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X射线激活氧化应激诱导DNA损伤及HaCaT发生细胞早衰研究
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作者 陈婕 恬静 +2 位作者 赵骅 高玲 刘青杰 《中国医学装备》 2024年第2期174-178,共5页
目的:探索不同剂量X射线照射人永生化角质形成细胞(HaCaT)后导致细胞氧化应激水平变化、DNA损伤及细胞早衰的发生。方法:对HaCaT进行X射线照射,根据照射剂量将其分为0 Gy组、5 Gy组和10 Gy组,使用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光... 目的:探索不同剂量X射线照射人永生化角质形成细胞(HaCaT)后导致细胞氧化应激水平变化、DNA损伤及细胞早衰的发生。方法:对HaCaT进行X射线照射,根据照射剂量将其分为0 Gy组、5 Gy组和10 Gy组,使用2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,并用比色法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。利用免疫荧光染色检测不同剂量X射线照射后HaCaT中的磷酸化组蛋白2A变异体(γ-H2AX)焦点变化。使用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试剂盒检测不同剂量X射线照射HaCaT后对细胞增殖的影响,采用β-半乳糖苷酶染色检测早衰细胞比例。利用蛋白免疫印迹法检测X射线照射后p21、p53蛋白表达变化。结果:X射线照射HaCaT后24 h,5 Gy组、10 Gy组均较0 Gy组2',7'-二氯荧光素(DCF)荧光强度显著增加,MDA含量较0 Gy组显著升高,而SOD活性较0 Gy组显著下降,3组比较差异均有统计学意义(F=38.35、92.22、5.22,P<0.05)。照射后1 h,γ-H2AX焦点变化呈剂量依赖性显著增加,与0 Gy组相比差异均有统计学意义(F=129.3,P<0.05)。X射线照射HaCaT后6、24和48 h,5 Gy组、10 Gy组均较与0 Gy组相比细胞增殖能力降低,3组比较差异均有统计学意义(F=116.41、62.20、34.29,P<0.01),β-半乳糖苷酶活性增高,其差异均有统计学意义(F=1629.22,P<0.01)。不同剂量X射线照射HaCaT后72 h,5 Gy组和10 Gy组p21、p53蛋白表达量升高,3组比较差异均有统计学意义(F=104.4、66.69,P<0.01)。结论:电离辐射可诱导HaCaT细胞发生氧化应激和DNA损伤同时引起细胞早衰的发生。 展开更多
关键词 电离辐射 氧化应激 DNA损伤 细胞早衰
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生物剂量估算相关的放射卫生标准现状分析
2
作者 赵骅 陆雪 +1 位作者 恬静 刘青杰 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期147-150,共4页
全面阅研我国放射卫生标准,对现行有效的应用生物学方法进行剂量估算的放射卫生标准进行深入研究,分析其现状、应用情况和存在问题,提出改进措施和和发展方向。
关键词 放射卫生 标准 生物剂量估算 现状分析
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基于多种机器学习算法的人血浆辐射敏感脂质代谢物模型探索
3
作者 陈琦 赵骅 +3 位作者 恬静 高义哲 高玲 刘青杰 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期457-463,共7页
目的通过脂质组学方法联合机器学习(ML)多种算法,探索人外周血辐射敏感脂质代谢物分类模型。方法收集2023年3—9月北京市某综合医院准备接受骨髓移植的25例白血病放射治疗病例,照射前和照射后外周血样本97份,其中对照组24份,为照射前血... 目的通过脂质组学方法联合机器学习(ML)多种算法,探索人外周血辐射敏感脂质代谢物分类模型。方法收集2023年3—9月北京市某综合医院准备接受骨髓移植的25例白血病放射治疗病例,照射前和照射后外周血样本97份,其中对照组24份,为照射前血液样本;辐射组73份,为4、8、12 Gy照射剂量下的24、25和24份血液样本。采用基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC⁃MS/MS)平台的靶向脂质组学方法,分析辐射组与对照组差异脂质。线性回归筛选0~12 Gy的剂量范围内辐射剂量响应脂质。采用5种机器学习方法构建训练集辐射分类模型,验证集进行模型的验证和评价。