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在不同碳源培养条件下酿酒酵母的蛋白质组解析 被引量：6
1
作者 张慧敏 姚善泾 +1 位作者 彭立凤 清水和幸 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期398-402,共5页
为了分析酿酒酵母在不同培养条件下的代谢调控过程的差异 ,采用固相pH梯度 SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对其利用不同碳源时细胞的总蛋白进行了分离 ,银染显色 ,使用 2D蛋白质图像分析系统ImageMaster 2DElite对双向电泳图谱进行分析 ,查... 为了分析酿酒酵母在不同培养条件下的代谢调控过程的差异 ,采用固相pH梯度 SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳对其利用不同碳源时细胞的总蛋白进行了分离 ,银染显色 ,使用 2D蛋白质图像分析系统ImageMaster 2DElite对双向电泳图谱进行分析 ,查询SWISS 2DPAGE蛋白质组数据库 ,识别了约 5 0 0个蛋白质点。对与糖酵解途径、磷酸戊糖途径、三羧酸循环和几种回补反应相关的大部分关键的蛋白质进行了差异分析。探讨了酿酒酵母利用不同碳源时及生长的不同阶段代谢机理的变化和在蛋白质水平的调控。 展开更多
关键词 双向凝胶电泳 蛋白质组 代谢调控 酵母
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溶氧振荡对聚β羟基丁酸混合培养过程的调控作用 被引量：2
2
作者 钱梓文 远山正幸 +1 位作者 花强 清水和幸 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期441-444,共4页
研究生物可降解塑料PHB(Polyβ hydroxybutyrate)生产的低成本和高产率发酵。采用廉价碳源———废食品糕点作为原料 ,其中同时具有葡萄糖和乳酸。培养是在同一 5L发酵罐中先后接入 2种细菌 ,先由乳酸杆菌Lacto bacillusdelbrueckii消... 研究生物可降解塑料PHB(Polyβ hydroxybutyrate)生产的低成本和高产率发酵。采用廉价碳源———废食品糕点作为原料 ,其中同时具有葡萄糖和乳酸。培养是在同一 5L发酵罐中先后接入 2种细菌 ,先由乳酸杆菌Lacto bacillusdelbrueckii消耗葡萄糖产生乳酸 ,再由真养产碱菌Ralstoniaeutrophus消耗乳酸产生PHB。本文应用混沌控制理论设计溶氧振荡来协调混生菌矛盾的生理需求 ,同时改变振荡节律激励细胞的代谢能。考虑真养产碱菌在乳酸里的代谢 ,有异养和真养两种途径 ,其中两种重要代谢通量 ,生物氧化能ATP和还原能NADPH ,能够反映混生菌细胞的生理状态 ,二者都与供氧密切有关。实验通过取样进行细胞破碎后 ,由荧光分析仪监测不同发酵阶段的ATP和NADPH ,发现 2种代谢能随着溶氧控制的不同节律变化而起伏 ,溶氧节律振荡能够使混合培养的PHB的浓度比常规供氧方法提高 1倍。 展开更多
关键词 PHB 混合发酵培养 溶氧振荡 节律控制 ATP NADPH代谢能测定 生物可降解塑料 混生菌
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混沌控制在聚β-羟基丁酸混合培养过程中的应用 被引量：2
3
作者 钱梓文 远山正幸 清水和幸 《无锡轻工业学院学报》 CSCD 2000年第5期451-454,494,共5页
在研究混沌建模的基础上开发了PHB(聚 β 羟基丁酸 )混合培养过程供氧的节律控制方法 .在PHB混合培养体系中 ,二种菌共存于同一发酵罐 ,其中乳酸杆菌首先消耗葡萄糖产生乳酸 ,与此同时真养产碱杆菌消耗乳酸最终产生PHB .这是两个相互耦... 在研究混沌建模的基础上开发了PHB(聚 β 羟基丁酸 )混合培养过程供氧的节律控制方法 .在PHB混合培养体系中 ,二种菌共存于同一发酵罐 ,其中乳酸杆菌首先消耗葡萄糖产生乳酸 ,与此同时真养产碱杆菌消耗乳酸最终产生PHB .这是两个相互耦合的过程 ,前者为需氧过程 ,后者为厌氧过程 .实验证明供氧的节律控制能够协调互相矛盾的两种代谢过程 ,是多菌共存生态系统优化控制的新尝试 . 展开更多
关键词 混沌控制 PHB生产 混合培养过程 供氧 微生物
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一种中间代谢途径代谢通量的定量分析方法 被引量：2
4
作者 张慧敏 朱江峰 +1 位作者 清水和幸 姚善泾 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第2期301-307,共7页
以13 C标记的碳源 ,用二维核磁共振技术 (1H 13 C ,HMQC)测定代谢中产生的氨基酸标记模式 ,研究对中间代谢途径胞内代谢通量进行定量分析的方法 .通过开发软件包 ,改进同位素分布的数学模型 ,提出了反应映射矩阵 (RMM )等概念 .由简化算... 以13 C标记的碳源 ,用二维核磁共振技术 (1H 13 C ,HMQC)测定代谢中产生的氨基酸标记模式 ,研究对中间代谢途径胞内代谢通量进行定量分析的方法 .通过开发软件包 ,改进同位素分布的数学模型 ,提出了反应映射矩阵 (RMM )等概念 .由简化算法 ,提高程序的执行效率 ,建立了定量分析胞内代谢通量的平台 .代谢模型涉及了糖酵解途径、磷酸戊糖途径、三羧酸循环、几种回补反应。 展开更多
关键词 中间代谢途径 代谢通量 定量分析 同位素分布模型 二维核磁共振技术
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不同碳源及通气条件下lpdA基因敲除对大肠杆菌代谢的影响 被引量：2
5
作者 李迈 姚善泾 清水和幸 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第4期880-885,共6页
lpdA基因编码的lipoamidedehydrogenase是丙酮酸脱氢酶复合体、α酮戊二酸脱氢酶复合体和甘氨酸裂解多酶体系的组成亚基之一.比较了不同碳源及通气条件下,lpdA基因敲除突变E.coli与野生E.coli的发酵特性,并通过对一些主要的酶活和胞内... lpdA基因编码的lipoamidedehydrogenase是丙酮酸脱氢酶复合体、α酮戊二酸脱氢酶复合体和甘氨酸裂解多酶体系的组成亚基之一.比较了不同碳源及通气条件下,lpdA基因敲除突变E.coli与野生E.coli的发酵特性,并通过对一些主要的酶活和胞内代谢产物浓度的测量,考察了lpdA基因敲除对E.coli代谢的影响.结果表明:葡萄糖为碳源的有氧条件下,lpdA基因的敲除导致丙酮酸、D乳酸、L谷氨酸的积累,TCA循环的抑制,乙醛酸途径和磷酸戊糖途径中的磷酸葡萄糖脱氢酶的激活.乙酸或丙酮酸为碳源的有氧发酵及葡萄糖为碳源的微氧发酵实验补充了以上的结论. 展开更多
关键词 LPDA 大肠杆菌 丙酮酸 D-乳酸 L-谷氨酸 酶活 胞内代谢产物
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