猪伪狂犬病毒C株的分离鉴定 被引量：10

1

作者 高俊锋 赖志 +4 位作者 舒银辉 漆世华 马晶晶 吴碧清 龚建培 《上海农业学报》 CSCD 2015年第1期32-36,共5页

在流行病学调查中分离到的1株伪狂犬病毒,命名为猪伪狂犬病毒C株,并对其进行鉴定、纯化。在gE和gI基因段上设计特异性引物进行PCR检测,闽A株在5 000 bp处出现目的条带,该毒株在1 500 bp附近出现目的条带,对目的条带测序,扩增产物大小为1... 在流行病学调查中分离到的1株伪狂犬病毒,命名为猪伪狂犬病毒C株,并对其进行鉴定、纯化。在gE和gI基因段上设计特异性引物进行PCR检测,闽A株在5 000 bp处出现目的条带,该毒株在1 500 bp附近出现目的条带,对目的条带测序,扩增产物大小为1 538 bp,在第989—4 468位基因缺失,缺失片段大小为3 570 bp,该缺失片段包含了伪狂犬病病毒的主要毒力基因(gE基因),除此缺失片段外,分别在第873、4 665、4 666、4 950位发生了碱基突变,同猪伪狂犬病病毒Bartha K61同源性为95.0%—96.0%,与PRV Bartha K61不是同一个毒株。用该毒株对部分省市分离到的伪狂犬毒株和标准毒株闽A株进行中和试验,中和指数为708—6 761,该毒株可完全中和临床分离的伪狂犬病毒株,故可用作候选疫苗毒株。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 C株 中和试验 分离鉴定

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BHK-21细胞不同处理方式对裸鼠致瘤性的影响 被引量：6

2

作者 于义娟 秦涛 +9 位作者 闵娟娟 漆世华 靖志强 付娅 李晶梅 廖园园 舒银辉 朱薇 徐松 谢红玲 《中国兽药杂志》 北大核心 2017年第11期28-35,共8页

为分析BHK-21细胞不同处理方式对裸鼠致瘤性的影响,分别用甲醛、二乙烯亚胺(BEI)、β-丙内酯(BPL)进行灭活和在-20℃进行冻融处理的BHK-21细胞接种裸鼠,通过病理组织形态学观察判定其是否存在致肿瘤的特性。结果显示,甲醛、BEI、BPL、冻... 为分析BHK-21细胞不同处理方式对裸鼠致瘤性的影响,分别用甲醛、二乙烯亚胺(BEI)、β-丙内酯(BPL)进行灭活和在-20℃进行冻融处理的BHK-21细胞接种裸鼠,通过病理组织形态学观察判定其是否存在致肿瘤的特性。结果显示,甲醛、BEI、BPL、冻融2次或3次分别处理的BHK-21细胞接种裸鼠,对裸鼠致瘤率为零。冻融1次的BHK-21细胞和10~7、10~5和10~3个BHK-21细胞分别接种裸鼠,致瘤率为100%。10个BHK-21细胞接种裸鼠,未见成瘤。试验表明,裸鼠检测BHK-21细胞致瘤性敏感性为10~3个细胞;冻融2次、甲醛、BEI、BPL处理,BHK-21细胞均丧失致瘤性;冻融1次不能使BHK-21细胞丧失致瘤性。 展开更多

关键词 BHK-21细胞 裸鼠 致瘤性

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猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)对兔与猪免疫攻毒保护平行关系研究 被引量：5

3

作者 舒银辉 黄文辉 +6 位作者 饶清宜 郑良益 漆世华 吴玉石 杨思谊 杨雷 谢红玲 《中国兽药杂志》 2012年第10期5-8,共4页

用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率... 用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率。结果表明,兔免疫28 d后的血清抗体中和指数为794～1258时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥1479时可获得100%保护;仔猪免疫28 d后的血清抗体中和指数为229～269时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥331时可获得100%保护。兔与仔猪对猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)均产生良好的免疫应答反应,抗体值较高者获得保护率相对较高,兔与猪免疫与攻毒保护呈现平行关系。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 灭活疫苗 免疫攻毒保护 平行关系

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血清3型鸭甲型肝炎病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与初步应用 被引量：5

4

作者 孙庆歌 薛霜 +7 位作者 肖爱芳 马慧慧 朱薇 漆世华 温文生 舒银辉 谢红玲 苏敬良 《中国兽药杂志》 2013年第4期1-5,共5页

通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5’非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3... 通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5’非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3的实时荧光定量RT-PCR方法。该方法能特异性地检测出DHAV-3,而与血清1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒(H9)、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒无交叉反应。在1.8×103～1.8×108copies/μL的检测范围内标准曲线线性关系较好,R2为0.992。敏感性试验表明,最低检测限为36拷贝数RNA。用该方法和胚半数致死量法对尿囊液中病毒含量进行检测,表明二种方法检测结果呈正相关。本研究所建立的检测方法特异性好,灵敏度高,且操作方便,可为该病毒的快速诊断和流行病学调查提供技术手段。 展开更多

