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活体染料CFDA-SE在淋巴细胞增殖研究中的应用 被引量：53
1
作者 肇静娴 曾耀英 +3 位作者 何贤辉 王南 狄静芳 曾山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期109-111,共3页
目的 :探讨活体染料CFDA SE在淋巴细胞增殖研究中的应用价值。方法 :利用CFDA SE染色、荧光抗体标记和流式细胞术 ,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂作用下荧光强度的变化 ,并应用相关软件分析其增殖情况。结果 :PDB +ion omycin或C... 目的 :探讨活体染料CFDA SE在淋巴细胞增殖研究中的应用价值。方法 :利用CFDA SE染色、荧光抗体标记和流式细胞术 ,检测淋巴细胞及其亚群在多克隆刺激剂作用下荧光强度的变化 ,并应用相关软件分析其增殖情况。结果 :PDB +ion omycin或ConA刺激 4 8h后均出现淋巴细胞分裂 ,表现为CFSE荧光强度的系列减半。环孢菌素A(CsA)可抑制ConA促进淋巴细胞增殖的作用 ,CFSE荧光无减半。ConA刺激4 8h后 ,出现CD4 + T细胞和CD8+ T细胞增殖不同步的现象 ,72h后这一现象更加明显。经ModFitTM 软件拟合后 ,得到的各项增殖指标显示 ,ConA对CD8+ T细胞的促增殖作用强于对CD4 + T细胞的作用。结论 :CFDA SE染色结合荧光抗体标记和流式细胞术 。 展开更多
关键词 活体染料羧基荧光素乙酰乙酸 CFDA-SE 淋巴细胞 细胞增殖 荧光抗体标记 流式细胞术
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豚鼠视网膜正常结构的定量研究 被引量：26
2
作者 史剑波 徐锦堂 +1 位作者 夏潮涌 狄静芳 《眼科研究》 CAS CSCD 1999年第2期98-100,共3页
目的定量研究正常豚鼠视网膜神经节细胞（ＲＧＣ）核和视网膜厚度。方法应用图像分析技术测量ＲＧＣ核的平均体积和体密度、视网膜各层结构厚度。结果ＲＧＣ核的平均体积为１７４μｍ３，按核体积分布直方图分成大、中、小３群，平均体... 目的定量研究正常豚鼠视网膜神经节细胞（ＲＧＣ）核和视网膜厚度。方法应用图像分析技术测量ＲＧＣ核的平均体积和体密度、视网膜各层结构厚度。结果ＲＧＣ核的平均体积为１７４μｍ３，按核体积分布直方图分成大、中、小３群，平均体积分别为３６３．５，１８５．３，８０．０μｍ３，所占比例分别为２０．９％，２８．６％，４９．５％；节细胞外界内层、内核内网层、光感受细胞层、视网膜全层的厚度分别为１９．４５，４５．５３，４３．９６，１０８．９４μｍ。结论采用ＲＧＣ核体积、体密度参数和视网膜各结构层厚度的测量是全面了解视网膜形态的敏感指标。 展开更多
关键词 豚鼠 视网膜 神经节细胞 RGC核 厚度
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外伤性视神经损伤手术时机选择的实验研究 被引量：31
3
作者 史剑波 文卫平 +3 位作者 许庚 徐锦堂 狄静芳 夏潮涌 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期368-370,397,共4页
[目的]通过视神经外伤后视网膜形态的变化,了解外伤性视神经损伤的手术时机与疗效间的相关关系。[方法]建立外伤性视神经损伤和不同时间减压动物模型,对视网膜神经节细胞(RGCs)、视网膜等进行了定量分析。[结果]正常对照组RGCs相对体积... [目的]通过视神经外伤后视网膜形态的变化,了解外伤性视神经损伤的手术时机与疗效间的相关关系。[方法]建立外伤性视神经损伤和不同时间减压动物模型,对视网膜神经节细胞(RGCs)、视网膜等进行了定量分析。[结果]正常对照组RGCs相对体积数密度(体密度,V_v)为0.072,小细胞所占比例为49.5％,视网膜厚度为108.9μm,节细胞以内层的厚度为19.5μm;48h减压组RGCs体密度为0.052,小细胞占比例为66.8％,视网膜总厚度为101.9μm,节细胞以内层厚度为16.9μm;14d减压组RGCs体密度为0.042,小细胞占比例为76.4％,视网膜总厚度为96.5μm,节细胞以内层为15.5μm。[结论]48h减压较14d减压可以较好的保存RGCs和视网膜的形态,外伤性视神经损伤后应该尽早解除周围因素对视神经的压迫。 展开更多
关键词 外伤性视神经损伤 视神经减压术 手术时机 视网膜神经节细胞
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天花粉蛋白诱导人类白血病细胞株HL-60细胞凋亡的研究 被引量：16
