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骨组织工程诱导性支架材料修复骨缺损 被引量：11
1
作者 唐俊杰 李文杰 +4 位作者 李根 王九娜 赵玲 秦文 赵红斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第3期340-346,共7页
背景:前期实验中发现载淫羊藿苷壳聚糖/胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架具有良好的物理和化学性质。目的:研究载淫羊藿苷壳聚糖/胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架修复兔胫骨平台骨缺损的效果。方法:利用静电纺丝技术制备胶原/聚己内... 背景:前期实验中发现载淫羊藿苷壳聚糖/胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架具有良好的物理和化学性质。目的:研究载淫羊藿苷壳聚糖/胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架修复兔胫骨平台骨缺损的效果。方法:利用静电纺丝技术制备胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架壳层,真空干燥法制备载淫羊藿苷壳聚糖微球/胶原支架芯层,将芯层嵌入壳层后利用京尼平交联构建载药复合支架。将载淫羊藿苷壳聚糖微球置入PBS中,观察药物缓释效果。将载药复合支架与大鼠骨髓间充质干细胞共培养7 d,观察细胞黏附效果。取青紫蓝兔15只,复制兔左侧胫骨缺损模型,随机分为3组,实验组于骨缺损处植入载药复合支架,对照组植入胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架,空白对照组不植入任何材料。术后4,12,24周行X射线观察、样本大体和组织学观察。结果与结论:载药复合支架具有疏松多孔结构,利于骨髓间充质干细胞的黏附、增殖;壳聚糖微球体外缓释在72 h内保持19%释放量的良好缓释效果。术后24周,实验组材料完全被新生骨组织覆盖,硬度与正常骨相近,苏木精-伊红染色观察发现有骨小梁、骨细胞和成骨细胞,但缺损区骨密度低于正常骨组织;对照组材料被纤维组织包裹,苏木精-伊红染色显示有骨小梁、骨髓细胞和纤维组织;空白对照组呈凹陷愈合,但硬度低于正常骨组织,苏木精-伊红染色可见大量骨髓细胞和骨小梁。结果表明载药壳聚糖/胶原/聚己内酯/羟基磷灰石复合支架能有效修复兔骨缺损。 展开更多
关键词 生物材料 骨生物材料 壳聚糖 胶原 聚己内酯 羟基磷灰石 骨缺损 复合材料 组织工程
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cAMP/Ca^(2+)信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经元细胞定向分化中的作用和机制 被引量：7
2
作者 赵玲 赵红斌 +3 位作者 秦文 李根 唐俊杰 王九娜 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期401-408,共8页
本研究旨在探讨cAMP/Ca^(2+)信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元细胞定向分化中的作用机制。将骨髓间充质干细胞株D1细胞分为空白对照组和红景天苷诱导组,空白对照组细胞加入不含药物的等量D/F12完全培养液,诱导组... 本研究旨在探讨cAMP/Ca^(2+)信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)向神经元细胞定向分化中的作用机制。将骨髓间充质干细胞株D1细胞分为空白对照组和红景天苷诱导组,空白对照组细胞加入不含药物的等量D/F12完全培养液,诱导组细胞加入含有100 mg·L^(–1)红景天苷的D/F12完全培养液分别作用24、48和72 h。运用RT^2 Profiler PCR Array方法检测红景天苷诱导BMSCs不同时间后c AMP/Ca^(2+)信号通路中差异表达的基因。实验表明,红景天苷分别诱导BMSCs 24、48和72 h后,与空白对照组比较,表达有差异的基因共38个,其中上调基因23个,下调基因15个,经过筛选上调较显著的基因有4个:DNA损伤诱导因子3(Ddit3)、热休克蛋白5(Hspa5)、磷酸酶1调节亚单位15a(Ppp1r15a)、前列腺素内过氧化物合酶(Ptgs2);下调显著的基因有4个:胰高血糖素(Gcg)、白细胞介素2(Il2)、肿瘤坏死因子(Tnf)、生长激素抑制素(Sst)。这些基因可能对红景天苷诱导BMSCs向神经元细胞的定向分化具有一定影响。 展开更多
关键词 红景天苷 骨髓间充质干细胞 神经元细胞 AMP/Ca^2+信号通路 RNA表达谱
