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MCMV感染对小鼠脾细胞调节性T细胞比率和Th1／Th2转录因子T—bet／GATA-3表达的影响 被引量：12
1
作者 李亚男 周玉峰 +3 位作者 舒赛男 朱单丹 杨助峰 方峰 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第42期2999-3002,共4页
目的在整体水平研究小鼠巨细胞病毒（MCMV）急慢性感染对小鼠脾细胞中调节性T细胞（Treg）比率和Th1／Th2特异性转录因子T—bet/GATA-3蛋白表达的影响。方法建立MCMV播散型感染模型，60只模型鼠分别于接种病毒后第1、3、7、14、28、45... 目的在整体水平研究小鼠巨细胞病毒（MCMV）急慢性感染对小鼠脾细胞中调节性T细胞（Treg）比率和Th1／Th2特异性转录因子T—bet/GATA-3蛋白表达的影响。方法建立MCMV播散型感染模型，60只模型鼠分别于接种病毒后第1、3、7、14、28、45、60、75、90和120天各处死6只，分离脾细胞；另设60只正常小鼠作为模拟感染对照。流式细胞术检测Treg比率，Western印迹法检测T-bet/GATA-3蛋白表达水平。结果Treg比率在急性感染末期（28d）明显低于模拟感染对照组[（1．46±0．27）％vs（2．78±0．29）％，P〈0．05]；在感染慢性期持续表达上调，60d时显著高于模拟感染对照组[（4．51±0．24）％vs（2．69±0．12）％，P〈0．05]。T—bet和GATA-3蛋白表达在感染后3d分别增至（O．618±0．053）和（0．836±0．061），均显著高于模拟感染对照组水平[（0．205±0．026）和（0．398±0．022）]；但是进入感染慢性期后均持续表达下调，在75、90和120d时均明显低于模拟感染对照组水平。结论感染急性期MCMV上调T-bet和GATA-3的蛋白表达；感染慢性期MCMV诱导Treg增殖活化，抑制Th1和Th2分化扩增，CMV诱导Treg扩增可能是其抑制宿主抗病毒免疫，导致慢性持续性感染的重要原因。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 T淋巴细胞 调节性 GATA3转录因子 T—bet
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巨细胞病毒感染对调节性T细胞和Ⅰ型、Ⅱ型辅助性T细胞分化增殖的影响 被引量：7
2
作者 朱单丹 方峰 +3 位作者 舒赛男 向稚丹 李亚男 杨助锋 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期537-540,546,共5页
目的定量检测巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞1型和2型(Th1/Th2)特异性转录因子Foxp3、T-bet和GATA-3mRNA水平的动态变化,探讨MCMV在急慢性感染期对Treg、Th1和Th2细胞分化增殖... 目的定量检测巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞1型和2型(Th1/Th2)特异性转录因子Foxp3、T-bet和GATA-3mRNA水平的动态变化,探讨MCMV在急慢性感染期对Treg、Th1和Th2细胞分化增殖的影响及其意义。方法建立MCMV全身播散型感染模型,根据主要脏器内病毒滴度,确定感染后28d为本模型急、慢性期界定点。42只模型鼠分别于接种病毒后第1、3、7、14、28、45、60天各处死6只小鼠,分离脾细胞,以灭活MCMV抗原为刺激原,体外培养5d,另设42只正常小鼠作为模拟感染对照。用Real-timeRT-PCR法检测小鼠脾细胞Foxp3、T-bet和GATA-3mRNA表达强度。结果MCMV感染组第7天T-betmRNA表达显著增高达峰值,与模拟感染对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),随后下降,到第28天降到对照组相当水平,至第60天显著低于对照组(P<0.01);而GATA-3mRNA在感染后第3天表达开始升高,第7天达峰值,第14天开始缓慢下降,但至第60天仍显著高于对照组(P<0.05);Foxp3mRNA表达在感染后14天明显低于对照组,第28天显著降低(P<0.01),但至第45天开始明显上调,第60天升高更显著(P<0.01)。结论在感染急性期,Treg未被诱导活化,宿主产生有效Th1/Th2应答反应,但随后逐渐下降,并向Th2偏移;在感染慢性期,Treg细胞增殖活化显著,进一步抑制Th1和Th2反应,且对Th1抑制效应更强,提示CMV诱导Treg细胞增殖活化是其抑制宿主抗病毒免疫而呈持续慢性感染的重要原因。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 转录因子 FOXP3 GATA-3 T-BET