4
作者 何贤辉 曾耀英 +3 位作者 孙荭 曾洁铭 徐丽慧 狄静芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期200-203,T001,共5页
目的 :研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白 (TCS)诱导人类白血病细胞株HL - 6 0细胞发生凋亡的作用及放线菌酮 (CHX)对此作用的影响。方法 :采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL - 6 0细胞发生凋亡的情况。结果 :流式细胞... 目的 :研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白 (TCS)诱导人类白血病细胞株HL - 6 0细胞发生凋亡的作用及放线菌酮 (CHX)对此作用的影响。方法 :采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL - 6 0细胞发生凋亡的情况。结果 :流式细胞术分析表明TCS能够诱导HL - 6 0细胞发生明显的凋亡现象 ,TCS (2 0mg/L)处理48h细胞凋亡百分率为 48 7%± 2 3% ( x±s) ,明显高于对照组的凋亡率 (6 3%± 1 0 % ) (P <0 0 5 ) ,而CHX (5mg/L)相同条件下诱导的凋亡率为 6 5 3%± 3 9%。TCS诱导的凋亡现象进一步为荧光显微镜的观察及DNA凝胶电泳所证实 ,TCS处理的细胞中有许多细胞呈现典型的凋亡细胞核形态改变 ,如染色体凝缩、核碎裂等 ;DNA凝胶电泳显示TCS处理的细胞呈典型的梯级格局。进一步研究表明预先以低浓度CHX (0 2mg/L)处理可显著加强TCS的作用 ,而在这个浓度下单独CHX并不诱导明显的细胞凋亡。TCS诱导HL - 6 0细胞的凋亡呈时间和剂量依赖关系。结论 :TCS能够诱导HL - 6 0细胞发生明显的凋亡 ,CHX可加强这种作用。 展开更多
关键词 天花粉素 放线菌酮 细胞凋亡 流式细胞术 白血病 HL-60细胞
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不同病程尖锐湿疣患者外周血Th细胞亚群的研究 被引量：18
5
作者 李振 曾耀英 +4 位作者 蔡小嫦 何贤辉 徐丽慧 曾山 狄静芳 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期253-255,共3页
目的从辅助性T细胞(Th)极化情况,探讨不同病程尖锐湿疣患者的细胞免疫状态。方法取肝素抗凝血,用密度梯度离心法分离出血浆和外周血单一核细胞(PBMC)进行细胞培养和免疫荧光染色:PHA和自身血浆刺激PBMC诱导T细胞极化,72h后收获细胞,分... 目的从辅助性T细胞(Th)极化情况,探讨不同病程尖锐湿疣患者的细胞免疫状态。方法取肝素抗凝血,用密度梯度离心法分离出血浆和外周血单一核细胞(PBMC)进行细胞培养和免疫荧光染色:PHA和自身血浆刺激PBMC诱导T细胞极化,72h后收获细胞,分别标记抗CD4鄄PE与抗CCR5鄄FITC和抗CD4鄄FITC与抗CCR3鄄PE,最后利用流式细胞仪对标记细胞进行分析。结果尖锐湿疣患者中,短病程组与长病程组Th1/Th2极化细胞百分率分别为(25.82±2.22)%/(14.80±1.14)%与(12.20±1.37)%/(13.74±0.99)%,两组极化细胞百分率分别与正常对照组比较差异均有显著性(P <0.05),短病程组Th1/Th2的比值为1.75±0.17,而长病程组为0.89±0.11。结论短病程尖锐湿疣患者机体呈现Th1型反应,而长病程者则以Th2型反应为主,存在Th1型反应向Th2型反应切换的现象。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 外周血 TH细胞亚群 细胞免疫 细胞培养 免疫荧光染色
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正常成人外周血Th1/Th2细胞亚群体外活化的研究 被引量：13
6
作者 李振 曾耀英 +3 位作者 何贤辉 蔡小嫦 曾山 狄静芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期302-304,共3页
