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胱抑素C与早期肾功能损害的关系 被引量:25
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作者 刘丽琴 王捷 +1 位作者 黄志红 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第24期3256-3258,共3页
目的探讨内源性标志物血清胱抑素C(cystatin C,Cys C)在评价早期肾功能损害中的价值。方法收集住院的慢性肾病患者108例,按内生肌酐清除率(Ccr)值分为早期肾功能不全组及中晚期肾功能不全组,40例对照组取自体检健康人群。乳胶颗粒增强... 目的探讨内源性标志物血清胱抑素C(cystatin C,Cys C)在评价早期肾功能损害中的价值。方法收集住院的慢性肾病患者108例,按内生肌酐清除率(Ccr)值分为早期肾功能不全组及中晚期肾功能不全组,40例对照组取自体检健康人群。乳胶颗粒增强免疫透射比浊分析法(PETIA)测定血清Cys C的浓度,肌氨酸氧化酶法测定血清肌酐(Scr)浓度,酶偶联法测定尿素氮(BUN)。比较Cys C、Scr、BUN与Ccr的相关性及其阳性检出率。采用似然比(LR)评价Cys C的可靠性。结果对照组、早期肾功能不全组、中晚期肾功能不全组的血清Cys C分别为(0.63±0.41)、(2.59±1.32)(、7.13±1.68)mg/L。Cys C、Scr、BUN与Ccr均呈显著相关(P<0.05),以Cys C与Ccr的相关程度最密切。血清Cys C的阳性检出率最高,LR以血清Cys C为最佳。结论血清Cys C是一个敏感的反映肾小球滤过功能的指标,对早期诊断肾功能损害具有重要价值。 展开更多
关键词 胱抑素C 肾功能损害 肾小球滤过率
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弓形虫pVAX1-SAG2真核表达质粒的构建及其诱导的小鼠免疫应答 被引量:17
2
作者 高世同 吴少庭 +3 位作者 龙彩虹 张仁利 黄达娜 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期658-661,共4页
目的 构建弓形虫主要速殖子表面抗原 2 (SAG2 )编码基因真核表达质粒pVAX1-SAG2 ,并接种小鼠 ,分析其所诱导的免疫应答。方法 以限制性内切酶EcoRⅠ与KpnⅠ双酶切从重组质粒 pGEM/SAG2中获得SAG2目的基因片段 ,约5 92个bp ,将其插入... 目的 构建弓形虫主要速殖子表面抗原 2 (SAG2 )编码基因真核表达质粒pVAX1-SAG2 ,并接种小鼠 ,分析其所诱导的免疫应答。方法 以限制性内切酶EcoRⅠ与KpnⅠ双酶切从重组质粒 pGEM/SAG2中获得SAG2目的基因片段 ,约5 92个bp ,将其插入真核表达载体 pVAX1多克隆位点 ,构建重组质粒 pVAX1-SAG2 ,并转化大肠杆菌JM 10 9,阳性克隆以双酶切与PCR法鉴定。大量提取纯化重组质粒 pVAX1-SAG2 ,5 0 μg肌肉注射小鼠左后腿内侧肌肉 ,3周后加强免疫一次 ;RT-PCR检测SAG2在小鼠肌肉中的转录表达 ,流式细胞仪测定T细胞亚群 ,以速殖子虫体抗原作ELISA测定小鼠血清IgG抗体。结果 真核表达重组质粒 pVAX1-SAG2双酶切鉴定及PCR扩增结果与预期结果相符合。RT -PCR从注射部位肌肉组织总RNA中扩增出SAG2目的基因条带 ;重组质粒 pVAX1-SAG2免疫组CD+ 4 细胞数为 32 .35± 5 .38,显著高于空质粒pVAX1及生理盐水 (NS)二对照组 (P <0 .0 1) ,后二者CD+ 4 细胞数分别为 19.6 5± 4 .2 1与 17.84± 1.5 9;免疫组CD+ 8细胞数为 18.6 7± 2 .37,但与空质粒及NS对照组相比 ,差别不显著 (P >0 .0 5 )。ELISA测定结果显示 pVAX1/SAG2免疫组小鼠血清中出现抗弓形虫特异性IgG抗体。结论 构建成功SAG2真核表达重组质粒 pVAX1-SAG2 。 展开更多
关键词 弓形虫 速殖子主要表面抗原2基因 DNA接种 免疫应答
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谷氨酸脱羧酶若干研究进展 被引量:13
3
作者 周智广 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期77-80,共4页