结果与对照组相比,辐射组敏感的脂质代谢物中62个脂质浓度变化差异有统计学意义(t=-4.91~4.74,P<0.05),包括鞘磷脂(SM)、胆固醇酯(CE)、神经酰胺(Cer)、磷脂酰肌醇(PI)、己糖神经酰胺(HexCer)、溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)、醚磷脂酰胆碱(PCO)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰乙醇胺(LysoPE)这9大类。在0~12 Gy的剂量范围内,筛选出20种具有良好剂量反应的脂质代谢物,包括11个SM,7个CE,1个Cer和1个PI。决策树(DT)、支持向量机(SVM)、轻量梯度增强机(Light GBM)、随机森林(RF)、K最邻近(KNN)这5种机器学习训练模型拟合均较好(F1=0.69~1.00),灵敏度较高。通过评价验证指标,辐射分类判定效果最好的模型为随机森林(灵敏度1.00、准确率0.72、F1值0.80)。结论通过靶向脂质组学分析,发现人类样本中辐射响应的脂质代谢物和辐射剂量响应的脂质。机器学习方法中的RF模型可以为探索人类辐射脂质代谢物模型提供新的思路。 展开更多
关键词 电离辐射 脂质组学 机器学习 随机森林
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低剂量电离辐射对人淋巴细胞氧化应激及DNA损伤的影响
4
作者 孙鑫 李爽 +4 位作者 陆雪 恬静 刘雅 刘青杰 张伟 《癌变.畸变.突变》 CAS 2024年第2期94-99,共6页
目的:探讨低剂量^(137)Cs γ射线照射后正常人淋巴细胞(AHH-1)是否产生氧化应激及DNA损伤,并引发DNA修复。方法:以剂量率为8.32 mGy/min的^(137)Cs γ射线照射AHH-1细胞,剂量分别为0(未照射)、0.01、0.02、0.05、0.075、0.1和0.2 Gy,照... 目的:探讨低剂量^(137)Cs γ射线照射后正常人淋巴细胞(AHH-1)是否产生氧化应激及DNA损伤,并引发DNA修复。方法:以剂量率为8.32 mGy/min的^(137)Cs γ射线照射AHH-1细胞,剂量分别为0(未照射)、0.01、0.02、0.05、0.075、0.1和0.2 Gy,照射后分别培养1、24、48和72 h。采用CCK-8试剂盒检测细胞存活率变化;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞氧化损伤水平;免疫荧光方法分析γH2AX和53BP1焦点形成情况;实时荧光定量PCR方法检测DNA损伤修复相关基因CDKN1A、DDB2和POLH的mRNA表达水平变化。结果:与未照射组相比,照射后24和48 h,各剂量组细胞存活率显著增强(P<0.05);照射后48 h,MDA水平和SOD活性在0.2 Gy剂量组发生显著变化(P<0.05);0.02~0.075 Gy和0.2 Gy剂量组ROS相对荧光强度显著升高(P<0.05);0~0.2 Gy γ射线照后1 h,γH2AX和53BP1焦点数量随剂量增加而增加,且具有明显的剂量-效应关系(P<0.01);与未照射组相比,照射后48 h,DDB2和POLH mRNA相对表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:低剂量电离辐射引起人淋巴细胞产生氧化应激和DNA损伤,并促进DNA损伤修复相关基因在转录水平发生改变。 展开更多
关键词 电离辐射 Γ射线 人淋巴细胞 氧化应激 DNA损伤 细胞增殖
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性别和年龄对60Co γ射线照射离体人外周血辐射敏感基因mRNA表达的影响 被引量:6
5
作者 李爽 陆雪 +3 位作者 封江彬 田梅 恬静 刘青杰 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第6期421-427,共7页
目的:探讨性别和年龄因素对电离辐射诱导的离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达变化的影响。方法:采集30例健康人离体外周血,以剂量率为1 Gy/min的60Coγ射线进行照射,照射剂量分别为0.5、1、2、3、4、6和8 Gy(以0 Gy为阴性对照组),照... 目的:探讨性别和年龄因素对电离辐射诱导的离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达变化的影响。方法:采集30例健康人离体外周血,以剂量率为1 Gy/min的60Coγ射线进行照射,照射剂量分别为0.5、1、2、3、4、6和8 Gy(以0 Gy为阴性对照组),照射后培养12 h,应用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测18个辐射敏感基因的mRNA表达水平变化,分析性别和年龄因素对这些基因mRNA表达水平的影响。