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3种ELISA方法与微量细胞中和试验检测SARS-CoV-2抗体滴度的相关性分析 被引量:3
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作者 赵恒 +7 位作者 廖芸 范胜涛 李丹丹 张莹 于丽 王丽春 李琦涵 徐兴丽 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期719-723,共5页
目的分析不同方法检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARSCoV-2)疫苗免疫后抗体滴度的相关性,为其特异性抗体检测提供方法学依据。方法采用微量细胞中和试验及3种ELISA方法(分别以S蛋白... 目的分析不同方法检测严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARSCoV-2)疫苗免疫后抗体滴度的相关性,为其特异性抗体检测提供方法学依据。方法采用微量细胞中和试验及3种ELISA方法(分别以S蛋白、N蛋白和灭活全病毒颗粒为抗原)检测SARS-CoV-2灭活疫苗临床试验血清样品的IgG抗体阳转率及中和抗体滴度,并进行微量细胞中和试验与3种ELISA方法的相关性分析。结果中和抗体、S抗体、N抗体和全病毒抗体检测所得抗体阳转率分别为84.3%、91.3%、65.2%和46.6%,抗体几何平均滴度分别为16.6、945.9、72.7和18.8。3种ELISA方法(分别以S蛋白、N蛋白和灭活全病毒颗粒为抗原)与微量细胞中和试验检测结果的相关系数(r)分别为0.494、0.371和0.181。结论检测SARS-CoV-2 S抗体水平能在很大程度上反映以抗体水平升高为特征的体液免疫反应的激活情况。 展开更多
关键词 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 中和抗体 S抗体 N抗体 全病毒抗体
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柯萨奇病毒A16型抗原与呼吸道黏膜上皮组织内先天淋巴细胞的相互关系及其疫苗应用价值 被引量:5
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作者 王永蓉 廉亚茹 +10 位作者 范胜涛 冯敏 杨二霞 姜莉 董承红 赵志梅 王丽春 廖芸 张莹 李琦涵 《微生物与感染》 2018年第6期350-361,共12页
柯萨奇病毒A16型(coxsakievirus A16,CA16)是引起手足口病的主要病原,但其发病及相关免疫机制尚不清楚,导致其疫苗研发面临诸多困难。众多研究表明,呼吸道黏膜上皮细胞及其相关免疫细胞尤其是天然淋巴细胞(innate lymphoid cell,ILC),... 柯萨奇病毒A16型(coxsakievirus A16,CA16)是引起手足口病的主要病原,但其发病及相关免疫机制尚不清楚,导致其疫苗研发面临诸多困难。众多研究表明,呼吸道黏膜上皮细胞及其相关免疫细胞尤其是天然淋巴细胞(innate lymphoid cell,ILC),在很大程度上促进病毒感染中天然免疫和适应性免疫反应的激活。然而,ILC在CA16感染诱导的免疫反应中如何发挥作用仍未知晓。为揭示CA16感染过程中ILC与病原的相互关系及发挥的作用,首先利用定量反转录-聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测CA16感染的人支气管上皮细胞16HBE和以特别配制的佐剂导入CA16灭活抗原的小鼠支气管上皮细胞CP-M175中对ILC具有激活效应的重要基因表达情况。然后,将特别配制的CA16灭活疫苗通过鼻腔免疫BALB/c小鼠,分析呼吸道黏膜组织中ILC与病毒抗原之间的相互关系。体内外实验结果均显示,CA16活病毒和灭活的病毒抗原能诱导ILC活化所需信号通路分子的表达增加,且ILC分泌的细胞因子表达增加。免疫荧光和共聚焦显微镜观察结果亦证实,病毒抗原与ILC1/ILC3分别存在共定位现象。比较4种途径/程序免疫的小鼠体内抗CA16中和抗体和特异性细胞免疫应答情况,发现采用特别配制的CA16灭活疫苗免疫小鼠能诱导产生较好的抗病毒免疫应答。结果提示,CA16抗原能通过激活ILC及其相关信号通路诱导产生有效的免疫反应。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A16型 天然淋巴细胞 树突细胞 呼吸道黏膜
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层析技术纯化核酸疫苗 被引量:3
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作者 周东霞 +4 位作者 孙明 王玺 戴青 黄小琴 褚嘉祐 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期129-132,共4页
