不同状态BMP-2对体外EMSCs成骨分化的作用 被引量：4

1

作者 史文涛 戴瑶 +4 位作者 毕士奇 吕德民 陆浩 崔学文 张志坚 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期261-267,共7页

[目的]探讨骨形成蛋白(BMP-2)与组织型谷氨酰胺转氨酶(tTG, TG2)交联形成固化型和BMP-2游离型细胞生长因子,两种不同状态的BMP-2对鼻粘膜间充质干细胞(EMSCs)向成骨细胞分化的影响;[方法]体外培养、扩增并鉴定EMSCs;实验分四组:TG2+BMP-... [目的]探讨骨形成蛋白(BMP-2)与组织型谷氨酰胺转氨酶(tTG, TG2)交联形成固化型和BMP-2游离型细胞生长因子,两种不同状态的BMP-2对鼻粘膜间充质干细胞(EMSCs)向成骨细胞分化的影响;[方法]体外培养、扩增并鉴定EMSCs;实验分四组:TG2+BMP-2、BMP-2、TG2和空白对照;四组细胞均采用定向成骨诱导培养基培养7 d;检测各组碱性磷酸酶活性及形成的钙结节面积大小;免疫印迹法检测成骨诱导相关蛋白表达水平;MTT法检测TG2、BMP-2和TG2+BMP-2对EMSCs增殖的影响。[结果]成骨诱导7 d后,TG2+BMP-2组细胞碱性磷酸酶活性较高,形成的钙结节较大,骨相关蛋白表达水平较高;TG2+BMP-2,TG2和BMP-2对EMSCs增殖能力无明显影响。[结论] TG2+BMP-2交联固化型细胞生长因子对EMSCs向成骨细胞分化表现出较强的促进作用,是组织工程化骨中理想的诱导成骨的细胞因子,具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 骨形成蛋白-2(BMP-2) 组织型谷氨酰胺转氨酶(TG-2) 外胚间充质干细胞 成骨分化

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超前镇痛护理干预在腰椎压缩性骨折术后疼痛中的应用 被引量：3

2

作者 卞璐 毕士奇 +3 位作者 史文涛 崔学文 徐爱花 张志坚 《当代护士（下旬刊）》 2019年第8期1-2,共2页

目的研究超前使用镇痛药(西乐葆)在腰椎压缩性骨折术后疼痛中的应用效果。方法选取2015年7月—2017年7月本院收治入院确诊为腰椎压缩性骨折需行手术治疗的患者64例,按入院后手术时间的顺序随机分为对照组和研究组各32例,对照组行常规护... 目的研究超前使用镇痛药(西乐葆)在腰椎压缩性骨折术后疼痛中的应用效果。方法选取2015年7月—2017年7月本院收治入院确诊为腰椎压缩性骨折需行手术治疗的患者64例,按入院后手术时间的顺序随机分为对照组和研究组各32例,对照组行常规护理,研究组在常规护理的基础上增加超前镇痛药(西乐葆)的使用及相关护理干预。分别观察记录患者主诉及术后疼痛评分。结果研究组出现疼痛平均时间及疼痛评分均低于对照组,且术后镇痛药物使用少于对照组,两组数据对比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论超前镇痛护理干预可以延迟疼痛出现时间,缓解疼痛症状,减少术后镇痛药的使用,减少患者用药费用支出,提高住院患者满意度。 展开更多

关键词 超前镇痛 护理干预 腰椎压缩性骨折 术后疼痛

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TG2基因修饰的鼻粘膜间充质干细胞向神经样细胞分化的研究 被引量：2

3

作者 崔学文 史文涛 +5 位作者 戴瑶 毕士奇 杨开元 陈平波 孙勇 张志坚 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期297-304,共8页

