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同时检测血清中多种抗体的蛋白质微阵列研究 被引量：7
1
作者 丁亚平 陈立炎 +7 位作者 张文 曹恒杰 倪世明 周枚芬 梁好 凌志光 耿永尧 王升启 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期640-644,共5页
建立一种用蛋白质微阵列法可同时检测血清中艾滋病毒 (HIV) ,丙型肝炎病毒 (HCV)和梅毒螺旋体(TP)抗体的方法 .将基因工程HIV、HCV和TP 3种融合抗原共价结合于固相载体玻片上 ,制成蛋白质微阵列 ,血清样本经稀释、加样、孵育、洗涤后 ,... 建立一种用蛋白质微阵列法可同时检测血清中艾滋病毒 (HIV) ,丙型肝炎病毒 (HCV)和梅毒螺旋体(TP)抗体的方法 .将基因工程HIV、HCV和TP 3种融合抗原共价结合于固相载体玻片上 ,制成蛋白质微阵列 ,血清样本经稀释、加样、孵育、洗涤后 ,加上Cy3荧光标记二抗 ,洗涤 ,激光共聚扫描 ,将获得的图片用Bio discover公司的Imagene专用分析软件进行分析 ,所获数据在经过自行编写的软件 ,根据Cutoff值自动生成判断结果 .用此蛋白质微阵列系统检测了 4 0 0例阴性血清 ,确定了Cutoff值 ,检测中国药品生物制品检定研究所的HIV ,HCV和TP 3种参比品 ,并与 3种ELISA试剂盒的结果进行了比较 .蛋白质微阵列的艾滋病毒阳性和阴性符合率均为 10 0 % (2 0 / 2 0 ) ;丙型肝炎病毒阳性和阴性符合率均为 95 % (38/ 4 0 ) .梅毒螺旋体参比品阳性符合率为 10 0 % (10 / 10 ) ,阴性符合率为 10 0 % (2 0 / 2 0 ) ,蛋白质微阵列与三种ELISA试剂检测国家HIV、TP、HCV参比品 (共 15 0份血清样本 ) ,结果具有高度的符合率 . 展开更多
关键词 同时检测 血清 多种抗体 蛋白质微阵列
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丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片的制备及临床评价 被引量：7
2
作者 张文 周枚芬 +5 位作者 陈立炎 丁亚平 曹恒杰 黄坚 耿永尧 王升启 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第6期935-939,共5页
为了制备丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片 ,并对其临床应用价值进行评价 ,将基因工程表达的丙型肝炎病毒分片段抗原 ,点至经特殊处理的玻片上 ,制成蛋白质芯片 .收集来自三家临床单位用于临床验证的 90 5份血清标本 .分别用丙肝... 为了制备丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片 ,并对其临床应用价值进行评价 ,将基因工程表达的丙型肝炎病毒分片段抗原 ,点至经特殊处理的玻片上 ,制成蛋白质芯片 .收集来自三家临床单位用于临床验证的 90 5份血清标本 .分别用丙肝病毒分片段抗体检测蛋白质芯片、ELISA丙肝病毒抗体检测试剂进行检测 .部分样本同时采用进口RIBA抗体检测试剂进行了检测 ,分别比较蛋白质芯片法与ELISA法以及RIBA试剂的符合率 .结果表明 :a 90 5份血清标本 ,ELISA法检出阳性 2 94份 ,阴性 611份 .阳性标本用蛋白质芯片法检测 ,融合抗原 2 92份显示阳性结果、 2份阴性结果 ,根据蛋白质芯片的核心抗原 ,以及NS3 ,NS4,NS5分片段抗原综合判断确定阳性样本 2 88份阳性 ,阴性样本 2份 ,4份样本结果不确定 .ELISA法检出的 611份阴性标本用两种蛋白质芯片法检测 ,检出阴性均为 611份 .两种蛋白质芯片法与ELISA法的阳性符合率分别为 99 3 %和98 9% ,与ELISA法的阴性符合率均为 10 0 % .用RIBA试剂检测 6份ELISA法为阳性 ,蛋白质芯片法为非阳性的样本 ,结果均为非阳性 .b 2 90份经RIBA试剂确认的阳性标本 10 4份 ,单片段阳性标本 66份 ,阴性标本12 0份 ,用蛋白质芯片法检测 ,检出阳性标本 10 3份 ,单片段阳性标本 61份 ,阴性标本 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 抗体 蛋白质芯片 临床评价