目的利用层析技术制备高纯度的核酸疫苗。方法用层析技术中的凝胶过滤、亲和、离子交换层析3种方法,依次对核酸疫苗进行纯化,并检测其纯度。结果连续使用3种层析方法获得的DNA达到了理想的分离效果,琼脂糖凝胶电泳未检出RNA,A260与A... 目的利用层析技术制备高纯度的核酸疫苗。方法用层析技术中的凝胶过滤、亲和、离子交换层析3种方法,依次对核酸疫苗进行纯化,并检测其纯度。结果连续使用3种层析方法获得的DNA达到了理想的分离效果,琼脂糖凝胶电泳未检出RNA,A260与A280的比值介于1.80~2.00之间,其中环状DNA达90%以上。经离子交换层析后的内毒素含量小于10EU/mg DNA,宿主DNA残留量小于0.002μg/μg DNA。结论纯化的核酸疫苗均符合国家标准,为制备核酸疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 核酸疫苗 层析技术 纯化
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悬浮吸附方法生产H_2株甲肝减毒活疫苗的产量质量及免疫效果 被引量:3
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作者 杨净思 曹逸云 +6 位作者 王晓辉 胡凝珠 柯华昕 杨晓蕾 王东宝 董德祥 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期584-585,共2页
:目的 在生产规模条件下 ,对悬浮和单层吸附方法应用于H2 株甲肝减毒活疫苗生产进行了 5年产量质量及人体免疫效果的比较。方法 采用悬浮吸附方法和单层吸附方法并进行比较。结果 悬浮吸附方法HAV增殖高峰比单层吸附方法提前 4天 ,... :目的 在生产规模条件下 ,对悬浮和单层吸附方法应用于H2 株甲肝减毒活疫苗生产进行了 5年产量质量及人体免疫效果的比较。方法 采用悬浮吸附方法和单层吸附方法并进行比较。结果 悬浮吸附方法HAV增殖高峰比单层吸附方法提前 4天 ,抗原滴度高一个稀释度 ,病毒繁殖全程细胞质量优于单层吸附方法 ,整个生产周期可缩短 9天。历年大规模对比生产和人体免疫效果观察结果表明 :悬浮吸附方法生产甲肝疫苗滴度略高于单层吸附方法 ,两者生产的疫苗在人体免疫效果方面无显著差异。结论 悬浮吸附方法更适宜H2 株甲肝减毒活疫苗工业化、规模化生产。 展开更多
关键词 甲肝活疫苗 单层吸附 产量质量 免疫效果 悬浮吸附
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肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响 被引量:2
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作者 李好 张莹 +8 位作者 王丽春 姜莉 范胜涛 杨二霞 董承红 张小龙 廉亚茹 李琦涵 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期255-260,264,共7页
目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3... 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3. 1(+),构建重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1。分别转染人支气管上皮细胞16HBE,于转染后24、48和72 h收集样本,进行细胞内天然免疫相关信号分子表达的检测和刺激T细胞增殖的检测。结果经双酶切及测序鉴定,重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1构建正确。与阴性对照组比较,EV71-VP1组IFNγ、OX40L、RANKL、TNF-α和IL-2的水平上调,而CA16-VP1组的上调幅度较小。EV71-VP1及CA16-VP1组16HBE细胞的胞内外提取物均可明显刺激分泌IFNγ的T细胞增殖(P <0. 05)。结论 EV71和CA16 VP1蛋白在人上皮细胞16HBE中表达后,可差异性诱导细胞中天然免疫信号分子表达及相似的非特异性刺激T细胞增殖能力。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型 人支气管上皮细胞16HBE 天然免疫 获得性免疫
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甲型肝炎减毒活疫苗生产中病毒释放的最佳方法探索 被引量:2
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作者 杨净思 胡云章 +4 位作者 杨晓蕾 柯华昕 杨伟 杨蓉 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期687-688,共2页
