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Kissl蛋白及其受体GPR54在结直肠癌中表达的意义 被引量:13
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作者 林素 戴起宝 陈绍勤 《肿瘤研究与临床》 CAS 2010年第6期406-409,共4页
目的 探讨Kissl蛋白及其受体GPR54与结直肠癌转移的关系.方法 应用免疫组织化学SP法检测121例结直肠癌原发灶及相应61例淋巴结转移灶中Kissl、GPR54的表达.结果 Kissl在伴淋巴结转移的结直肠癌原发灶表达率(52.46%)低于无淋巴结转移者... 目的 探讨Kissl蛋白及其受体GPR54与结直肠癌转移的关系.方法 应用免疫组织化学SP法检测121例结直肠癌原发灶及相应61例淋巴结转移灶中Kissl、GPR54的表达.结果 Kissl在伴淋巴结转移的结直肠癌原发灶表达率(52.46%)低于无淋巴结转移者(71.67%),差异具有统计学意义(P=0.030) 伴远处器官转移者表达率(28.57%)低于无远处器官转移者(69.00%),差异具有统计学意义(P=0.001) 结直肠癌淋巴结转移灶中Kissl表达率(22.95%)低于其原发灶Kissl的表达率(52.46%),差异具有统计学意义(P=0.001).GPR54在结直肠癌原发灶中的表达与有无淋巴结转移及远处器官转移无关(P〉0.05).结论 Kissl表达下降与结直肠癌的转移密切相关,可能参与肿瘤转移的调控. 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 肿瘤转移 Kiss1 GPR54 免疫组织化学
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肿瘤转移抑制基因Kiss一1对构建原代人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型的影响 被引量:12
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作者 陈绍勤 林素 +1 位作者 戴起宝 涂明美 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期209-211,共3页
目的构建原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤模型(肝转移模型),探讨Kiss一1基因在移植瘤存活、生长和转移中的作用。方法选择Kiss一1基因阳性和阴性表达的人结直肠癌组织块各l块,分别建立裸鼠皮下移植瘤和裸鼠盲肠原位移植瘤模型,... 目的构建原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤模型(肝转移模型),探讨Kiss一1基因在移植瘤存活、生长和转移中的作用。方法选择Kiss一1基因阳性和阴性表达的人结直肠癌组织块各l块,分别建立裸鼠皮下移植瘤和裸鼠盲肠原位移植瘤模型,并观察移植瘤生长和肝转移。结果裸鼠第2代皮下移植瘤模型构建成功率Kiss一1基因阳性组为37.50%,阴性组为100.00%,差异有统计学意义(P〈0.05);裸鼠盲肠原位移植瘤模型构建成功率,第1代为41.67%(Kiss一1阳性组为12.25%,阴性组75.00%),第2代为75.00%(Kiss一1阳性组为56.25%,阴性组为93.75%);Kiss一1阴性组成功率均高于阳性组,差异有统计学意义(P〈0.05);皮下移植瘤模型和第1代盲肠原位移植瘤模型中均未发现肝转移,第2代盲肠原位移植瘤模型中肝转移率Kiss一1阳性组为33.33%,阴性组80.00%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Kiss一1基因表达缺失有助于提高原代人结直肠癌裸鼠盲肠原位移植瘤肝转移模型构建的成功率,提示它具有抑制结直肠癌移植瘤存活、生长和转移的作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 移植瘤 Kiss一1
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Kiss-1基因通过NF-κB信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞迁移 被引量:7
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作者 陈绍勤 苏小宝 +3 位作者 高骥 韩宏景 陈志华 林素 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1643-1648,共6页
