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烟草中多酚氧化酶的生理生化特征及其活性控制的研究 被引量:62
1
作者 雷东锋 蒋大宗 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1316-1320,共5页
对烟草叶中的多酚氧化酶(PPO)进行了部分纯化,对比了叶中PPO在苗期和田间的活性差异,研究了其活性变化规律,发现生长旺盛期PPO活性高于其他时期.研究了烟叶在不同水势条件下PPO活性变化规律,发现水势过高、过低,PPO活性均较低,在-872.78... 对烟草叶中的多酚氧化酶(PPO)进行了部分纯化,对比了叶中PPO在苗期和田间的活性差异,研究了其活性变化规律,发现生长旺盛期PPO活性高于其他时期.研究了烟叶在不同水势条件下PPO活性变化规律,发现水势过高、过低,PPO活性均较低,在-872.78kPa水势条件下,PPO活性最高,所以细胞中的含水量是影响PPO活性的因素之一.研究了PPO在35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃和75℃等烘烤温度条件下的热敏感性,发现:酶的最适反应温度为35℃;温度由35℃升至75℃,活性逐渐下降,在每一温度下保持5min,活性趋于稳定.用回归法得出了烟叶中PPO的下降百分数与温度之间的关系式.用双倒数作图法比较了NaDiCa、EDTA、巯基乙醇和硫脲4种常用抑制剂对烟叶中PPO活性的抑制强度,结果表明:同一浓度下它们对PPO的抑制强度依次递减,而NaDiCa抑制效率明显高于其他3种抑制剂;CuCl2可以促进PPO活性,用回归法得出了活力增加百分数与二价铜离子浓度的关系式. 展开更多
关键词 烟叶 多酚氧化酶 活性变化 活性控制
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三阴性乳腺癌临床病理特点及预后因素分析 被引量:33
2
作者 梁奋莉 曹伟 +2 位作者 李林瑞 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第2期294-298,共5页
目的:分析三阴性乳腺癌的临床病理特征和预后影响因素。方法:选取219例具有完整随访结果的浸润性乳腺癌病例,按ER、PR、HER-2表达情况分为三阴性亚群和非三阴性亚群。结果:三阴性亚群中髓样癌及组织学分级3级者所占比例显著高于非三阴... 目的:分析三阴性乳腺癌的临床病理特征和预后影响因素。方法:选取219例具有完整随访结果的浸润性乳腺癌病例,按ER、PR、HER-2表达情况分为三阴性亚群和非三阴性亚群。结果:三阴性亚群中髓样癌及组织学分级3级者所占比例显著高于非三阴性亚群,随访期间,两组患者的复发转移率、无病生存率及总生存率无显著差异。生存分析提示淋巴结状态是三阴性亚群预后的独立影响因素。结论:三阴性乳腺癌的组织学分级高于非三阴性乳腺癌,淋巴结转移状态是三阴性亚群预后的独立影响因素。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 临床病理特征 预后
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粘连分子及其在病理学中的作用 被引量:19
3
作者 司履生 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期245-248,共4页
粘连分子及其在病理学中的作用司履生,王一理细胞粘连分子(Cellularadtesionmaterial,CAM)是细胞一细胞、细胞一细胞外基质(ECM)之间一大类粘连物质的总称。从名称看来,它似乎只是一类粘合物质。... 粘连分子及其在病理学中的作用司履生,王一理细胞粘连分子(Cellularadtesionmaterial,CAM)是细胞一细胞、细胞一细胞外基质(ECM)之间一大类粘连物质的总称。从名称看来,它似乎只是一类粘合物质。其实,它是维持多细胞生物体正常发育... 展开更多
关键词 粘连分子 细胞 病理学
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中老年人群甲状腺结节发病状况调查 被引量:21
4
作者 路万虹 滕伟平 +10 位作者 施秉银 魏丹国 李随勤 闫利英 张丽 刘娟 韩凤阳 李昊 刘新君 《老年医学与保健》 CAS 2005年第3期150-152,共3页
