转化生长因子－β的测定 被引量：10

1

作者 虞冠华 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1995年第2期116-117,123,共3页

转化生长因子－β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦ－β）活性测定方法分为生物学及免疫学两类。生物学测定法是通过ＴＧＦ－β刺激或抑制敏感细胞株增殖、调节细胞基质形成、抗原表达程度来确定其活性... 转化生长因子－β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦ－β）活性测定方法分为生物学及免疫学两类。生物学测定法是通过ＴＧＦ－β刺激或抑制敏感细胞株增殖、调节细胞基质形成、抗原表达程度来确定其活性和含量，常用正常大鼠肾成纤维细胞软琼脂克隆法和Ｍｙ－ｌ－Ｌｕ水貂肺上皮细胞生长抑制３Ｈ－ＴｄＲ掺入法。该法具有灵敏度高、直接表现ＴＧＦ－β生物功能的特点。免疫测定法常用ＥＬＩＳＡ，操作简便、专一性强、稳定性好，能区别不同ＴＧＦ－β亚型。 展开更多

关键词 转化生长因子 β 测定 TGF-Β

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大肠杆菌表达的重组肿瘤坏死因子的纯化 被引量：5

2

作者 龙娜 唐治华 +4 位作者 虞冠华 施凤霞 朱有华 丁树标 许祥裕 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第1期61-64,共4页

采用离子交换层析分离纯化大肠杆菌表达的重组人肿瘤坏死因子（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ｒｈＴＮＦ－α），通过分步洗脱得到了含ｒｈＴＮＦ－α单一条带的色谱峰，比活达２．４&... 采用离子交换层析分离纯化大肠杆菌表达的重组人肿瘤坏死因子（Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｈｕｍａｎｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ｒｈＴＮＦ－α），通过分步洗脱得到了含ｒｈＴＮＦ－α单一条带的色谱峰，比活达２．４×１０８Ｕ／ｍｇ，回收率为７７．２％，为ｒｈＴＮＦ－α的大规模制备及临床应用奠定了基础。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 液相色谱 重组 提纯

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转化生长因子-β(TGF-β)的结构 被引量：4

3

作者 虞冠华 葛锡锐 姚(金珏) 《细胞生物学杂志》 CSCD 1994年第3期111-117,共7页

1978年,Delarco和Todar首先发现病毒转化的细胞能分泌一种具有使正常大鼠肾成纤维细胞表型发生转化能力的因子,它在表皮生长因子(EGF)存在的情况下使贴壁生长的细胞特性发生改变,获得在软琼脂培养基上生长形成克隆的能力,并失去生长密... 1978年,Delarco和Todar首先发现病毒转化的细胞能分泌一种具有使正常大鼠肾成纤维细胞表型发生转化能力的因子,它在表皮生长因子(EGF)存在的情况下使贴壁生长的细胞特性发生改变,获得在软琼脂培养基上生长形成克隆的能力,并失去生长密度依赖的抑制作用。因此,这种细胞因子被命名为转化生长因子-β(TGF-β)。在过去的10年中。 展开更多

关键词 转化生长因子 结构 细胞生物学

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HI-6复方救治有机磷和氨基甲酸酯类农药中毒患者临床观察 被引量：4

4

作者 丁树标 施凤霞 +2 位作者 岑芳桂 虞冠华 许祥裕 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 1992年第1期29-31,共3页

双吡啶单肟HI-6,化学名为(吡啶-2-醛肟-1-1甲基)-(4-氨基甲酰基-吡啶-1-甲基)醚氯盐,〔1-(2-hydroxyiminomethyl-pyridinium)-2-(4-carboxyamido-pyridinium)

关键词 农药中毒 HI-6

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人转化生长因子β1正反义基因对HL—60细胞周期及细胞增殖的调控研究 被引量：5

5

作者 张宏权 宋丽华 +7 位作者 王允玲 周廷冲 王会信 张双喜 魏文 虞冠华 赵南明 沈子威 《中国科学（B辑）》 CSCD 北大核心 1995年第11期1149-1155,共7页