目的 探索甲型肝炎减毒活疫苗 (简称甲肝活疫苗 )生产中感染细胞释放病毒的最佳方法。方法 采用超声波细胞粉碎仪、- 70℃及液氮冻融 3种方法粉碎细胞 ,对细胞破碎情况、病毒抗原滴度和感染性滴度进行了比较。结果 超声波连续粉碎 3... 目的 探索甲型肝炎减毒活疫苗 (简称甲肝活疫苗 )生产中感染细胞释放病毒的最佳方法。方法 采用超声波细胞粉碎仪、- 70℃及液氮冻融 3种方法粉碎细胞 ,对细胞破碎情况、病毒抗原滴度和感染性滴度进行了比较。结果 超声波连续粉碎 3次 (90秒 /次 )、- 70℃反复冻融粉碎 4次和液氮冻融粉碎 6次 ,细胞破碎率分别为 94%、82 %和 81% ;病毒抗原滴度和感染性滴度均达高峰 ;抗原滴度均为 1∶2 5 6 ,感染性滴度 (logCCID50 /ml)分别为 8 6 7、6 5和 6 0。继续超声和 -70℃冻融粉碎细胞 ,病毒抗原滴度和感染性滴度基本不变 ,而液氮冻融至第 10次时 ,抗原滴度无明显变化 ,感染性滴度下降2 0logCCID50 /ml。结论 超声波破碎率最高 ,细胞碎片最小 ,病毒充分释放 ,且不损伤病毒 ;- 70℃和液氮冻融破碎率较低 ,细胞碎片较大 ,病毒释放效率低 ,病毒损伤以液氮冻融为重。 展开更多
关键词 甲型肝炎 减毒活疫苗 超声波 冻融 病毒释放
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8~24个月龄儿童腮腺炎病毒血清学抗体检测方法比较分析 被引量:2
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作者 殷琼洲 夏龙辉 +12 位作者 李菁 李琦涵 李红 崔晓雨 任群慧 何永华 廖芸 赵志梅 王兆 李琼 梁燕 杨北方 《医学研究杂志》 2018年第10期49-53,40,共6页
目的在分析湖北省两县市的腮腺炎疾病流行情况基础上,对腮腺炎病毒血清学抗体检测方法进行比较分析。方法收集2010~2016年当阳市和谷城县流行性腮腺炎疫情资料进行疾病流行趋势描述。同时依托于湖北省当阳市和谷城县开展的腮腺炎减毒... 目的在分析湖北省两县市的腮腺炎疾病流行情况基础上,对腮腺炎病毒血清学抗体检测方法进行比较分析。方法收集2010~2016年当阳市和谷城县流行性腮腺炎疫情资料进行疾病流行趋势描述。同时依托于湖北省当阳市和谷城县开展的腮腺炎减毒活疫苗(人二倍体细胞)的随机、双盲、阳性疫苗对照的Ⅱ期临床试验,分别采集491例当阳市及526例谷城县8~24个月龄受试者的免疫前血液样品进行腮腺炎病毒抗体水平检测。检测方法包括中和抗体检测法和血凝抑制抗体检测法,每种方法又分别以F基因型或A基因型毒株作为指示病毒或血凝素;就4种检测结果对两地腮腺炎抗体阳性率进行组间比较,并使用同一检测方法对不同基因型毒株的检测结果进行比较分析。结果当阳市2012~2013年达到腮腺炎发病高峰,而谷城县的发病高峰年则在2014~2015年。血清学检测结果表明,A基因型中和抗体法、A基因型血凝抑制抗体法及F基因型血凝抑制抗体法在当阳市、谷城县两地的抗体阳性率比较,差异均无统计学意义;而当使用F基因型中和抗体检测法时,谷城腮腺炎抗体阳性率为7. 0%,当阳市为0. 4%,两地抗体阳性率比较差异有统计学意义(P=0. 000)。使用血凝抑制抗体法同时检测两种基因型毒株的检测结果差异无统计学意义;而运用中和抗体法同时检测则发现,谷城县抗F基因型病毒抗体水平呈阳性而抗A基因型病毒抗体水平呈阴性的比例高达6. 6%,抗A基因型病毒抗体水平呈阳性而抗F基因型病毒抗体水平呈阴性比例则为0. 0%,两种基因型毒株的中和抗体检测结果比较差异有统计学意义(P=0. 000)。结论采用F基因型毒株作为指示病毒,同时使用中和抗体检测方法,能提高检测结果的敏感度,从而有效评价腮腺炎血清学抗体水平。 展开更多
关键词 流行性腮腺炎 发生率 血清学检测法 基因型
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不同月龄婴幼儿接种F基因型腮腺炎减毒活疫苗的免疫应答研究 被引量:2
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作者 殷琼洲 杨盛然 +10 位作者 蕊鞠 梁燕 王晶晶 徐明珏 邓燕 杨北方 李琼 王兆 李琦涵 车艳春 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2019年第3期257-260,共4页
目的探索不同月龄婴幼儿接种F基因型腮腺炎减毒活疫苗(Mumps attenuated live vaccine, MuV)后的免疫应答差异。方法招募无流行性腮腺炎疾病史且未接种过含腮腺炎成分疫苗的8-24月龄健康婴幼儿,接种F基因型MuV,采集免疫前和免疫后28d血... 目的探索不同月龄婴幼儿接种F基因型腮腺炎减毒活疫苗(Mumps attenuated live vaccine, MuV)后的免疫应答差异。方法招募无流行性腮腺炎疾病史且未接种过含腮腺炎成分疫苗的8-24月龄健康婴幼儿,接种F基因型MuV,采集免疫前和免疫后28d血标本,检测抗F基因型腮腺炎病毒中和抗体。结果分别招募8-12月龄、13-17月龄、18-24月龄健康儿童132名、104名、99名。3个年龄组儿童MuV免疫后抗F基因型腮腺炎病毒中和抗体阳性率分别为88.6%、90.4%、90.9%(χ~2=0.37,P=0.832),阳转率分别为87.9%、89.4%、89.9%(χ~2=0.27,P=0.874),几何平均滴度分别为1:5.88、1:7.12、1:6.83(H=1.25,P=0.536)。结论不同月龄婴幼儿接种F基因型MuV后均有良好免疫应答。 展开更多
