豫西地区禽源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析 被引量：29

1

作者 毛福超 郁川 +3 位作者 韩璐 韩于佩 刘文慧 刘静 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第1期127-130,共4页

为了解豫西地区禽源大肠杆菌的耐药情况,从豫西地区养鸡场采集130份疑似大肠杆菌病料样品,按常规方法分离细菌,对分离菌株进行生化试验、PCR鉴定、血清型鉴定及药敏试验。结果显示,共分离鉴定出98株鸡源大肠杆菌,确定86株细菌分属14个... 为了解豫西地区禽源大肠杆菌的耐药情况,从豫西地区养鸡场采集130份疑似大肠杆菌病料样品,按常规方法分离细菌,对分离菌株进行生化试验、PCR鉴定、血清型鉴定及药敏试验。结果显示,共分离鉴定出98株鸡源大肠杆菌,确定86株细菌分属14个血清型,其中以O14、O141、O78、O88血清型为主,分别占分离菌株的20.93%、16.28%、13.95%、9.30%。利用K-B法药敏试验检测大肠杆菌对20种抗生素的耐药性,结果表明,分离菌对复方新诺明的耐药性最高（95.92%）,其次为四环素（83.67%）、氨苄西林（81.63%）、萘啶酸（77.55%）、恩诺沙星（69.39%）,对亚胺培南和多黏菌素B敏感。大部分菌株具有多重耐药性,耐药种类最多的菌株对18种抗生素耐药,9～14重耐药菌株有76株,占77.55%。可见,豫西地区禽源大肠杆菌耐药现象十分严重,严重影响了禽类大肠杆菌病的防治。 展开更多

关键词 大肠杆菌 分离鉴定 药敏试验 耐药性分析

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巨噬细胞极化形成的影响因素研究进展 被引量：6

2

作者 程相朝 毛福超 《动物医学进展》 北大核心 2019年第6期72-77,共6页

巨噬细胞是生物体中宿主防御的重要调节者。为了满足机体不同的需要,巨噬细胞可以在不同刺激因子作用下转化为具有不同功能表型的状态,这个过程称为极化。不同影响因素下的静息巨噬细胞(M0)可极化形成不同的表型,促炎表型(M1)和抗炎表型... 巨噬细胞是生物体中宿主防御的重要调节者。为了满足机体不同的需要,巨噬细胞可以在不同刺激因子作用下转化为具有不同功能表型的状态,这个过程称为极化。不同影响因素下的静息巨噬细胞(M0)可极化形成不同的表型,促炎表型(M1)和抗炎表型(M2)。极化后的巨噬细胞也可通过逆转它们的表型进一步重新编程。巨噬细胞极化和重编程在维持免疫系统的稳定状态中发挥重要作用,并参与许多疾病的发生发展过程。论文对巨噬细胞极化形成的影响因素进行了论述提供参考。 展开更多

关键词 巨噬细胞 极化 信号通路

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猪繁殖与呼吸综合征病毒的免疫保护机制及疫苗研究进展 被引量：2

3

作者 翟崇凯 毛福超 张贺伟 《中国动物检疫》 CAS 2023年第2期86-98,共13页

猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的高变异性、免疫逃逸以及异源毒株间的交叉保护效果差,致使现有疫苗保护效力的持久性和有效性受限。本文归纳了PRRSV国内外流行毒株的进化和抗原... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的高变异性、免疫逃逸以及异源毒株间的交叉保护效果差,致使现有疫苗保护效力的持久性和有效性受限。本文归纳了PRRSV国内外流行毒株的进化和抗原变异以及毒株中和表位的免疫保护机制研究现状,系统分析了传统疫苗、反向遗传学构建的嵌合疫苗、基因工程疫苗、干扰素诱导激活疫苗以及纳米疫苗等的研究进展,提出了通过不断改良佐剂、改进接种方式等途径开发新型PRRSV疫苗,有望加快终结PRRS的全球流行,为研发安全高效的新型PRRSV疫苗提供了参考。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异毒株 中和表位 免疫保护机制 疫苗

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一株肠炎沙门氏菌鞭毛基因FliC的克隆及生物信息学分析 被引量：5

4

作者 程相朝 田文静 +2 位作者 张梦珂 毛福超 廖成水 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第12期3379-3386,共8页

