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胚胎干细胞试验模型用于白藜芦醇胚胎发育毒性的评价 被引量：5
1
作者 方海琴 于洲 +5 位作者 杨嵘 荣靖 侯明月 刘杰 束玉磊 彭双清 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期89-94,共6页
目的依据胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ESC)具有向心肌细胞分化的能力,建立体外分化发育毒性评价模型,并应用其评价受试物白藜芦醇胚胎发育毒性。方法悬滴转悬浮法培养D3系胚胎干细胞(ESC-D3),观察受试物对ESC-D3分化能力影响,结合MT... 目的依据胚胎干细胞(Embryonic Stem Cell,ESC)具有向心肌细胞分化的能力,建立体外分化发育毒性评价模型,并应用其评价受试物白藜芦醇胚胎发育毒性。方法悬滴转悬浮法培养D3系胚胎干细胞(ESC-D3),观察受试物对ESC-D3分化能力影响,结合MTT法判断受试物对ESC-D3及小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)的细胞毒性结果,预测受试物的发育毒性。用已知无胚胎发育毒性化合物青霉素(Penicillin,PN),强胚胎发育毒性化合物氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)等对模型进行有效性验证,并将经过验证的EST模型用于受试物白藜芦醇的发育毒性评价。结果利用建立的EST模型对5-FU和PN的发育毒性进行评价,结果为5-FU为强胚胎发育毒性,PN为无胚胎发育毒性,与文献报道一致。应用EST模型评价得出白藜芦醇对3T3细胞活力的半数抑制浓度IC503T3为27.93μg/ml,对D3细胞活力的半数抑制浓度IC50D3为28.02μg/ml,对D3细胞的半数分化抑制浓度ID50D3为158.97μg/ml,经EST模型判断公式计算得出该化合物无发育毒性化合物。结论建立的EST模型的有效性验证结果与ECVAM的结论一致,可用于胚胎发育毒性的筛选和评价;经EST模型评价,白藜芦醇为无胚胎发育毒性。 展开更多
关键词 胚胎干细胞实验 有效性验证 白藜芦醇 胚胎发育毒性
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消毒产品亚急性毒性试验SD大鼠血液生化正常参考值的建立 被引量：4
2
作者 贾栗 王以美 +3 位作者 何俊 束玉磊 李致远 彭双清 《中国消毒学杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期332-335,共4页
目的建立消毒产品亚急性毒性试验SD大鼠血液生化正常参考值范围。方法采用全自动生化分析仪及血细胞分析仪检测方法,对模型SD大鼠的12项血清生化指标及18项血液学指标进行评价,建立正常参考值范围。结果 SD大鼠10项血清生化指标雌雄性... 目的建立消毒产品亚急性毒性试验SD大鼠血液生化正常参考值范围。方法采用全自动生化分析仪及血细胞分析仪检测方法,对模型SD大鼠的12项血清生化指标及18项血液学指标进行评价,建立正常参考值范围。结果 SD大鼠10项血清生化指标雌雄性别差异显著(P<0.05),其中丙氨酸氨基转移酶等3项指标为雄性大鼠高于雌性;总蛋白等7项指标为雄性大鼠低于雌性。SD大鼠8项血液学指标也存在雌雄性别差异(P<0.05),除平均红细胞血红蛋白浓度雄性大鼠低于雌性之外,白细胞等其余7项血液学指标均为雄性高于雌性。结论试验模型大鼠中多数血液生化指标存在雌雄性别差异,本研究建立的SPF级SD大鼠的血液生化正常参考值,可为消毒产品毒性评价提供参考。 展开更多
关键词 消毒产品 亚急性毒性试验 SD大鼠 血液生化指标 参考值
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T-2毒素对小鼠胚胎干细胞的氧化损伤作用 被引量：4
3
作者 方海琴 何俊 +5 位作者 赵君 李利忠 赵增明 束玉磊 耿雪 彭双清 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期165-169,共5页