关键词 腮腺炎减毒活疫苗 F基因型 免疫应答
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HIV-1C亚型nef基因构建的DNA质粒诱导小鼠免疫反应的研究 被引量:1
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作者 周东霞 孙明 +4 位作者 戴青 王玺 黄小琴 褚嘉祐 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期777-780,共4页
目的构建表达中国流行株HIV-1C亚型调控nef基因的重组质粒pVAX-nef,并免疫BALB/c小鼠,观察其免疫效果,为探索新型HIV DNA疫苗提供数据。方法利用分子生物学技术,将nef基因克隆到pVAX,并在体外进行表达与鉴定。以纯化的Nef蛋白作为包被抗... 目的构建表达中国流行株HIV-1C亚型调控nef基因的重组质粒pVAX-nef,并免疫BALB/c小鼠,观察其免疫效果,为探索新型HIV DNA疫苗提供数据。方法利用分子生物学技术,将nef基因克隆到pVAX,并在体外进行表达与鉴定。以纯化的Nef蛋白作为包被抗原,用ELISA检测其体液免疫反应,用ELISPOT检测其细胞免疫反应。结果重组质粒pVAX-nef成功构建。接种小鼠后2周,ELISPOT结果显示产生了针对HIV特异的CD4和CD8细胞抗原表位的免疫应答,且与免疫剂量存在一定的正相关性。ELISA实验诱导产生了抗HIV-1特异性抗体,其中40μg免疫组诱导的抗体水平最高。结论重组质粒pVAX-nef免疫小鼠后可有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫反应。 展开更多
关键词 HIV-1C亚型 DNA疫苗 免疫反应
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HIV-1C亚型DNA疫苗诱导小鼠免疫反应的研究 被引量:1
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作者 周东霞 王杨 +4 位作者 孙明 黄小琴 俞建昆 褚嘉祐 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期451-456,460,共7页
构建含中国流行株HIV-1 C亚型核心蛋白gag基因的重组质粒pVAX-gag,并在体外进行了表达与鉴定.同时构建了含此gag基因的原核表达质粒pGEX-gag,表达纯化并鉴定重组蛋白Gag.以质粒pVAX-gag免疫Balb/C小鼠后,用ELISpot和流式细胞仪检测其细... 构建含中国流行株HIV-1 C亚型核心蛋白gag基因的重组质粒pVAX-gag,并在体外进行了表达与鉴定.同时构建了含此gag基因的原核表达质粒pGEX-gag,表达纯化并鉴定重组蛋白Gag.以质粒pVAX-gag免疫Balb/C小鼠后,用ELISpot和流式细胞仪检测其细胞免疫反应.再以纯化后的重组蛋白Gag作为包被抗原,用ELISA检测其体液免疫反应.结果显示重组质粒pVAX-gag免疫小鼠后可有效地诱导机体产生细胞免疫和体液免疫反应,且免疫剂量和免疫效果存在一定的正相关性.重组原核表达质粒pGEX-gag的表达产物能与抗p24单克隆抗体发生特异性反应,可用于抗HIV抗体检测. 展开更多
关键词 HIV-1C型 DNA疫苗 免疫反应
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HIV-1C亚型调控蛋白Nef在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 戴青 孙明 +3 位作者 周东霞 黄小琴 褚嘉祐 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期347-348,共2页
目的表达人免疫缺陷病毒1型C亚型调控蛋白Nef,为研制HIV疫苗寻找新的途径。方法通过PCR扩增,获得HIV-1C亚型Nef基因片段,并将其克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,以SDS-PAGE和Westernblot分析表达... 目的表达人免疫缺陷病毒1型C亚型调控蛋白Nef,为研制HIV疫苗寻找新的途径。方法通过PCR扩增,获得HIV-1C亚型Nef基因片段,并将其克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后,以SDS-PAGE和Westernblot分析表达产物。结果表达产物是相对分子质量为50000的GST融合蛋白,且能与p27单克隆抗体发生特异性反应。结论重组Nef蛋白在大肠杆菌中得到了有效表达。 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒Ⅰ型 NEF蛋白 原核表达