本研究旨在对肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis)鞭毛蛋白FliC基因进行克隆,并对所获序列进行生物信息学分析。提取该菌基因组DNA作为模板,参考GenBank中肠炎沙门氏菌FliC基因序列设计1对引物,利用PCR克隆获得FliC基因,将其插入到克... 本研究旨在对肠炎沙门氏菌(Salmonella Enteritidis)鞭毛蛋白FliC基因进行克隆,并对所获序列进行生物信息学分析。提取该菌基因组DNA作为模板,参考GenBank中肠炎沙门氏菌FliC基因序列设计1对引物,利用PCR克隆获得FliC基因,将其插入到克隆载体中进行测序,应用生物信息学软件分析该基因的核苷酸和氨基酸序列,利用BLAST进行同源性比对,并构建系统进化树,同时对该基因编码蛋白的理化性质、亲水性、信号肽、跨膜结构域、糖基化位点和B细胞抗原表位、二级结构、三级结构等进行分析。结果显示,试验成功克隆了1 518bp的目的基因,编码505个氨基酸。同源性比对发现,FliC基因相对保守,与大肠杆菌属有较高的同源性。该蛋白的化学分子式为C2254H3701N657O803S4,理论分子质量为52.981ku,理论等电点为4.91;不稳定指数为16.86,是稳定存在的亲水蛋白质。结构分析结果显示,该蛋白没有信号肽或跨膜结构域,但具有8个N-糖基化位点、13个O-糖基化位点和60个磷酸化位点,同时还含有26个B细胞线性结合位点和5个T细胞结合位点。二级结构分析显示,α-螺旋、β-转角、延伸链和无规卷曲分别占43.76%、3.76%、20.99%和31.49%。本试验成功克隆了肠炎沙门氏菌鞭毛基因FliC,并对其序列结构进行了分析,为进一步研究鞭毛在肠炎沙门致病过程中的作用及基因工程疫苗的研制提供理论依据。 展开更多

关键词 肠炎沙门氏菌 鞭毛 FliC基因 生物信息学分析

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单增李斯特菌TatD-like DNase序列结构特征及其表达纯化和重组蛋白活性的研究 被引量：3

5

作者 毛福超 张梦珂 +10 位作者 廖成水 贾艳艳 王晓利 郁川 余祖华 何雷 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期84-92,共9页

本研究旨在探究单增李斯特菌10403s TatD-like DNase蛋白的序列结构特征与原核表达重组蛋白的核酸酶活性。应用生物信息学软件预测分析蛋白序列结构特征,构建重组原核表达质粒pET-32a-TatDlike DNase,转化入大肠杆菌Rosetta。重组蛋白经... 本研究旨在探究单增李斯特菌10403s TatD-like DNase蛋白的序列结构特征与原核表达重组蛋白的核酸酶活性。应用生物信息学软件预测分析蛋白序列结构特征,构建重组原核表达质粒pET-32a-TatDlike DNase,转化入大肠杆菌Rosetta。重组蛋白经IPTG诱导表达、亲和层析纯化、透析复性后进行核酸酶活性分析。结果显示,单增李斯特菌10403s TatD-like DNase由265个氨基酸组成,理论蛋白分子质量为30.16 ku,与芽孢杆菌属TatD蛋白同源性最高。二级结构主要由49.43%的α-螺旋、29.81%的无规则卷曲和16.6%的β-折叠构成。SDS-PAGE和Western-blot显示,重组原核表达蛋白大小约52 ku,主要以包涵体形式表达。琼脂糖凝胶电泳证实,重组蛋白在Mg2+存在时切割λDNA的核酸酶活性显著增强,且最适反应温度和pH值分别为37℃和pH6.0。本研究系统性分析了单增李斯特菌TatD-like DNase的序列结构特征,得到了重组原核表达蛋白,且该重组蛋白具有Mg2+依赖性核酸酶活性,这为进一步研究TatD-like DNase在单增李斯特菌感染中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 单增李斯特菌 TatD-like DNase 表达纯化 核酸酶 活性

原文传递

基于耗散体系的混凝土裂缝演化熵变研究 被引量：3

6

作者 项长生 程建曙 +2 位作者 周宇 毛福超 王立宪 《兰州理工大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期122-126,共5页