目的 :探讨CD4+ T细胞在体外活化的条件下向Th1或Th2极化的规律。方法 :用Ficoll-Hypaque梯度离心法分离出正常成人抗凝外周血单个核细胞 (PBMC)和血浆 ,将PBMC置于含或不含有自身血浆环境中 ,并在植物血凝素 (PHA ,2 0mg L)的刺激下进... 目的 :探讨CD4+ T细胞在体外活化的条件下向Th1或Th2极化的规律。方法 :用Ficoll-Hypaque梯度离心法分离出正常成人抗凝外周血单个核细胞 (PBMC)和血浆 ,将PBMC置于含或不含有自身血浆环境中 ,并在植物血凝素 (PHA ,2 0mg L)的刺激下进行培养 ,培养 2 4、48、72h后收获细胞 ,分别用双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术对CD4+ T细胞表达表面分子CCR3、CCR5进行分析。结果 :CD4+ T细胞受自身血浆和PHA刺激后向Th1 Th2两个方向极化 ,2 4、48、72h后极化率分别达到 (13 2 8± 1 5 9) % (12 70± 1 6 5 ) %、(17 19± 1 0 3) % (17 5 0± 1 30 ) %、(19 49± 2 87) % (18 5 8± 1 49) % ;而只有PHA刺激的极化率很低 ,两组有显著性差异 (P <0 0 1) ;Th1∶Th2之比约等于 1。结论 :正常成人外周血CD4+ T细胞可以在体外自身血浆和PHA的条件下明显极化 ,而且Th1 Th2细胞处于等值的平衡状态。 展开更多
关键词 T淋巴细胞 趋化因子 流式细胞术 TH1/TH2细胞亚群
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环孢菌素A对小鼠T细胞活化影响的血清免疫药理学评价 被引量：8
7
作者 全世明 曾耀英 +3 位作者 何贤辉 曾山 狄静芳 肇静娴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期225-227,共3页
目的　应用血清免疫药理学技术 ,探讨环孢菌素A(CsA)对T细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CsA免疫调节的分子机制 ,为临床用药提供理论依据。方法　分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与CsA、5 %CsA血清预孵后 ,加入多克隆刺激剂继续培养共 2 4h... 目的　应用血清免疫药理学技术 ,探讨环孢菌素A(CsA)对T细胞体外活化的影响 ,以进一步揭示CsA免疫调节的分子机制 ,为临床用药提供理论依据。方法　分离小鼠淋巴结细胞 ,分别与CsA、5 %CsA血清预孵后 ,加入多克隆刺激剂继续培养共 2 4h。收获细胞 ,进行双色免疫荧光标记 ,以流式细胞术分析T细胞上CD6 9分子的表达情况。结果　在CsA和 5 %CsA血清作用下 ,ConA活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (2 4 15± 3 38) %和 (2 3 6 8±6 89) % ,与相应对照组 [分别为 (6 4 6 7± 5 88) %和 (6 4 35± 10 13) % ]相比较均有显著差异 (P <0 0 1) ;在CsA和5 %CsA血清作用下 ,PDB活化的T细胞CD6 9表达的百分率分别为 (78 86± 7 70 ) %和 (80 0 5± 9 91) % ,与相应对照组 [分别为 (84 79± 6 87) %和 (79 6 8± 4 17) % ]相比较均无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　CsA(410nmol/L)和含CsA血清均可强烈抑制ConA刺激的T细胞活化 ,而对PDB刺激的T细胞活化无抑制效应。 5 %CsA血清与CsA单纯药物体外实验的结果相一致 。 展开更多
关键词 环孢菌素A CD69 T淋巴细胞 血清免疫药理学
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麒麟菜中蕨藻红素抗肿瘤活性研究 被引量：16
8
作者 杨宜婷 岑颖洲 +1 位作者 肇静娴 狄静芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期851-852,共2页
目的 :探讨把蕨红藻素 (caulerpin)发展成为抗肿瘤药物的可能性。方法 :检测caulerpin对细胞株HL6 0的细胞毒作用及诱导细胞凋亡作用。结果 :Caulerpin对HL6 0细胞有一定的细胞毒和细胞诱导凋亡作用。结论
关键词 麒麟菜 抗肿瘤活性 蕨藻红素 药物筛选试验 细胞凋亡
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鼻息肉组织中检测CD3和CD69的表达 被引量：9
9
作者 史剑波 陈嵘 +3 位作者 文卫平 狄静芳 曾山 黄桂球 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期199-202,共4页