谷氨酸脱羧酶是γ氨基丁酸的合成酶,主要存在于脑和胰岛中。因体内存在多种形式的谷氨酸脱羧酶,现无获得各种均一的谷氨酸脱羧酶的统一方法。谷氨酸脱羧酶的克隆和表达,既弄清了谷氨酸脱羧酶的基因结构与定位,又为谷氨酸脱羧酶的... 谷氨酸脱羧酶是γ氨基丁酸的合成酶,主要存在于脑和胰岛中。因体内存在多种形式的谷氨酸脱羧酶,现无获得各种均一的谷氨酸脱羧酶的统一方法。谷氨酸脱羧酶的克隆和表达,既弄清了谷氨酸脱羧酶的基因结构与定位,又为谷氨酸脱羧酶的大规模应用奠定了基础。目前认为谷氨酸脱羧酶是Ⅰ型糖尿病的始动靶抗原,体内注入谷氨酸脱羧酶可预防或延缓NOD(nonobesediabetic)小鼠Ⅰ型糖尿病的发生。 展开更多
关键词 谷氨酸脱羧酶 纯化 克隆 理化性质
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阳离子脂质体与基因转移 被引量:12
4
作者 周智广 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期163-165,共3页
阳离子脂质体是表面带正电的脂质体。它可与带负电的基因(DNA或RNA)形成带正电的脂-基因复合物,此复合物借静电作用吸附于细胞表面,通过与细胞膜融合或细胞内吞而将结合的基因导入细胞,并获得表达。阳离子脂质体转基因的操... 阳离子脂质体是表面带正电的脂质体。它可与带负电的基因(DNA或RNA)形成带正电的脂-基因复合物,此复合物借静电作用吸附于细胞表面,通过与细胞膜融合或细胞内吞而将结合的基因导入细胞,并获得表达。阳离子脂质体转基因的操作简便、重复性好,转染效率高,在基因工程、物种培育和基因治疗研究等方面有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 基因转移 阳离子脂质体 基因载体
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长沙市某院6535例肺结核患者耐药结果分析 被引量:16
5
作者 郭婧玮 谭云洪 +3 位作者 易松林 陈忠南 王诗 《实用预防医学》 CAS 2015年第8期1014-1017,共4页
目的调查长沙市某院就诊肺结核患者耐药情况。方法收集2013-2014年湖南省胸科医院就诊结核患者6 535例,采用绝对浓度法测定病人对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、卡那霉素、氧氟沙星6种常用抗结核药物的敏感性。结果经痰结核菌培养... 目的调查长沙市某院就诊肺结核患者耐药情况。方法收集2013-2014年湖南省胸科医院就诊结核患者6 535例,采用绝对浓度法测定病人对异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、卡那霉素、氧氟沙星6种常用抗结核药物的敏感性。结果经痰结核菌培养阳性1 140例,初治患者591例,复治患者549例;耐药肺结核患者443例,总耐药率为38.86%(443/1 140),其中初治患者耐药率为25.38%(150/591),复治患者耐药率为53.37%(293/549)。在耐多药患者中,耐多药率为23.7%(270/1 140),复治患者的耐多药率35.15%(193/549)高于初治耐多药患者13.03%(77/591),复治患者在阳性率、耐药率和耐多药率方面均高于初治患者,其差异均有统计学意义(分别χ2=104.91,P=0.000;χ2=93.84,P=0.000;χ2=77.09,P=0.000)。根据性别分类,男性患者阳性率19.46%高于女性患者阳性率13.32%(χ2=37.75,P=0.000),但女性患者分别在单耐RFP和单耐SM均高于男性患者,差异有统计学意义(分别χ2=4.152,P=0.042;χ2=10.257,P=0.001)。RFP、INH和SM为单药耐药率最高的前三位,分别为28.50%、28.42%和21.58%。而在MDRTB中,以同时耐利福平、异烟肼和链霉素所占比例最高,达32.2%(87/270)。结论长沙市某院就诊肺结核患者的总耐药率和耐多药率均较高,MDR-TB中,菌株中以异烟肼、利福平和链霉素三种药物同时耐药的患者数最高,中老年人群是结核病及耐药结核的高发人群,复治患者在阳性率、耐药率和耐多药率方面均高于初治患者。 展开更多
关键词 结核 药敏试验 耐多药结核
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血水草生物碱及其血根碱抑菌作用的研究 被引量:15
6
作者 孙文霞 +3 位作者 黄琼瑶 杨洁 刘年猛 钟志宏 《实用预防医学》 CAS 2010年第9期1864-1866,共3页