基于耗散体系特性,结合信息熵理论与能量法,对混凝土裂缝各个阶段的能量分布状态进行研究.建立起裂、裂缝稳定扩展及裂缝失稳破坏阶段熵变函数,并推导单元损伤程度公式,用以判断混凝土是否起裂和裂缝所处阶段;同时分析温差和荷载作用下... 基于耗散体系特性,结合信息熵理论与能量法,对混凝土裂缝各个阶段的能量分布状态进行研究.建立起裂、裂缝稳定扩展及裂缝失稳破坏阶段熵变函数,并推导单元损伤程度公式,用以判断混凝土是否起裂和裂缝所处阶段;同时分析温差和荷载作用下的能量分布,建立影响混凝土裂缝演化的双因素熵值函数.利用有限元软件Midas/FEA数值模拟两跨连续梁的开裂过程,并与文献分析结果进行对比.结果表明熵变函数能很好地描述混凝土裂缝的演化规律. 展开更多

关键词 耗散体系 信息熵 裂缝演化 混凝土结构

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鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因缺失株的构建及其生物学特性的研究 被引量：1

7

作者 张梦珂 廖成水 +5 位作者 毛福超 王晓利 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期589-597,共9页

为了探究5'-nucleotidase基因的功能及其在鼠伤寒沙门菌感染中的作用,本研究首先构建缺失1 112 bp的5'-nucleotidase基因的重组自杀性质粒pR E 112Δ5'-nucleotidase,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选... 为了探究5'-nucleotidase基因的功能及其在鼠伤寒沙门菌感染中的作用,本研究首先构建缺失1 112 bp的5'-nucleotidase基因的重组自杀性质粒pR E 112Δ5'-nucleotidase,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选出SL1344Δ5'-nucleotidase缺失株,并对其生物学特性进行初步研究。PCR及测序结果表明,SL1344Δ5'-nucleotidase构建成功,且回复株SL1344CΔ5'-nucleotidase构建成功。进一步研究表明,缺失株SL1344Δ5'-nucleotidase保留了亲本菌株SL1344的血清型1,4,5,12∶i∶1,2,且能够稳定遗传缺失1 112 bp的5'-nucleotidase基因,生长速度没有发生明显改变。但是,缺失株SL1344Δ5'-nucleotidase口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为4.30×10~7CF U,毒力降低至亲本株SL1344的1.96%。免疫保护率试验结果显示,对6周龄BALB/c小鼠免疫后第17天,鼠伤寒沙门菌野生株攻毒有50%的保护率。缺失株免疫小鼠后第21天,血清抗体IgG水平达到最高。回复菌株与亲本亲株之间生物学特性无显著性差异,基本恢复到野生型水平。上述结果表明,SL1344Δ5'-nucleotidase基因缺失株构建成功,遗传稳定,毒力明显降低,且具有较好的免疫原性,为研究鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因与其致病力之间的关系提供了依据,并为研究它在鼠伤寒沙门菌感染中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌SL1344 5’-nucleotidase基因 缺失株 回复株 生物学特性

原文传递

巨噬细胞极化在微生物感染中的作用研究进展 被引量：1

8

作者 廖成水 毛福超 程相朝 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期323-327,共5页

巨噬细胞(Macrophage)起源于骨髓中的前体细胞,分化成熟的巨噬细胞广泛分布于机体各个组织和器官中[1]。在特定因素作用下,机体内某些细胞可以直接分化成为巨噬细胞,不同细胞分化后的巨噬细胞可以分布于不同组织[2]。巨噬细胞是参与机... 巨噬细胞(Macrophage)起源于骨髓中的前体细胞,分化成熟的巨噬细胞广泛分布于机体各个组织和器官中[1]。在特定因素作用下,机体内某些细胞可以直接分化成为巨噬细胞,不同细胞分化后的巨噬细胞可以分布于不同组织[2]。巨噬细胞是参与机体固有免疫的一类重要免疫细胞,不但可以吞噬外来微生物,还能递呈抗原,通过合成分泌多种细胞因子发挥功效,在控制炎症变化的过程中起到主导作用。当外界病原体侵入机体引发感染时,机体的无菌环境被打破,巨噬细胞被激活后识别病原体和抗原递呈,吞噬杀灭病原体起到免疫保护作用。 展开更多