通过构建人转化生长因子β1(hTGF-β1)的正、反义基因表达载体并通过基因转染技术,首次将hTGF-β1的正、反义基因分别导入到HL-60细胞中,经G418选择获得可稳定表达hTGF-β1的HL-60细胞。较为详细地研究了hTGF-β1的正、反义基因对HL-60... 通过构建人转化生长因子β1(hTGF-β1)的正、反义基因表达载体并通过基因转染技术,首次将hTGF-β1的正、反义基因分别导入到HL-60细胞中,经G418选择获得可稳定表达hTGF-β1的HL-60细胞。较为详细地研究了hTGF-β1的正、反义基因对HL-60细胞周期的影响及对细胞增殖的调控作用。结果表明,表达正义hTGF-β1 mRNA的HL-60细胞阻滞于G1期,而表达反义hTGF-β1 mRNA的HL-60细胞可以解除G1期的阻滞,使大部分细胞进入S期。加入正义hTGF-β1基因后,HL-60细胞形成集落的能力下降,细胞生长速度下降,恶变程度降低;加入反义hTGF-β1基因后,其结果正相反。 展开更多

关键词 细胞生长 HTGF-Β1 正义基因 反义基因 细胞周期

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转化生长因子－β（TGF－β）受体及其信号传递 被引量：4

6

作者 虞冠华 葛锡锐 姚 《生命科学》 CSCD 1995年第5期34-45,共12页

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）受体及其信号传递虞冠华，葛锡锐，姚（中国科学院上海细胞生物学研究所上海２０００３１）转化生长因子－β（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦ－β）是具有多种生物学功... 转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）受体及其信号传递虞冠华，葛锡锐，姚（中国科学院上海细胞生物学研究所上海２０００３１）转化生长因子－β（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦ－β）是具有多种生物学功能的细胞生长因子，其信号通过细胞表... 展开更多

关键词 细胞学 转化生长因子 受体 信号传递

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N-IL_2对S_(180)实体瘤抑制作用的实验研究 被引量：3

7

作者 朱敏生 虞冠华 +3 位作者 丁树标 施风霞 朱有华 许祥裕 《江苏医药》 CAS CSCD 1989年第10期526-528,共3页

向S_(180)实体肉瘤体内注射自然培养的人白细胞介素Ⅱ(N-IL2),结果能抑制肿瘤的生长和提高荷瘤鼠NK细胞的活性。当剂量为20IU、1O01U、200IU时,肿瘤四倍体积的生长延迟时间分别为0.4、2.9,2.7天。治疗后第4天,小鼠尾静脉血的淋巴细胞比... 向S_(180)实体肉瘤体内注射自然培养的人白细胞介素Ⅱ(N-IL2),结果能抑制肿瘤的生长和提高荷瘤鼠NK细胞的活性。当剂量为20IU、1O01U、200IU时,肿瘤四倍体积的生长延迟时间分别为0.4、2.9,2.7天。治疗后第4天,小鼠尾静脉血的淋巴细胞比例分别为64·8％、59.0％、60.5％,与对照组比较均有显著性差异。荷瘤鼠瘤体内注射N-IL2后第4天,其脾NK细胞活性随剂量的加大而增加,并与肿瘤的抑制程度呈平行关系。 展开更多

关键词 白细胞介素 实体瘤

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产生白细胞介素-2最佳条件的研究 被引量：3

8

作者 虞冠华 施凤霞 +2 位作者 朱有华 许祥裕 丁树标 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1990年第3期533-537,共5页

本文就影响天然白细胞介素—2产生的诸多因素进行了研究,得到了实验条件下IL—2制备的最适培养条件:诱导剂PHA浓度200ug/ml,培养液PH7.0,Hepes浓度8mM,细胞浓度2×10~6个/ml,活细胞率应大于90％,配制培养液水质电导率小于0.2us/cm,... 本文就影响天然白细胞介素—2产生的诸多因素进行了研究,得到了实验条件下IL—2制备的最适培养条件:诱导剂PHA浓度200ug/ml,培养液PH7.0,Hepes浓度8mM,细胞浓度2×10~6个/ml,活细胞率应大于90％,配制培养液水质电导率小于0.2us/cm,培养方式采用旋转培养。 展开更多

关键词 白细胞介素-2 淋巴细胞 比色分析

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淋巴细胞对自由基的潜在调节作用 被引量：3

9

作者 朱敏生 许祥裕 +3 位作者 丁树标 朱有华 虞冠华 施凤霞 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1992年第20期1894-1896,共3页

机体内的自由基不断地产生,同时也不断地清除,以达到自由基代谢平衡。机体内存在一套天然防御系统,如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等.这些物质在体内呈相对稳定量,属固有调节,那么机体淋巴细胞系统是... 机体内的自由基不断地产生,同时也不断地清除,以达到自由基代谢平衡。机体内存在一套天然防御系统,如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等.这些物质在体内呈相对稳定量,属固有调节,那么机体淋巴细胞系统是否参人自由基的调节?目前尚无报道.我们体外实验研究发现,淋巴细胞由IL-2激活后,对活性氧自由基具有明显的清除作用,且对氧化溶血有明显的抑制作用.这一现象的发现对生物体内的自由基代谢及其病理损伤调节研究提供了新的依据. 展开更多