目的探讨Kiss-1基因抑制人结直肠癌细胞转移能力与NF-κB信号传导通路的相关性。方法构建重组p GC-LV-Kiss-1-EGFP慢病毒载体并转染人结直肠癌HCT116细胞,实验分为空白对照组(CON组)、慢病毒空载体阴性对照组(NC组)、Kiss-1基因过表达组... 目的探讨Kiss-1基因抑制人结直肠癌细胞转移能力与NF-κB信号传导通路的相关性。方法构建重组p GC-LV-Kiss-1-EGFP慢病毒载体并转染人结直肠癌HCT116细胞,实验分为空白对照组(CON组)、慢病毒空载体阴性对照组(NC组)、Kiss-1基因过表达组(OE组)。CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测转染前后细胞增殖能力的变化,Transwell法分别检测转染前后细胞的侵袭和迁移能力的变化。Western-blot法检测转染前后NF-κB信号传导通路中抑制性蛋白I-κB以及下游效应蛋白MMP-9表达量的变化。结果 OE组HCT116细胞中I-κB的表达含量较CON组、NC组明显升高(P<0.05),下游效应蛋白MMP-9的表达量明显下降(P<0.05),差异具有统计学意义。OE组较CON组、NC组细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),细胞侵袭、迁移能力亦出现明显抑制(P<0.05)。结论重组p GC-LV-Kiss-1-EGFP慢病毒转染人结直肠癌HCT116细胞后,可能通过NF-κB信号传导通路途径抑制其增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 人结直肠癌 KISS-1 NF-ΚB MMP-9 转移
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后疫情时代临床专业型硕士研究生科研能力培养的思考 被引量:2
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作者 陈绍勤 陈志华 +3 位作者 林素 翁翔巍 林桦 高骥 《卫生职业教育》 2023年第3期6-8,共3页
针对后疫情时代临床专业型硕士研究生培养中存在的问题,提出加强研究生临床科研能力培养,构建适应时代特点的研究生培训机制,完善研究生科研能力评价体系。
关键词 临床专业型硕士研究生 科研能力 医学教育
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小分子干扰RNA沉默人结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响 被引量:6
5
作者 陈绍勤 陈昌江 +2 位作者 戴起宝 林素 陈志华 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期2101-2103,共3页
目的 观察小于扰RNA(siRNA)沉默结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响,以及细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学行为的变化.方法 利用脂质体lipofectamineTM 2000将siRNA稳定转染结直肠癌HT-29细胞,实验分为干扰组、阴性... 目的 观察小于扰RNA(siRNA)沉默结直肠癌HT-29细胞TCF21基因对Kiss-1基因表达的影响,以及细胞增殖、侵袭及迁移能力等生物学行为的变化.方法 利用脂质体lipofectamineTM 2000将siRNA稳定转染结直肠癌HT-29细胞,实验分为干扰组、阴性对照组、空白对照组;应用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)与Western blot技术检测TCF21与Kiss-1基因mRNA与蛋白的表达水平,分别采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法和Transwell小室法检测干扰前后细胞增殖、侵袭与迁移能力的变化.结果 siRNA干扰后成功沉默了HT-29细胞TCF21基因的表达,Kiss-1基因mRNA的表达量为0.58 ±0.02,较对照组的1.00±0.00明显降低(P<0.05),蛋白表达量为0.3491±0.0009,与对照组比较(0.8485 ±0.0016)亦出现明显下降(P<0.05),同时细胞增殖、侵袭及迁移能力均明显增强(P<0.01).结论 沉默TCF21基因的表达可以下调结直肠癌细胞Kiss-1基因的表达水平,并导致相应生物学行为的变化,因此TC F21基因可能是Kiss-1基因的上游调控因子. 展开更多
关键词 结直肠癌 小干扰RNA TCF21 KISS-1 生物学行为
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5-杂氮-2'-脱氧胞苷对人结直肠癌HCT116细胞KISS1基因表达及侵袭迁移的影响 被引量:5
6
作者 陈绍勤 陈志华 +1 位作者 林素 戴起宝 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期26-32,共7页
目的:应用甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)干预人结直肠癌HCT116细胞,分析KISS1基因启动子甲基化与KISS1表达的关系及对细胞生物学特性的影响。方法:分别采用甲基化特异性-PCR、实时荧... 目的:应用甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-dC)干预人结直肠癌HCT116细胞,分析KISS1基因启动子甲基化与KISS1表达的关系及对细胞生物学特性的影响。方法:分别采用甲基化特异性-PCR、实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测不同剂量的5-Aza-dC干预不同时间后HCT116细胞中KISS1基因启动子的甲基化状态、mRNA和蛋白表达的影响;并应用Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移能力的变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞增殖能力的变化。