目的　研究鼻息肉组织中T淋巴细胞表面标记CD3和早期活化标记CD69的表达,探讨人鼻息肉组织中T淋巴细胞的浸润和活化状况。方法　采用流式细胞术检测 21例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血中T淋巴细胞CD3、CD69的表达,并与健康人下鼻甲黏膜... 目的　研究鼻息肉组织中T淋巴细胞表面标记CD3和早期活化标记CD69的表达,探讨人鼻息肉组织中T淋巴细胞的浸润和活化状况。方法　采用流式细胞术检测 21例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血中T淋巴细胞CD3、CD69的表达,并与健康人下鼻甲黏膜及外周血进行比较。结果鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞浸润[ (39.65±2.08)% ];鼻息肉组织及患者外周血T淋巴细胞均表达CD69分子,其水平分别占T淋巴细胞总量的 (36.96±2.50)%和 (4.66±0.18)%,在用多克隆刺激剂短期(5h)刺激后,两者CD69的表达均增加[分别为(59.88±2.59)%、(92.76±0.55)% ];而在健康人下鼻甲黏膜中几乎未见T淋巴细胞,健康人外周血T淋巴细胞在刺激前CD69的表达较低[ (1.82±0.25)% ],但在刺激后几乎全部活化 [ (98.54±0 28)% ]。结论　鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞浸润且高度表达CD69分子,提示鼻息肉组织中T淋巴细胞处于异常免疫活化状态。 展开更多
关键词 鼻息肉组织 CD69 CD3 外周血T淋巴细胞 淋巴细胞浸润 流式细胞术检测 细胞表面标记 健康人 活化状态 异常免疫 下鼻甲 刺激剂 多克隆 患者 黏膜 分子
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靛蓝和靛玉红对小鼠T细胞活化与增殖的影响 被引量：10
10
作者 王通 曾耀英 +4 位作者 肇静娴 胡英杰 江逊 狄静芳 冯铮 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期444-447,共4页
目的:研究靛蓝(IB)和靛玉红(IR)对小鼠T细胞活化和增殖的影响。方法:以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T细胞活化和增殖,利用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子表达情况;通过2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-苯二磺酸)-2H-四唑单钠... 目的:研究靛蓝(IB)和靛玉红(IR)对小鼠T细胞活化和增殖的影响。方法:以刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠T细胞活化和增殖,利用流式细胞术检测T细胞早期活化标志CD69分子表达情况;通过2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-苯二磺酸)-2H-四唑单钠盐(WST-1)法测定细胞增殖;通过CFDA-SE染色流式细胞术检测增殖细胞各代所占比例和增殖指数(PI)。结果:小鼠T细胞离体培养6 h后,对照组活化比率为(14.25±2.25)%,在ConA的刺激下小鼠T细胞活化显著(35.25±2.31)%(P<0.01),IB和IR分别显著降低活化,(26.88±0.99)%和(23.98±2.25)%(P<0.01)。在ConA的刺激下,小鼠T细胞WST-1吸收度(1.28±0.09)显著高于对照组(0.33±0.02)(P<0.01)。IB和IR分别显著降低了ConA引起的WST-1吸收度增加(P<0.01)。在培养48 h后,空白对照组CFDA-SE流式细胞术检测结果仅显示单一亲代峰(parent),PI为1.0。ConA刺激下小鼠T细胞明显增殖,出现子一代和子二代峰,PI为1.36。在IB或IR作用下,ConA介导的小鼠T细胞增殖明显下降,亲代峰细胞数增多,子一代和二代的细胞数降低,PI均为1.22,低于ConA组。结论:靛蓝和靛玉红均可以显著的抑制ConA介导的小鼠T细胞的活化和增殖。 展开更多
关键词 靛蓝 靛玉红 T淋巴细胞 活化 增殖 流式细胞术
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喘可治延长小鼠异基因移植皮片存活时间与CD4^+CD25^+调节性T细胞相关性研究 被引量：13
11
作者 王幼萍 曾耀英 +5 位作者 肇静娴 赵莉 邢飞跃 狄静芳 江逊 李海仙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期765-767,共3页