结果:与阴性对照组相比,各剂量γ射线照射组人外周血18个辐射敏感基因的mRNA表达水平均明显增加,并且呈剂量-效应关系(R2=0.63~0.97,P<0.05)。在相同照射剂量,MDM2、XPC、FDXR、DDB2、ASTN2和TNFSF4 mRNA相对表达水平在不同个体之间存在较大的差异。女性外周血中BAX、TNFRSF10B、ASTN2、TNFSF4、POLH和GADD45A mRNA相对表达水平均高于男性,在0.5~8 Gy照射剂量范围内具有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。MDM2、FDXR、DDB2和RPS27L mRNA表达水平在不同年龄组间(20~29岁、30~39岁、40~49岁和50~60岁)存在差异(P<0.05或P<0.01)。结论:离体人外周血中辐射敏感基因mRNA表达水平的变化存在个体间差异,且与受照者性别和年龄相关。 展开更多
关键词 电离辐射 基因表达 性别 年龄 个体间差异
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X射线照射离体人周围血染色体畸变剂量-效应曲线建立与验证 被引量:5
6
作者 陆雪 李爽 +3 位作者 恬静 田雪蕾 田梅 刘青杰 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2019年第6期705-708,共4页
目的探讨X射线照射离体人周围血淋巴细胞染色体畸变的量效关系,建立双着丝粒体(dic)+着丝粒环(r)的剂量-效应曲线。方法采集3名健康人肘静脉血,经0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、2.00、3.00、4.00和5.00 Gy X射线(剂量率为1.158 Gy/min... 目的探讨X射线照射离体人周围血淋巴细胞染色体畸变的量效关系,建立双着丝粒体(dic)+着丝粒环(r)的剂量-效应曲线。方法采集3名健康人肘静脉血,经0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、2.00、3.00、4.00和5.00 Gy X射线(剂量率为1.158 Gy/min)离体照射,常规培养、收获和制备染色体标本,显微镜下分析并记录dic和r的畸变数;采用CABAS软件拟合建立dic+r剂量-效应曲线。对2份生物剂量比对样品进行剂量估算。结果在0.00~5.00 Gy剂量范围内,每细胞dic+r的畸变率随着照射剂量的增加而增加(P<0.01)。所拟合的剂量-效应曲线符合线性平方模型,回归方程为:y=(9.72×10^-4±4.70×10^-4)+(3.85×10^-2±4.38×10^-3)D+(7.20×10^-2±2.11×10^-3)D^2(决定系数=0.999,P<0.01)。用拟合曲线对验证样本的剂量估算结果与实际照射剂量基本接近。结论本研究建立的0.00~5.00 Gy X射线照射后的染色体畸变剂量-效应曲线及数学模型,为本实验室准确估算生物剂量提供了可依据的方法。 展开更多
关键词 染色体畸变 剂量-效应曲线 X射线 生物剂量计
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电离辐射对肺腺癌细胞A549早衰的影响 被引量:4
7
作者 李至荟 封江彬 +8 位作者 李峰生 陆雪 恬静 李爽 赵骅 田雪蕾 周丁华 刘青杰 高玲 《中国医学装备》 2017年第10期134-136,共3页
目的:探究不同剂量X射线对肺腺癌细胞A549早衰的影响,为辐射诱导细胞早衰机制的探索提供理论依据。方法:采用不同剂量X射线照射肺腺癌细胞A549,按照X射线吸收剂量情况将实验分为对照组和照射组,对照组X射线吸收剂量为0 Gy,照射组的X射... 目的:探究不同剂量X射线对肺腺癌细胞A549早衰的影响,为辐射诱导细胞早衰机制的探索提供理论依据。方法:采用不同剂量X射线照射肺腺癌细胞A549,按照X射线吸收剂量情况将实验分为对照组和照射组,对照组X射线吸收剂量为0 Gy,照射组的X射线吸收剂量分别为2 Gy、4 Gy和8 Gy。利用克隆形成率实验检测细胞增殖能力变化,吉姆萨染色观察细胞形态,利用溶酶体红色荧光探针Lyso-Tracker Red检测A549细胞的溶酶体数量变化,?-半乳糖苷酶染色检测早衰细胞。结果:照射组吸收剂量为2 Gy、4 Gy和8 Gy的A549增殖能力降低,与对照组比较差异有统计学意义(F=186.45,P<0.05),且部分细胞体积变大,溶酶体数量增多,细胞出现早衰。结论:X射线可引起A549细胞增殖能力降低,溶酶体数量增加等细胞早衰症状。 展开更多
关键词 X射线 肺腺癌细胞 早衰
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年龄和性别对正常人外周血淋巴细胞核质桥自发率的影响 被引量:4
8
作者 赵骅 陆雪 +2 位作者 恬静 田梅 刘青杰 《癌变.畸变.突变》 CAS 2021年第1期48-52,共5页