关键词 血清3型鸭甲型肝炎病毒 实时荧光定量RT—PCR

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副猪嗜血杆菌病的防治探讨 被引量：3

5

作者 程建国 饶健 舒银辉 《湖北畜牧兽医》 2011年第10期21-23,共3页

副猪嗜血杆菌病作为世界范围发生的疾病,严重危害着养猪业的发展,对其进行防治具有重要的经济意义。副猪嗜血杆菌菌株中1、5、10、12、13和14型菌株毒力较强,2、4、15型菌株毒力中等,8型菌株毒力较弱。4、5、13型菌株在世界上大多数国... 副猪嗜血杆菌病作为世界范围发生的疾病,严重危害着养猪业的发展,对其进行防治具有重要的经济意义。副猪嗜血杆菌菌株中1、5、10、12、13和14型菌株毒力较强,2、4、15型菌株毒力中等,8型菌株毒力较弱。4、5、13型菌株在世界上大多数国家流行,由于在实际生产上常发生灭活疫苗免疫失败,造成了巨大的经济损失。结合国内外文献,对副猪嗜血杆菌疾病的研究现状以及其在流行病学、发病机理、临床症状、诊断与治疗、预防与免疫等方面的研究进展进行了探讨分析,为副猪嗜血杆菌的防控提供参考和借鉴。 展开更多

关键词 副猪嗜血杆菌 寡肽A蛋白 抗生素 免疫

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猪伪狂犬病病毒HB-11株的分离鉴定及gC基因的分析 被引量：2

6

作者 马晶晶 吴碧清 +3 位作者 高俊锋 郑良益 舒银辉 赖志 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第8期28-32,共5页

将某猪场发病死亡猪的脑和肺组织接种BHK-21细胞,连传5代均出现典型细胞病变,表明分离到1株病毒,病毒含量为108. 33TCID50/mL。该毒株能被猪伪狂犬病病毒标准阳性血清中和,接种家兔、小鼠和仔猪均出现典型伪狂犬病症状,表明分离株为猪... 将某猪场发病死亡猪的脑和肺组织接种BHK-21细胞,连传5代均出现典型细胞病变,表明分离到1株病毒,病毒含量为108. 33TCID50/mL。该毒株能被猪伪狂犬病病毒标准阳性血清中和,接种家兔、小鼠和仔猪均出现典型伪狂犬病症状,表明分离株为猪伪狂犬病病毒,命名为PRV HB-11株。gC基因的遗传进化分析显示,HB-11株与近年来流行的变异株同源性为99. 3%~99. 4%,与Bartha株的同源性为94. 8%,其gC基因序列相对于Bartha株序列有7个连续氨基酸的插入(158AAASTPA164),该突变插入的生物学意义有待于进一步研究。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 分离 鉴定 GC基因

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猪伪狂犬病不同佐剂灭活疫苗对兔免疫原性初探 被引量：2

7

作者 舒银辉 黄文辉 +7 位作者 饶清宜 郑良益 漆世华 王桂桂 吴玉石 祝春花 杨思谊 杨雷 《中国兽药杂志》 2011年第12期19-22,共4页

采用分离鉴定的猪伪狂犬病毒(HB-J株)以4种佐剂研制成4批灭活疫苗,以研究其对兔的免疫原性。疫苗分别免疫PRV抗体阴性兔后,用乳胶凝集试验法(LAT)和中和试验法(SNT)对试验兔进行血清抗体检测;于免疫后21、28 d对试验兔分别进行攻毒,观... 采用分离鉴定的猪伪狂犬病毒(HB-J株)以4种佐剂研制成4批灭活疫苗,以研究其对兔的免疫原性。疫苗分别免疫PRV抗体阴性兔后,用乳胶凝集试验法(LAT)和中和试验法(SNT)对试验兔进行血清抗体检测;于免疫后21、28 d对试验兔分别进行攻毒,观察兔保护情况。试验结果表明,兔对不同佐剂的猪伪狂犬病疫苗均产生良好的免疫应答反应,且当兔免疫后血清凝集价≥1∶32或血清抗体中和指数≥1479或中和价≥1∶16时,可以抵抗10 LD50剂量强毒的攻击;当兔免疫后血清凝集价≥1∶64或血清抗体中和指数≥2187或中和价≥1∶32时,可以抵抗100LD50剂量强毒的攻击;4种佐剂灭活疫苗均具有良好的免疫效果。 展开更多