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红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化中的Ca^(2+)/CaM信号通路 被引量：4
3
作者 赵玲 赵红斌 +3 位作者 潘茜 李根 王九娜 唐俊杰 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第37期6019-6023,共5页
背景:课题组前期研究表明,红景天苷能诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化,Ca2+信号是实现其生物学信号传导的重要途径之一目的:探讨Ca2+/CaM信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化中的作用及机制。方法:... 背景:课题组前期研究表明,红景天苷能诱导骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向分化,Ca2+信号是实现其生物学信号传导的重要途径之一目的:探讨Ca2+/CaM信号通路在红景天苷诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化中的作用及机制。方法:实验分为空白对照组和红景天苷诱导组,红景天苷诱导组将不同质量浓度红景天苷(5,10,20,50,100 mg/L)作用骨髓间充质干细胞24 h和100 mg/L红景天苷作用骨髓间充质干细胞12,24,48,72 h。采用Western blot方法分别检测红景天苷诱导骨髓间充质干细胞后神经标志分子MAP2和Ca2+/CaM信号通路中关键蛋白CaM、CaMKⅡ的表达水平。另外实验设阻断剂组,分别加Ca2+信号通路特异性阻断剂:500μmol/L EGTA(细胞外Ca2+螯合剂)、1 mmol/L Nifedipine(L型Ca2+通道阻断剂)、10 mmol/L LY294002(PI3K抑制剂)分别作用细胞30 min后,再加入100 mg/L红景天苷作用细胞24 h,采用Western blot方法检测阻断Ca2+/CaM信号通路后NSE、CaM的表达情况。结果与结论:1红景天苷诱导后,MAP2的表达上调(P<0.01),说明红景天苷可诱导骨髓间充质干细胞分化为神经细胞。2不同质量浓度红景天苷诱导骨髓间充质干细胞24 h后,10 mg/L红景天苷组CaM、CaMKⅡ的表达与其他诱导组比较显著上调(P<0.01);同一质量浓度红景天苷诱导72 h后CaM、CaMKⅡ表达明显下调(P<0.01)。3阻断细胞外Ca2+和PI3K信号通路后,NSE与CaM的表达水平较红景天苷诱导组上调(P<0.05)。结果表明,红景天苷通过抑制Ca2+/CaM信号通路实现骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化。 展开更多
关键词 干细胞 骨髓干细胞 红景天苷 骨髓间充质干细胞 Ca2+/CaM信号通路 神经细胞 国家自然科学基金
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独一味药物敷料的构建及其对高原皮肤创伤修复的实验研究 被引量：2
4
作者 李文杰 王世勇 +5 位作者 刘阳 李根 赵玲 王九娜 唐俊杰 赵红斌 《生物医学工程与临床》 CAS 2017年第3期229-235,共7页
目的构建一种新型创伤敷料并评价其生物学性能,以期实现对高海拔地区皮肤创伤修复。方法将独一味与胶原蛋白/聚己内酯(1∶1)混合,用0.1%京尼平交联或不交联材料24 h,部分敷料用质量体积分数0.1%京尼平室温交联1 h,用无水乙醇溶液充分洗... 目的构建一种新型创伤敷料并评价其生物学性能,以期实现对高海拔地区皮肤创伤修复。方法将独一味与胶原蛋白/聚己内酯(1∶1)混合,用0.1%京尼平交联或不交联材料24 h,部分敷料用质量体积分数0.1%京尼平室温交联1 h,用无水乙醇溶液充分洗涤,再用浓度0.1 mol/L NaOH中和10 min,剩余敷料不交联做为对照,自然干燥、密封后用60钴照射灭菌。利用扫描电子显微镜观察材料交联前后的结构;通过体外实验分析交联前后材料的透气性、吸水性、接触角和降解性能。同时选取40只Wistar大鼠(雌雄不拘),鼠龄(3.4±0.3)个月,体质量(180±10)g。对大鼠急进高海拔地区(海拔3 670 m)后复制皮肤创伤模型,随机分为2组;对照组用常规纱布治疗,实验组用载药敷料治疗。术后3、7、14 d时,分别利用组织学和免疫组织化学方法观察并评价创伤愈合效果。结果交联后敷料可见纤维相互交叉粘连,呈纳米纤维状无序排列、分布,纤维的直径为200~600 nm。载药敷料24 h时药物释放率为(83.62±4.23)%。交联敷料吸水率、透气率高于未交联敷料(51.21%±2.55%vs 40.07%±2.55%,90.60%±3.68%vs 84.30%±4.23%),差异有统计学意义(P<0.05)。交联敷料降解率、接触角小于未交联敷料(10.54%±1.73%vs 58.20%±3.62%,10.00°±0.86°vs 128.00°±1.75°),差异有统计学意义(P<0.01、0.05)。动物实验,实验组创面的愈合率明显高于对照组(P<0.05),且创面组织中CD31和表皮生长因子(EGF)表达水平明显高于对照组。结论胶原/独一味药物敷料具有良好的物理特性和组织相容性,能有效促进皮肤创伤的修复。 展开更多