目的:研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞(CD4 +CD2 5 + Tr)变化的相关性。方法:建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型,通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响,并利... 目的:研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4 + CD2 5 + 调节性T细胞(CD4 +CD2 5 + Tr)变化的相关性。方法:建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型,通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响,并利用3色免疫荧光标记和流式细胞术分析受鼠外周血CD4 + CD2 5 + Tr变化规律。结果:同种异基因移植CKZ组的移植皮片存活时间显著长于同种异基因移植对照组,分别为(19 .5±2 .3)d和(10 . 2±2 .2 )d ,P <0 . 0 1;在同种异基因皮片移植后,受体外周血CD4 + CD2 5 + Tr占CD4 + T细胞百分率明显升高,术后8d达到高峰(P <0 . 0 1) ,然后出现下降趋势,其中同种异基因移植对照组在术后13d时已回落至正常水平,而同种异基因移植CKZ组在术后2 3d时仍维持在高于移植前水平;在同基因皮片移植后,CKZ组与对照组外周血CD4 + CD2 5 +Tr水平均无明显升高(P >0 . 0 5 )。结论:喘可治可延长小鼠同种异基因移植皮片存活时间,通过升高CD4 + CD2 5 + Tr水平而发挥免疫抑制效应可能是其机制之一。 展开更多
关键词 喘可治 CD4^+CD25^+调节性T细胞 移植 皮肤 流式细胞术
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外伤性视神经损伤后视神经及视网膜形态的动态观察 被引量：9
12
作者 史剑波 狄静芳 +1 位作者 徐锦堂 沈伟哉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1268-1270,T007,共4页
目的 :了解外伤性视神经损伤后的病理变化、溃变特点与时相间的关系。方法 :参照Allen脊髓损伤法 ,造成视神经眶尖段间接 6 0 0gcm力冲击、挤压伤。伤后对视神经和视网膜行形态学动态观察。结果 :①伤后 4 8h ,视神经轻度肿胀和空泡反应... 目的 :了解外伤性视神经损伤后的病理变化、溃变特点与时相间的关系。方法 :参照Allen脊髓损伤法 ,造成视神经眶尖段间接 6 0 0gcm力冲击、挤压伤。伤后对视神经和视网膜行形态学动态观察。结果 :①伤后 4 8h ,视神经轻度肿胀和空泡反应 ;1周时损伤处视神经出现溃变 ,神经胶质细胞增生 ,视网膜神经节细胞 (retinalganglioncells,RGCs)形态改变不明显 ;2周时神经纤维轴束间空泡样改变 ,局灶性坏死 ,RGCs核固缩和细胞数量减少。术后 3月 ,视神经损伤部位直径缩小 ,形成胶质疤痕 ,RGCs数量明显减少 ,核固缩细胞增多。②RGCs数量于术后 4 8h、1周、2周、1月和 3月分别比正常对照组低 3 35 %、13 2 3%、19 74 %、2 3 2 0 %、2 9 2 8%。③视网膜细胞在 4 8h内出现凋亡。结论 :本实验模型可造成明确的视神经和视网膜损伤 ,神经元的损伤程度从节细胞、中间神经元、感光细胞的次序依次递减。视网膜和视神经损伤的严重程度与时间呈相关性。RGCs数量在 4 8h至 1周时下降速率最快。 展开更多
关键词 视神经 创伤 损伤 视网膜神经节细胞 病理学
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小鼠同种异基因皮肤移植模型的建立 被引量：7
13
作者 刘德许 曾耀英 +3 位作者 狄静芳 王曦 林弈 季煜华 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期221-223,共3页