目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化影响。方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率。实验分... 目的:研究重组transglutaminase 2(TG2)腺病毒转染对鼻粘膜骨髓间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化影响。方法:利用贴壁筛选法分离培养和扩增EMSCs,通过免疫荧光方法分析EMSCs的纯度,采用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率。实验分组:重组TG2腺病毒转染EMSCs(ad EMSCs)组、重组GFP腺病毒转染EMSCs组(GFP-EMSCs)和空白对照组(control),诱导细胞向神经样细胞分化,倒置显微镜观察分化过程中细胞形态的变化。免疫荧光和免疫印迹方法检测诱导后EMSCs的轴突膜蛋白(GAP-43),微管相关蛋白(MAP2)和髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达情况。向大鼠脊髓内注射ad EMSCs,2周后取脊髓。结果:实验数据表明转染TG2腺病毒的EMSCs可稳定表达TG2。诱导7 d后,ad EMSCs组细胞呈现双极和多极的典型神经样细胞形态,并且GAP-43,MAP2和MBP的表达水平较对照组高。移植入体内2周的ad EMSCs存活良好且部分细胞表达GAP-43。结论:TG2基因修饰有利于EMSCs在体外向神经样细胞分化,并且具有良好的可移植性。 展开更多

关键词 鼻粘膜 间充质干细胞 组织型谷胺酰氨转胺酶 神经样细胞

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组织型转谷氨酰胺酶2在鼻黏膜间充质干细胞分化过程中的表达 被引量：2

4

作者 吕德民 史文涛 +4 位作者 陆浩 毕士奇 杨开元 崔学文 张志坚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第19期2959-2964,共6页

背景:外胚层间充质干细胞可在特定的外环境中定向分化为其他类型细胞,分化过程中一些特殊蛋白的表达可能直接影响其命运的方向。目的:探讨大鼠鼻黏膜间充质干细胞在成骨细胞分化和成神经样细胞分化过程中组织型转谷氨酰胺酶2的表达。方... 背景:外胚层间充质干细胞可在特定的外环境中定向分化为其他类型细胞,分化过程中一些特殊蛋白的表达可能直接影响其命运的方向。目的:探讨大鼠鼻黏膜间充质干细胞在成骨细胞分化和成神经样细胞分化过程中组织型转谷氨酰胺酶2的表达。方法:组织贴壁法分离培养并鉴定大鼠鼻黏膜间充质干细胞,分别进行成神经样细胞、成骨细胞诱导分化。在诱导不同时间点,采用免疫荧光检测神经相关蛋白GAP-43、TUBB3和骨相关蛋白OCN、COLⅠ的表达,免疫印迹法检测神经相关蛋白GAP-43、TUBB3,骨相关蛋白OCN、COLⅠ,神经营养因子NT-3、BDNF,细胞外基质FN、LN以及组织型转谷氨酰胺酶2的表达水平。结果与结论:①成神经诱导3 d,免疫荧光法观察可见神经元细胞特征性蛋白GAP-43和TUBB3呈阳性表达;成骨诱导7 d,免疫荧光法观察可见成骨细胞特征性蛋白COLⅠ和OCN呈阳性表达;②成神经诱导培养3,5,7 d,免疫印迹法检测神经细胞相关蛋白GAP-43、TUBB3和组织型转谷氨酰胺酶2表达水平随诱导时间延长而增高;成骨诱导7,14 d,免疫印迹法检测成骨细胞相关蛋白COLⅠ、OCN以及组织型转谷氨酰胺酶2水平随诱导时间延长而增高;③成神经诱导7 d,免疫印迹法检测神经营养因子NT-3、BDNF和组织型转谷氨酰胺酶2水平高于未诱导对照组;成骨诱导14 d,免疫印迹法检测细胞外基质FN、LN和组织型转谷氨酰胺酶2水平高于未诱导对照组;④结果表明,组织型转谷氨酰胺酶2可能参与和调控鼻黏膜间充质干细胞向神经样细胞和成骨细胞分化过程。 展开更多

关键词 鼻黏膜间充质干细胞 成骨细胞 神经样细胞 组织型转谷氨酰胺酶2

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包埋载音猬因子壳聚糖微球纤维蛋白支架对鼻黏膜来源外胚层间充质干细胞分化的影响 被引量：2

5

作者 崔学文 杨开元 +6 位作者 杨文静 陆浩 史文涛 陈平波 毕士奇 沈元昊 张志坚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第29期4694-4700,共7页