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寡核苷酸芯片用于HLA-A基因分型的研究 被引量：2
3
作者 胡守旺 张帆 +2 位作者 王晖 耿永尧 王升启 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期340-343,共4页
目的　应用寡核苷酸芯片分型方法 ,对HLA A基因进行分型研究。方法　采用不对称PCR方法 ,扩增HLA A基因的第 2 ,3外显子 ,荧光标记扩增产物 ,作为杂交模板。设计分型检测寡核苷酸探针 ,制备HLA A基因分型检测芯片。采取差异选择法 ,筛... 目的　应用寡核苷酸芯片分型方法 ,对HLA A基因进行分型研究。方法　采用不对称PCR方法 ,扩增HLA A基因的第 2 ,3外显子 ,荧光标记扩增产物 ,作为杂交模板。设计分型检测寡核苷酸探针 ,制备HLA A基因分型检测芯片。采取差异选择法 ,筛选强杂交信号和高特异性的分型探针。探索了探针长度、探针位置等对杂交信号的影响。杂交结果经荧光扫描 ,并用分型软件分析判断阳性探针和HLA A基因型。结果　 30例临床样本芯片分型结果与PCR SSP及DNA测序分型结果相符。结论　采用寡核苷酸芯片技术对HL A基因分型是种好的方法 ,具有测速快、成本低、高通量的优点。 展开更多
关键词 HLA-A基因 基因分型 寡核苷酸芯片 PCR-SSP
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生物制品事业的发展策略刍议
4
作者 耿永尧 《微生物学免疫学进展》 1996年第Z09期72-75,共4页
生物制品事业的发展策略刍议耿永尧（卫生部兰州生物制品研究所，兰州７３００４６）我国生物制品事业的发展，在国家卫生部指导下，经历了一个长期的计划经济的发展道路。卫生部下属的六个生物制品研究所，在行业保护的政策下，迅速壮... 生物制品事业的发展策略刍议耿永尧（卫生部兰州生物制品研究所，兰州７３００４６）我国生物制品事业的发展，在国家卫生部指导下，经历了一个长期的计划经济的发展道路。卫生部下属的六个生物制品研究所，在行业保护的政策下，迅速壮大，为我国人民的防病、灭病做出了重... 展开更多
关键词 生物制品 发展策略 生产管理
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丙型肝炎病毒分片段抗体检测蛋白质芯片质控参比品的建立及质量验证 被引量：1
5
作者 张文 周枚芬 +4 位作者 陈立炎 丁亚平 黄坚 耿永尧 王升启 《生物技术通讯》 CAS 2004年第3期248-250,共3页
建立能同时检测丙型肝炎病毒(HCV)嵌合抗体、核心抗体和NS3、NS4、NS5抗体的蛋白质芯片质控参比品,对质控合格的芯片进行质量验证。用3种HCVEIA试剂分别检测从3家医院收集的丙型肝炎病毒感染患者血清及其他非HCV感染患者血清,从3种EIA... 建立能同时检测丙型肝炎病毒(HCV)嵌合抗体、核心抗体和NS3、NS4、NS5抗体的蛋白质芯片质控参比品,对质控合格的芯片进行质量验证。用3种HCVEIA试剂分别检测从3家医院收集的丙型肝炎病毒感染患者血清及其他非HCV感染患者血清,从3种EIA试剂同时阴性或阳性的血样中挑取阳性和阴性血清,然后用RNAhybPCR试剂进行检测,从中再选取部分样本用RIBA3.0进行检测,确定HCV分片段抗体检测蛋白质芯片质控参比品。经质检合格的芯片用中国药品生物制品检定所的HCV参比品进行检定。通过490例临床标本的检测对芯片的质量进行进一步的验证。从收集的240份丙型肝炎病毒感染患者血清及其他非HCV感染患者血清筛选出30份血样(15份阳性,15份阴性)作为HCV分片段抗体检测蛋白芯片质控参比品。中国药品生物制品检定所的80份HCV参比品检定结果表明,混合抗体阳性检出率为39/40,阴性符合率为40/40,总符合率为98.7%;核心抗体阳性检出率为27/40,阴性符合率为40/40;NS3抗体阳性检出率为26/40,阴性符合率为39/40;NS4抗体阳性检出率为19/40,阴性符合率为40/40;NS5抗体阳性检出率2/40,阴性符合率为40/40。490例临床标本的检测结果表明,对于194例HCV阳性标本,蛋白质芯片混合抗体与ELISA的符合率达99.5%,分片段抗体符合率达97.4%,两种方法检测? 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 蛋白质芯片 质量验证 生物制品 抗体 检测
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