目的了解中老年人群甲状腺结节的发病情况。方法对938例既往无甲状腺疾病史的离退休职工进行高分辨率甲状腺B超检查。结果本组资料甲状腺结节检出率男女分别为37.16%和45.70%,其中女性结节的发生率随年龄增长而显著升高(P<0.05);<... 目的了解中老年人群甲状腺结节的发病情况。方法对938例既往无甲状腺疾病史的离退休职工进行高分辨率甲状腺B超检查。结果本组资料甲状腺结节检出率男女分别为37.16%和45.70%,其中女性结节的发生率随年龄增长而显著升高(P<0.05);<1.0cm的微小结节占多数,男女分别为67.81%及64.08%;随着年龄的增长多发结节的比例上升,男性>70岁的多发结节占57.14%,显著高于<70岁人群(P<0.05)。结论 我国中老年人群甲状腺结节的发病率高,应重视甲状腺结节的早期诊断和早期治疗。 展开更多
关键词 中老年人群 甲状腺结节 高分辨率超声波
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高血糖加重缺血性脑损伤 被引量:16
5
作者 景丽 张建忠 +3 位作者 马爱铃 于欣 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期542-544,共3页
目的:探讨高血糖对脑缺血损伤的影响。方法:采用大鼠高血糖全脑缺血模型,用HE和TUNEL染色,对比检测脑细胞损伤和凋亡。结果:高血糖组在缺血再灌注后与血糖正常组相比,纹状皮质脑水肿和神经元变性、死亡明显加重;海马CA1区损伤神经元计... 目的:探讨高血糖对脑缺血损伤的影响。方法:采用大鼠高血糖全脑缺血模型,用HE和TUNEL染色,对比检测脑细胞损伤和凋亡。结果:高血糖组在缺血再灌注后与血糖正常组相比,纹状皮质脑水肿和神经元变性、死亡明显加重;海马CA1区损伤神经元计数无显著性差异;海马CA3区损伤神经细胞数明显多于血糖正常组。TUNEL染色可见,在纹状皮质、海马CA1区和CA3区高血糖组和血糖正常组阳性细胞明显多于对照组;在缺血或再灌注后,正常血糖组和高血糖组的TUNEL阳性细胞数均无显著性差异。结论:高血糖可加重缺血引起的神经元损伤。 展开更多
关键词 高血糖 脑缺血 凋亡
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磷酯酰肌醇-3激酶家族研究进展 被引量:10
6
作者 杨章民 司履生 《国外医学(分子生物学分册)》 CAS CSCD 2003年第5期285-289,共5页
PI3激酶家族包括 3种类型 ,Ⅰ型和Ⅲ型的催化亚基与调节亚基形成异二聚体 ,II型不形成异二聚体 ,具有独特的C2结构域。生长因子、有丝分裂原等多种因素可使其活化。所生成的 3 磷酸肌醇脂 (PIP、PIP2、PIP3)具有第二信使功能 ,即作为信... PI3激酶家族包括 3种类型 ,Ⅰ型和Ⅲ型的催化亚基与调节亚基形成异二聚体 ,II型不形成异二聚体 ,具有独特的C2结构域。生长因子、有丝分裂原等多种因素可使其活化。所生成的 3 磷酸肌醇脂 (PIP、PIP2、PIP3)具有第二信使功能 ,即作为信号转导分子膜易位活化的“锚”分子。PI3 K家族在细胞的增殖、抗凋亡、细胞迁移、膜泡转运、细胞癌性转化等众多过程有关的信号转导方面起重要作用 ,本文就此予以综述。 展开更多
关键词 磷酯酰肌醇-3激酶 信号传导 生物学功能 催化亚基 调节亚基 C2结构域 第二信使
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放疗对宫颈癌局部免疫潜能细胞亚群的影响 被引量:14
7
作者 史秦峰 德普 +3 位作者 杨筱凤 梁奋莉 陈宏伟 《中国妇幼健康研究》 2012年第3期294-296,共3页
目的分析宫颈癌患者放射治疗过程中病灶局部肿瘤浸润淋巴细胞亚群的变化。方法收集8例接受局部放射治疗的宫颈癌患者放疗前、放疗第1周、第2周、第3周的肿瘤组织标本,采用免疫组织化学方法原位分析CD8^+、Granzyme B^+、OX40^+、FOX... 目的分析宫颈癌患者放射治疗过程中病灶局部肿瘤浸润淋巴细胞亚群的变化。方法收集8例接受局部放射治疗的宫颈癌患者放疗前、放疗第1周、第2周、第3周的肿瘤组织标本,采用免疫组织化学方法原位分析CD8^+、Granzyme B^+、OX40^+、FOXP3^+、CD4^+浸润T淋巴细胞状态的动态变化。结果放射治疗后,CD8^+、Granzyme B^+、CD4’T淋巴细胞在肿瘤实质的分布均有下降,且差异均有统计学意义(PCD8+=0.023〈0.05、PGra+:0.015〈0.05、PCD4+=0.022〈0.05);OX40^+、FOXP3^+T淋巴细胞在肿瘤实质的分布虽略呈下降之势,但差异均无统计学意义(P〉0.05)。肿瘤间质的CD8^+、Granzyme B^+、FOXP3^+、CD4^+T淋巴细胞在接受放射治疗后分布虽有变化,但差异均无统计学意义(P〉0.05)。OX40’T淋巴细胞接受放射治疗后在肿瘤间质的分布略有升高,且差异有统计学意义(POX40+=0.039〈0.05)。结论局部放疗对宫颈癌局部细胞毒性淋巴细胞有明显抑制作用.而调节性T细胞表现出较强的放射抵抗性。 展开更多