关键词 肝巨噬细胞 炎症反应 巨噬细胞极化 戈登氏链球菌 寄生虫感染 微生物感染

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广义局部信息熵在简支梁损伤识别中的应用 被引量：1

9

作者 项长生 毛福超 +2 位作者 周宇 李明达 王立宪 《甘肃科学学报》 2017年第6期89-94,共6页

为了探寻简便的混凝土桥梁损伤识别方法,基于信息熵基本理论,利用广义局部信息熵损伤指标,验证指标在钢筋混凝土简支梁中的损伤识别效果。采用有限元软件Midas/civil建立钢筋混凝土简支梁的数值模型,运行分析得到简支梁的动力特性,采用... 为了探寻简便的混凝土桥梁损伤识别方法,基于信息熵基本理论,利用广义局部信息熵损伤指标,验证指标在钢筋混凝土简支梁中的损伤识别效果。采用有限元软件Midas/civil建立钢筋混凝土简支梁的数值模型,运行分析得到简支梁的动力特性,采用简支梁一阶和二阶振型数据构建广义局部信息熵损伤指标,分别研究广义局部信息熵在简支梁单点和多点损伤定位、损伤定量和抗噪性方面的效果。结果表明广义局部信息熵损伤指标在简支梁损伤识别中简易、高效,且具有一定的抗噪能力。 展开更多

关键词 损伤识别 广义局部信息熵 振型 简支梁 抗噪性

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广义局部信息熵在混凝土简支梁损伤识别中的应用 被引量：1

10

作者 项长生 张亮 +2 位作者 高虹 毛福超 原子 《兰州理工大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期145-150,共6页

以广义局部信息熵基本理论为基础,构造基于挠度的广义局部信息熵损伤指标,分别验证3组不同采样点数量下指标在钢筋混凝土简支梁中的损伤识别效果,并将结果进行归一化处理.利用有限元软件Midas/civil建立钢筋混凝土简支梁损伤数值模型,... 以广义局部信息熵基本理论为基础,构造基于挠度的广义局部信息熵损伤指标,分别验证3组不同采样点数量下指标在钢筋混凝土简支梁中的损伤识别效果,并将结果进行归一化处理.利用有限元软件Midas/civil建立钢筋混凝土简支梁损伤数值模型,分析指标在简支梁损伤定位、损伤定量和抗噪性方面的应用效果.结果表明,采用基于挠度的广义局部信息熵指标能对钢筋混凝土简支梁进行准确损伤定位,定性分析损伤程度,并具有抗噪性. 展开更多

关键词 损伤识别 广义局部信息熵 挠度 简支梁 抗噪性

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表达NDV HN蛋白重组减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpΔasdC79-13的构建及生物学特性 被引量：1

11

作者 尚珂 程相朝 +7 位作者 郁川 余祖华 张俊峰 毛福超 韩璐 韩于佩 刘文慧 陈桂华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期589-594,共6页

利用平衡致死系统构建表达鸡新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)的减毒鸡白痢沙门菌活载体疫苗株。以p MD18-T-HN为模板,经PCR扩增出HN基因,定向插入原核表达载体p YA3493,构建重组质粒p YA-HN,再将其电转... 利用平衡致死系统构建表达鸡新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)的减毒鸡白痢沙门菌活载体疫苗株。以p MD18-T-HN为模板,经PCR扩增出HN基因,定向插入原核表达载体p YA3493,构建重组质粒p YA-HN,再将其电转入减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpΔasd C79-13中,获得重组减毒鸡白痢沙门菌ΔcrpΔasd C79-13(p YA-HN)。对重组菌的生化特性、生长特性、稳定性及安全性进行测定;并对重组菌表达的HN蛋白进行SDSPAGE和Western blot分析。结果显示,该重组菌保留了在DAP阴性环境中的生存能力;不能利用麦芽糖、蔗糖及乳糖等碳源,但保留了利用葡萄糖的能力;其生长速度明显低于强毒株C79-13,而与ΔcrpΔasd C79-13相比变化不明显;在体外连续传代能稳定遗传HN基因片段;经SDS-PAGE出现1条蛋白质量约为63 000的蛋白条带;Western blot证明重组菌表达的HN蛋白能与NDV阳性血清特异性结合;雏鸡口服接种试验表明ΔcrpΔasd C79-13(p YA-HN)的毒力较强毒株C79-13下降183倍。上述结果表明,成功构建了能稳定表达NDV HN蛋白的口服重组减毒鸡白痢沙门菌,为开发鸡白痢—新城疫的基因工程口服疫苗奠定了初步基础。 展开更多