关键词 淋巴细胞 自由基 调节作用

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癌性胸腹水的LAK免疫治疗及其适应证 被引量：3

10

作者 朱敏生 许祥裕 +2 位作者 虞冠华 朱有华 施凤霞 《江苏医药》 CAS CSCD 1990年第10期533-534,共2页

本文报告了利用癌性胸腹水淋巴细胞经N-IL 2进行LAK 诱导后回输治疗5例晚期恶性肿瘤。3例癌性胸水经治疗后,其中2例明显减少和消失。1例在观察期手术死亡。2例肝癌肝硬化腹水经治疗后腹水无明显改变,其中1例其它症状改善,腹水由血性变淡... 本文报告了利用癌性胸腹水淋巴细胞经N-IL 2进行LAK 诱导后回输治疗5例晚期恶性肿瘤。3例癌性胸水经治疗后,其中2例明显减少和消失。1例在观察期手术死亡。2例肝癌肝硬化腹水经治疗后腹水无明显改变,其中1例其它症状改善,腹水由血性变淡,淋巴细胞增加。此疗法适合于无产生漏出液因素所致的癌性胸腹水,以及在治疗前未进行大剂最化疗的患者。 展开更多

关键词 免疫疗法 癌性 LAK 胸水 腹水

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5-氟脲嘧啶、丝裂霉素C对外周血LAK细胞杀伤活性的影响 被引量：2

11

作者 朱敏生 许祥裕 +3 位作者 丁树标 虞冠华 施凤霞 田学信 《江苏医药》 CAS CSCD 1990年第2期70-71,共2页

本实验察了5-氟脲嘧啶(5-FU)、丝裂霉素C(MMC)对天然白细胞介素Ⅱ(N-IL_2)诱导的淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)杀伤活性的影响。结果发现5-FU、MMC 对LAK 细胞的杀伤活性有明显影响。作者认为在临床上应用LAK 治疗的同时不宜同时应用大剂最... 本实验察了5-氟脲嘧啶(5-FU)、丝裂霉素C(MMC)对天然白细胞介素Ⅱ(N-IL_2)诱导的淋巴因子激活杀伤细胞(LAK)杀伤活性的影响。结果发现5-FU、MMC 对LAK 细胞的杀伤活性有明显影响。作者认为在临床上应用LAK 治疗的同时不宜同时应用大剂最的5-氟脲嘧啶或丝裂霉素C。 展开更多

关键词 5-氟脲嘧啶 丝裂霉素C LAK

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人转化生长因子β1　cDNA在COS－7细胞中的表达 被引量：3

12

作者 龙建银 张宏权 +1 位作者 王会信 虞冠华 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第4期396-400,共5页

在测定了ＴＧＦβ１全长序列的基础上，构建了两个ＴＧＦβ１的表达载体ｐＣＭＶβ和ｐＳＶＬβ；分别从转录水平和翻译水平检测了这两个载体在ＣＯＳ－７细胞中的表达。同时利用ＣＯＳ－７短暂表达系统，建立了ＴＧＦβ１的生物测活法... 在测定了ＴＧＦβ１全长序列的基础上，构建了两个ＴＧＦβ１的表达载体ｐＣＭＶβ和ｐＳＶＬβ；分别从转录水平和翻译水平检测了这两个载体在ＣＯＳ－７细胞中的表达。同时利用ＣＯＳ－７短暂表达系统，建立了ＴＧＦβ１的生物测活法；并分别研究了上清收获时间、表达载体。 展开更多

关键词 人 转化生长因子 COS-7细胞 表达

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肝癌靶向 LAK 细胞的制备及其杀伤肿瘤的作用特征 被引量：1