目的观察血水草生物碱(Eomecon chionantha Alkaloids,ECA)及其血根碱(Sanguinarine,SAN)的抑菌作用。方法以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌为受试菌,采用琼脂打孔扩散法和琼脂平板稀释法,研究ECA及SAN的抑菌... 目的观察血水草生物碱(Eomecon chionantha Alkaloids,ECA)及其血根碱(Sanguinarine,SAN)的抑菌作用。方法以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白假丝酵母菌为受试菌,采用琼脂打孔扩散法和琼脂平板稀释法,研究ECA及SAN的抑菌作用。结果 ECA和SAN可抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的生长,而对铜绿假单胞菌无抑制作用;ECA对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为40、160、40μg/ml;SAN对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的MIC分别为40、80、40μg/ml。结论 ECA和SAN对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌具有较强的抑菌效果,对铜绿假单胞菌没有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 血水草生物碱 血根碱 抑菌作用 最低抑菌浓度
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中性粒细胞-淋巴细胞比值及血小板-淋巴细胞比值与SLE疾病活动度的相关性分析 被引量:15
7
作者 刘培 刘苗 +1 位作者 叶剑荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期1887-1890,1896,共5页
目的:分析中性粒细胞-淋巴细胞比值(NLR)及血小板-淋巴细胞比值(PLR)与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动度的相关性。方法:收集湖南省人民医院121例SLE患者与100例健康体检者的临床资料及实验室检查数据,根据SLEDAI评分将SLE患者分为活动组... 目的:分析中性粒细胞-淋巴细胞比值(NLR)及血小板-淋巴细胞比值(PLR)与系统性红斑狼疮(SLE)疾病活动度的相关性。方法:收集湖南省人民医院121例SLE患者与100例健康体检者的临床资料及实验室检查数据,根据SLEDAI评分将SLE患者分为活动组与缓解组,分析NLR、PLR与SLE疾病活动度的相关性。结果: SLE患者NLR和 PLR分别为4.78(2.82~7.80)和197.56(137.27~285.52),对照组NLR和 PLR分别为1.75(1.51~2.11)和113.84(98.65~131.11);SLE患者NLR和 PLR较对照组显著升高,差异均有统计学意义( P <0.001);活动组的NLR和 PLR分别为5.99(3.49~10.47)和206.81(151.33~333.47),缓解组的NLR和 PLR分别为4.02(2.16~5.37)和182.09(115.00~247.14);活动组NLR、PLR与缓解组相比显著升高,差异均有统计学意义( P <0.05);SLEDAI评分与NLR、PLR呈正相关( r =0.372、0.232, P <0.05)。结论: NLR、PLR可作为SLE疾病活动度的评价指标。 展开更多
关键词 中性粒细胞-淋巴细胞比值 血小板-淋巴细胞比值 系统性红斑狼疮
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Cystatin-ELISA法诊断日本血吸虫病的研究 被引量:7
8
作者 黄跃龙 易新元 +5 位作者 曾宪芳 张顺科 李忠杰 周东明 王庆林 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第2期115-118,共4页
目的 建立一种敏感、高特异性的血吸虫病诊断方法。方法 应用 Cystatin捕获血吸虫吐出物中的半胱氨酸蛋白酶 ,再进行 EL ISA试验检测日本血吸虫 (Sj)病人血清中相应的特异抗体。结果 检测 12 0例慢性血吸虫病人血清 ,84例非疫区正常... 目的 建立一种敏感、高特异性的血吸虫病诊断方法。方法 应用 Cystatin捕获血吸虫吐出物中的半胱氨酸蛋白酶 ,再进行 EL ISA试验检测日本血吸虫 (Sj)病人血清中相应的特异抗体。结果 检测 12 0例慢性血吸虫病人血清 ,84例非疫区正常人血清和 36例华支睾吸虫病人血清 ,Cys-tatin- EL ISA检测 Sj病人阳性率为 98.4 % ,与正常人及华支睾吸虫病人无交叉反应。其敏感性(98.4 % )与 SEA- EL ISA法的敏感性 (93.4 % )比较无明显区别 (P>0 .0 5 ) ,但特异性显著高于后者(P<0 .0 5 )。 Cystatin- EL ISA敏感性和特异性亦均高于 AWA- EL ISA和 ES- EL ISA。结论  Cys-tatin- EL ISA敏感性高 ,特异性强 ,是一种有效的诊断血吸虫病的方法。 展开更多