关键词 胶原蛋白 独一味 静电纺丝 皮肤创伤 高海拔
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一种溶菌酶洗手液的抑菌性能和毒性试验研究 被引量：2
5
作者 杨金芳 李晓颖 +3 位作者 李敏 王九娜 杨小琳 赵金礼 《中国消毒学杂志》 CAS 2020年第11期823-825,共3页
目的研究一种溶菌酶洗手液的抑菌性能和毒性。方法采用悬液定量抑菌试验法、理化分析和动物试验法,对溶菌酶洗手液进行酶活性和抑菌性能及毒性试验。结果该溶菌酶洗手液中溶菌酶蛋白含量为1.65 mg/m L,酶活性为50000 u/mg。该溶菌酶洗... 目的研究一种溶菌酶洗手液的抑菌性能和毒性。方法采用悬液定量抑菌试验法、理化分析和动物试验法,对溶菌酶洗手液进行酶活性和抑菌性能及毒性试验。结果该溶菌酶洗手液中溶菌酶蛋白含量为1.65 mg/m L,酶活性为50000 u/mg。该溶菌酶洗手液的50%稀释液作用5 min,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌的抑菌率达96%以上,对手上自然菌的平均杀灭对数值为1.31。该溶菌酶洗手液小鼠急性经口毒性LD50>5000 mg/(kg·bw)。结论该溶菌酶洗手液对细菌繁殖体和真菌具有良好的抑菌作用,属无毒级物质。 展开更多
关键词 溶菌酶 洗手液 抑菌效果 毒性
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复合红景天苷支架材料对大鼠骨髓间充质干细胞的影响 被引量：2
6
作者 王九娜 向大伟 +4 位作者 唐俊杰 李根 赵玲 秦文 赵红斌 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期207-212,共6页
探讨复合红景天苷微球的胶原蛋白材料支架对大鼠骨髓间充质干细胞的影响及作用。将红景天苷制作成微球复合到胶原蛋白中,扫描电镜观察材料支架的表征,接种大鼠骨髓间充质干细胞后扫描电镜观察细胞与材料的黏附性,CCK-8法测细胞在材料上... 探讨复合红景天苷微球的胶原蛋白材料支架对大鼠骨髓间充质干细胞的影响及作用。将红景天苷制作成微球复合到胶原蛋白中,扫描电镜观察材料支架的表征,接种大鼠骨髓间充质干细胞后扫描电镜观察细胞与材料的黏附性,CCK-8法测细胞在材料上的增殖情况,HE染色检测细胞在材料上的增殖及形态,S100免疫荧光化学法检测干细胞向神经细胞的分化情况。结果显示,细胞接种到材料上,在材料上黏附并生长。同种材料,随着时间的延长,材料上的细胞显著增殖(P<0.05)。神经细胞标志性蛋白S100表达为阳性。复合红景天苷微球的胶原蛋白具有良好的生物相容性,红景天苷微球不影响细胞在材料上的增殖,且可有效诱导大鼠间充质干细胞向神经细胞分化。 展开更多
关键词 红景天苷 胶原蛋白 材料支架 骨髓间充质干细胞
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京尼平交联仿骨结构诱导性骨组织工程支架材料的制备与表征
7
作者 李根 李文杰 +5 位作者 唐俊杰 王九娜 赵玲 秦文 赵兴绪 赵红斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第38期6081-6086,共6页
背景:目前,尽管利用各种材料制备的组织工程化骨研究取得了一定进展,但均表现出诸如支架材料降解速度与新生骨组织形成速率不匹配、组织生长缓慢、降解代谢产物有毒性等缺陷。目的:构建一种新型的仿骨结构诱导性骨组织工程支架材料,评... 背景:目前,尽管利用各种材料制备的组织工程化骨研究取得了一定进展,但均表现出诸如支架材料降解速度与新生骨组织形成速率不匹配、组织生长缓慢、降解代谢产物有毒性等缺陷。目的:构建一种新型的仿骨结构诱导性骨组织工程支架材料,评价其物理化学及生物学性能。方法:以壳聚糖包被淫羊藿苷制备微球,检测其体外缓释效果;将载药微球与胶原蛋白复合构建支架材料的管芯;将羟基磷灰石、聚己内酯与胶原蛋白依次以0∶3∶3、1∶3∶3、2∶3∶3、3∶3∶3的比例混合于六氟异丙醇中,通过静电纺丝技术依次电纺制得具有4层结构的支架材料外管;以1%京尼平将经嵌套的管芯与外管交联在一起。利用万能材料试验机、表面接触角仪、红外光谱、扫描电镜、吸水率、透气性、孔隙率、体外降解实验等对交联前后外管材料的结构和特征进行表征,并评价骨髓间充质干细胞与外管材料的生物相容性;Wistar大鼠皮下埋置实验进一步评价交联前后外管材料的组织相容性。结果与结论:药物在管芯中具有良好的缓释效果;制备的骨组织工程支架材料具有良好的均一性,交联后外管材料的力学性能、吸水率、透气性均高于未交联组(P<0.05),且体外降解速率显著低于未交联组(P<0.05)。苏木精-伊红染色显示骨髓间充质干细胞可良好贴附于交联前后的外管材料上;交联的外管材料植入Wistar大鼠皮下后均无炎症反应。表明交联后诱导性骨组织工程支架材料具有良好的生物相容性及力学性能。 展开更多