目的应用小鼠胚胎干细胞(mESC)作为模型探讨T-2毒素对mESC的作用靶点与作用机制。方法选用0.5 ng/ml T-2毒素处理分化过程中的mESC 24、72和120 h,流式细胞术检测mESC的活性氧簇(ROS)的生成,比色法检测mESC的抗氧化防御酶活性,包括超氧... 目的应用小鼠胚胎干细胞(mESC)作为模型探讨T-2毒素对mESC的作用靶点与作用机制。方法选用0.5 ng/ml T-2毒素处理分化过程中的mESC 24、72和120 h,流式细胞术检测mESC的活性氧簇(ROS)的生成,比色法检测mESC的抗氧化防御酶活性,包括超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的活力变化,以及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量。结果 0.5 ng/ml T-2毒素作用72与120 h,mESC中ROS大量蓄积,抗氧化防御酶(SOD、GPx)活力下降,MDA增加,其效应呈现时间依赖关系。自由基清除剂(Trolox,200μmol/L)预处理可以降低T-2毒素对mESC抗氧化防御酶活力的抑制作用,减轻T-2毒素引起的mESC中ROS的蓄积以及MDA的增加。结论低剂量T-2毒素染毒引起mESC的氧化损伤是其发育毒性的重要机制之一。 展开更多
关键词 T-2毒素 发育毒性 小鼠胚胎干细胞 活性氧 氧化损伤
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汉阳PM_(2.5)对人胚胎干细胞来源的成纤维细胞的遗传毒性研究 被引量：3
4
作者 何俊 赵增明 +6 位作者 赵君 田冬冬 周维 苑晓燕 殷健 束玉磊 彭双清 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期436-439,共4页
目的研究汉阳地区PM2.5对人胚胎干细胞来源的成纤维细胞(EBf-H9细胞)的遗传毒性,验证EBf-H9细胞作为遗传毒性评价模型的可行性,拟为遗传毒性评价提供一个新的可选细胞模型。方法不同浓度PM2.5作用于EBfH9细胞24 h,应用CCK-8试剂盒及LDH... 目的研究汉阳地区PM2.5对人胚胎干细胞来源的成纤维细胞(EBf-H9细胞)的遗传毒性,验证EBf-H9细胞作为遗传毒性评价模型的可行性,拟为遗传毒性评价提供一个新的可选细胞模型。方法不同浓度PM2.5作用于EBfH9细胞24 h,应用CCK-8试剂盒及LDH试剂盒检测EBf-H9细胞的细胞毒性和LDH漏出率;采用单细胞凝胶电泳试验及微核试验评价PM2.5对EBf-H9细胞DNA和染色体损伤程度。结果细胞毒性试验结果显示,随着PM2.5剂量的增加,细胞存活率逐渐降低,而LDH漏出率呈先增加后降低的趋势,且存在剂量-效应关系;单细胞凝胶电泳试验与双核细胞微核试验结果显示,随着PM2.5剂量的增加,彗星拖尾率与双核细胞微核率逐渐上升,且存在明显的剂量-效应关系。结论在本试验条件下,汉阳PM2.5引起EBf-H9细胞出现DNA和染色体损伤,初步证实EBf-H9细胞可作为一种新的遗传毒性评价候选细胞模型。 展开更多
关键词 PM2.5 胚胎干细胞 成纤维细胞 细胞毒性 遗传毒性
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雌二醇诱导雌性大鼠真性性早熟模型的建立 被引量：3
5
作者 杨嵘 张立实 +6 位作者 王以美 张丽 黄丽娜 张廷芬 束玉磊 赵君 彭双清 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期279-283,共5页
目的应用17β-雌二醇(E2)建立雌性大鼠真性性早熟模型。方法 15日龄雌性SD仔大鼠采用ig给予雌二醇50μg.kg-1连续5 d制备性早熟模型。观察大鼠阴门开启平均日龄(VO)、第一个发情间期出现的平均日龄(D1)和性周期稳定后第一个发情期出现... 目的应用17β-雌二醇(E2)建立雌性大鼠真性性早熟模型。方法 15日龄雌性SD仔大鼠采用ig给予雌二醇50μg.kg-1连续5 d制备性早熟模型。观察大鼠阴门开启平均日龄(VO)、第一个发情间期出现的平均日龄(D1)和性周期稳定后第一个发情期出现的平均日龄(E1);测定血清中黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和雌激素(E2)水平;计算子宫、卵巢和阴道指数;逆转录PCR法测定下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)、Kiss-1、G蛋白偶联受体54(GPR54)mRNA和垂体GnRH受体(GnRHR)mRNA表达水平。结果 与溶剂对照组比较,模型组大鼠VO,D1和E1分别提前了14.6 d,14.5 d和11.3 d(P<0.05),阴道指数相对升高了151%(P<0.05);模型组大鼠血清中LH,FSH和E2水平明显升高(P<0.05);GnRH,Kiss-1,GPR54和GnRHR mRNA表达量均显著增加(P<0.05)。结论 应用17β-雌二醇可以使雌性大鼠正常的性发育提前,可以考虑用于建立真性性早熟模型。 展开更多
