用Illumina高通量测序技术,构建家蚕品种JS口服感染Bm BDV-ZJ的数字基因表达谱,为排除个体间差异,以10头蚕作为一个样本用于DGE检测。样本中基因的差异表达检测通过严格的运算法则进行,对差异检验的P值(P value)作多重假设检验校正,通过控制FDR(false discovery rate)来决定P值的域值。本研究中,差异表达基因定义为FDR≤0.001且差异倍数在2倍及以上(|log2ratio|≥1)的基因。采用基因本体论(GO)分类体系确定所有差异表达基因可能的功能。用GO计算P值和bonferoni校正。选用校正P值≤0.05作为基因组显著富集的阈值。WEGO软件用来视化、比较和绘制GO注释结果。利用KEGG数据库进行通路富集分析,进一步确定显著富集代谢途径或信号传导途径,Q值≤0.05的通路指定为DGEs中的显著富集通路。通过q RT-PCR方法对部分差异表达基因进行验证。【结果】感染组和对照组分别得到4 850 663和4 875 307个原始标签,去除低质量标签后,分别得到4 757 934和4 788 406个清洁标签,对应的标签种类数量分别为62 436和63 680种。两个文库间的清洁标签和清洁标签种类的数量在不同拷贝区间分布类似,感染组和对照组样本的测序量分别为3.5 M和3.7 M,测序深度符合试验的要求,两样本的DGE数据是可信的。将这两个DGE数据库的所有清洁标签与家蚕参考基因库进行比对,在对照组与感染组中,分别有36.39%和45.30%的清洁标签可以比对到基因。另有50.02%和43.34%的清洁标签可以比对到家蚕参考基因组,剩余的未知标签分别占清洁标签总数的13.59%和12.35%。共发现了447个差异表达基因,其中306个上调表达,141个下调表达。分 展开更多
关键词 家蚕 数字基因表达谱 二分浓核病毒 Q RT-PCR
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桑象虫微孢子虫对家蚕的病原性研究
15
作者 黄可威 《中国蚕业》 2001年第2期17-18,共2页
关键词 桑象虫微孢子虫 家蚕 病原特性 传染性
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家蚕黑尾病及其防治方法研究
16
作者 黄可威 卢克松 《蚕业科学》 CAS CSCD 2001年第2期123-127,共5页
家蚕黑尾病主要是由曲霉菌在蚕尾部寄生引起的一种真菌病 ,从病蚕中分离到病原菌有两种 ,一种孢子表面棘多而长、黄褐色 ,孢子大 ,直径 4~ 6 μm ;一种孢子表面棘短而少、蓝绿色 ,孢子小 ,直径 2~ 3μm。黑尾病在高温多湿条件下多发 ... 家蚕黑尾病主要是由曲霉菌在蚕尾部寄生引起的一种真菌病 ,从病蚕中分离到病原菌有两种 ,一种孢子表面棘多而长、黄褐色 ,孢子大 ,直径 4~ 6 μm ;一种孢子表面棘短而少、蓝绿色 ,孢子小 ,直径 2~ 3μm。黑尾病在高温多湿条件下多发 ,多发生于 4龄中期至 5龄中期。黑尾病病原菌侵染寄生家蚕的过程是 :病原菌分生孢子附着在蚕尾部背板与节间的三角形节间膜处 ,分生孢子发芽侵入蚕体产生黑色小病斑 ,随病情加重病斑加大 ,甚至在病斑处出现节间断裂 ,直至形成黑尾症状。使用药剂防治黑尾病以 5 展开更多
关键词 家蚕 黑尾病 曲霉菌 防治 真菌病 形态特征 侵染规律
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家蚕真菌病的发生规律及防治 被引量:1
17
作者 沈中元 《中国蚕业》 2010年第2期87-89,共3页
关键词 真菌病 家蚕 发生规律 防治 传染性蚕病 体内寄生 病原真菌 发病死亡
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农药氰戊菊酯和杀虫双诱导家蚕血液蛋白的变化 被引量:7
18
作者 吴立娜 赵巧玲 +5 位作者 裘智勇 夏定国 沈中元 沈兴家 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期262-267,共6页
为了解析家蚕对常用农药氰戊菊酯和杀虫双的解毒机制,分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药,观察家蚕对农药的中毒症状,采用双向电泳(2-DE)技术对添食农药的家蚕幼虫的血液蛋白进行分离,利用电喷雾电离(ESI)质谱对具有2次以上重复的显著差异蛋... 为了解析家蚕对常用农药氰戊菊酯和杀虫双的解毒机制,分别给家蚕5龄幼虫添食2种农药,观察家蚕对农药的中毒症状,采用双向电泳(2-DE)技术对添食农药的家蚕幼虫的血液蛋白进行分离,利用电喷雾电离(ESI)质谱对具有2次以上重复的显著差异蛋白点进行鉴定,并用生物信息学方法进行分析。家蚕5龄幼虫分别添食1/4LD50剂量浓度的2种农药后,均在3~12h内出现中毒症状,且血液蛋白的表达也发生了变化:在氰戊菊酯诱导下,幼虫血液中增加了纤维样蛋白、果糖-1,6-二磷酸醛缩酶、半胱氨酸蛋白酶抑制剂;在杀虫双诱导下,幼虫血液中增加了丝氨酸蛋白酶抑制剂-13;经2种农药分别诱导处理后3h,幼虫血液中都减少了体液低分子蛋白-Ⅲ的表达。推测家蚕对氰戊菊酯和杀虫双具有一定的免疫反应。 展开更多