关键词 血吸虫病 ES Cystatin-ELISA法 诊断 抗体 日本血吸虫
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用噬菌体展示技术筛选日本血吸虫免疫原的模拟短肽 被引量:7
9
作者 王敏 易新元 +6 位作者 曾宪芳 周东明 张顺科 章洁 李忠杰 王庆林 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期295-298,共4页
目的 从噬菌体随机 12肽库免疫筛选出大鼠对血吸虫天然抗性的模拟靶表位 ,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。方法 用粗提大鼠血清IgG作固相配体筛选噬菌体 12肽库 ,按吸附 洗脱 扩增的淘洗过程进行 3轮筛选 ;随机挑取噬菌体克隆用E... 目的 从噬菌体随机 12肽库免疫筛选出大鼠对血吸虫天然抗性的模拟靶表位 ,探讨其抗日本血吸虫的免疫保护效果。方法 用粗提大鼠血清IgG作固相配体筛选噬菌体 12肽库 ,按吸附 洗脱 扩增的淘洗过程进行 3轮筛选 ;随机挑取噬菌体克隆用ELISA检测其特异性 ,并对其中的 2个克隆进行测序 ;用混合噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,分别在 0、1、3周进行 ,第 5周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴 ,4 5d后剖杀冲虫 ,计虫数及肝卵数。结果 经 3轮筛选 ,特异性结合噬菌体富集增加了 2 0 0多倍 ,随机挑取 2 0个噬菌体克隆经ELISA鉴定 ,有 19个克隆能与大鼠血清呈特异性反应。自动测序仪测序的 2个克隆的序列与GenBank的已知序列无同源性。与对照组相比 ,混合噬菌体克隆免疫小鼠的减虫率为 33.6 % ,减卵率为 5 9.8%。结论 利用噬菌体展示技术可获得天然抗血吸虫抗性的短肽 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 模拟短肽 免疫筛选 噬菌体随机肽库
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血水草生物碱致钉螺肝脏损伤机制研究 被引量:9
10
作者 彭玲 +3 位作者 杨盛清 彭飞 刘年猛 黄琼瑶 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期127-129,共3页
目的分析血水草生物碱(ECA)对钉螺肝脏蛋白质和糖原水平、酶活性变化及脂质过氧化的影响,探讨血水草杀灭钉螺机制。方法 10 mg/L ECA药液浸泡钉螺36 h,解剖活钉螺,分离肝脏,测定总蛋白质和糖原、丙二醛(MDA)水平及丙氨酸氨基转移酶(ALT... 目的分析血水草生物碱(ECA)对钉螺肝脏蛋白质和糖原水平、酶活性变化及脂质过氧化的影响,探讨血水草杀灭钉螺机制。方法 10 mg/L ECA药液浸泡钉螺36 h,解剖活钉螺,分离肝脏,测定总蛋白质和糖原、丙二醛(MDA)水平及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果 ECA浸泡后钉螺肝脏总蛋白质和糖原的量均显著降低,AKP、ALT、AST、LDH酶活性明显下降,与清水对照组相比,均存在显著差异(P<0.05、0.01);而ACP及MDA水平差异不显著。结论 ECA抑制钉螺肝脏AKP、ALT、AST、LDH酶活性,影响钉螺肝脏糖及蛋白质代谢,破坏代谢平衡,导致肝功能紊乱,从而引起钉螺死亡。 展开更多
关键词 血水草 生物碱 钉螺 糖原 脂质过氧化
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过碘酸钠氧化可溶性虫卵抗原ELISA诊断血吸虫病的研究 被引量:5
11
作者 黄跃龙 易新元 +2 位作者 曾宪芳 张冉 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期238-241,共4页
目的 改进可溶性虫卵抗原-酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA),进一步提高其诊断血吸虫病的敏感性、特异性及疗效考核价值。方法 应用过碘酸钠(sodium Perodate,SP)处理SEA,氧化其糖基化表位,建立SP-SEA-ELISA,检测血吸虫病患者血清中的特异... 目的 改进可溶性虫卵抗原-酶联免疫吸附试验(SEA-ELISA),进一步提高其诊断血吸虫病的敏感性、特异性及疗效考核价值。方法 应用过碘酸钠(sodium Perodate,SP)处理SEA,氧化其糖基化表位,建立SP-SEA-ELISA,检测血吸虫病患者血清中的特异性抗体,并与常规SEA-ELISA进行比较。结果 分别用两种方法检测患者血清,其中慢性血吸虫病64例、华支睾吸虫病34例、卫氏并殖吸虫病33例、囊尾蚴病36例,检测健康人血清119例。SP-SEA-ELISA特异性为99.2%,高于SEA-ELISA,敏感性为98.4%,与SEA-ELISA比较无明显降低。用SP-SEA-ELISA及SEA-ELISA检测治疗后12个月的慢性血吸虫病患者血清,阴性率为89.0%,明显优于SEA-ELISA(42.1%)。结论 过碘酸钠处理SEA,可提高免疫诊断特异性,降低交叉反应,有一定的疗效考核价值。 展开更多