关键词 雌二醇 青春期 早熟 下丘脑-垂体系统
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芥子气诱导人皮肤成纤维细胞氧化应激的研究 被引量：1
6
作者 李漾 束玉磊 +6 位作者 周维 崔岚 殷健 闫夏贝 赵君 赵增明 彭双清 《解放军预防医学杂志》 CAS 2017年第12期1497-1501,共5页
目的研究芥子气对人皮肤真皮成纤维细胞的毒性作用,探讨氧化损伤在芥子气所致细胞毒性中的作用。方法采用胰酶消化法分离人皮肤真皮层成纤维细胞;采用CCK-8法检测芥子气对成纤维细胞增殖抑制的影响;采用DCFH-DA荧光染色法检测芥子气对... 目的研究芥子气对人皮肤真皮成纤维细胞的毒性作用,探讨氧化损伤在芥子气所致细胞毒性中的作用。方法采用胰酶消化法分离人皮肤真皮层成纤维细胞;采用CCK-8法检测芥子气对成纤维细胞增殖抑制的影响;采用DCFH-DA荧光染色法检测芥子气对细胞内ROS的影响;采用Annexin-PI双染法检测细胞凋亡。结果不同浓度芥子气作用于成纤维细胞24 h,对细胞的增殖具有明显抑制作用(P<0.05),并呈明显的剂量依赖性,其半数抑制浓度(IC50)为315μmol/L;随着芥子气染毒剂量的增加,细胞内ROS呈剂量依赖性增加;芥子气导致成纤维细胞发生凋亡,并呈明显剂量依赖性;细胞在芥子气和ROS清除剂的双重作用下存活率显著高于芥子气组。结论芥子气对皮肤成纤维细胞具有明显的细胞毒性作用,可导致ROS的产生,活性氧清除剂NAC可在一定程度上减轻芥子气对细胞的毒性作用。 展开更多
关键词 芥子气 成纤维细胞 ROS凋亡
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人诱导多能干细胞在药物早期毒性评价中的应用 被引量：1
7
作者 赵增明 何俊 +2 位作者 束玉磊 赵君 彭双清 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期614-620,共7页
人诱导多能干细胞与人胚胎干细胞相似,在体外可分化为各种类型的体细胞,其来源充足,可针对个人或某种疾病取材,为药物早期毒性评价体外替代方法提供了一个新的可选细胞模型。目前,利用人诱导多能干细胞获得的心肌细胞用于药物引起的心... 人诱导多能干细胞与人胚胎干细胞相似,在体外可分化为各种类型的体细胞,其来源充足,可针对个人或某种疾病取材,为药物早期毒性评价体外替代方法提供了一个新的可选细胞模型。目前,利用人诱导多能干细胞获得的心肌细胞用于药物引起的心率改变、QT间期延长和心肌损伤等心脏毒性评价;利用其获得的神经细胞,结合高通量、高内涵技术及电生理学技术,可用于药物引起的神经突出生长异常、电生理改变及神经发育毒性评价;利用人诱导多能干细胞可获得个体特异性的大量肝细胞,具有较高的细胞色素P450酶活性,能够比较真实的反映人肝细胞的代谢特征,用于评价药物肝细胞毒性;人诱导多能干细胞具有多能性,在体外可分化为外、中和内胚层,具有用于发育毒性评价的可能性,对三胚层相应标志分子的检测有助于发育毒性评价终点的确立;人诱导多能干细胞还可用作3D培养的种子细胞,构建三维立体组织和器官模型,用于药物早期毒性评价,进一步缩小细胞水平与体内水平评价结果的差异。 展开更多
关键词 诱导多能干细胞 药物评价 药物毒性
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间充质干细胞在军事医学领域的应用研究进展
8
作者 闫夏贝 何俊 +7 位作者 束玉磊 赵君 王以美 孙岩松 谢剑炜 徐华 赵增明 彭双清 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期453-458,共6页
间充质干细胞(MSC)是可在体外贴壁培养的、具有多向分化潜能的成体干细胞,可从多种组织中分离得到。研究表明,MSC具有组织修复、免疫调节、支持造血及旁分泌等生物学特性,目前已有大量研究将其应用于对中枢神经系统、循环及造血系统疾... 间充质干细胞(MSC)是可在体外贴壁培养的、具有多向分化潜能的成体干细胞,可从多种组织中分离得到。研究表明,MSC具有组织修复、免疫调节、支持造血及旁分泌等生物学特性,目前已有大量研究将其应用于对中枢神经系统、循环及造血系统疾病、移植物抗宿主病等疾病的治疗。该文综述了MSC在军事医学领域治疗急性放射病、造血系统损伤、胃肠综合征、皮肤损伤及混合伤等伤病的研究进展及应用前景。 展开更多