目的:为移植免疫及药物免疫机理研究建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型。方法:受体BALB/c分为A～E共5组,即对照组,5 0、7 5、10、2 0mg/kg环孢菌素A(CsA)剂量组,通过背-背法进行C5 7BL/ 6的全厚皮皮片移植,以探求通过较小剂量CsA及... 目的:为移植免疫及药物免疫机理研究建立小鼠同种异基因皮肤移植动物模型。方法:受体BALB/c分为A～E共5组,即对照组,5 0、7 5、10、2 0mg/kg环孢菌素A(CsA)剂量组,通过背-背法进行C5 7BL/ 6的全厚皮皮片移植,以探求通过较小剂量CsA及优化实验条件和护理方式建立供免疫机理研究的动物试验平台。结果:5 0、7 5、10mg/kg组相对于对照组皮片排斥时间无明显差别,而2 0mg/kg组植皮能较长时间存活。结论:2 0mg/kg的CsA剂量可以经济。 展开更多
关键词 同种异基因 皮片移植 环孢菌素A
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尖锐湿疣患者外周血自然杀伤细胞活性的研究 被引量：11
14
作者 李振 曾耀英 +4 位作者 蔡小嫦 何贤辉 徐丽慧 曾山 狄静芳 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2003年第3期145-147,共3页
目的　从自然杀伤细胞 (NK)内分泌γ 干扰素和CD6 9表达等层次 ,探讨尖锐湿疣 (CA)患者的细胞免疫状态 ,为临床免疫治疗提供指引。方法　用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞 (PBMC) ,进行细胞培养和免疫荧光染色 :①PDB刺激PBMC ,2... 目的　从自然杀伤细胞 (NK)内分泌γ 干扰素和CD6 9表达等层次 ,探讨尖锐湿疣 (CA)患者的细胞免疫状态 ,为临床免疫治疗提供指引。方法　用密度梯度离心法分离出外周血单个核细胞 (PBMC) ,进行细胞培养和免疫荧光染色 :①PDB刺激PBMC ,2h、12h、2 4h后收获细胞 ,进行anti CD5 6 FITC与anti CD6 9 PE免疫标记 ;②PDB、Ionomycin和Monensin刺激PBMC ,4h收获细胞 ,用anti CD5 6 PE与anti IFN γ FITC细胞内染色 ,最后利用流式细胞仪对标记细胞进行分析。结果　NK细胞受体外刺激后 ,长病程组各时点的CD6 9阳性细胞百分率分别是 ( 2 5 .73± 2 .99) %、( 5 7.0 8±4.74) %、( 6 7.0 7± 2 .5 2 ) % ,与对照组各时点相比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而短病程组各时点与对照组比较 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。长病程组的IFN γ阳性NK细胞比率是 ( 34.6 9± 3 .36 ) % ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。短病程组与对照组比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　短病程患者NK细胞活化和功能均正常 ,但长病程者NK细胞活化明显不足和功能严重障碍。本试验结果为长病程患者的免疫治疗提供理论依据和新的指引。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 外周血 自然杀伤细胞活性 γ—干扰素 CD69 细胞免疫状态 临床免疫治疗
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雷公藤多甙和FK506滴眼防治大鼠角膜移植免疫排斥反应的比较 被引量：11
15
作者 邓宏伟 陈建苏 +3 位作者 李辰 姚晓明 赵松滨 狄静芳 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第3期440-443,共4页
目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。... 目的:观察雷公藤多甙(tripterygiitotorum,TⅡ)及FK506滴眼液局部应用对大鼠角膜移植免疫排斥反应的影响。方法:建立大鼠角膜移植模型,随机按局部滴用药物分组成A,B,C组,用裂隙灯记录及比较各组移植排斥指数,并比较角膜排斥发生时间。分别于术后15d及30d行常规病理学检查。并通过免疫组化检查CD25,CD5+4在角膜植片基质中的表达。结果:0.3g/LTⅡ及0.5g/LFK506抑制角膜移植免疫排斥反应的效应均有效,两者相比效果无显著性差异。HE染色及免疫组化分析可见15d时各有效组角膜植片厚度基本正常,基质中仅有少量CD25,CD5+4阳性细胞表达、淋巴细胞浸润,新生血管少见。结论:TⅡ与FK506疗效近似。具有抑制高危角膜移植免疫排斥反应发生的临床应用价值。 展开更多
关键词 雷公藤多甙(TII) 角膜移植 移植物排斥
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山茱萸总甙滴眼液防治角膜移植免疫排斥反应的实验研究 被引量：10