关键词 过碘酸钠 氧化 可溶性虫卵抗原 ELISA 诊断 血吸虫病
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重组日本血吸虫铁蛋白的表达纯化及诱导小鼠保护性免疫研究 被引量:4
12
作者 王敏 易新元 +3 位作者 曾宪芳 李先平 罗秀菊 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期113-116,共4页
目的 表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白 ,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用。方法 用基因重组技术 ,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体 pGMC上 ;在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达 ;用电泳层析法分离... 目的 表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白 ,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用。方法 用基因重组技术 ,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体 pGMC上 ;在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达 ;用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS -PAGE和Western -blot鉴定表达纯化产物 ;用纯化的重组铁蛋白免疫小鼠三次 ,分别在 0、2、4周进行。第 6周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴。 4 2天后剖杀冲虫 ,计数虫数及肝卵数。结果 纯化的重组铁蛋白分子量为 4 0kD ,具有较好的免疫原性 ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。与对照组相比 ,纯化重组铁蛋白免疫小鼠组的减虫率为 2 4 5 % ,减卵率为 4 5 8%。结论 重组日本血吸虫铁蛋白不仅在大肠杆菌中得到高效表达 ,而且纯化的铁蛋白分子能诱导抗日本血吸虫病的保护性免疫。 展开更多
关键词 重组日本血吸虫铁蛋白 表达 纯化 诱导 小鼠 保护性免疫
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血水草血根碱对钉螺肝脏损伤的研究 被引量:8
13
作者 孙文霞 +3 位作者 黄琼瑶 彭飞 刘年猛 杨盛清 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期82-84,共3页
目的分析血水草血根碱(SAN)对钉螺肝脏糖原、重要酶活性及脂质过氧化的影响,探讨SAN对钉螺肝脏损伤的机理。方法自血水草粉末中分离SAN,配制5 mg/L水溶液,每500 ml溶液投放50只钉螺,25℃浸泡36 h,解剖活螺,分离肝脏,另设清水对照组。测... 目的分析血水草血根碱(SAN)对钉螺肝脏糖原、重要酶活性及脂质过氧化的影响,探讨SAN对钉螺肝脏损伤的机理。方法自血水草粉末中分离SAN,配制5 mg/L水溶液,每500 ml溶液投放50只钉螺,25℃浸泡36 h,解剖活螺,分离肝脏,另设清水对照组。测定钉螺肝脏糖原和丙二醛(MDA)含量以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性,采用独立样本t检验对统计结果进行分析。