关键词 宫颈癌 放射治疗 调节性T细胞 放射抵抗
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应用重组PCR技术构建人单链白细胞介素12融合基因 被引量:11
8
作者 张梅 司履生 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期22-26,共5页
目的构建人单链白细胞介素 12 (hsc IL- 12 )融合基因并在真核细胞中进行表达 ,为进一步研究 hsc IL- 12融合蛋白的生物学活性奠定基础。方法应用重组 PCR技术将 h IL - 12 p40和 p35亚单位两段编码序列的 c DNA通过一疏水性多肽接头 (G... 目的构建人单链白细胞介素 12 (hsc IL- 12 )融合基因并在真核细胞中进行表达 ,为进一步研究 hsc IL- 12融合蛋白的生物学活性奠定基础。方法应用重组 PCR技术将 h IL - 12 p40和 p35亚单位两段编码序列的 c DNA通过一疏水性多肽接头 (Gly4Ser) 3碱基序列进行前后拼接 (IL- 12 p40 -多肽接头 - p35 ) ,构建 hsc IL- 12融合基因 ,并进行核苷酸序列测定 ,进一步将 hsc IL - 12融合基因插入 pc DNA3.1真核表达载体中 ,转染 COS- 7细胞表达 hsc IL - 12融合蛋白 ,并行 Western blot分析。结果该融合基因经 DNA序列分析表明 :p40、p35、linker的连接顺序、方向及序列完全正确 ,融合基因可在 COS- 7细胞中表达hsc IL- 12融合蛋白。Western blot显示该融合蛋白分子量为 70 0 0 0 u,可与鼠抗人 IL- 12 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论重组 PCR技术是十分有效。 展开更多
关键词 重组PCR 人白细胞介素12 人单链白细胞介素 融合基因
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EGFR和KRAS在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义 被引量:13
9
作者 鲍晨 +2 位作者 柳俊 董学敏 赵宇 《现代生物医学进展》 CAS 2017年第5期892-894,922,共4页
目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)和鼠Kirsten肉瘤病毒致癌基因(KRAS)蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达水平及临床意义。方法:利用免疫组化SP法对上皮性卵巢癌组织(病例组,n=57)、卵巢良性肿瘤组织(良性组,n=50)以及正常卵巢组织(对照组,... 目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)和鼠Kirsten肉瘤病毒致癌基因(KRAS)蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达水平及临床意义。方法:利用免疫组化SP法对上皮性卵巢癌组织(病例组,n=57)、卵巢良性肿瘤组织(良性组,n=50)以及正常卵巢组织(对照组,n=50)中的EGFR、KRAS蛋白水平进行检测,并分析其在上皮性卵巢癌发生发展中的作用。结果:病例组的EGFR、KRAS蛋白阳性率高于良性组和对照组(P<0.05),良性组和对照组的EGFR、KRAS蛋白阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。浆液性腺癌组EGFR、KRAS蛋白的阳性表达率高于非浆液性腺癌组,Ⅲ~Ⅳ期的上皮性卵巢癌组织中EGFR、KRAS蛋白阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期,中、低分化组中EGFR、KRAS蛋白阳性表达率高于高分化组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。上皮性卵巢癌组织中EGFR与KRAS的蛋白的阳性表达率呈正相关关系(r=0.469,P<0.05)。结论:EGFR及KRAS蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达水平明显升高,可能参与了上皮性卵巢癌的发生发展过程,且两者之间呈正相关关系,联合检测可作为早期诊断上皮性卵巢癌的重要指标。 展开更多