目的:探索年龄、性别因素对我国健康人群外周血淋巴细胞核质桥自发率的影响,为核质桥的影响因素研究提供科学依据。方法:选取98例健康成人,其中男性52例,女性46例,年龄范围为20~68岁,平均年龄为(40.7±12.6)岁。按年龄分为20~29岁组... 目的:探索年龄、性别因素对我国健康人群外周血淋巴细胞核质桥自发率的影响,为核质桥的影响因素研究提供科学依据。方法:选取98例健康成人,其中男性52例,女性46例,年龄范围为20~68岁,平均年龄为(40.7±12.6)岁。按年龄分为20~29岁组(22人)、30~39岁组(23人)、40~49岁组(25人)和50岁以上组(28人)。抽取研究对象外周血2 mL,采用胞质分裂阻滞法培养细胞40 h后,加入松胞素B(终浓度为10μg/mL),继续培养至68 h收获细胞。每个受试者观察1000个双核细胞,分析核质桥、微核及核芽的数量。结果:核质桥总体自发率为每个细胞0.56‰,男性略高于女性,但差异无统计学意义(P>0.05)。男性在不同年龄组间,核质桥自发率差异无统计学意义(P>0.05)。女性40~49岁年龄组核质桥自发率最高,显著高于20~29岁组(U=2.31,P<0.05)。微核自发率女性高于男性(U=4.40,P<0.05),男性和女性受试者40~49岁组微核自发率均为最高。核芽自发率在不同性别间的差异无统计学意义(P>0.05),在不同年龄组间无明显变化规律。结论:健康人群中的核质桥自发率较低,不受性别因素影响,在20~49岁范围内具有随年龄增加而升高的趋势。 展开更多
关键词 核质桥 微核 核芽 自发率 年龄 性别
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^(60)Coγ射线全身照射大鼠的小肠组织中辐射敏感脂质代谢物的筛选 被引量:3
9
作者 习聪 赵骅 +3 位作者 陆雪 恬静 田梅 刘青杰 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期172-177,共6页
目的筛选大鼠的小肠组织中辐射敏感脂质代谢物并探索其代谢通路,为放射性肠损伤生物标志物研究提供科学依据。方法用60Coγ射线对大鼠进行全身照射,照射剂量分别为0、1、2、3、5、8 Gy,通过液相色谱-质谱联用(LC-MS)的靶向脂质组学方法... 目的筛选大鼠的小肠组织中辐射敏感脂质代谢物并探索其代谢通路,为放射性肠损伤生物标志物研究提供科学依据。方法用60Coγ射线对大鼠进行全身照射,照射剂量分别为0、1、2、3、5、8 Gy,通过液相色谱-质谱联用(LC-MS)的靶向脂质组学方法,探究大鼠受照后小肠组织中脂质代谢物的变化。结果大鼠受照后3 d,筛选出小肠组织中15个辐射敏感脂质代谢物,其中4个代谢物浓度显著上调,11个代谢物浓度显著下调,差异有统计学意义(t=-6.395、5.998、5.836、-5.503、-5.449、-5.422、4.841、4.802、4.621、4.457、4.426、4.373、4.110、3.945、3.902,P<0.05;错误发现率<0.05),主要涉及鞘脂代谢、甘油磷脂代谢等代谢通路。4个磷脂酰丝氨酸(PS)随受照剂量的上升而显著上升,1个磷脂酸(PA)、2个鞘磷脂(SM)及4个脂肪酸(FA)随受照剂量的上升而显著下降,具有明显的剂量-效应关系(R2>0.80,P<0.05)。结论大鼠受到60Coγ射线全身照射后,小肠组织中脂质代谢物鞘脂代谢、甘油磷脂代谢等代谢通路的11个脂质代谢物具有良好的剂量-效应关系,可能成为放射性肠损伤生物标志物。 展开更多
关键词 电离辐射 肠损伤 脂质组学 代谢通路
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基于代谢组学方法筛选大鼠血浆辐射敏感代谢物 被引量:2
10
作者 赵骅 陆雪 +3 位作者 恬静 李爽 田梅 刘青杰 《癌变.畸变.突变》 CAS 2020年第3期166-170,176,共6页
目的:筛选大鼠血浆辐射敏感代谢物并探索其代谢通路,为辐射损伤生物标志物研究提供科学依据。方法:用60Coγ射线对20只大鼠进行全身照射,照射剂量分别为0、1、3、5 Gy,剂量率为1 Gy/min,采用基于液相色谱质谱串联平台的非靶向代谢组学方... 目的:筛选大鼠血浆辐射敏感代谢物并探索其代谢通路,为辐射损伤生物标志物研究提供科学依据。方法:用60Coγ射线对20只大鼠进行全身照射,照射剂量分别为0、1、3、5 Gy,剂量率为1 Gy/min,采用基于液相色谱质谱串联平台的非靶向代谢组学方法,检测大鼠受照7 d后血浆中代谢物的变化。结果:大鼠受照后,筛选出血浆中11个辐射敏感代谢物,主要涉及牛磺酸和亚牛磺酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢、初级胆汁酸生物合成等代谢通路。十八二烯酰基肉碱、十八一烯酰基肉碱、十六酰基肉碱、牛磺酸、L-犬尿氨酸及胞嘧啶随受照剂量的上升而显著下降(P<0.05),具有明显的剂量-效应关系。结论:大鼠受到γ射线照射后,血浆中代谢物水平发生显著变化,有6个代谢物具备成为辐射生物剂量计的基础条件。 展开更多