结果 SAN组和清水对照组钉螺的肝脏糖原含量分别为(12.151±0.204)mg/g和(18.113±0.163)mg/g,差异有统计学意义(P<0.05);MDA水平分别为(5.298±0.441)nmol/mgprot和(4.351±0.197)nmol/mgprot,差异无统计学意义(P>0.05);SAN组钉螺的肝脏ALT、AST、ACP、AKP、SOD分别为(2.760±0.076)U/mg-prot、(68.723±2.295)U/mgprot、(407.949±19.868)U/gprot、(191.287±0.771)U/gprot、(48.452±0.193)U/mgprot,清水对照组钉螺分别为(1.104±0.000)U/mgprot、(49.448±1.626)U/mgprot、(344.475±30.186)U/gprot、(121.905±3.127)U/gprot、(38.814±2.765)U/mgprot,两组差异均具有统计学意义(P均<0.05),SAN组和清水对照组钉螺肝脏POD活性分别为(22.170±0.018)U/mgprot、(21.747±0.264)U/mgprot,两组POD差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SAN可引起钉螺肝脏糖原含量及一些重要酶活性的改变而导致钉螺肝功能损伤。 展开更多
关键词 血水草血根碱 钉螺 肝脏
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弓形虫GRA4基因真核表达重组质粒DNA免疫小鼠的研究 被引量:8
14
作者 林绮萍 吴少庭 +8 位作者 翁亚彪 高世同 张仁利 黄达娜 雷明军 温见翔 潘晖榕 秦莉 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第3期180-183,共4页
目的用pVACGRA4真核表达重组质粒免疫小鼠,观察诱导的免疫应答及对弓形虫感染的保护作用。方法大量制备pVACGRA4真核表达重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠3次,以pVAC空质粒及不经任何处理的空白组为对照。于末次免疫4周后... 目的用pVACGRA4真核表达重组质粒免疫小鼠,观察诱导的免疫应答及对弓形虫感染的保护作用。方法大量制备pVACGRA4真核表达重组质粒,经基因枪腹部皮内注射免疫BALB/c小鼠3次,以pVAC空质粒及不经任何处理的空白组为对照。于末次免疫4周后作免疫指标测定(包括MTT法测定小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性、间接免疫荧光法测定T淋巴细胞亚群数目、双夹心ELISA法测定细胞因子IFNγ及IL4含量、间接ELISA法测定IgG抗体滴度),并观察攻毒试验后小鼠存活情况。结果脾淋巴细胞增殖各组间差异无显著性(P>0.05);pVACGRA4组CD4+T细胞百分率无明显变化(P>0.05),CD8+T细胞百分率明显增加(与pVAC对照组比较P<0.05,与空白对照组比较P<0.01),CD4+/CD8+比值也较空白对照组明显降低(P<0.01);pVACGRA4免疫组IFNγA值比对照组略高,但差异无显著性(P>0.05),IL4A值各组间无明显变化(P>0.05);pVACGRA4组可诱导产生特异性IgG抗体,但滴度不高;pVACGRA4免疫组小鼠存活率显著高于两对照组,死亡小鼠的平均存活时间延长(与空白对照组比较P<0.05)。结论用pVACGRA4重组质粒DNA免疫小鼠,可诱导产生以细胞免疫为主的免疫应答及对弓形虫攻击感染的部分保护作用。 展开更多
关键词 弓形虫 GRA4 DNA免疫 小鼠
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SARS冠状病毒S蛋白部分序列1的克隆与表达 被引量:5
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作者 吴少庭 +4 位作者 秦莉 黄达娜 高世同 张仁利 余新炳 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期13-16,共4页
目的 构建SARS冠状病毒S蛋白部分序列 1(S1)的原核重组表达质粒 ,并分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法 采用逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)技术从SARS冠状病毒RNA中扩增出编码S1蛋白的基因片段 ,并克隆至pMD18-T载体上 ;菌落PCR鉴... 目的 构建SARS冠状病毒S蛋白部分序列 1(S1)的原核重组表达质粒 ,并分析其在大肠杆菌中的表达状况。方法 采用逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)技术从SARS冠状病毒RNA中扩增出编码S1蛋白的基因片段 ,并克隆至pMD18-T载体上 ;菌落PCR鉴定阳性克隆并测序列分析 ;将阳性克隆的插入片段亚克隆至表达载体pGEX - 4T - 2 ,转化大肠杆菌JM10 9,PCR和双酶切鉴定转化菌落 ;将阳性菌株经IPTG诱导 ,SDS -PAGE和免疫印迹分析截短型S蛋白的表达。结果 RTPCR扩增出S1蛋白的特异片段 ,其阳性克隆的序列存在 2处碱基突变第 36位G变为A ;第 333位由C变为T) ,其中第 36位为有义突变 ,第 333位为同义突变 ;阳性克隆中截短型S1蛋白的基因片段被亚克隆到表达载体pGEX - 4T - 2而构建成重组表达质粒 ,并在JM 10 9中表达了S1蛋白的融合蛋白 ,表达的蛋白能与GST免疫血清和SARS病人血清反应。结论 成功构建了SARS冠状病毒S1蛋白的重组表达质粒 ,该质粒在大肠杆菌中表达了截短型S蛋白的融合蛋白。 展开更多