关键词 表皮生长因子手受体 鼠Kirsten肉瘤病毒致癌基因蛋白 上皮性卵巢癌
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卵巢早衰患者外周血CD4^+、Th1/Th2细胞分布研究 被引量:10
10
作者 杨桂艳 +1 位作者 曹缵 孙李旭 《生殖医学杂志》 CAS 1998年第4期227-230,共4页
近年的研究提示,卵巢早衰与免疫紊乱有关。本研究用流式细胞仪分拣细胞,结合原位杂交的方法研究卵巢早衰患者外周血CD4+T淋巴细胞Th1/Th2分布,旨在探讨卵巢早衰自身免疫损伤的机制。结果:卵巢早衰组Th1细胞百分比(... 近年的研究提示,卵巢早衰与免疫紊乱有关。本研究用流式细胞仪分拣细胞,结合原位杂交的方法研究卵巢早衰患者外周血CD4+T淋巴细胞Th1/Th2分布,旨在探讨卵巢早衰自身免疫损伤的机制。结果:卵巢早衰组Th1细胞百分比(4976±922)明显高于对照组(2006±710)(P<0.001);Th1/Th2细胞比值(115±017)明显高于对照组(063±009)(P<0.001)。提示Th1,Th2细胞调节失衡,可能与卵巢早衰的发生有关。 展开更多
关键词 卵巢功能衰竭 T细胞 卵巢早衰 TH1 TH2
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量子点:新的荧光标记物质 被引量:4
11
作者 陈宏伟 刘红莉 +1 位作者 司履生 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期47-49,共3页
关键词 量子点 荧光标记物质 人类基因组计划 细胞蛋白组学 纳米晶体
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共刺激分子在宫颈癌组织中的表达 被引量:10
12
作者 郭建芬 司履生 +4 位作者 赵英仁 刘孜 徐长福 孙向乐 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期342-345,共4页
目的 研究宫颈癌组织中癌细胞中的共刺激分子B7 1、B7 2、细胞间粘附因子 Ⅰ (ICAM 1)及主要组织相容性抗原 (MHC)Ⅰ、Ⅱ类分子表达 ,以揭示人体肿瘤的逃逸机制。方法 利用免疫组织化学技术 ,观察了42例人宫颈癌组织中B7 1、B7 2、IC... 目的 研究宫颈癌组织中癌细胞中的共刺激分子B7 1、B7 2、细胞间粘附因子 Ⅰ (ICAM 1)及主要组织相容性抗原 (MHC)Ⅰ、Ⅱ类分子表达 ,以揭示人体肿瘤的逃逸机制。方法 利用免疫组织化学技术 ,观察了42例人宫颈癌组织中B7 1、B7 2、ICAM 1的表达 ,观察了 36例MHCⅠ、Ⅱ类抗原的表达 ;利用原位杂交技术观察了 2 0例人宫颈癌组织中B7 1、B7 2和ICAM 1的mRNA表达。结果 在进行免疫组织化学检测的标本中 ,42例中有 2 2及 2 7例的癌组织癌细胞分别表达B7 1及ICAM 1分子 ,但无一例表达B7 2分子 ;所有癌组织及癌巢间质中均可见有程度不同的B7 1、B7 2和ICAM1阳性的树突状细胞及淋巴细胞浸润 ;37例中有 32例及 4例的癌细胞分别表达MHCⅠ和Ⅱ类抗原 ,癌巢及间质内有成团或散在的MHCⅡ阳性树突状细胞浸润 ,同一标本中MHCⅡ阳性树突状细胞的数量明显多于B7 1和B7 2阳性树突状细胞。在进行原位杂交的 2 0例标本中 ,有 11例和 15例的癌细胞分别表达B7 1和ICAM 1mRNA ,浸润的树突状细胞及淋巴细胞可见B7 1、B7 2和ICAM 1mRNA表达。结论 人宫颈癌的癌细胞确实表达与抗原提呈及刺激T细胞活化有关的分子 ,而且肿瘤组织中存在有职业性抗原提呈细胞浸润 。 展开更多
关键词 原位杂交 宫颈癌 共刺激分子 基因表达
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贝伐单抗联合培美曲塞加顺铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效与安全性的Meta分析 被引量:11
13
作者 赵钰玲 董娅 +4 位作者 范亚莉 杨拴盈 鱼军 李建英 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第12期1903-1910,共8页