背景:脊髓组织工程的基本思路是将体外分离培养的种子细胞种植到具有三维结构的生物材料支架上,并加入生物活性因子保持一定浓度,构成具有生物活性的细胞-支架复合物。然而如何构建合理的细胞生长微环境以及维持生物活性因子的最佳浓度... 背景:脊髓组织工程的基本思路是将体外分离培养的种子细胞种植到具有三维结构的生物材料支架上,并加入生物活性因子保持一定浓度,构成具有生物活性的细胞-支架复合物。然而如何构建合理的细胞生长微环境以及维持生物活性因子的最佳浓度一直面临诸多问题。该实验创新性地提出了双交联缓释体系,持续稳定地释放神经营养因子,以便更好地促进种子细胞的生长与分化。目的:利用冷冻干燥法,将包载音猬因子的壳聚糖微球填充于纤维蛋白胶,构建具有三维结构的复合生物工程支架,探讨该支架对外胚层间充质干细胞向神经元样细胞分化的影响。方法:①采用离子凝胶法制备包载音猬因子的壳聚糖微球,而后将其与纤维蛋白胶混合,冷冻干燥成型,即得到包埋载音猬因子壳聚糖微球的纤维蛋白支架,采用扫描电子显微镜观察支架微观结构和ELISA检测音猬因子缓释效果,并制备包载音猬因子的纤维蛋白支架和包载音猬因子的壳聚糖微球作为对照;②采用悬浮抗贴壁法获取外胚层间充质干细胞来源的神经球样细胞分别种植于上述支架和经多聚赖氨酸修饰的圆玻片上,加入神经诱导培养基培养。14d后免疫荧光标记神经细胞相关蛋白β3-Tubulin、MAP-2和MBP,采用Westernblot方法测定神经细胞相关蛋白表达水平。结果与结论:①扫描电子显微镜观察纤维蛋白胶经冷冻干燥后呈海绵型网状结构,载音猬因子的壳聚糖微球均匀分散在其中;②ELISA检测结果显示复合纤维蛋白支架缓释速度较为平缓且持续时间较长,形成更稳定、持续的缓释体系;③免疫荧光染色显示复合纤维蛋白支架组高表达神经细胞相关蛋白;同时,Western blot检测结果显示复合纤维蛋白支架组表达的神经细胞相关蛋白水平明显高于其他组(P<0.05);④结果表明,壳聚糖复合纤维蛋白支架缓释效果较好,该复合支架对 展开更多

关键词 外胚层间充质干细胞 壳聚糖 音猥因子 纤维蛋白胶 复合纤维蛋白支架 缓释 神经球样细胞 神经元 国家自然科学基金

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鼻黏膜来源外胚间充质干细胞与磷酸钙骨水泥材料的体外相容性 被引量：2

6

作者 史文涛 戴瑶 +4 位作者 陈平波 毕士奇 吕德明 陆浩 张志坚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第33期5350-5355,共6页

背景:利用磷酸钙骨水泥载间充质干细胞治疗骨缺损已取得令人满意的成果,但是鼻黏膜来源的外胚层间充质干细胞与磷酸钙骨水泥的体外相容性尚不清楚。目的:探讨磷酸钙骨水泥对大鼠鼻黏膜来源外胚间充质干细胞向成骨细胞分化的影响,进一步... 背景:利用磷酸钙骨水泥载间充质干细胞治疗骨缺损已取得令人满意的成果,但是鼻黏膜来源的外胚层间充质干细胞与磷酸钙骨水泥的体外相容性尚不清楚。目的:探讨磷酸钙骨水泥对大鼠鼻黏膜来源外胚间充质干细胞向成骨细胞分化的影响,进一步探讨鼻黏膜来源外胚间充质干细胞与磷酸钙骨水泥的生物相容性。方法:体外培养扩增鼻黏膜来源外胚间充质干细胞,并将其种植于磷酸钙骨水泥表面和培养板(对照组),均进行成骨诱导14 d。碱性磷酸酶活性法检测鼻黏膜来源外胚间充质干细胞的碱性磷酸酶活性,茜素红染色法测定钙结节面积大小,免疫荧光和免疫印迹法检测成骨诱导相关蛋白表达水平;鬼笔环肽染色法动态观察磷酸钙骨水泥表面的细胞形态;MTT法检测磷酸钙骨水泥对细胞增殖的影响。结果与结论:(1)成骨诱导14 d后,磷酸钙骨水泥表面的鼻黏膜来源外胚间充质干细胞碱性磷酸酶活性较高,形成的钙结节较大,骨相关蛋白表达水平较高;(2)磷酸钙骨水泥对鼻黏膜来源外胚间充质干细胞的增殖有一定的促进作用;(3)结果表明,鼻黏膜来源外胚间充质干细胞与磷酸钙骨水泥支架材料具有良好的生物相容性,磷酸钙骨水泥对鼻黏膜来源外胚间充质干细胞向成骨细胞分化表现出一定的促进作用。 展开更多