结果:5-Aza-dC干预后,HCT116细胞KISS1基因启动子甲基化转为阴性。5-Aza-dC干预5 d后,各个浓度处理组KISS1 mRNA及蛋白的表达量均较对照组有明显增高(P<0.05),且随着浓度的增加,mRNA和蛋白的表达量逐渐上调,但5μmol/L组与10μmol/L组之间,差异无统计学意义(P>0.05);干预后各组细胞的侵袭和迁移能力也较对照组明显下降(P<0.05)。结论:DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC能够逆转KISS1基因启动子的甲基化,并通过上调KISS1基因表达抑制结直肠癌HCT116细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 脱氧胞苷 甲基化 肿瘤转移 KISS1基因
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Kiss-1基因启动子甲基化与结直肠癌的关系 被引量:4
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作者 陈志华 戴起宝 +1 位作者 陈绍勤 林素 《肿瘤基础与临床》 2012年第2期101-104,共4页
目的探讨结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态与临床病理学特征的关系及临床意义。方法采用甲基化特异性PCR检测142例正常结直肠组织、23例结直肠腺瘤组织、73例结直肠癌组织和相应癌旁组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态。结果结... 目的探讨结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态与临床病理学特征的关系及临床意义。方法采用甲基化特异性PCR检测142例正常结直肠组织、23例结直肠腺瘤组织、73例结直肠癌组织和相应癌旁组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态。结果结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性率为82.2%,癌旁组织为30.1%,结直肠腺瘤组织为21.7%,正常结直肠组织为6.3%,总体比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kiss-1基因启动子甲基化阳性率与结直肠癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及远处转移有关(P<0.05)。结论 Kiss-1基因启动子甲基化可能促进结直肠癌的发生、发展与转移,Kiss-1基因启动子甲基化水平有可能成为评估结直肠癌转移风险及预后的指标之一。 展开更多
关键词 结直肠癌 KISS-1基因 甲基化 转移
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结直肠癌细胞Kiss-1基因表达在X线照射后的变化及其与肿瘤细胞增殖和凋亡的关系 被引量:3
8
作者 陈绍勤 涂明美 +2 位作者 戴起宝 林素 柯春林 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2012年第5期508-511,共4页
目的研究X线照射后人结直肠癌SW480细胞中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达水平变化及其对细胞增殖和凋亡能力的影响。方法SW480细胞分为对照组(0Gy)和不同照射剂量(2、4、6和8Gy)的实验组。实验组经6-MVX线照射后48h,应用细胞免疫组织... 目的研究X线照射后人结直肠癌SW480细胞中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达水平变化及其对细胞增殖和凋亡能力的影响。方法SW480细胞分为对照组(0Gy)和不同照射剂量(2、4、6和8Gy)的实验组。实验组经6-MVX线照射后48h,应用细胞免疫组织化学、实时定量PCR法检测细胞中Kiss.1蛋白及mRNA水平.通过软琼脂集落形成实验和流式细胞法检测细胞增殖和凋亡情况。结果与对照组相比,2、4Gy剂量组细胞Kiss-1蛋白表达无明显改变(P〉0.05).6、8Gv剂量组表达明显上调(P〈0.05);在2、4、6Gy剂量组细胞瞄SS-1基因mRNA水平上调(P〈0.05),8Gy剂量组则无明显改变(P〉0.05);与对照组相比,各剂量组细胞克隆形成数均明显减少(P〈0.05):4、6、8Gy剂量组细胞凋亡率增加(P〈0.05)。2Gv剂量组细胞凋亡率无明显改变(P〉0.05)。结论X线照射有可能上调SW480细胞Kiss-1基因的表达.同时残存癌细胞凋亡率增高、增殖力下降。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 电离辐射 基因 KISS-1 细胞增殖 细胞凋亡
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慢病毒转染KISS1基因对人结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响 被引量:3