16
作者 孟晶 黄丽娜 +4 位作者 陈建苏 李辰 赵松滨 狄静芳 杨皓庄 《中国实用眼科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期64-67,共4页
目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分组 :A、B、C、D组为Wistar SD组间同种异体角膜移植 ,Wistar为受体 ,SD为供体 ,其中A组为空白对照组、B组为 0 5 %... 目的 :观察山茱萸总甙 (COG)滴眼液局部应用对角膜移植免疫排斥反应的影响。方法 :建立封闭群大鼠角膜移植模型 ,随机分组 :A、B、C、D组为Wistar SD组间同种异体角膜移植 ,Wistar为受体 ,SD为供体 ,其中A组为空白对照组、B组为 0 5 %COG滴眼液组、C组为 1%COG滴眼液组 ,D组为 2 %COG滴眼液组 ,E组为Wis tar Wistar对照组 ,即Wistar大鼠间同种异体移植组。用裂隙灯显微镜记录及比较各组 :角膜植片透明度、水肿度、新生血管度、移植排斥指数 (RI)及角膜排斥发生时间。结果 :术后各组移植排斥指数及发生角膜移植排斥时间 ,A组与B组、A组与C组、A组与D组、B组与C组、C组与D组比较均有显著性差异 ,P <0 0 1;B组与D组之间比较P >0 0 5 ,无显著性差异。结论 :COG滴眼液能有效地防治角膜移植免疫排斥反应 ,1%COG滴眼液更有效。 展开更多
关键词 山茱萸总甙滴眼液 防治 角膜移植 免疫排斥反应
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鼻息肉组织T淋巴细胞IFN-γ、IL-4的表达 被引量：7
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作者 陈嵘 史剑波 +3 位作者 许庚 狄静芳 曾山 曾耀英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1623-1626,共4页
目的 :通过检测γ -干扰素 (IFN -γ)、白细胞介素 - 4 (IL - 4 )两种细胞因子在鼻息肉组织T淋巴细胞(CD3+ 细胞 )中的表达 ,探讨鼻息肉的可能发病机制。方法 :采用流式细胞术检测 2 1例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血中T淋巴细胞IFN -γ... 目的 :通过检测γ -干扰素 (IFN -γ)、白细胞介素 - 4 (IL - 4 )两种细胞因子在鼻息肉组织T淋巴细胞(CD3+ 细胞 )中的表达 ,探讨鼻息肉的可能发病机制。方法 :采用流式细胞术检测 2 1例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血中T淋巴细胞IFN -γ、IL - 4的分泌情况 ,并与正常人下鼻甲粘膜及外周血进行比较。结果 :在正常人下鼻甲粘膜中几乎未见CD3+ IL - 4 + 和CD3+ IFN -γ+ 细胞。鼻息肉组织中有大量T淋巴细胞浸润 [(39.6 5± 2 0 8) % ],IL - 4、IFN -γ的含量分别为 (13 6 0 6± 0 6 4 4 ) %、(32 938± 2 4 77) % ;患者外周血中IL - 4、IFN -γ的含量分别为 (6 6 86±0 2 0 4 ) %、(6 4 312± 1 6 11) % ,与之相比 ,病人鼻息肉组织中IL - 4的含量显著高于外周血 (P <0 0 5 )而IFN -γ的含量明显低于外周血 (P <0 0 5 )。正常人外周血IL - 4、IFN -γ的含量分别为 (0 5 6 0± 0 0 5 1) % ,(0 2 4 6± 0 0 2 0 ) % ,与之相比 ,病人外周血中IL - 4、IFN -γ的含量均显著高于正常人 (P <0 0 5 )。结论 :鼻息肉患者鼻粘膜局部免疫异常 ,Th细胞因子分泌优势发生改变 ,造成鼻腔粘膜“微环境”改变 ,可能与鼻息肉的形成有密切关系。 展开更多
关键词 鼻息肉 T淋巴细胞 干扰索Ⅱ型 白细胞介素4 流式细胞术
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视神经损伤后视网膜细胞凋亡的研究 被引量：6
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作者 狄静芳 史剑波 +1 位作者 曾耀英 徐锦堂 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 1999年第4期88-93,共6页