目的:系统评价贝伐单抗联合培美曲塞加顺铂治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效与安全性。方法:计算机检索Pub Med、Medline、CNKI、VIP和万方医学网等数据库,纳入贝伐单抗联合培美曲塞加顺铂比较治疗晚期非小细胞肺癌的临床随机对照试验... 目的:系统评价贝伐单抗联合培美曲塞加顺铂治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效与安全性。方法:计算机检索Pub Med、Medline、CNKI、VIP和万方医学网等数据库,纳入贝伐单抗联合培美曲塞加顺铂比较治疗晚期非小细胞肺癌的临床随机对照试验,检索时间截至2016年11月。对所检索文献进行文献筛选、资料提取和方法学质量评价后,采用Rev Man5.3.0软件进行Meta分析。结果:共纳入10个研究,合计1 094例患者。研究结果显示:在疗效评价方面,含贝伐单抗治疗的观察组在客观有效率(OR=2.63,95%CI:2.04~3.38,P<0.000 01)、中位无进展生存期(m PFS)(χ~2=15.976,P=0.016 17)方面与不含贝伐单抗的对照组的差异有统计学意义,观察组的疗效明显高于对照组;而在疾病控制率、m OS及安全性方面,贝伐单抗组疾病控制率(OR=2.52,95%CI:1.88~3.38,P<0.000 01)、中位生存期(m OS)(χ~2=5.316 2,P=0.050 02)、恶心、呕吐(OR=0.87,95%CI:0.64~1.19,P=0.38),血小板减低(OR=1.01,95%CI:0.61~1.68,P=0.96),中性粒细胞减低(OR=1.3 8,9 5%CI:0.9 0~2.1 2,P=0.1 4)及贫血(OR=0.99,95%CI:0.46~2.12,P=0.97)的发生率与不含贝伐单抗组相同。但是高血压(OR=3.92,95%CI:1.05~14.62,P=0.04)、出血(OR=5.29,95%CI:0.87~32.31,P=0.07)的发生率却明显高于不含贝伐单抗组。结论:贝伐单抗联合培美曲塞加顺铂比培美曲塞加顺铂治疗非小细胞肺癌的疗效较高,不良反应较少。 展开更多
关键词 贝伐单抗 培美曲塞 顺铂 非小细胞肺癌 META分析
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利用生物信息学技术研究蛋白功能的几种方法 被引量:7
14
作者 剑利 杨章民 《国外医学(分子生物学分册)》 CAS CSCD 2001年第4期255-256,共2页
阐明基因的功能是后基因组计划的主要任务。生物信息学为解决这一难题提供了有力手段。生物信息学是用数理和信息学的观点、理论、方法研究生命现象 ,组织和分析呈指数增长的生物学数据的一门新型学科。本文介绍
关键词 生物信息学 蛋白质 功能 种系发生
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肺腺癌病理组织学特点与表皮生长因子受体基因突变的关系 被引量:10
15
作者 宫惠琳 +7 位作者 李晓锋 杨喆 曹培龙 春宝 蒋依娜 鸿雁 张冠军 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期170-174,共5页
目的:寻找表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的肺腺癌的组织学特征。方法按照2011年国际肺癌研究学会、美国胸科学会和欧洲呼吸学会发布的肺腺癌国际多学科新分类的标准,对72例手术切除肺腺癌标本进行组织结构分类。同时还按照肺腺癌... 目的:寻找表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的肺腺癌的组织学特征。方法按照2011年国际肺癌研究学会、美国胸科学会和欧洲呼吸学会发布的肺腺癌国际多学科新分类的标准,对72例手术切除肺腺癌标本进行组织结构分类。同时还按照肺腺癌细胞形态的特点进行分类。分析不同类别与EGFR基因的突变的关系。结果72例肺腺癌患者突变率为35/72(48.6%)。突变类型以19del和L858R为主,两者合计共占总突变例数的88.6%(31/35)。 EGFR基因突变与女性、不吸烟和高-中分化有关,而与年龄、吸烟指数、淋巴结转移、分期、有无包涵体及沙砾体和核分裂数高低无关。新分类还显示EGFR基因突变多见于乳头为主型和腺泡为主型肺腺癌,少见于实体为主伴黏液型,几乎不见于特殊类型肺腺癌(主要为浸润性黏液癌和胶样癌)。此外,EGFR基因突变还多见于鞋钉状细胞的肺腺癌中。结论乳头为主型、腺泡为主型和鞋钉状细胞的肺腺癌具有较高的EGFR基因突变率。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 受体 表皮生长因子