关键词 代谢组学 电离辐射 生物标志物 剂量效应
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低剂量照射诱导人淋巴细胞53BP1焦点形成的剂量-效应关系研究 被引量:2
11
作者 徐岩 封江彬 +5 位作者 陆雪 李爽 高玲 田梅 恬静 刘青杰 《中国医学装备》 2016年第4期106-108,共3页
目的:探讨低剂量60Coγ射线照射诱导人永生化淋巴细胞AHH-1中P53结合蛋白1(53BP1)焦点水平与照射剂量之间的关系。方法:用^(60)Coγ射线照射AHH-1细胞,照射剂量分别为0 m Gy、10 m Gy、25 m Gy、50 m Gy、100和200 m Gy,吸收剂量率为20 ... 目的:探讨低剂量60Coγ射线照射诱导人永生化淋巴细胞AHH-1中P53结合蛋白1(53BP1)焦点水平与照射剂量之间的关系。方法:用^(60)Coγ射线照射AHH-1细胞,照射剂量分别为0 m Gy、10 m Gy、25 m Gy、50 m Gy、100和200 m Gy,吸收剂量率为20 m Gy/min,37℃修复30 min后进行免疫荧光染色,利用激光共聚焦扫描显微镜分析细胞中53BP1焦点形成情况。结果:在剂量为0~200 mG y的^(60)Coγ射线照射30 min后,AHH-1细胞中53BP1焦点在每个细胞中的数目为0~4个,均符合泊松分布。从50 m Gy照射剂量开始53BP1焦点水平显著性增加,且焦点水平与照射剂量具有剂量-效应关系,剂量-效应曲线为y=(0.03×10^(-2))x+2.32×10^(-2)(R^2=0.9236,P<0.01)。结论:在低剂量电离辐射作用下,53BP1焦点水平具有较好的剂量-效应关系。 展开更多
关键词 低剂量照射 60Coγ射线 免疫荧光 P53结合蛋白1
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松胞素B对辐射诱导淋巴细胞核质桥水平影响的研究 被引量:2
12
作者 赵骅 陆雪 +5 位作者 田雪蕾 恬静 李爽 封江彬 陈德清 刘青杰 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期576-580,共5页
目的 探索胞质分裂阻滞分析中,松胞素B终浓度和加入时间对辐射诱导淋巴细胞核质桥水平的影响。方法 本研究按照不同松胞素B终浓度分为2、4、6、8、10 μg/ml 5个终浓度组,此外,按照不同松胞素B加入时间分为0、28、40、44 h组4个加入... 目的 探索胞质分裂阻滞分析中,松胞素B终浓度和加入时间对辐射诱导淋巴细胞核质桥水平的影响。方法 本研究按照不同松胞素B终浓度分为2、4、6、8、10 μg/ml 5个终浓度组,此外,按照不同松胞素B加入时间分为0、28、40、44 h组4个加入时间组。用2 Gy(吸收剂量率为1 Gy/min)60Co γ射线照射正常人离体外周血(设0 Gy对照组),采用胞质分裂阻滞分析法,进行细胞培养、收获、制片、染色。在光学显微镜下分析单核细胞、双核细胞、多核细胞的比例,以及双核细胞中核质桥率及微核率。结果 各终浓度组和加入时间组(0 h组除外)的核分裂指数、双核细胞比例均随松胞素B终浓度的升高而升高,随松胞素B加入时间的推迟而降低。2 Gy射线照射后,各终浓度组和加入时间组(0 h组除外)核质桥率差异无统计学意义(P〉0.05);5个终浓度组间微核率具有随松胞素B终浓度的增加而下降的趋势,4个加入时间组间微核率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 不同松胞素B终浓度和加入时间可使辐射诱导的核质桥率在一定范围内变化,但差异无统计学意义。适当增加松胞素B终浓度、提前加入时间可使双核细胞比例升高,有助于提高分析效率。 展开更多
关键词 核质桥 松胞素B 胞质分裂阻滞分析 微核
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放射生物剂量学研究的新进展 被引量:2
13
作者 恬静 刘青杰 《国际放射医学核医学杂志》 2015年第4期316-323,共8页
放射生物剂量学方法在历次放射事故应急处置中起到非常重要的作用,主要采用非稳定性染色体畸变和微核分析。最近的研究关注快速高通量的生物剂量计的探索,不仅涉及上述方法的自动化,还涉及DNA双链断裂、基因表达等分子生物学剂量计... 放射生物剂量学方法在历次放射事故应急处置中起到非常重要的作用,主要采用非稳定性染色体畸变和微核分析。最近的研究关注快速高通量的生物剂量计的探索,不仅涉及上述方法的自动化,还涉及DNA双链断裂、基因表达等分子生物学剂量计的研究以及代谢组学和血清学指标的筛选。笔者主要就2012—2014年放射生物州量学研究的新进展进行综述。 展开更多
关键词 放射生物剂量学 细胞遗传学 快速高通量分析 分子生物学