关键词 硬羟基磷灰石 胶原 交联试剂 生物材料 骨生物材料 仿骨结构 静电纺丝 表征 生物相容性
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红景天苷通过p21和Cyclin对MSCs细胞周期的影响
8
作者 潘茜 陈亚男 +4 位作者 李根 唐俊杰 王九娜 赵玲 赵红斌 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2087-2091,共5页
目的：探讨红景天苷诱导小鼠骨髓间充质干细胞marrow mesenchymal stem cells（MSCs）向神经元细胞定向分化的相关分子机制。方法：以MSCs（D1细胞）为对象,红景天苷作为诱导剂,运用流式细胞术、荧光免疫化学染色和Western blot方法分... 目的：探讨红景天苷诱导小鼠骨髓间充质干细胞marrow mesenchymal stem cells（MSCs）向神经元细胞定向分化的相关分子机制。方法：以MSCs（D1细胞）为对象,红景天苷作为诱导剂,运用流式细胞术、荧光免疫化学染色和Western blot方法分别检测红景天苷对细胞周期及Cyclin D1和p21蛋白表达的影响。结果：红景天苷诱导细胞24,48 h后,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,说明红景天苷能显著促进细胞发生G0/G1期阻滞;荧光免疫化学染色表明,对照组和诱导12-24 h后Cyclin D1为阳性表达,阳性细胞数为71%,71%和44%,而48-72 h组表达呈阴性;诱导12-72 h后p21呈阳性表达,阳性细胞数为85%,90%,65%和73%,与对照组相比差异显著（P〈0.01）;Western blot检测表明Cyclin D1表达量随诱导时间的延长下调,p21蛋白表达水平上调。结论：红景天苷通过影响细胞周期相关蛋白Cyclin D1和p21抑制细胞增殖,使MSCs阻滞于G0/G1期,进而促进MSCs定向分化。本试验为阐明红景天苷诱导MSCs定向分化的分子机制奠定了坚实的理论基础。 展开更多
关键词 红景天苷 细胞周期 MSCS 周期蛋白 周期蛋白依赖性激酶抑制因子
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胶原蛋白与黏土混合材料的性能研究 被引量：2
9
作者 王九娜 赵兴绪 +5 位作者 唐俊杰 李根 姜拓之 赵玲 秦文 赵红斌 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第47期7573-7578,共6页
背景:凹凸棒黏土质轻,吸水性强,湿时具有黏性和可塑性等特性,被广泛应用于各个领域,但将凹凸棒黏土作为骨修复材料鲜有报道。目的:将胶原蛋白与不同比例凹凸棒黏土混合,构建一种新型组织工程支架材料,以期运用于骨修复。方法:将胶原蛋... 背景:凹凸棒黏土质轻,吸水性强,湿时具有黏性和可塑性等特性,被广泛应用于各个领域,但将凹凸棒黏土作为骨修复材料鲜有报道。目的:将胶原蛋白与不同比例凹凸棒黏土混合,构建一种新型组织工程支架材料,以期运用于骨修复。方法:将胶原蛋白和凹凸棒黏土以干质量比为1∶0、5∶1、4∶1、3∶1的比例混合均匀,冷冻干燥,制备支架材料,扫描电镜观察材料的表观特征,检测1%京尼平交联前后材料的孔隙率和质量吸水率。将4组比例材料分别与大鼠骨髓间充质干细胞共培养,培养3 d及7 d分别进行扫描电镜观察及苏木精-伊红染色。将1%京尼平交联后的4组比例材料分别植入大鼠体内,1个月后观察材料降解情况。结果与结论:材料呈多孔海绵状,交联前材料的孔隙率在60%-80%之间,交联后材料的孔隙率在40%-65%之间,4组之间交联前后孔隙率比较差异无显著意义(P>0.05)。4组材料交联后的质量吸水率较交联前显著降低(P<0.05)。胶原蛋白-凹凸棒黏土支架材料具有良好的细胞相容性,在动物体内可以完全降解并被吸收,但不同比例配比降解速率不一,无炎症反应。 展开更多
关键词 生物材料 骨生物材料 胶原蛋白 凹凸棒黏土 支架 生物相容性
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