目的:探究微小核糖核酸-21(mi R-21)对心肌缺血大鼠心肌细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:取40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和建模组(30只),建模组大鼠通过左冠状动脉前降支(LAD)结扎术建立心肌缺血大鼠模...目的:探究微小核糖核酸-21(mi R-21)对心肌缺血大鼠心肌细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:取40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和建模组(30只),建模组大鼠通过左冠状动脉前降支(LAD)结扎术建立心肌缺血大鼠模型,假手术组大鼠仅开胸后不做其他处理即缝合。将建模成功大鼠随机分为对照组(转染mi R-NC慢病毒)、沉默组(转染mi R-21 antagomir慢病毒)、过表达组(转染mi R-21 mimics慢病毒),假手术组注射等量生理盐水。苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤情况;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(WB)检测TLR-4、NF-κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)信使核糖核酸(m RNA)和蛋白表达及磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)水平。结果:对照组大鼠心肌纤维排列紊乱,大量心肌细胞肿胀坏死并伴随炎症细胞浸润,沉默组大鼠心肌组织损伤情况进一步加重,而过表达组大鼠心肌组织损伤现象得到明显改善。与假手术组比,对照组、沉默组、过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达降低(P<0.05);与对照组比,沉默组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA表达与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达降低(P<0.05),过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平降低,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达升高(P<0.05)。结论:下调mi R-21表达可促进TLR-4/NF-κB通路表达,加重心肌缺血大鼠心肌损伤。展开更多
文摘目的:探究微小核糖核酸-21(mi R-21)对心肌缺血大鼠心肌细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法:取40只SD大鼠随机分为假手术组(10只)和建模组(30只),建模组大鼠通过左冠状动脉前降支(LAD)结扎术建立心肌缺血大鼠模型,假手术组大鼠仅开胸后不做其他处理即缝合。将建模成功大鼠随机分为对照组(转染mi R-NC慢病毒)、沉默组(转染mi R-21 antagomir慢病毒)、过表达组(转染mi R-21 mimics慢病毒),假手术组注射等量生理盐水。苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤情况;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹法(WB)检测TLR-4、NF-κB、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)信使核糖核酸(m RNA)和蛋白表达及磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)水平。结果:对照组大鼠心肌纤维排列紊乱,大量心肌细胞肿胀坏死并伴随炎症细胞浸润,沉默组大鼠心肌组织损伤情况进一步加重,而过表达组大鼠心肌组织损伤现象得到明显改善。与假手术组比,对照组、沉默组、过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达降低(P<0.05);与对照组比,沉默组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA表达与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平升高,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达降低(P<0.05),过表达组大鼠心肌细胞凋亡率,TLR-4、NF-κB、Caspase-3、Bax m RNA与其蛋白表达,以及p-NF-κB p65水平降低,Bcl-2 m RNA及其蛋白表达升高(P<0.05)。结论:下调mi R-21表达可促进TLR-4/NF-κB通路表达,加重心肌缺血大鼠心肌损伤。