关键词 鼻黏膜 外胚间充质干细胞 磷酸钙骨水泥 成骨分化 生物相容性 干细胞 国家自然科学基金 鼻黏膜 间质干细胞 磷酸钙类 细胞分化 组织工程

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氯倍他索促进鼻粘膜间充质干细胞成神经样细胞分化 被引量：1

7

作者 史文涛 戴瑶 +3 位作者 毕士奇 陆浩 吕德民 张志坚 《神经损伤与功能重建》 2019年第1期1-5,共5页

目的:研究氯倍他索(Clo)对鼻粘膜外胚层间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:贴壁筛选法分离培养EMSCs,免疫荧光法鉴定体外扩增的EMSCs;MTT法检测Clo对EMSCs增殖能力的影响;成神经样细胞诱导实验分为Clo组、音猬因子(SHH)... 目的:研究氯倍他索(Clo)对鼻粘膜外胚层间充质干细胞(EMSCs)向神经样细胞分化的影响。方法:贴壁筛选法分离培养EMSCs,免疫荧光法鉴定体外扩增的EMSCs;MTT法检测Clo对EMSCs增殖能力的影响;成神经样细胞诱导实验分为Clo组、音猬因子(SHH)组和空白对照组,采用全反式维甲酸(ATRA)诱导各组细胞向神经样细胞分化;倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光和免疫印迹方法检测神经元细胞相关蛋白。结果:体外分离培养的EMSCs高表达间充质干细胞和神经嵴源干细胞标志物Vimentin和Nestin。各组EMSCs成神经样细胞诱导7 d后,Clo组和SHH组EMSCs呈现双极和多极的典型神经样细胞形态并且高表达神经元细胞相关蛋白。Clo组EMSCs表达SHH和SMO的水平明显高于空白对照组,与SHH组比较差异无统计学意义(P>0.05);Clo可促进EMSCs分泌内源性脑神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)。结论:Clo可通过激活SHH信号通路和上调内源性神经营养因子水平促进EMSCs向神经样细胞分化。 展开更多

关键词 鼻粘膜外胚层间充质干细胞 氯倍他索 神经样细胞 音猬因子

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重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架对神经干细胞增殖与分化的影响 被引量：1

8

作者 孙勇 陈平波 +4 位作者 史文涛 杨开元 毕士奇 张志坚 徐晓峰 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第8期1085-1090,共6页

目的研究包含重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架对神经干细胞(NSCs)增殖与分化的影响。方法实验分组:FG-SHH组(将NSCs种植于重组SHH腺病毒-支架组)和对照组(controls)[以培养板、重组SHH腺病毒转染组(SHH)、纤维蛋白胶支架组(FG)为对照组]... 目的研究包含重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架对神经干细胞(NSCs)增殖与分化的影响。方法实验分组:FG-SHH组(将NSCs种植于重组SHH腺病毒-支架组)和对照组(controls)[以培养板、重组SHH腺病毒转染组(SHH)、纤维蛋白胶支架组(FG)为对照组];体外分离培养并鉴定NSCs,构建重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架,用免疫荧光和免疫印迹方法测定转染效率;MMT法检测细胞增殖活力;免疫荧光和免疫印迹法检测上述各组细胞表达神经细胞相关蛋白:β微管蛋白(β-tubulin Ⅲ)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达状态。结果体外培养的NSCs高表达nestin;转染重组SHH腺病毒后NSCs可稳定表达SHH;FG-SHH支架促NSCs增殖能力较强,并且FG-SHH组β-tubulin Ⅲ及MBP阳性细胞率和蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05),FG-SHH组GFAP的阳性细胞率和蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。结论重组SHH腺病毒纤维蛋白缓释支架可以促进NSCs的增殖及其向神经元和少突胶质细胞分化,并抑制星形胶质细胞分化。 展开更多

关键词 神经干细胞 纤维蛋白支架 增殖 分化 SHH

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SHH基因修饰的大鼠鼻黏膜外胚层间充质干细胞向神经样细胞的诱导分化