关键词 伪狂犬病 不同佐剂 疫苗 免疫原性

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1例仔猪流行性腹泻的诊断报告 被引量：2

8

作者 于义娟 舒银辉 +2 位作者 廖园园 李晶梅 谢红玲 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第3期120-121,共2页

2013年3月，湖北省武汉市某养猪场，哺乳仔猪发病，集中在3～7日龄，发病初期表现为呕吐、拉稀，发病后期表现为拉黄色稀便，仔猪消瘦、脱水，发病率较高，约60％，死亡率不高，不到10％。

关键词 猪流行性腹泻 诊断报告 哺乳仔猪 发病率 养猪场 武汉市 湖北省 死亡率

原文传递

日本乙型脑炎病毒ELISA抗体检测试剂盒的研制及初步应用 被引量：1

9

作者 李建 廖园园 +7 位作者 秦红刚 刘洁 朱薇 漆世华 韩兴 徐松 舒银辉 谢红玲 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第1期10-13,共4页

采用日本乙型脑炎病毒单克隆抗体预包被酶标板，将纯化的日本乙型脑炎病毒（ JEV）作为检测用抗原，利用包被捕获法建立了用于检测猪乙型脑炎抗体的间接ELISA法。采用建立的ELISA法对50份已知阴性血清样本检测，临界OD450nm值为0．343，... 采用日本乙型脑炎病毒单克隆抗体预包被酶标板，将纯化的日本乙型脑炎病毒（ JEV）作为检测用抗原，利用包被捕获法建立了用于检测猪乙型脑炎抗体的间接ELISA法。采用建立的ELISA法对50份已知阴性血清样本检测，临界OD450nm值为0．343，ELISA与IFA对200份血清进行平行检测，总符合率为92．9％，与商品化的同类国产试剂盒的符合率为95％。与其他常见的猪病毒阳性血清抗体无交叉反应，2～8℃保存12个月稳定。研制的ELISA抗体检测试剂盒为临床JEV血清抗体检测及其疫苗的免疫效果评价提供了技术手段。 展开更多

关键词 日本乙型脑炎病毒 试剂盒 间接ELISA 抗体

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免疫小鼠血清中猪圆环病毒2型抗体ELISA检测试剂盒的研究

10

作者 李建 张敏 +14 位作者 薛霜 张飞雁 朱薇 石宝兰 漆世华 李文静 王碧群 秦红刚 韩兴 郑良益 徐松 舒银辉 冯钊 李婷婷 谢红玲 《中国兽药杂志》 2022年第2期19-24,共6页

为研制一种小鼠血清中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测试剂盒,以PCV2 Cap蛋白兔多抗作为包被用抗体,捕获纯化的PCV2 Cap蛋白,制备抗原检测板,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗小鼠IgG作为二抗,建立检测小鼠血清中PCV... 为研制一种小鼠血清中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测试剂盒,以PCV2 Cap蛋白兔多抗作为包被用抗体,捕获纯化的PCV2 Cap蛋白,制备抗原检测板,辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗小鼠IgG作为二抗,建立检测小鼠血清中PCV2抗体ELISA检测方法并制备试剂盒。采用所制备的ELISA试剂盒对50份已知阴性血清样本进行检测,临界OD_(450nm)值为0.335;采用ELISA试剂盒与IFA分别对100份血清检测,总符合率为96%,检测小鼠血清敏感性效价达1∶16000,与其他常见的猪病毒小鼠阳性血清无交叉反应,2~8℃保存15个月稳定,批内变异系数为2.28%~4.17%,批间变异系数为4.27%~6.02%,具有良好的敏感性、特异性、稳定性及重复性;采用ELISA试剂盒对不同来源疫苗免疫组小鼠血清进行检测,均显示良好效果。研究表明,本研究制备的ELISA试剂盒可用于小鼠血清中PCV2抗体效价检测。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 抗体 ELISA试剂盒

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鸡新城疫及传染性法氏囊病二联油乳剂灭活苗的试制与应用

11

作者 舒银辉 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第2期35-36,共2页

关键词 鸡 ND 二联疫苗 灭活苗 油乳剂 免疫试验

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不同佐剂猪细小病毒灭活苗免疫效果比较试验

12

作者 舒银辉 向敏 +4 位作者 漆世华 陶弼菲 占才耀 陈志华 汪云 《上海畜牧兽医通讯》 2009年第3期16-17,共2页

关键词 猪细小病毒病 病毒灭活苗 比较试验 免疫效果 佐剂 初产母猪 木乃伊 大洋洲

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