13

作者 许祥裕 朱敏生 +2 位作者 朱有华 丁树标 虞冠华 《江苏医药》 CAS CSCD 1993年第8期408-411,共4页

利用肝癌单克隆抗体(H_(10))制备CD_3×H_(10)双特异性抗体及其肝癌特异性靶向LAK 细胞(HT-LAK),结果表明:CD_3M_cA_b 封闭LAK 细胞后对其生化自发光有明显抑制作用,但细胞对rIL-2仍保持较高的反应性。为此我们选用CD_3M_cA_b 为杂... 利用肝癌单克隆抗体(H_(10))制备CD_3×H_(10)双特异性抗体及其肝癌特异性靶向LAK 细胞(HT-LAK),结果表明:CD_3M_cA_b 封闭LAK 细胞后对其生化自发光有明显抑制作用,但细胞对rIL-2仍保持较高的反应性。为此我们选用CD_3M_cA_b 为杂交抗体组份。经制备的HT-LAK 细胞在低效靶比(0.1:1;1:1)时对H7402肝癌细胞有较高的杀伤活性,明显高于单纯LAK 细胞(P<0.01),但在高效靶比(5:1:10:1)时二者无明显差异。 展开更多

关键词 杀伤细胞 肝肿瘤 癌 单克隆抗体

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天然白细胞介素_2对温度稳定性实验研究 被引量：1

14

作者 虞冠华 施凤霞 +2 位作者 许祥裕 丁树标 朱有华 《药学情报通讯》 1989年第4期22-23,共2页

天然白细胞介素-2(N-IL-2)生物学活性的维持与其保存条件直接相关。文献报道,IL-2纯度越高,越容易失活,必须添加保护剂,在低温条件下保存。Mier在纯化的IL-2样品中加0.25％BSA,使IL-2稳定性大大提高。本文就实验室制备纯化的N-IL-2在不... 天然白细胞介素-2(N-IL-2)生物学活性的维持与其保存条件直接相关。文献报道,IL-2纯度越高,越容易失活,必须添加保护剂,在低温条件下保存。Mier在纯化的IL-2样品中加0.25％BSA,使IL-2稳定性大大提高。本文就实验室制备纯化的N-IL-2在不同温度不同条件下活性保持情况进行实验研究。材料和方法 1.部分纯化的N-IL-2样品制备及处理 N-IL-2上清液由健康人外伤性脾脏淋巴细胞经PHA刺激产生。 展开更多

关键词 白细胞介素2 稳定性 温度

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重组人白细胞介素－2在离子色谱分离时的复性 被引量：1

15

作者 唐治华 罗丽华 +3 位作者 虞冠华 施凤霞 丁树标 许祥裕 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第3期341-343,共3页

采用ＨＰＩＥＣ应用ＣＭ交换柱分离纯化Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌表达的ｒＩＬ－２，与空气氧化复性相比较，又有１倍以上的变性ｒＩＬ－２在色谱过程中得到复性，且溶液ｐＨ影响ｒＩＬ－２的复性和纯化效果：ｐＨ７．０时ｒＩＬ－２复性率高... 采用ＨＰＩＥＣ应用ＣＭ交换柱分离纯化Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌表达的ｒＩＬ－２，与空气氧化复性相比较，又有１倍以上的变性ｒＩＬ－２在色谱过程中得到复性，且溶液ｐＨ影响ｒＩＬ－２的复性和纯化效果：ｐＨ７．０时ｒＩＬ－２复性率高于ｐＨ８．０时，但纯度明显低于ｐＨ８．０时分离的ｒＩＬ－２． 展开更多

关键词 白细胞介素-2 色谱法 制备

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重组菌包含体中白细胞介素-2的分离 被引量：1

16

作者 许祥裕 虞冠华 +3 位作者 丁树标 施风霞 罗丽华 朱有华 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期246-248,共3页

白细胞介素-2(IL-2)是调节免疫功能的淋巴因子。重组白细胞介素-2(rIL-2)的表达成功。为IL-2的基础研究和临床应用提供了条件。由于rIL-2在细菌中的高效表达,其形成包含体存在细菌胞浆中,难以溶解。

关键词 白细胞介素2 包含体 制备 溶解性

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成人脾LAK细胞对肿瘤细胞杀伤过程的超微结构观察 被引量：1

17

作者 朱敏生 朱有华 +2 位作者 许祥裕 丁树林 虞冠华 《江苏医药》 CAS CSCD 1991年第10期545-546,共2页

本文通过透射电流观察了LAK 细胞与肿瘤细胞在不同的作用时期的超微结构病理过程。结果表明,LAK 细胞与肿瘤细胞混合15分钟后即可发生膜接触,30分钟后与肿瘤细胞紧密接触并融合,融合处肿瘤细胞胞浆发生空泡,4小时后LAK 细胞已进入肿瘤... 本文通过透射电流观察了LAK 细胞与肿瘤细胞在不同的作用时期的超微结构病理过程。结果表明,LAK 细胞与肿瘤细胞混合15分钟后即可发生膜接触,30分钟后与肿瘤细胞紧密接触并融合,融合处肿瘤细胞胞浆发生空泡,4小时后LAK 细胞已进入肿瘤细胞内。作者提出脾LAK 细胞杀伤瘤细胞的病理过程。 展开更多