9
作者 陈志华 林素 +3 位作者 韩宏景 苏小宝 陈绍勤 戴起宝 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期577-581,I0004,共6页
目的:探讨慢病毒转染KISS1基因过表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并阐明其作用机制。方法:选取KISS1基因低表达结直肠癌细胞株,构建慢病毒载体并转染KISS1基因,分为对照组(PBS处理)、空载体组(转染空载体)和过表达... 目的:探讨慢病毒转染KISS1基因过表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并阐明其作用机制。方法:选取KISS1基因低表达结直肠癌细胞株,构建慢病毒载体并转染KISS1基因,分为对照组(PBS处理)、空载体组(转染空载体)和过表达组(转染含KISS1载体)。荧光显微镜检查转染的荧光率(MOI),Real-time PCR和Western blotting法检测各组细胞中KISS1 mRNA和蛋白(metastin)的表达量,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞侵袭和迁移能力。结果:LoVo、SW620、SW480、HCT-116和HT29细胞中,HCT-116细胞中KISS1 mRNA和蛋白表达量相对最低,因此筛选其作为研究载体。包装有KISS1基因的慢病毒感染HCT-116细胞后,能够稳定表达增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因,MOI均>80%。与对照组和空载体组比较,过表达组细胞中KISS1 mRNA和蛋白表达量明显升高(P<0.05),细胞增殖活力明显降低(P<0.05),侵袭能力和迁移能力亦明显下降(P<0.05);与对照组比较,空载体组细胞增殖活力、侵袭能力和迁移能力差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒转染KISS1基因能够过表达KISS1蛋白及抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力,其机制可能与KISS1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 KISS1基因 转染 侵袭 转移
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不同消化道重建方式对远端胃癌合并2型糖尿病患者术后血糖的影响 被引量:3
10
作者 林素 陈绍勤 +1 位作者 陈志华 戴起宝 《中国医学创新》 CAS 2014年第33期40-42,共3页
目的:探讨不同消化道重建方式对远端胃癌合并2型糖尿病患者术后血糖的影响。方法:选取本院79例远端胃癌合并2型糖尿病的患者,对其行根治性远端胃大部切除术,按消化道重建方式的不同分为三组,A组19例:毕Ⅰ式吻合;B组38例:单纯毕Ⅱ式吻合;... 目的:探讨不同消化道重建方式对远端胃癌合并2型糖尿病患者术后血糖的影响。方法:选取本院79例远端胃癌合并2型糖尿病的患者,对其行根治性远端胃大部切除术,按消化道重建方式的不同分为三组,A组19例:毕Ⅰ式吻合;B组38例:单纯毕Ⅱ式吻合;C组22例:毕Ⅱ式吻合+空肠侧侧吻合。比较三组患者术后血糖的变化情况。结果:A组血糖治疗有效率为26.3%,B组为81.6%,C组为86.4%。B、C组术后对血糖控制的有效率均高于A组(P<0.05),而B、C组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。B、C组术后1、6、12个月的FPG、2 h PG、Hb Alc与A组比较差异均有统计学意义(P<0.05);而B、C组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:毕Ⅱ式吻合能够有效控制术后的血糖,并推测前肠短路导致肠激素分泌减少可能是手术治疗糖尿病的主要原因。 展开更多
关键词 胃癌 2型糖尿病 消化道重建 血糖
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结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化对其表达水平的影响及其临床意义 被引量:2
11
作者 陈志华 林素 +2 位作者 陈绍勤 戴起宝 韩宏景 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1074-1079,共6页