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非小细胞性肺癌局部免疫微环境中细胞因子mRNA表达的分析 被引量:8
16
作者 陈宏伟 李睿 +3 位作者 李蓉 来宝长 司履生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期763-766,共4页
目的:以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)为对象,探讨肿瘤局部微环境中免疫反应的特点及其对抗肿瘤免疫的影响。方法:以5例结核性胸膜炎患者作为对照,采用地高辛末端标记的寡核苷酸探针,以原位杂交技术检测了23例非小细... 目的:以非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)为对象,探讨肿瘤局部微环境中免疫反应的特点及其对抗肿瘤免疫的影响。方法:以5例结核性胸膜炎患者作为对照,采用地高辛末端标记的寡核苷酸探针,以原位杂交技术检测了23例非小细胞性肺癌(NSCLC)患者的新鲜胸腔积液和/或手术切除标本中的淋巴细胞和肿瘤细胞中,IL-2、INF-γ、IL-12(p40)、IL-18、IL-4、IL-10、TGF-β1、IL-1、IL-3、IL-8、GM-CSF、TNF-α及TGF-αmRNA的表达。结果:NSCLC患者胸腔积液的单个核细胞及肿瘤组织中,IL-4、IL-10、TGF-α和TGF-β1mRNA的表达水平,明显高于IL-2、IL-12、IL-18和INF-γmRNA的表达;而结核性胸腔积液的单个核细胞中上述细胞因子mRNA的水平均降低,并且各细胞因子mRNA的表达水平之间没有明显的差异。结论:NSCLC患者胸腔积液的单个核细胞及肿瘤组织中,II型细胞因子和免疫抑制细胞因子mRNA的表达占主导地位,反映了肿瘤局部的免疫微环境处于抑制状态。上述结果有助于了解肿瘤逃逸的机制,并为制定NSCLC免疫治疗的方案提供了重要的实验依据。 展开更多
关键词 非小细胞性肺癌 细胞因子 原位杂交
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抗HPV16L1IgY抗体的制备及活性检测 被引量:8
17
作者 杨军 张明娟 +3 位作者 强磊 苏宝山 司履生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期324-327,332,共5页
目的制备出高特异性的抗HPV16L1IgY抗体,为HPV16L1蛋白的检测提供一种方法。方法用纯化HPV16L1蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法提取鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;采用免疫组织化学法... 目的制备出高特异性的抗HPV16L1IgY抗体,为HPV16L1蛋白的检测提供一种方法。方法用纯化HPV16L1蛋白免疫母鸡,分别收集鸡蛋,4℃下保存备用;经聚乙二醇法提取鸡蛋黄中IgY抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY抗体效价的测定;采用免疫组织化学法通过对转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中L1蛋白的检测评价IgY抗体的特异性。结果3次免疫之后,IgY抗体效价达到1:10240,同时可特异性与转染pcDNAEGFP-HPV16L1(含EGFP-HPV16L1融合基因)质粒的CHO细胞中EGFP-HPV16L1结合。结论采用HPV16L1蛋白免疫母鸡,成功获得了较高效价的特异性IgY抗体,并可用于HPV16L1蛋白的细胞学检测,为IgY抗体在免疫组织化学检中的应用提供实验依据。 展开更多
关键词 人头瘤病毒16型 鸡蛋黄 IGY
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淋巴细胞减少期联合免疫重建和瘤苗免疫增强抗肿瘤免疫的机制 被引量:9
18
作者 马军 +2 位作者 HU Hong-ming Bernard A Fox 司履生 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期708-712,共5页