关键词 asd^+宿主—载体平衡致死系统 减毒鸡白痢沙门菌 NDV HN 生物学特性

原文传递

金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性研究 被引量：1

12

作者 李琦 廖成水 +7 位作者 毛福超 王晓利 张梦珂 张晓洁 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期175-181,共7页

为研究金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,本研究复苏培养金黄色葡萄球菌后取培养上清液,采用透析得到金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白,结果显示获得的该蛋白浓度为48.5μg/mL。采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测金... 为研究金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,本研究复苏培养金黄色葡萄球菌后取培养上清液,采用透析得到金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白,结果显示获得的该蛋白浓度为48.5μg/mL。采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响。结果显示,金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白表现出降解λDNA的核酸酶活性,且最适温度和pH值分别为50℃和9.0,在低温和酸性条件下核酸酶的活性较弱,但胞外核酸酶对70℃以上的耐受性较差。不同浓度的Ba^2+、Mg^2+和Zn^2+对胞外分泌蛋白的核酸酶活性无影响;低浓度(0.01 mmol/L^1 mmol/L)的Ca^2+、Ni^2+、Cu^2+和Mn^4+可以促进胞外核酸酶切割λDNA的活性;高浓度的Na^+、K^+和Fe^3+可以提高胞外核酸酶切割λDNA的活性;添加Co^2+(0.01 mmol/L^10 mmol/L)可以促进胞外分泌蛋白的核酸酶活性。本研究证实了金黄色葡萄球菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,为进一步研究胞外分泌蛋白在金黄色葡萄球菌和宿主互作中的确切作用奠定了基础。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 胞外蛋白 核酸酶 金属离子 活性

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肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性测定

13

作者 田文静 廖成水 +2 位作者 李琦 毛福超 程相朝 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期5-10,共6页

为研究肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,同时利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响。结果显示,肠炎沙门菌胞外分... 为研究肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,采用琼脂糖凝胶电泳法、琼脂扩散法和琼脂培养法检测肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,同时利用琼脂糖凝胶电泳法探究温度、pH、金属离子对核酸酶活性的影响。结果显示,肠炎沙门菌胞外分泌蛋白表现出降解λDNA的核酸酶活性,且最适温度和pH分别是37℃和9.0,在低温和酸性条件的反应环境时核酸酶的活性较弱,胞外核酸酶对60℃以上的耐受性较差。不同浓度的Na^(+)和K^(+)对胞外分泌蛋白的核酸酶活性没有影响;当Ca^(2+)浓度超过0.01 mmol/L对胞外核酸酶活性有抑制作用;Zn^(2+)、Mn^(2+)和Ni^(2+)在低浓度时(0.01~1 mmol/L)以及Mg^(2+)、Cu^(2+)、Ba^(2+)、Fe^(3+)和Co^(2+)在高浓度时(5~10 mmol/L)均能促进胞外分泌蛋白的核酸酶活性。本试验证实了肠炎沙门菌胞外分泌蛋白的核酸酶活性,为今后进一步探索胞外分泌蛋白在肠炎沙门菌和宿主互作中的作用提供了科学依据。 展开更多

关键词 胞外蛋白 肠炎沙门菌 核酸酶活性

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鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因的序列特征及其蛋白核酸酶活性分析

14

作者 张梦珂 廖成水 +5 位作者 毛福超 王晓利 李银聚 吴庭才 张春杰 程相朝 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期675-679,共5页

为研究鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因的序列特征,本研究应用PCR扩增得到鼠伤寒沙门菌SL1344株的5'-nucleotidase基因片段,利用在线网站和DNAMAN 6.0.3.48软件进行其核苷酸和氨基酸序列的同源性分析。然后将目的基因亚克隆至... 为研究鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因的序列特征,本研究应用PCR扩增得到鼠伤寒沙门菌SL1344株的5'-nucleotidase基因片段,利用在线网站和DNAMAN 6.0.3.48软件进行其核苷酸和氨基酸序列的同源性分析。然后将目的基因亚克隆至原核表达载体p ET32a构建重组表达质粒(pET32a-5'-nucleotidase),转入大肠杆菌Rosetta中经IPTG诱导表达,亲和层析法纯化后采用SDS-PAGE和western blot进行分析。采用酶切活性试验分析重组蛋白的核酸酶活性。结果显示,鼠伤寒沙门菌SL1344株5'-nucleotidase基因为1 482 bp,5'-nucleotidase核苷酸序列与其它22种微生物的5'-nucleotidase及其类似物的同源性较低,最高仅为52.8%。理论上蛋白的分子量为57.18 ku,编码523个氨基酸。SDS-PAGE和western blot结果显示5'-nucleotidase重组蛋白约72 ku,且以可溶性和包涵体两种形式表达。同时,酶切活性试验结果显示重组5'-nucleotidase蛋白具有降解DNA的能力。本实验克隆了鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因,并表达得到了具有核酸酶活性的重组蛋白,为进一步研究5'-nucleotidase基因在鼠伤寒沙门菌感染中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 鼠伤寒沙门菌 5'-nucleotidase基因 克隆 序列分析 原核表达