目的:研究结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响,分析其与结直肠癌临床病理特性的关系及临床意义。方法:收集126例结直肠癌组织及其癌旁正常结直肠组织,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测Kiss-1基因启动子区甲... 目的:研究结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响,分析其与结直肠癌临床病理特性的关系及临床意义。方法:收集126例结直肠癌组织及其癌旁正常结直肠组织,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测Kiss-1基因启动子区甲基化状态,采用实时荧光定量PCR和Western blotting法检测结直肠癌组织和正常结直肠组织中Kiss-1基因mRNA和蛋白的表达水平。结果:结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性率(83.33%)高于癌旁正常结直肠组织(30.16%)(P<0.05)。结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化阳性组Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平均低于Kiss-1基因启动子甲基化阴性组(P<0.05)。结直肠癌组织中T3+T4组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于T1+T2组(P<0.05),但Kiss-1基因mRNA和蛋白表达水平低于T1+T2组(P<0.05);中和低分化组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率高于高分化组(P<0.05),Kiss-1基因mRNA表达水平低于高分化组(P<0.05);淋巴结转移组甲基化阳性率高于无淋巴结转移组(P<0.05),但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无淋巴结转移组(P<0.05);远处转移组Kiss-1基因启动子甲基化阳性率显著高于无远处转移组(P<0.05),但Kiss-1基因mRNA及蛋白表达水平低于无转移组(P<0.05)。Kiss-1基因启动子甲基化阳性率与患者的性别、年龄、肿瘤部位和大小无明显关联(P>0.05)。结论:结直肠癌组织中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达水平及结直肠癌的恶性转化特性(特别是转移)有关联,Kiss-1基因甲基化状态有望成为评估结直肠癌转移风险的重要指标。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 KISS-1基因 DNA甲基化 转移
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PKC信号通路在KISS1基因抑制人结直肠癌HCT116细胞侵袭迁移的作用 被引量:2
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作者 陈志华 韩宏景 +4 位作者 林素 苏小宝 戴起宝 陈绍勤 吴佩文 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期1448-1452,共5页
目的:探讨PKC信号通路在KISS1基因发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭迁移的作用。方法:构建p GC-LV-KISS1-EGFP慢病毒载体感染人结直肠癌细胞HCT116,分空白对照组(CON组)、空载体对照组(NC组)、过表达组(OE组)。q RT-PCR和Western blot检... 目的:探讨PKC信号通路在KISS1基因发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭迁移的作用。方法:构建p GC-LV-KISS1-EGFP慢病毒载体感染人结直肠癌细胞HCT116,分空白对照组(CON组)、空载体对照组(NC组)、过表达组(OE组)。q RT-PCR和Western blot检测KISS1基因m RNA和Metastin、PKC信号通路的关键分子PKCα、PKCβII及下游E钙黏蛋白表达量的变化。Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力的变化。结果:转染后能够稳定表达报告基因EGFP,荧光率均>80%,且OE组KISS1基因m RNA、Metastin表达量较CON组和NC组均明显升高(P<0.05)。转染后,PKCβⅡ的蛋白表达量(0.288 2±0.023 7)较CON组(0.530 9±0.013 3)和NC组(0.511 7±0.008 5)明显下降(P<0.05),而PKCα的表达水平无明显变化(P>0.05);下游效益蛋白E钙黏蛋白表达量(0.633 2±0.017 4)较CON组(0.232 2±0.019 6)和NC组(0.252 3±0.018 2)明显升高(P<0.05)。OE组细胞侵袭、迁移能力较CON组和NC组均明显下降(P<0.05)。结论:KISS1基因可能通过下调PKCβⅡ后上调下游蛋白E钙黏蛋白的表达而发挥抑制结直肠癌细胞HCT116侵袭、迁移作用,有望成为防治结直肠癌转移的新靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 KISS1基因 PKC 信号通路 转移
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X线照射对人结直肠癌细胞株SW480中Kiss-1基因表达的影响 被引量:2
13
作者 涂明美 陈绍勤 +2 位作者 戴起宝 柯春林 林素 《肿瘤基础与临床》 2011年第2期95-97,共3页