关键词 家蚕 血液蛋白 氰戊菊酯 杀虫双 诱导 双向电泳 ESI质谱
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家蚕感染质型多角体病毒(BmCPV)后中肠组织差异蛋白质分析 被引量:5
19
作者 高坤 邓祥元 +2 位作者 裘智勇 郭锡杰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期2796-2807,共12页
【目的】分析家蚕感染质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,BmCPV)后中肠组织中蛋白质的差异表达,为从蛋白质分子水平上探索家蚕感染BmCPV后的分子应答机制奠定基础。【方法】通过蛋白质双向凝胶电泳技术(two-di... 【目的】分析家蚕感染质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,BmCPV)后中肠组织中蛋白质的差异表达,为从蛋白质分子水平上探索家蚕感染BmCPV后的分子应答机制奠定基础。【方法】通过蛋白质双向凝胶电泳技术(two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE)对BmCPV病毒感染组和灭菌水对照组家蚕p50的中肠组织蛋白进行比较,通过基质辅助质量飞行时间质谱技术(MALDI-TOFMS)和家蚕蛋白质数据库检索对所得到的差异蛋白点进行鉴定与分析。【结果】2-DE电泳结果比较分析表明,BmCPV感染组和对照组家蚕的中肠组织有8个差异蛋白斑点,其中对照中肠有3个,感染中肠有5个。经MALDI-TOF MS鉴定结果显示对照家蚕中肠中的3个差异蛋白斑点分别为家蚕的类固醇脱氢酶(Hydroxysteroid dehydrogenase)、线粒体电压依赖的阴离子通道孔蛋白(Voltage-dependent anion-selective channel,VDAC)和1个未知新型蛋白;感染家蚕中肠的5个差异蛋白点分别是家蚕的Ras-鸟嘌呤核苷酸释放因子1(Ras-specific guanine nucleotide-releasing factor 1-like,RASGRF1)、H+转运ATP合成酶亚基、候选肿瘤抑制因子(Putative tumor suppressor protein,PDSS2)、多药耐药蛋白(Multidrug resistance-associated protein,MRP4/ABCC4)、冻坏B样蛋白(Nipped-B-like protein-like,NIPBL)。【结论】BmCPV感染可导致家蚕中肠组织多种蛋白的差异表达,提示家蚕可能通过启动不同的机制来应答病毒的感染,其中VDAC的下调表达以及PDSS2、MRP4/ABCC4和NIPBL的上调表达均与诱导细胞凋亡相关,推测家蚕在BmCPV感染的过程中可能启动了细胞凋亡的抗病毒机制。 展开更多
关键词 家蚕 质型多角体病毒 中肠 差异蛋白
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白僵菌诱导家蚕抗菌肽enbocin1基因的表达特征及产物的抗真菌活性 被引量:4
20
作者 黄玉霞 耿涛 +4 位作者 侯成香 吕丁丁 高坤 郭锡杰 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期619-626,共8页
家蚕的抗菌肽家族基因enbocin1是蚕体免疫系统相关基因。为解析家蚕对病原真菌感染免疫应答反应的分子机制,采用实时荧光定量PCR检测抗菌肽基因enbocin1在家蚕5龄幼虫感染球孢白僵菌(Beauveria bassiana)后的时空表达模式,结果显示:enbo... 家蚕的抗菌肽家族基因enbocin1是蚕体免疫系统相关基因。为解析家蚕对病原真菌感染免疫应答反应的分子机制,采用实时荧光定量PCR检测抗菌肽基因enbocin1在家蚕5龄幼虫感染球孢白僵菌(Beauveria bassiana)后的时空表达模式,结果显示:enbocin1主要在幼虫脂肪体中显著上调表达,而且持续至感染诱导后30 h,感染后8、30 h的表达水平分别上调了约44倍和6倍;在马氏管、体壁中该基因的诱导表达差异不显著,在血淋巴中几乎检测不到该基因的表达。进一步用原核表达系统成功表达并纯化获得了高纯度的重组家蚕抗菌肽enbocin1,体外抑菌试验表明其对白僵菌具有较强的抑菌活性,且重组enbocin1蛋白浓度与抑菌活性之间具有量效关系。用重组enbocin1蛋白制备了效价达1∶30 000的多克隆抗体,可用于进一步深入研究enbocin1的功能及其作用机制。研究结果提示抗菌肽enbocin1在家蚕抵御真菌感染的过程中可能具有重要作用。 展开更多
关键词 家蚕 抗菌肽 enbocin1基因 基因表达 抑菌活性 球孢白僵菌
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