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HIV-1 C/B’亚型多价重组MVA病毒疫苗免疫原性的研究
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作者 高燕 孙明 +7 位作者 张银川 王玺 李冰香 黄小琴 陈丹 周东霞 褚嘉祐 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期11-15,共5页
目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1C/B’CRF株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat。方法:设105pfu/ml,106pfu/ml,107pfu/mlADMVA3个剂量组,用ELISPOT... 目的:检测人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)C/B’亚型与痘苗病毒安卡拉株(MVA)的多价重组疫苗的免疫原性,此疫苗中包含HIV-1C/B’CRF株的5个基因,分别是env,gag,pol,nef,tat。方法:设105pfu/ml,106pfu/ml,107pfu/mlADMVA3个剂量组,用ELISPOT方法检测细胞免疫反应。同时,以Gag蛋白作为包被抗原,使用间接ELISA的方法检测体液免疫反应。结果:免疫后的小鼠对插入基因env,gag,pol和nef所表达蛋白均产生了特异性细胞免疫应答,且免疫效果与免疫剂量呈正相关。ELISA结果表明,MVA重组疫苗免疫诱导产生了特异性体液免疫,抗HIV-1Gag的抗体滴度与免疫次数和免疫剂量都存在正相关性。结论:多价MVA重组疫苗能有效地诱导小鼠产生特异的细胞免疫和体液免疫反应。 展开更多
关键词 HIV-1 C/B’亚型 多价重组MVA病毒疫苗 免疫原性
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埃可病毒6型对恒河猴树突状细胞的感染研究
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作者 曾洁媛 杨盛然 +11 位作者 李琦涵 王建斌 王晶晶 张小龙 范胜涛 冯敏 廖芸 王丽春 杨少杰 余波 张莹 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1560-1566,共7页
目的:肠道病毒作为小核糖核酸病毒的成员之一,其病原特性已得到了广泛的研究,为进一步探讨其尚未完全清楚的病理学机理,利用来源于恒河猴的不同免疫细胞,对埃可病毒6型(Echovirus 6,Echo 6)毒株与树突状细胞的作用关系及其特征做了初步... 目的:肠道病毒作为小核糖核酸病毒的成员之一,其病原特性已得到了广泛的研究,为进一步探讨其尚未完全清楚的病理学机理,利用来源于恒河猴的不同免疫细胞,对埃可病毒6型(Echovirus 6,Echo 6)毒株与树突状细胞的作用关系及其特征做了初步分析。方法:利用流式细胞仪及抗不同树突状细胞表面特征分子的抗体,从恒河猴外周血及骨髓分离未成熟树突状细胞,经体外诱导培养后,以Echo 6病毒在感染复数为0.1的条件下感染树突状细胞,并于感染后不同时间点收集细胞,检测病毒载量,绘制病毒增殖曲线,同时对上清中相关细胞因子含量做出动态检测。结果:源于恒河猴外周血PBMC分选出的树突状细胞以成熟期树突状细胞(CD11^+/CD83^+)居多;而源于骨髓的细胞经粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)和重组人白细胞介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)刺激培养后诱导分化的树突状细胞则以未成熟细胞为主。Echo 6型病毒分别对未成熟树突状细胞和成熟树突状细胞进行感染后显示,病毒在未成熟树突状细胞中有明显增殖的趋势而非在成熟树突状细胞中增殖。进一步检测病毒感染这些细胞后效应分子的表达情况发现,感染了Echo 6型病毒的未成熟树突状细胞出现肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)转录表达水平的明显上升,同时这些细胞的表面标记呈现CD11^+/CD83^+趋势。结论:Echo 6型病毒能够感染未成熟树突状细胞并在其中出现明显增殖趋势,并在上调细胞TNF-α和rh IL-6表达水平的同时,促进这些细胞转变为成熟树突状细胞。 展开更多