关键词 间充质干细胞 造血系统损伤 胃肠综合征 战时损伤
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糖网明目颗粒对大鼠长期毒性研究
9
作者 彭辉 赵增明 +10 位作者 贾栗 束玉磊 何俊 张廷芬 李利忠 何秀姝 刘晔 连增林 赵君 王以美 彭双清 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期978-983,共6页
目的观察大鼠连续灌胃给予糖网明目颗粒26周的毒性反应、程度及可逆性。方法连续灌胃给予SD大鼠糖网明目颗粒26周(以8.4、4.2和2.1 g/kg的高、中、低3个剂量给药3周,后调整为14.0、8.4和4.2 g/kg的高、中、低剂量给药23周),另设溶剂对照... 目的观察大鼠连续灌胃给予糖网明目颗粒26周的毒性反应、程度及可逆性。方法连续灌胃给予SD大鼠糖网明目颗粒26周(以8.4、4.2和2.1 g/kg的高、中、低3个剂量给药3周,后调整为14.0、8.4和4.2 g/kg的高、中、低剂量给药23周),另设溶剂对照组(蒸馏水),每组40只;每天观察大鼠一般状态、体征、饮食情况及尿、粪便,每周称体质量1次并计算摄食量;给药中期(13周)、给药结束(26周)及恢复期(4周)后进行血液学、血液生化学、血凝指标及病理组织学检查。结果与同期对照组相比,给药期间高、中、低剂量组雄性动物体质量出现小幅降低,高、中剂量组摄食量出现降低(P<0.05);高剂量MCHC、ALT、TBIL和Na+出现降低(P<0.05),TP、ALB和D-BIL增高(P<0.05);中剂量雄性动物胸腺质量与脏器系数降低(P<0.05),高剂量雄性动物肝脏、肾脏脏器系数等升高(P<0.05);病理镜检发现,各组动物肝脏、肾脏等脏器存在不同程度的慢性炎性细胞浸润灶,雄性动物前列腺间质炎性细胞浸润。以上的个别指标虽有统计学差异,但未见明显的剂量-毒性关系,且均在正常范围内波动;其他各项指标差异均无统计学意义,未见与药物作用有关的病理变化。结论在本实验条件下,糖网明目颗粒对SD大鼠的无毒性反应剂量(NOAEL)为14.0 g/kg体质量(相当于临床成人拟用剂量的50倍)。 展开更多
关键词 糖网明目颗粒 毒性 NOAEL 大鼠
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芥子气对人皮肤角质细胞DNA损伤效应的研究
10
作者 束玉磊 何俊 +7 位作者 闫夏贝 李漾 周维 张丽 赵君 赵增明 谢剑炜 彭双清 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第8期647-651,共5页
目的探究芥子气对人永生化表皮角质形成细胞(HacaT细胞)DNA损伤的毒性作用特征及机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度芥子气对HacaT细胞增殖的抑制作用,AnnexinⅤ-FITC法检测芥子气对HacaT细胞凋亡指数的影响,单细胞凝胶电泳法检测芥子气... 目的探究芥子气对人永生化表皮角质形成细胞(HacaT细胞)DNA损伤的毒性作用特征及机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度芥子气对HacaT细胞增殖的抑制作用,AnnexinⅤ-FITC法检测芥子气对HacaT细胞凋亡指数的影响,单细胞凝胶电泳法检测芥子气对HacaT细胞DNA的损伤,Western印迹法检测芥子气对HacaT细胞DNA损伤修复相关蛋白的影响。结果不同浓度芥子气作用HacaT细胞24 h后,对细胞的增殖均有抑制作用(P<0.05),并呈明显的剂量依赖性,其半数抑制浓度IC50值为121μmol/L;HacaT细胞的凋亡指数和彗星拖尾率随芥子气浓度的增加而增加;不同浓度芥子气染毒可导致DNA损伤修复相关蛋白表达量及活性的改变。结论芥子气对HacaT细胞具有明显的细胞毒性作用,可引起细胞凋亡并产生明显的DNA损伤,ATM-P53-γH2AX-PARP信号通路在芥子气导致DNA损伤修复过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 芥子气 人皮肤角质细胞 DNA损伤
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