9

作者 毕士奇 吕德明 +5 位作者 杨开元 戴瑶 庄琴 黄秋生 张志坚 崔学文 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2018年第6期461-466,472,共7页

目的:探讨音猬因子(sonic hedgehog,SHH)基因转染对大鼠鼻黏膜外胚层间充质干细胞(ectomesenchymal stem cell,EMSCs)分化为神经样细胞的影响。方法:利用组织贴壁法分离、培养和纯化EMSCs,SHH基因重组腺病毒转染EMSCs(SHH-EMSCs),免疫... 目的:探讨音猬因子(sonic hedgehog,SHH)基因转染对大鼠鼻黏膜外胚层间充质干细胞(ectomesenchymal stem cell,EMSCs)分化为神经样细胞的影响。方法:利用组织贴壁法分离、培养和纯化EMSCs,SHH基因重组腺病毒转染EMSCs(SHH-EMSCs),免疫荧光染色观察转染前后EMSCs的干细胞标志蛋白巢蛋白、波形蛋白和Connexin-43,蛋白质印迹检测SHH蛋白表达。诱导分化实验分为4组:SHH-EMSCs诱导组、SHH-EMSCs正常培养组、EMSCs诱导组、EMSCs正常培养组;倒置相差显微镜观察分化过程中细胞形态变化;免疫荧光染色和蛋白质印迹检测诱导后轴突膜蛋白(GAP-43)、β-3微管蛋白(TUBB3)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达。并将SHH-EMSCs悬液注入大鼠脊髓组织内,观察该细胞在脊髓内存活和分化情况。结果:免疫荧光染色结果显示,经SHH基因转染后的EMSCs巢蛋白、波形蛋白和Connexin-43阳性率达90%;蛋白质印迹结果显示,SHH蛋白表达明显升高。SHH-EMSCs诱导组培养7 d后,细胞呈现双极、多极和锥形的典型神经细胞样形态;免疫荧光染色和蛋白质印迹结果表明SHH-EMSCs诱导组GAP-43、TUBB3、MBP和Smoothen的表达水平明显高于其他3组,差异有统计学意义; GFAP在4组细胞中均为弱表达,无显著差异。SHH-EMSCs在大鼠脊髓内存活情况良好且表达TUBB3。结论:SHH基因转染的EMSCs具有更高的向神经样细胞分化效率,并可在脊髓内存活; EMSCs可望成为移植脊修复髓损伤的一种新的种子细胞。 展开更多

关键词 鼻黏膜 外胚层间充质干细胞 音猬因子 基因转染 神经样细胞 分化 脊髓损伤

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氯倍他索对大鼠神经干细胞自发分化的影响

10

作者 史文涛 戴瑶 +2 位作者 毕士奇 赵有发 张志坚 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期567-571,共5页

目的:研究氯倍他索(Clo)对神经干细胞自发分化的影响,为Clo治疗中枢性神经损伤提供医学理论基础。方法:利用无血清悬浮法分离培养及鉴定大鼠NSCs;选取第三代NSCs,以含10%胎牛血清完全培养基贴壁诱导分化7 d,培养基中各加入同体积二甲基... 目的:研究氯倍他索(Clo)对神经干细胞自发分化的影响,为Clo治疗中枢性神经损伤提供医学理论基础。方法:利用无血清悬浮法分离培养及鉴定大鼠NSCs;选取第三代NSCs,以含10%胎牛血清完全培养基贴壁诱导分化7 d,培养基中各加入同体积二甲基亚砜、2. 5、5μmol/L的Clo;免疫荧光染色和Western Blot方法检测NSCs分化后轴突膜蛋白(GAP-43)、酸性胶质蛋白(GFAP)、髓磷脂碱性蛋白(MBP)表达情况,进一步探讨Clo的作用机制。结果:分离培养的NSCs高表达Nestin; Clo作用组表达GAP-43和MBP较对照组明显提高(P <0. 05),GFAP表达水平低于对照组(P <0. 05),Clo作用组表达音猬因子(SHH)和锌指蛋白(Gli 1)均高于对照组(P <0.05)。结论:Clo可在体外通过SHH信号通路促进NSCs向神经元细胞和少突胶质细胞分化,与此同时Clo可抑制NSCs向星形胶质细胞分化。 展开更多