目的：探讨凋亡在视神经撞击和挤压损伤导致视网膜神经节细胞死亡中的作用。方法：应用活细胞悬液荧光染色法和流式细胞仪 Ｐ Ｉ染色法检测损伤后视网膜神经元凋亡的形态和数量。结果：荧光染色法见视野内有散在细胞出现核染色质凝聚现... 目的：探讨凋亡在视神经撞击和挤压损伤导致视网膜神经节细胞死亡中的作用。方法：应用活细胞悬液荧光染色法和流式细胞仪 Ｐ Ｉ染色法检测损伤后视网膜神经元凋亡的形态和数量。结果：荧光染色法见视野内有散在细胞出现核染色质凝聚现象（ 不规则核块） ，流式细胞仪 Ｄ Ｎ Ａ 直方图见正常对照组有直而高的 Ｇ０／ Ｇ１ 峰和低平的 Ｇ２ 峰，在 Ｇ０／ Ｇ１ 之前有一细胞群体，大约占细胞总数的１６３ ％ ，损伤组在 Ｇ０／ Ｇ１ 之前有一低小的亚二倍体峰，大约占全部细胞的４８３ ％ 。结论：视神经不完全损伤后存在视网膜神经元的凋亡，这一结论可为视神经外伤的临床治疗提供实验依据。 展开更多
关键词 视网膜神经元 凋亡 视神经损伤
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小鼠眼内移植三种B16黑色素瘤细胞系的比较研究 被引量：8
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作者 赵军 李辰 +2 位作者 狄静芳 冯峥 赵松滨 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期914-916,T002,共4页
目的 :比较B16F0、B16F1、B16F10 3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于该肿瘤细胞系来源的C5 7BL/6小鼠前房内的进展情况。方法 :将此三种黑色素瘤细胞系培养后的活细胞悬液移植于C5 7BL/6小鼠前房内 ,观察并比较其眼球溃破时间、淋巴结和肺... 目的 :比较B16F0、B16F1、B16F10 3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于该肿瘤细胞系来源的C5 7BL/6小鼠前房内的进展情况。方法 :将此三种黑色素瘤细胞系培养后的活细胞悬液移植于C5 7BL/6小鼠前房内 ,观察并比较其眼球溃破时间、淋巴结和肺的转移及生存期。结果 :F10组移植肿瘤眼眼球溃破时间早于另两组 ,而F0组与F1组间无差异。在鼠前房移植肿瘤细胞后的 18d ,F1组及F10组鼠出现移植肿瘤眼同侧的颈部淋巴结转移 ,而F0组未出现类似情况 ;在鼠前房移植肿瘤细胞后的 2 8d ,3组均出现肺转移。F0组小鼠生存时间长于另两组 ,而F1组与F10组间无差异。结论 :3种黑色素瘤细胞系的细胞移植于小鼠前房内后进展不同 。 展开更多
关键词 黑色素瘤 细胞系 对比研究 眼 小鼠
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内皮素-1诱导培养大鼠大脑皮质神经元凋亡的初步研究 被引量：7
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作者 徐安定 吴宜娟 +5 位作者 苗海锋 卓文燕 曾子华 狄静芳 谭少华 郑佩娥 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期45-47,44,共4页
目的观察内皮素(endothelin,ET)-1有无直接诱导原代培养神经元凋亡的作用,以及其作用通过的ET受体亚型。方法神经元培养取自新生SD大鼠大脑皮质。培养5 d后分别加入0.2 nmol/L,20 nmol/L ET-1处理24 h,用Annexin V、Hoechst 33258染色... 目的观察内皮素(endothelin,ET)-1有无直接诱导原代培养神经元凋亡的作用,以及其作用通过的ET受体亚型。方法神经元培养取自新生SD大鼠大脑皮质。培养5 d后分别加入0.2 nmol/L,20 nmol/L ET-1处理24 h,用Annexin V、Hoechst 33258染色半定量测定细胞凋亡。再用流式细胞仪分别定量检测ET受体A拮抗剂(BQ123)或ET受体B拮抗剂(BQ788)对20 nmol/L ET-1诱导神经元凋亡的效果。结果0.2 nmol/L ET-1未显示诱导培养神经元凋亡的作用;20 nmol/L ET-1处理后24 h,培养神经元凋亡率明显高于对照组(P<0.01);BQ123和BQ788分别部分阻断了20 nmol/L ET-1诱导神经元凋亡的作用(P<0.01),但阻断效果不完全。结论20 nmol/L ET-1可直接诱导培养大鼠大脑皮质神经元凋亡,其作用可能是通过其A受体和B受体亚型共同实现的。 展开更多
关键词 神经元 内皮素-1 凋亡 内皮素拮抗剂 细胞培养
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