关键词 SARS 冠状病毒 基因克隆 基因表达 基因序列 严重急性呼吸综合征 S1蛋白
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医学检验技术专业发展和就业形势调查分析 被引量:7
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作者 陈心怡 任林 +1 位作者 曾灵 《卫生职业教育》 2021年第21期117-118,共2页
目的对医学检验技术专业发展和就业形势进行调查,为医学检验技术专业教育改革提供参考。方法采用问卷星对湖南师范大学医学院和南华大学衡阳医学院2015级至2019级医学检验技术专业学生共623人进行匿名调查,用描述法分析调查结果。结果... 目的对医学检验技术专业发展和就业形势进行调查,为医学检验技术专业教育改革提供参考。方法采用问卷星对湖南师范大学医学院和南华大学衡阳医学院2015级至2019级医学检验技术专业学生共623人进行匿名调查,用描述法分析调查结果。结果大部分学生对医学检验技术专业发展持有信心,但仍有部分学生对自己所学专业缺乏自信;在严峻的就业形势和高质量社会要求下,大部分学生认为需要提升自己的综合能力,希望学校优化实践教学环节;本科毕业后,学生主要就业途径是自主择业和校园招聘,也有很多学生选择考研深造,以适应愈加激烈的就业竞争环境。结论医学检验技术教育改革应以医院检验科岗位能力需求及医学发展和社会需求为导向,从课程体系、人才培养方案等方面进行改革,培养符合社会发展需求的复合型医学检验技术人才。 展开更多
关键词 医学检验技术 专业发展 就业形势
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日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究 被引量:2
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作者 王敏 易新元 +2 位作者 曾宪芳 李先平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期696-699,共4页
目的 :构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白 ,并初步观察其免疫诊断价值。方法 :将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体 ,转化重组体到大肠杆菌E .coli 2 5 6 6进行表达 ;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋... 目的 :构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白 ,并初步观察其免疫诊断价值。方法 :将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体 ,转化重组体到大肠杆菌E .coli 2 5 6 6进行表达 ;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS PAGE和Westernblot鉴定表达纯化产物 ;用Dot ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清。结果 :重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 ) 日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达 ,分子量为 4 0kD ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。用重组铁蛋白检测 30例日本血吸虫病人血清和 30例正常人血清 ,阳性率和假阳性率分别为 93 3%和 3 3%。结论 :成功地表达纯化日本血吸虫重组铁蛋白 ,且该蛋白具有一定的免疫诊断价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 铁蛋白 基因克隆 表达 免疫诊断