目的阐明向免疫重建的淋巴细胞减少小鼠(reconstituted lymphopenic mice,RLM)进行瘤苗免疫增强抗肿瘤免疫反应的机制.方法分别以放疗和环磷酰胺处理C57BL/6小鼠,建立淋巴细胞减少模型,并各设正常-非免疫组、RLM-非免疫组、正常-免疫组... 目的阐明向免疫重建的淋巴细胞减少小鼠(reconstituted lymphopenic mice,RLM)进行瘤苗免疫增强抗肿瘤免疫反应的机制.方法分别以放疗和环磷酰胺处理C57BL/6小鼠,建立淋巴细胞减少模型,并各设正常-非免疫组、RLM-非免疫组、正常-免疫组和RLM-免疫组等4个实验组.在免疫重建的24 h内,分别用灭活黑色素瘤细胞F10(放疗实验部分)和GM-CSF修饰的活黑色素瘤细胞D5-G 6(化疗实验部分)免疫,8~10 d后采集肿瘤疫苗部位引流淋巴结(tumor vaccine draininglymph node,TVDLN),以FACS分析细胞表型.磁珠纯化的T细胞分别经anti-CD3及anti-TCRβ刺激后,分别以[3H]-TdR掺入法和FACS检测T细胞的增殖能力和CD69的表达情况,以此反映T细胞的激活阈值.结果 RLM-免疫组TVDLN中,DC细胞和活化T细胞的频数显著增高.新鲜T细胞的体外增殖能力显著增强,激活阈值明显降低.结论放、化疗引起的淋巴细胞减少可诱导T细胞增殖活化,激活阈值降低,有助于瘤苗免疫打破机体对肿瘤的免疫耐受,增强抗肿瘤免疫反应. 展开更多
关键词 T淋巴细胞 淋巴细胞减少 免疫重建 T细胞活化
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着色性干皮病与DNA损伤修复 被引量:8
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作者 胡劲松 黄辰 +1 位作者 宋土生 《国外医学(遗传学分册)》 CAS 2002年第6期365-370,共6页
着色性干皮病是一种常染色体隐性遗传病 ,有七组互补型和一种变异型。该病的发生与 DNA的损伤修复缺陷有关。本文拟对着色性干皮病致病基因的克隆、在
关键词 DNA损伤修复 DNA损伤 着色性干皮病 肿瘤 XP 基因克隆
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HPV-16L1植物表达载体的构建及HPV-16L1在转基因烟草中表达的鉴定 被引量:6
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作者 刘红莉 陈宏伟 +4 位作者 李文生 雷霆 喆之 司履生 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期827-831,共5页
利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV 16L1蛋白编码基因 ,将其重组于pUCmT和pBI12 1中 ,构建含HPV 16L1基因的植物双元表达载体pBI L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达。采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 (NicotianatobacumL .) ,... 利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV 16L1蛋白编码基因 ,将其重组于pUCmT和pBI12 1中 ,构建含HPV 16L1基因的植物双元表达载体pBI L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达。采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草 (NicotianatobacumL .) ,获得HPV 16L1转基因烟草植株。经PCR及Southern杂交分析 ,HPV 16L1基因整合到烟草基因组中 ;Westernblot和ELISA分析检测显示转基因烟草叶片蛋白可与HPV 16L1单克隆抗体特异性反应 ,且定位于 5 5kD处 ,其最高表达量占烟草叶片总可溶蛋白的 0 0 76 %。小鼠红细胞凝集试验 (HA)及小鼠红细胞凝集抑制试验 (HAI)显示转基因烟草叶片蛋白可引起小鼠红细胞凝集。结果表明已成功地构建了HPV 16L1的植物双元表达载体 ,并证实了利用转基因烟草植物能够表达出HPV 16L1蛋白 。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 病毒样颗粒 转基因烟草 植物疫苗 根瘤农杆菌
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