关键词 LAK细胞 肿瘤细胞 超微结构 杀伤

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细小病毒非结构蛋白基因转染对胃癌细胞株细胞因子表达的影响 被引量：1

18

作者 沈锡中 虞冠华 +1 位作者 江绍基 萧树东 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第3期203-206,共4页

将可诱导表达的细小病毒非结构蛋白基因转染入人低分化胃腺癌细胞株MKN-45,该基因诱导表达后部分宿主细胞死亡,成活细胞生长特性发生显著改变,如细胞间粘附力增强,倍增时间延长,裸鼠体内成瘤能力下降。RNA斑点印迹显示非结构蛋白基因的... 将可诱导表达的细小病毒非结构蛋白基因转染入人低分化胃腺癌细胞株MKN-45,该基因诱导表达后部分宿主细胞死亡,成活细胞生长特性发生显著改变,如细胞间粘附力增强,倍增时间延长,裸鼠体内成瘤能力下降。RNA斑点印迹显示非结构蛋白基因的表达能明显增加胃癌细胞白细胞介素-1α,白细胞介素-1β和白细胞介素6核因子表达,而对白细胞介素6表达无影响。提示细小病毒的抗肿瘤作用部分可能是由其非结构蛋白影响肿瘤细胞的细胞因子表达所介导的。 展开更多

关键词 细小病毒非结构蛋白 基因转染 胃癌 细胞株 细胞因子 表达 癌细胞

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转化生长因子－β1诱导前单核自血病细胞分化过程中细胞表型变化的研究 被引量：1

19

作者 虞冠华 葛锡锐 姚鑫 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1996年第4期193-197,共5页

本文对重组人转化生长因子－β１诱导前单核白血病细胞系ＴＨＰ－１细胞向ＭΦ分化过程中细胞表面特异性抗原表达变化进行了研究。流式细胞仪分析表明，实验细胞ＴＨＰ－１主要表现单核细胞的表型，巨噬细胞标志Ｍａｃ－１α、Ｍａｃ－... 本文对重组人转化生长因子－β１诱导前单核白血病细胞系ＴＨＰ－１细胞向ＭΦ分化过程中细胞表面特异性抗原表达变化进行了研究。流式细胞仪分析表明，实验细胞ＴＨＰ－１主要表现单核细胞的表型，巨噬细胞标志Ｍａｃ－１α、Ｍａｃ－１β、Ｍａｃ－２为阴性。ｒｈＴＧＦ－β１作用后，分化细胞表面单核细胞标志４Ｆ２表达下降，巨噬细胞特异抗原Ｍａｏ－１α、Ｍａｃ－１β、Ｍａｃ－２表达上升，细胞表现出ＭΦ表型。结合前文分化细胞表现出的脱氢酶硝基蓝四唑还原、α－萘酚醋酸酯酶活性和吞噬功能，可以发现分化细胞在细胞表面特异性抗原表达及细胞表型的转变与其ＭΦ生物学功能的获得在时相上基本一致。 展开更多

关键词 白血病 THP-1细胞 TGF-β1 细胞分化

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小儿肾小球疾病时白细胞介素—2受体表达的研究 被引量：2

20

作者 虞冠华 许祥裕 +4 位作者 丁树标 罗丽华 施风霞 姜新猷 陈迎章 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期229-231,共3页

本文对28例小儿肾病综合症,14例小儿急性肾小球肾炎及30名正常儿童的白细胞介素—2(IL—2R)表达进行了研究。结果表明:小儿肾小球疾病发作期IL—2R自发表达和经丝裂原(PHA)刺激活化后的表达与正常对照相比表达异常,并有显著差异,而在缓... 本文对28例小儿肾病综合症,14例小儿急性肾小球肾炎及30名正常儿童的白细胞介素—2(IL—2R)表达进行了研究。结果表明:小儿肾小球疾病发作期IL—2R自发表达和经丝裂原(PHA)刺激活化后的表达与正常对照相比表达异常,并有显著差异,而在缓解期IL—2R表达趋于正常。提示肾小球疾病患儿细胞免疫应答能力异常与疾病有一定的关系。 展开更多

关键词 儿童 肾小球疾病 白细胞介素2

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