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单核细胞增生性李斯特氏菌tatD基因缺失对小鼠毒力和肠道菌群的影响

15

作者 牛俊辉 李琦 +6 位作者 毛福超 钱满 贾艳艳 丁轲 张春杰 程相朝 廖成水 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期161-168,共8页

【目的】探究单核细胞增生性李斯特氏菌Listeria monocytogenes tatD基因缺失对小鼠Mus musculus毒力和肠道菌群的影响,为tatD在单核细胞增生性李斯特氏菌与宿主互作中的作用及减毒疫苗研究提供参考。【方法】采用Bliss法将亲本菌株(LM1... 【目的】探究单核细胞增生性李斯特氏菌Listeria monocytogenes tatD基因缺失对小鼠Mus musculus毒力和肠道菌群的影响,为tatD在单核细胞增生性李斯特氏菌与宿主互作中的作用及减毒疫苗研究提供参考。【方法】采用Bliss法将亲本菌株(LM10403s)、缺失菌株(LM10403sΔtatD)和互补菌株(LM10403sCΔtatD)口服感染小鼠,确定菌株对小鼠的半数致死量(LD_(50))。LM10403sΔtatD以1.00×10^(5) CFU口服免疫小鼠观察其免疫保护效果。将40只6周龄雌鼠随机平均分为对照即磷酸缓冲盐溶液组(PBS)、LM10403s组、LM10403sΔtatD组和LM10403sCΔtatD组,PBS组小鼠灌胃200μL无菌PBS,实验组分别灌胃200μL含1.00×10^(6) CFU的菌液。灌胃24 h后剖杀各组小鼠,收集肠道内容物,采用Illumina Hiseq测序技术测定各处理小鼠盲肠样品微生物16S rRNA V3-V4区序列,并比较分析其微生物群落结构、多样性和信号通路富集。【结果】LM10403sΔtatD的LD_(50)为8.11×10^(7) CFU,毒力低于LM10403s。同时LM10403sΔtatD口服免疫小鼠后对单核细胞增生性李斯特氏菌亲本菌株的攻毒能提供80%保护率。Chao1和Observed species指数显示:PBS与LM10403sΔtatD处理组差异不显著,但LM10403s组和LM10403sCΔtatD处理组相比于PBS处理组显著下降(P<0.05)。在门水平上,LM10403sΔtatD处理组的厚壁菌门Firmicutes相对丰度高于LM10403s和LM10403sCΔtatD处理组,而在属水平上,乳杆菌属Lactobacillus相对丰度高于LM10403s和LM10403sCΔtatD处理组。功能预测分析显示:LM10403s处理组在细胞过程、环境信息处理和新陈代谢等信号通路的富集程度高于LM10403sΔtatD处理组。【结论】tatD基因缺失后单核细胞增生性李斯特氏菌的毒力降低,并具有一定的免疫保护效果。tatD基因缺失菌株感染小鼠对肠道菌群失调影响减小,且有益菌增多。 展开更多

关键词 tatD基因 单核细胞增生性李斯特氏菌 毒力 16S rRNA 肠道菌群

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一例猫创伤性疝合并股骨远端生长板骨折的诊断和治疗

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作者 王聪慧 赵帅 +3 位作者 张茜 毛福超 王迎鲜 翟崇凯 《北方牧业》 2024年第11期42-43,共2页

