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题名鲤鱼肝原代细胞的分离与培养方法
被引量:3
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作者
蒋丽辉
李意捷
傅志伟
崔倩
杨明
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机构
上海大学环境与化学工程学院
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出处
《渔业研究》
2017年第1期1-7,共7页
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基金
国家自然科学基金(No.31470554)
上海市教委创新项目(No.14YZ001)
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文摘
本研究在酶消化法的基础上,通过比较不同的肝组织分离和培养条件,获得鲤鱼肝原代细胞培养的最佳培养方法和条件。首先,结合细胞数量和台盼蓝染色所得的细胞存活率,比较了胰蛋白酶消化鲤鱼肝组织的不同反应温度和时间,结果表明:肝组织用0.25%(m/V)胰蛋白酶在25℃消化40 min时细胞分离效果最好。其次,经酶消化得到的肝原代细胞粗制液,设置4种不同的细胞纯化和培养条件:1)将细胞直接重悬于含10%胚牛血清(FBS)的L-15/DMEM培养基中培养;2)以10%鲤鱼血清取代培养基中的胚牛血清重悬细胞并培养;3)将细胞经Percoll液密度梯度离心纯化后,重悬于含10%胚牛血清的L-15/DMEM培养基中培养;4)细胞经Percoll纯化后,重悬于含10%鲤鱼血清的L-15/DMEM培养基中培养。利用光学显微镜观察肝细胞的形态,进而通过HE染色法检测,结果表明经Percoll纯化后,肝细胞纯度显著提高;采用MTS/PMS法检测肝细胞的增殖情况,结果表明鲤鱼血清代替胚牛血清培养细胞,肝细胞活力显著提高。本研究将为建立稳定的毒理学肝原代细胞实验模型奠定基础。
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关键词
鲤鱼
肝原代细胞
Percoll密度梯度离心
鱼血清
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Keywords
Cyprinus carpio
primary hepatocytes
Percoll density gradient centrifugation
fish serum
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分类号
S961.6
[农业科学—水产养殖]
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题名序进式教研提升体育作业设计的实效性研究
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作者
杜杨方红
林莉
李意捷
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机构
上海市松江一中
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出处
《上海课程教学研究》
2023年第S01期133-140,共8页
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文摘
上海市松江一中体育与健康学科教研组为了提升学生体育作业实效,使用深度教研工具量表,设计与实践了一系列层层递进的教研活动。每次教研活动都包括主题、内容、预期目标、问题与策略、待解决的问题、所使用的工具等,在教研设计与实施过程中,梳理和提炼每次教研活动的相关经验,使深度教研工具校本化、学科化,提升体育作业设计的实效性,为后续的研究提供实践资料。
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关键词
深度教研
体育作业
教研活动案例
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分类号
G633.96
[文化科学—教育学]
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