目的探讨X线照射对体外培养人结直肠癌细胞株SW480中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达的影响。方法应用SYBRGreen实时定量PCR检测、相对定量法分析不同剂量X线照射后24、48 h SW480中Kiss-1 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,照射后24 h,各... 目的探讨X线照射对体外培养人结直肠癌细胞株SW480中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达的影响。方法应用SYBRGreen实时定量PCR检测、相对定量法分析不同剂量X线照射后24、48 h SW480中Kiss-1 mRNA的表达水平。结果与对照组相比,照射后24 h,各照射组Kiss-1 mRNA表达的差异均无统计学意义(P>0.05);照射后48 h,2、4、6 Gy组Kiss-1 mRNA表达上调(P<0.05),8 Gy组Kiss-1 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 X线照射不会导致结直肠癌细胞Kiss-1基因表达下调,放疗可能不会增加结直肠癌转移的风险。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 电离辐射 肿瘤转移 KISS-1 聚合酶链反应
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Kiss-1基因下调丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路抑制人结直肠癌HCT116细胞转移能力 被引量:1
14
作者 高骥 苏小宝 +2 位作者 林素 陈志华 陈绍勤 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1988-1992,共5页
目的观察Kiss-1基因通过下调促细胞丝裂原细胞外激酶-胞外信号调节激酶.丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路(MEK—ERK—MAPK)途径对人结直肠癌HCTl16细胞侵袭、转移能力的影响。方法重组LV.Kiss-1基因慢病毒为载体转染人结直肠癌HCT11... 目的观察Kiss-1基因通过下调促细胞丝裂原细胞外激酶-胞外信号调节激酶.丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路(MEK—ERK—MAPK)途径对人结直肠癌HCTl16细胞侵袭、转移能力的影响。方法重组LV.Kiss-1基因慢病毒为载体转染人结直肠癌HCT116细胞,实验分为空白对照组(CON组)、慢病毒空载体阴性对照组(NC组)、Kiss-1基因过表达组(OE组)。细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染前后细胞增殖能力的变化,Transwell法分别检测转染前后细胞的侵袭和迁移能力的变化。应厢Westernblot法检测3组细胞中MAPK信号通路的关键分子丝裂原细胞外激酶(MEK)表达含量的变化以及下游效应蛋白肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化水平的变化。结果OE组HCTll6细胞中MEK的表达含量为0.3920±0.0107,较CON组的0.8284±0.0167、NC组的0.8405±0.0092明显降低(P〈0.05),下游效应蛋白MLC磷酸化水平OE组为0.1783±0.0072,较CON组的0.5246±0.0122、NC组的0.5441-4-0.0135亦明显下降(P〈0.05),差异有统计学意义。OE组较CON、NC组细胞增殖受到明显抑制(P〈0.05),细胞侵袭、迁移能力亦出现明显抑制(P〈0.05)。结论LV-Kiss-1基因慢病毒转染人结直肠癌HCTl16细胞后,可能通过MEK—ERK—MAPK信号传导通路途径抑制其增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 结直肠癌 Kiss-1 丝裂原细胞外激酶.胞外信号调节激酶一丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路 转移
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结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化与Kiss-1基因表达的关系
15
作者 林素 陈志华 +1 位作者 陈绍勤 戴起宝 《黑龙江医药》 CAS 2013年第6期1007-1010,共4页