关键词 埃可病毒6型 树突状细胞 感染 肠道病毒 肿瘤坏死因子 白细胞介素-6
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8-20月龄儿童接种肠道病毒71型灭活疫苗的免疫原性和持久性 被引量:1
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作者 华瑞珏 黄瑾 +7 位作者 权力 张小娟 张莹 崔萍芳 李颖 石昊昱 徐飚 《中国疫苗和免疫》 北大核心 2020年第6期626-628,638,共4页
目的观察8-20月龄儿童接种2剂次肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV-71)灭活疫苗的免疫原性和持久性。方法于2017年10-12月在上海市静安区招募8-20月龄儿童,按0d、30d程序接种2剂次EV-71疫苗,采集免疫前和免疫后60d、365d、730d血标本,采... 目的观察8-20月龄儿童接种2剂次肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV-71)灭活疫苗的免疫原性和持久性。方法于2017年10-12月在上海市静安区招募8-20月龄儿童,按0d、30d程序接种2剂次EV-71疫苗,采集免疫前和免疫后60d、365d、730d血标本,采用细胞病变法测定血清EV-71中和抗体,分析抗体阳转率和几何平均滴度(Geometric mean titer,GMT)。结果受试者EV-71疫苗免疫前EV-71中和抗体阳性率、GMT分别为3.25%(4/123)、1:4.17,免疫后60d、365d、730d抗体阳转率分别为96.15%(100/104)、90.20%(92/102)、90.80%(79/87),GMT分别1:41.76、1:28.44、1:43.41。结论8-20月龄儿童对EV-71疫苗具有良好的免疫原性和2年免疫持久性。 展开更多
关键词 肠道病毒71型灭活疫苗 免疫原性 免疫持久性
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能增强抗原特异性免疫应答的新局部接种法
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作者 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 2003年第1期42-43,共2页
关键词 局部接种法 动物实验 免疫应答
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肠道病毒71型灭活疫苗灭活验证超速离心条件的优化
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作者 赵恒 袁梅 +7 位作者 严皎 王云飞 杨佳 史磊 冯凯 杨晓蕾 洪超 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期192-194,199,共4页
目的优化肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗灭活验证超速离心条件,为EV71灭活疫苗灭活验证样品的处理提供实验依据。方法在不同转速(45 000、40 000、35 000、30 000、25 000 r/min)和时间(120、90、60、30 min)条件下对EV71... 目的优化肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗灭活验证超速离心条件,为EV71灭活疫苗灭活验证样品的处理提供实验依据。方法在不同转速(45 000、40 000、35 000、30 000、25 000 r/min)和时间(120、90、60、30 min)条件下对EV71收获液进行超速离心,检测离心前和离心后病毒液的滴度,计算回收率,比较不同条件下离心前后病毒回收效果。结果在转速相同或离心时间相同的条件下,EV71的沉淀效果与离心时间或离心转速呈正相关(R^2从0.77和0.88分别增大到0.99),其中,当离心转速超过40 000 r/min时,不同离心时间下病毒的回收率均在90%以上,当离心时间为120 min,离心转速为45 000 r/min时,病毒的沉淀效果最好,回收率最高,达98%。综合离心时间因素,选择离心条件为45 000 r/min-60 min较适宜(回收率为97%),与45 000 r/min-120 min相比,差异无统计学意义(P>0.05);如将时间减为45 000 r/min-30 min,与其他3组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EV71的沉淀效果与离心转速和离心时间呈正相关,即随着离心转速增大和离心时间的延长,病毒的沉淀效果越好、回收率越高。 展开更多
关键词 肠道病毒71型 超速离心 回收率
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