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中波紫外线照射后HaCaT细胞早衰和P53、P16表达研究 被引量:2
14
作者 闫娟 刘青杰 +7 位作者 田梅 陆雪 恬静 李爽 赵骅 田雪蕾 陈德清 高玲 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期284-289,共6页
目的探索不同剂量中波紫外线(UVB)对人永生化角质形成细胞HaCaT早衰的影响及其可能的分子机制。方法采用0、20、50、80和100 mJ/cm 2UVB分别照射HaCaT细胞,于照射后72 h采用姬姆萨染色观察细胞形态,通过克隆形成实验检测细胞增殖能力,β... 目的探索不同剂量中波紫外线(UVB)对人永生化角质形成细胞HaCaT早衰的影响及其可能的分子机制。方法采用0、20、50、80和100 mJ/cm 2UVB分别照射HaCaT细胞,于照射后72 h采用姬姆萨染色观察细胞形态,通过克隆形成实验检测细胞增殖能力,β-半乳糖苷酶染色检测早衰细胞比例,利用溶酶体红色荧光探针Lyso-Tracker Red检测照射后24、48、72 h细胞内溶酶体数量变化,划痕实验检测照射后24、48 h细胞迁移能力变化。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测早衰相关蛋白P53和P16的表达变化。结果20、50、80和100 mJ/cm 2UVB照射后,HaCaT细胞出现早衰相关表型,照后72 h细胞体积增大(F=115.18,P<0.05),增殖能力降低(F=410.32,P<0.05),β-半乳糖苷酶活性增高(F=16.31,P<0.05),照后24、48、72 h溶酶体数量增多(F=17.65、38.36、13.66,P<0.05),照后24、48 h迁移能力降低(F=8.21、11.48,P<0.05)。照后72 h早衰相关蛋白P53和P16表达增加。结论UVB照射可诱导HaCaT细胞发生早衰,其机制可能通过引起HaCaT细胞P53和P16蛋白表达增加实现。 展开更多
关键词 中波紫外线 早衰 角质形成细胞 P53 P16
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不同剂量率^(60)Coγ射线照射对人外周血辐射敏感基因表达变化的影响 被引量:2
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作者 李爽 陆雪 +2 位作者 恬静 田梅 刘青杰 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期481-485,共5页
目的探讨不同剂量率^(60)Coγ射线照射对辐射诱导的基因表达水平改变的影响。方法^(60)Coγ射线照射3例正常人离体外周血,剂量率分别为0.2、1.0和2.0 Gy/min,照射剂量为0、1、2、4和6 Gy,照射后24 h收集细胞,实时荧光定量(PCR)法对11个... 目的探讨不同剂量率^(60)Coγ射线照射对辐射诱导的基因表达水平改变的影响。方法^(60)Coγ射线照射3例正常人离体外周血,剂量率分别为0.2、1.0和2.0 Gy/min,照射剂量为0、1、2、4和6 Gy,照射后24 h收集细胞,实时荧光定量(PCR)法对11个基因(CDKN1A、MDM2、PCNA、FDXR、GADD45A、PHPT1、ASTN2、TNFSF4、POLH、GDF-15和PPM1D)mRNA表达水平进行相对定量检测;逐步回归法构建不同剂量率基因组合表达模型。结果不同剂量率0.2、1和2 Gy/min ^(60)Coγ射线照射后,辐射诱导的11个基因的相对表达量随照射剂量增加而升高,具有显著的剂量依赖性(R2=0.744~0.998,P<0.05);0.2 Gy/min ^(60)Coγ射线照射2 Gy后,CDKN1A、FDXR、PHPT1和TNFSF4基因的表达量明显高于1和2 Gy/min剂量率组,差异具有统计学意义(t=3.73、5.73、2.44、2.77、3.53、2.68、2.43、2.05,P<0.05);2 Gy/min ^(60)Coγ射线照射6 Gy后,PPM1D基因表达量明显高于其他两个剂量率组(t=3.82、2.54,P<0.05);不同剂量率基因组合表达模型由2~3个基因组成,回归方程的R2值为0.951~0.976(P<0.05)。结论在0.2~2 Gy/min剂量率范围内,不同剂量率^(60)Coγ射线照射可能会影响辐射诱导人外周血基因表达水平的改变。 展开更多
关键词 电离辐射 基因表达 剂量率
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人外周血淋巴细胞微核分析用于估算离体模拟局部照射剂量的研究 被引量:1