目的:研究结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测73例结直肠癌、正常结直肠组织和人结直肠癌细胞HCT116、SW480、W1116、LoVo中Kiss-1基因启动子甲基化状态,应用realtime... 目的:研究结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化状态对Kiss-1基因表达的影响。方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测73例结直肠癌、正常结直肠组织和人结直肠癌细胞HCT116、SW480、W1116、LoVo中Kiss-1基因启动子甲基化状态,应用realtime-PCR、Western-blot技术检测相应组织和细胞中Kiss-1基因mRNA和蛋白质(Metastine)的表达量。结果:结直肠癌中Kiss-1基因甲基化阳性率(82.19%)高于正常组织(6.31%)(P<0.05);结直肠癌组织中,甲基化阳性组Kiss-1基因mRNA和Metastine表达量均明显低于甲基化阴性组(P<0.05)。而HCT116、SW116和SW480细胞中Kiss-1基因启动子甲基化阳性,LoVo细胞甲基化阴性;定量分析Kiss-1基因mRNA和matestin表达量,结果显示LoVo>SW480>SW1116>HCT116,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:结直肠癌中Kiss-1基因启动子甲基化可能引起Kiss-1基因表达下调。 展开更多
关键词 结直肠癌 KISS-1基因 甲基化
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放射治疗对直肠癌组织中肿瘤转移抑制基因Kiss-1表达的影响
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作者 柯春林 林素 +2 位作者 陈绍勤 戴起宝 涂明美 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第6期1151-1152,共2页
目的:探讨放射治疗对直肠癌组织中Kiss-1基因表达的影响及意义。方法:应用免疫组化SP法检测29例放射治疗前、后直肠癌组织中Kiss-1基因的表达,通过图像分析系统(Image-Pro Plus 6.0)进行定量分析。结果:放射治疗前直肠癌组织中Kiss-1基... 目的:探讨放射治疗对直肠癌组织中Kiss-1基因表达的影响及意义。方法:应用免疫组化SP法检测29例放射治疗前、后直肠癌组织中Kiss-1基因的表达,通过图像分析系统(Image-Pro Plus 6.0)进行定量分析。结果:放射治疗前直肠癌组织中Kiss-1基因表达水平的图像分析灰度值为160.81±2.78,放疗后为158.04±3.24,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:放射治疗对直肠癌中肿瘤转移抑制基因Kiss-1的表达无明显影响,推测放射治疗不会增加直肠癌转移的风险。 展开更多
关键词 直肠癌 放射 KISS-1 转移 免疫组化
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UHRF1通过WNT/MMP9信号通路抑制结直肠癌细胞的侵袭和迁移
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作者 陈志华 郑艳 +1 位作者 林素 陈绍勤 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第11期1075-1083,共9页
目的探索UHRF1基因与结直肠癌(CRC)患者临床病理特性的关系,慢病毒转染过表达和敲减UHRF1对CRC细胞增殖、侵袭及迁移的影响及可能的信号通路。方法免疫组织化学和RT-PCR法检测112例CRC癌组织与癌旁组织UHRF1的表达。构建慢病毒转染过表... 目的探索UHRF1基因与结直肠癌(CRC)患者临床病理特性的关系,慢病毒转染过表达和敲减UHRF1对CRC细胞增殖、侵袭及迁移的影响及可能的信号通路。方法免疫组织化学和RT-PCR法检测112例CRC癌组织与癌旁组织UHRF1的表达。构建慢病毒转染过表达和敲减UHRF1载体,分别转染SW480和HCT116细胞株,RT-PCR和Western blot检测转染前后及IWP-2(WNT拮抗剂)和HLY78(WNT活化剂)干预前后的UHRF1、WNT信号通路关键分子和MMP9的表达。EDU检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果(1)TCGA数据库和临床数据中,癌组织中UHRF1 m RNA和蛋白表达均高于正常组织。UHRF1表达量与TNM分期、N和M分期密切相关。TCGA中UHRF1低表达患者有更长的5年OS和疾病相关存活时间(DSS),UHRF1预测1、3和5年OS的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.634、0.652和0.771;在临床数据中3年OS也有相同生存获益,UHRF1高表达是CRC不良预后因素。(2)过表达UHRF1后,SW480中WNT3a、GSK3β和MMP9分子表达明显升高,p-β-catenin表达下降(P<0.05);敲减UHRF1后,HCT116细胞中WNT3a、GSK3β、MMP9表达下降,而p-β-catenin表达升高(P<0.05);分别用IWP-2和HLY78进行“拯救”实验,能够获得一致结果。(3)过表达组细胞增殖、迁移和侵袭能力明显高于对照组;IWP-2处理后,细胞增殖、迁移及侵袭能力则受到抑制。敲减实验呈现与过表达实验相反的结果。结论UHRF1在CRC发生发展中可能具有重要作用,UHRF1高表达可能是CRC不良预后因素,UHRF1可能通过WNT/MMP9信号通路来影响CRC的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 UHRF1 WNT/MMP9信号通路 增殖 侵袭
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