关键词 NSCS 氯倍他索 神经元细胞 星形胶质细胞 少突胶质细胞

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测量截骨联合间隙平衡全膝关节置换治疗膝骨关节炎

11

作者 毕士奇 崔学文 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2021年第9期37-38,共2页

探究膝骨关节炎治疗中测量截骨联合间隙平衡全膝关节置换治疗效果。方法:采集80例病人临床资料进行回顾性分析,40例测量截骨治疗纳入对照组,40例测量截骨联合间隙平衡全膝关节置换治疗纳入观察组,对比其临床治疗效果。结果:两组患者均... 探究膝骨关节炎治疗中测量截骨联合间隙平衡全膝关节置换治疗效果。方法:采集80例病人临床资料进行回顾性分析,40例测量截骨治疗纳入对照组,40例测量截骨联合间隙平衡全膝关节置换治疗纳入观察组,对比其临床治疗效果。结果:两组患者均顺利完成手术,且除股骨内后髁截骨厚度观察组显著大于对照组外(P<0.05),其他围术期观察指标差异无统计学意义(P>0.05);两组伸膝应力位张开角度差异不大(P>0.05),屈膝90°应力位张开角度观察组小于对照组(P<0.05);观察组并发症发生率5.00%,低于对照组20.00%(P<0.05);观察组术后6个月KSS评分、膝伸屈活动度高于对照组,WOMAC评分低于对照组(P<0.05)。结论:膝骨关节炎外科治疗中测量截骨联合间隙平衡的全膝关节置换方案临床效果更好,在并发症发生率减少、膝关节功能恢复、预后结局改善等方面存在积极影响。 展开更多

关键词 测量截骨 膝骨关节炎 间隙平衡 全膝关节置换

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SHH缓释的脊髓去细胞支架促进大鼠脊髓损伤修复 被引量：2

12

作者 陈平波 徐晓峰 +6 位作者 周焕高 毕士奇 史文涛 杨开元 张志坚 陈谦 杨文静 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期203-209,共7页

目的:研究可缓释音猬因子(sonic hedgehog,SHH)的脊髓去细胞支架(acellular spinal cord scaffolds,ASCSs)对大鼠脊髓损伤修复的效果。方法:(1)用物理和化学联合法制备ASCSs,并检测其效果。(2)使用京尼平(genipin,GP)作为交联剂,体外制... 目的:研究可缓释音猬因子(sonic hedgehog,SHH)的脊髓去细胞支架(acellular spinal cord scaffolds,ASCSs)对大鼠脊髓损伤修复的效果。方法:(1)用物理和化学联合法制备ASCSs,并检测其效果。(2)使用京尼平(genipin,GP)作为交联剂,体外制备缓释SHH的ASCSs(ASCSs-GP-SHH),探究其缓释效果。(3)建立大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,随机分为四组(每组20只):单纯SCI组,ASCSs组,ASCSs-GP组(GP交联的ASCSs),ASCSs-GP-SHH组。术后每周记录BBB评分,评估功能恢复。术后12周取出损伤处脊髓组织,行免疫组化和Western Blot检测损伤处相关蛋白Nestin(巢蛋白),GAP43(生长相关蛋白),MBP(髓磷脂碱性蛋白),NF200(神经丝蛋白),GFAP(胶质纤维酸性蛋白)的表达。结果:(1)物理及化学联法制备ASCSs效果良好;(2)ASCSs-GP-SHH具有良好的缓释SHH的性能;(3)ASCS-GP-SHH组BBB评分从术后到12周较其他组高(P<0.05);(4)免疫组化及HE染色结果显示:ASCS-GP-SHH组脊髓横断处有神经元再生。SCI组神经元凋亡明显,纤维瘢痕及空洞大,ASCS-GP组较ASCS组稍好,ASCS组较SCI组稍好;(5)Western Blot结果显示:ASCS-GP-SHH组Nestin,GAP43,MBP,NF200表达高于SCI、ASCS-GP、ASCS组(P<0.05),而GFAP低于SCI、ASCS-GP、ASCS组(P<0.05)。结论:物理和化学联合制备可以有效的制备ASCSs,ASCSs-GP-SHH缓释效果良好,对大鼠脊髓损伤的修复有明显的促进作用。 展开更多

关键词 音猬因子 脊髓去细胞支架 京尼平 缓释 脊髓损伤

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