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作者 陆雪 田雪蕾 +3 位作者 赵骅 恬静 田梅 刘青杰 《癌变.畸变.突变》 CAS 2021年第3期193-196,共4页
目的:探讨利用人外周血淋巴细胞微核分析估算局部照射剂量的可行性。方法:收集2例人外周血样本,每例血样分为两部分,一部分不照射,另一部分再分成两组分别于1和5 Gy的60Coγ射线下离体照射,剂量率为1 Gy/min。将来自同一样本的照射血与... 目的:探讨利用人外周血淋巴细胞微核分析估算局部照射剂量的可行性。方法:收集2例人外周血样本,每例血样分为两部分,一部分不照射,另一部分再分成两组分别于1和5 Gy的60Coγ射线下离体照射,剂量率为1 Gy/min。将来自同一样本的照射血与未照射血按1∶3或3∶1比例混合以模拟局部照射,共分析8组混合血样中双核淋巴细胞微核(MN)率,利用国际原子能机构(IAEA)推荐的Dolphin's模型推算混合血中受照血的微核率,并采用卫生行业标准(WS/T 178—1999)推荐的剂量效应曲线估算局部照射剂量。结果:各组混合血样MN分布均不符合泊松分布。1 Gy照射组估算的局部剂量与实际照射剂量偏差较大,5 Gy照射组估算的局部剂量与实际照射剂量较接近。结论:离体情况下,MN能较好的用于估算局部照射剂量,且MN可能更适用于较高剂量的估算。 展开更多
关键词 局部照射 淋巴细胞微核 离体模拟 Dolphin’s模型 电离辐射
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Mnk2与CBC^(VHL)泛素连接酶E3复合物的相互作用 被引量:1
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作者 王平章 王欣 +2 位作者 王峰 恬静 罗楹 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2005年第6期537-544,共8页
Mnk2即MAPK相互作用的激酶-2(MAP kinase-interacting kinase-2,Mnk2)是MAPK激活的蛋白激酶之一,具有磷酸化真核翻译起始因子eIF4E(Eukaryotic translation initiation factor 4E)的作用,但是eIF4E磷酸化的生理功能以及Mnk2在蛋白翻译... Mnk2即MAPK相互作用的激酶-2(MAP kinase-interacting kinase-2,Mnk2)是MAPK激活的蛋白激酶之一,具有磷酸化真核翻译起始因子eIF4E(Eukaryotic translation initiation factor 4E)的作用,但是eIF4E磷酸化的生理功能以及Mnk2在蛋白翻译过程中的确切地位并不清楚.除了eIF4E外,Mnk2生理底物尚缺乏鉴定.为了进一步寻找Mnk2新的生理底物,揭示Mnk2的生理功能,我们以Mnk2为“诱饵”,运用酵母双杂交系统发现Mnk2能够与VHL(von Hippel-Lindau tumor suppressor),Rbx1(ring-box 1)和Cu12(cullin2)相互作用,并在哺乳动物细胞中验证了Mnk2和VHL的结合.由于VHL,Rbx1和Cu12均为CBC^(VHL)泛素连接酶E3复合物成分,所以Mnk2参与了CBC^(VHL)泛素连接酶E3复合物的相互作用,可能是其新的泛素化底物.此外,在酵母双杂交系统中,Mnk2还与VHL结合蛋白-1(von Hippel-Lindau binding protein 1,VBP1)相互作用,由于VBP1在细胞骨架蛋白的成熟过程起重要作用并与胚胎形态的发生有关,所以Mnk2可能还参与了细胞形状的调控. 展开更多
关键词 Mnk2 酵母双杂交 CBC^VHL 泛素连接酶 VBP1
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胞质分裂阻滞法分析细胞组学研究指标在公共卫生领域的应用现状 被引量:1
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作者 恬静 刘青杰 《中国医学装备》 2017年第5期141-143,共3页
近年来利用胞质分裂阻滞法分析微核、核质桥、核芽、核分裂指数、细胞凋亡和细胞坏死等细胞组学指标,成为公共卫生领域探讨不同人群结构、环境、职业暴露等因素对基因组不稳定性、染色体断裂、丢失和细胞增殖能力的影响的常用方法。现... 近年来利用胞质分裂阻滞法分析微核、核质桥、核芽、核分裂指数、细胞凋亡和细胞坏死等细胞组学指标,成为公共卫生领域探讨不同人群结构、环境、职业暴露等因素对基因组不稳定性、染色体断裂、丢失和细胞增殖能力的影响的常用方法。现将利用胞质分裂阻滞法分析多种细胞组学指标在公共卫生领域的应用现状做以综述。 展开更多
关键词 胞质分裂阻滞法 微核 核质桥 核芽 核分裂指数 细胞组学指标
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利用人外周血淋巴细胞染色体畸变估算离体模拟局部照射剂量