猫的创伤性膈疝是指隔肌因外伤而受损或破裂,导致腹腔内的器官进入胸腔的情况。这种情况可能是由于车祸、跌落、或其他外力导致的胸部或腹部严重撞击造成的。创伤性膈疝可能导致严重的健康问题,如胃肠道受压迫、呼吸困难、休克等。症状... 猫的创伤性膈疝是指隔肌因外伤而受损或破裂,导致腹腔内的器官进入胸腔的情况。这种情况可能是由于车祸、跌落、或其他外力导致的胸部或腹部严重撞击造成的。创伤性膈疝可能导致严重的健康问题,如胃肠道受压迫、呼吸困难、休克等。症状可能包括呼吸急促、呕吐、腹痛、脱水以及体内器官功能障碍等。如果发生了创伤性隔疝,需要紧急就医。治疗通常需要进行紧急手术以修复受损的隔肌并将腹腔内的器官放回到原位。手术后,动物通常需要在恢复期间接受特殊的护理和监测,以确保身体能够康复并避免并发症的发生。 展开更多

关键词 创伤性膈疝 器官功能障碍 隔肌 股骨远端 腹腔内 呼吸急促 呼吸困难 生长板

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mRNA疫苗在动物传染病中的研究进展及应用

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作者 翟崇凯 毛福超 +3 位作者 田文静 王聪慧 王迎鲜 张贺伟 《河南农业科学》 北大核心 2024年第5期10-21,共12页

与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有安全性高、有效性好、研发周期短等特点,使其在传染病的预防和控制方面具有得天独厚的优势。目前,mRNA疫苗在新型冠状病毒(COVID-19)肺炎、流感、埃博拉病毒病、寨卡病毒病等人类疾病的防控中取得了巨大进展... 与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有安全性高、有效性好、研发周期短等特点,使其在传染病的预防和控制方面具有得天独厚的优势。目前,mRNA疫苗在新型冠状病毒(COVID-19)肺炎、流感、埃博拉病毒病、寨卡病毒病等人类疾病的防控中取得了巨大进展,但动物用mRNA疫苗研究尚不深入。因此,开发动物用mRNA疫苗来预防和控制家畜、家禽、野生动物等的传染性疾病,成为动物疫病和公共卫生领域的重要研究方向之一。全面探讨了动物传染病mRNA疫苗的设计、制备、递送系统、应用、优势、挑战以及前景,为研制和开发动物传染病mRNA疫苗提供参考。 展开更多

关键词 mRNA疫苗 制备方法 递送系统 免疫机制 动物传染病

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单增李斯特菌TatD基因缺失菌株的生物学特性研究

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作者 牛俊辉 李琦 +7 位作者 毛福超 李含笑 钱满 贾艳艳 丁轲 张春杰 程相朝 廖成水 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期602-612,共11页

为探究TatD基因缺失对单增李斯特菌生物学特性的影响,本研究对缺失菌株LM10403sΔTatD的生化特性、生长特性、生物被膜、环境适应性、黏附、侵袭、增殖、耐药性、溶血特性和毒力等生物学特性进行研究。结果显示,LM10403sΔTatD与亲本菌... 为探究TatD基因缺失对单增李斯特菌生物学特性的影响,本研究对缺失菌株LM10403sΔTatD的生化特性、生长特性、生物被膜、环境适应性、黏附、侵袭、增殖、耐药性、溶血特性和毒力等生物学特性进行研究。结果显示,LM10403sΔTatD与亲本菌株LM10403s的生化特性和生长特性均无明显差异。LM10403sΔTatD保留了LM10403s对温度、H_(2)O_(2)和EtOH的适应性,并且对巨噬细胞Raw264.7的黏附、侵袭和增殖没有发生明显改变。但与LM10403s相比,LM10403sΔTatD对高温(54℃)、酸性和苯扎溴铵的耐受性以及对头孢曲松的耐药性和胞外分泌蛋白的溶血特性均有所降低,而生物被膜形成能力有所提升。LM10403sΔTatD腹腔注射感染6周龄小鼠的LD_(50)为2.58×10^(6)CFU,毒力稍低于LM10403s。上述结果表明,TatD基因缺失对单增李斯特菌LM10403s的生物学特性整体无明显影响,部分环境适应性和溶血特性有所降低,而生物被膜形成有所增加,为进一步探究TatD在单增李斯特菌与宿主互作过程中的作用奠定基础。 展开更多

关键词 单增李斯特菌 TatD基因 缺失菌株 环境适应性 生物学特性

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