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LBL与TBL整合教学法在研究生分子生物学教学中的应用 被引量:5
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作者 刘宁 侯德富 《教育教学论坛》 2017年第11期246-247,共2页
分子生物学在精准医学中占有重要的地位。本文探讨LBL与TBL整合教学法在医学研究生分子生物学教学中的应用,发现LBL与TBL整合教学增强学生自主学习的能力,培养学生的团队意识、探究意识和创新思维,加深对知识的理解,并可活跃课堂的学习... 分子生物学在精准医学中占有重要的地位。本文探讨LBL与TBL整合教学法在医学研究生分子生物学教学中的应用,发现LBL与TBL整合教学增强学生自主学习的能力,培养学生的团队意识、探究意识和创新思维,加深对知识的理解,并可活跃课堂的学习氛围。这为研究生教育教学提供了有益的参考。 展开更多
关键词 分子生物学 研究生 LBL TBL 教学模式
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血水草生物碱致钉螺肝脏蛋白质差异表达分析 被引量:5
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作者 彭玲 黄琼瑶 +3 位作者 刘建军 彭飞 孙慧 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期431-435,共5页
目的分析血水草生物碱(ECA)致钉螺肝脏蛋白质表达的变化。方法10mg/LECA浸泡钉螺36h后,解剖活钉螺并收集肝脏,双向电泳分离ECA组和清水对照组钉螺肝脏蛋白质,ImageMaster2D5.0软件分析图谱,筛选差异蛋白质,并用MALDI-TOF-TOF质谱进行鉴... 目的分析血水草生物碱(ECA)致钉螺肝脏蛋白质表达的变化。方法10mg/LECA浸泡钉螺36h后,解剖活钉螺并收集肝脏,双向电泳分离ECA组和清水对照组钉螺肝脏蛋白质,ImageMaster2D5.0软件分析图谱,筛选差异蛋白质,并用MALDI-TOF-TOF质谱进行鉴定。结果ECA组和清水对照组分别检出(354±110)、(311±12)个蛋白点;质谱鉴定获得假定蛋白、ENSANGP00000022175蛋白、醛脱氢酶、未知蛋白、ENSAN-GP00000027067蛋白、类似锚蛋白3的1亚型4亚亚型蛋白、相似A型肝炎病毒短型细胞受体1的蛋白、线粒体异柠檬酸脱氢酶2样蛋白、类似角蛋白的蛋白、角蛋白10、角蛋白1共11个蛋白质,这些蛋白质均为ECA处理后表达上调的蛋白质。结论ECA可引起钉螺肝脏蛋白质表达发生改变。 展开更多
关键词 血水草 生物碱 钉螺 肝脏 蛋白质组学
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日本血吸虫新基因的克隆及分析 被引量:3
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作者 陈欲晓 唐连飞 +3 位作者 章洁 曾宪芳 易新元 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期167-170,共4页
目的:克隆并分析日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)新基因,提供有效的疫苗候选分子。方法用Sj雄虫可溶性抗原免疫家兔血清为探针筛选Sj成虫cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片断进行PCR扩增并测序,通过互联网NCBIGenBank和蛋白质分析... 目的:克隆并分析日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)新基因,提供有效的疫苗候选分子。方法用Sj雄虫可溶性抗原免疫家兔血清为探针筛选Sj成虫cDNA文库,将所获阳性克隆的插入片断进行PCR扩增并测序,通过互联网NCBIGenBank和蛋白质分析软件进行分析。结果:共筛选得11个阳性克隆,经分析有2个新基因,分别是Sj P8(GenBank注册号AF517843)和Sj肌球蛋白cDNA序列(GenBank注册号AY770506),分别编码含75个氨基酸的跨膜蛋白和含212个氨基酸的蛋白片断。结论:Sj P8和Sj肌球蛋白cDNA序列可能为日本血吸虫疫苗的研究提供有价值的材料。 展开更多
关键词 日本血吸虫 新基因 成虫CDNA文库 cDNA序列 阳性克隆 肌球蛋白 PCR扩增 血吸虫疫苗 探针筛选 抗原免疫 NCBI 分析软件 跨膜蛋白 氨基酸 兔血清 可溶性 互联网 蛋白质 片断 注册
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