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作者 田雪蕾 陆雪 +2 位作者 恬静 田梅 刘青杰 《辐射防护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期309-314,共6页
多数电离辐射事故均为局部照射。对于局部照射剂量估算,国际原子能机构(IAEA)推荐采用Dolphin’s模型,该模型需推算出照射部位染色体畸变率,再代入离体均匀照射情况下建立的剂量效应曲线来估算局部照射剂量。准确推算照射部位染色体畸... 多数电离辐射事故均为局部照射。对于局部照射剂量估算,国际原子能机构(IAEA)推荐采用Dolphin’s模型,该模型需推算出照射部位染色体畸变率,再代入离体均匀照射情况下建立的剂量效应曲线来估算局部照射剂量。准确推算照射部位染色体畸变率对于估算剂量十分重要,选用合适的剂量效应曲线对估算剂量也同样重要,而对于局部照射,关于不同剂量率剂量效应曲线对估算结果影响的报道还十分有限。基于此本研究利用人外周血淋巴细胞染色体畸变估算离体模拟局部照射剂量,分析不同剂量率剂量效应曲线对估算结果的影响。利用^(60)Coγ射线离体照射人外周血样品(样本A和样本B),剂量分别为1 Gy和5 Gy。将照射血与未照射血按25%和75%比例混合以模拟局部照射,分析混合血样中淋巴细胞的双着丝粒染色体(dicentric chromosome,dic)加着丝粒环(r),利用Dolphin’s模型估算局部照射dic+r率,并用剂量率不同的两种剂量效应曲线估算局部照射剂量。结果显示,大部分混合血样dic+r分布不符合泊松分布,为过离散分布。利用与实际照射剂量率一致的剂量效应曲线估算的样品受照剂量大多与实际照射剂量比较接近,相对偏差在10%以内,但两样本的1 Gy 25%组的估算受照剂量与实际照射剂量偏差较大。利用与实际照射剂量率不一致的剂量效应曲线估算的样品受照剂量与实际照射剂量相对偏差均超过10%。结果表明dic+r分析用于估算离体模拟局部照射的剂量有可行性,采用剂量率和照射剂量率一致的剂量效应曲线估算的结果更为准确。 展开更多
关键词 局部照射 Dolphin’s模型 染色体畸变 剂量估算
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X射线及UVB对人表皮细胞细胞增殖及褪黑素受体表达的影响
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作者 高玲 李至荟 +6 位作者 封江彬 陆雪 恬静 李爽 赵骅 田雪蕾 刘青杰 《中国医学装备》 2017年第6期156-160,共5页
目的:研究X射线和紫外线B(UVB)对表皮细胞增殖的影响,以及对褪黑素受体(MTNR)蛋白表达的影响,为生活在高海拔地区可能受到较高电离和非电离辐射的公众辐射效应及其防护提供指导。方法:经照射剂量为0 Gy(对照组)、0.5 Gy、2 Gy和5 Gy(照... 目的:研究X射线和紫外线B(UVB)对表皮细胞增殖的影响,以及对褪黑素受体(MTNR)蛋白表达的影响,为生活在高海拔地区可能受到较高电离和非电离辐射的公众辐射效应及其防护提供指导。方法:经照射剂量为0 Gy(对照组)、0.5 Gy、2 Gy和5 Gy(照射组)X射线以及0 m J/cm2、20 m J/cm2、50 m J/cm2、100 m J/cm2和200 m J/cm2的UVB分别照射人表皮细胞Hacat和人黑色素瘤细胞A875,通过四甲基偶氮唑(MTT)和克隆形成率实验检测细胞增殖能力变化,采用蛋白质印迹法检测褪黑素受体MTNR-1B蛋白表达变化。结果:在照射剂量为0.5 Gy、2 Gy和5 Gy的X射线以及20 m J/cm2和50 m J/cm2UVB的照射下,可导致Hacat和A875细胞生长不同程度的降低。3种不同剂量X射线照射后Hacat细胞克隆形成率分别为对照组的71.2%、36.7%和16.3%,与对照组比较差异有统计学意义(F=249.96,P<0.05),A875细胞细胞克隆形成率分别为对照组的64.7%、49.5%和31.6%,与对照组比较差异有统计学意义(F=147.29,P<0.05);在照射剂量为20 m J/cm2和50 m J/cm2的UVB照射后Hacat细胞的克隆形成率分别为对照组的40.74%和12.96%,A875细胞的克隆形成率分别为对照组的16.33%和6.12%;50 m J/cm、100 m J/cm和200 m J/cm2的UVB照射后A875细胞中MTNR1B表达随着剂量的增大而显著增加,而3种不同剂量X射线对MTNR1B表达在不同剂量之间无显著影响。结论:X射线和UVB照射后均可引起细胞增殖和存活能力的降低,UVB照射后引起的细胞增殖抑制可能与褪黑素受体表达变化相关。 展开更多
关键词 X射线 紫外线B(UVB) 细胞增殖 褪黑素受体 蛋白印迹法
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