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大蒜新素对巨细胞病毒感染小鼠脾细胞TGF-β1和IL-10的抑制作用 被引量：3
3
作者 周华 舒赛男 +3 位作者 杨助峰 刘兴楼 朱单丹 方峰 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第5期580-583,共4页
目的:研究大蒜新素对巨细胞病毒(CMV)感染鼠的免疫抑制性细胞因子TGF-β1和IL-10的影响,探讨大蒜新素的抗CMV机制。方法:建立非免疫抑制性鼠巨细胞病毒(MCMV)全身播散性感染小鼠模型;双抗体夹心ELISA法检测感染后1,3,7,14,28,45,60,75,9... 目的:研究大蒜新素对巨细胞病毒(CMV)感染鼠的免疫抑制性细胞因子TGF-β1和IL-10的影响,探讨大蒜新素的抗CMV机制。方法:建立非免疫抑制性鼠巨细胞病毒(MCMV)全身播散性感染小鼠模型;双抗体夹心ELISA法检测感染后1,3,7,14,28,45,60,75,90,120d正常对照组、病毒感染组和药物治疗组小鼠脾细胞培养上清中TGF-β1和IL-10水平的时序性变化。结果:MCMV感染后,TGF-β1和IL-10分泌均显著升高,并呈现出急慢性期两次高峰的特点。大蒜新素治疗对MCMV感染鼠各时间点TGF-β1水平均有下调作用,且对其急性期分泌高峰的抑制更明显。大蒜新素治疗对IL-10的急性期分泌高峰影响不明显,却显著下调慢性期IL-10的分泌高峰。结论:大蒜新素能显著抑制MCMV感染后TGF-β1和IL-10分泌,进而增强机体细胞免疫功能而有利于机体清除MCMV病毒,这可能是大蒜新素抗CMV的另一作用机制。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 大蒜新素 TGF-Β1 IL-10
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鼠巨细胞病毒对小鼠调节性T细胞分化和效应性T细胞活化的影响 被引量：3
4
作者 李亚男 方峰 +4 位作者 舒赛男 朱单丹 杨助峰 李革 董永绥 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期587-591,共5页
目的在整体水平探讨小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染对小鼠调节性T细胞（Treg）亚群CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞分化和CD4^＋CD25^＋Foxp3^-效应性T细胞（TE）活化的影响。方法建立全身播散型MCMV感染小鼠模型，依据主要脏器内病毒滴度，确... 目的在整体水平探讨小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染对小鼠调节性T细胞（Treg）亚群CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞分化和CD4^＋CD25^＋Foxp3^-效应性T细胞（TE）活化的影响。方法建立全身播散型MCMV感染小鼠模型，依据主要脏器内病毒滴度，确定感染后第28天为本模型急、慢性期界定点。42只小鼠分别于感染MCMV后第1、3、7、14、28、45和60天处死6只；另设42只小鼠作为对照。流式细胞术检测CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg和活化的CD4^＋CD25^＋Foxp3^-TE在脾单个核细胞中所占比率变化。结果MCMV感染急性期CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg比率持续降低，第28天左右降至最低值，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；随后直线上升，第45天高于基线，第60天升至峰值，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；CD4^＋CD25^＋Foxp3^-TE在感染后第3～7天高于对照组（P〈0．05），其后持续下降，在感染后第45天和第60天显著低于对照组水平（P〈0．05）。Treg／CD4^＋CD25^＋TE比率在感染后第3～14天显著降低（P〈0．05）；随后逐渐上升，在感染后第45天和第60天均显著高于对照组（P〈0．05）。结论MCMV可在慢性感染期诱导CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg种群扩增，抑制CD4^＋CD25^＋Foxp3^-TE活化增殖，这可能是MCMV逃避特异性免疫而实现长期潜伏的机制之一。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 调节性T细胞 效应细胞 FOXP3
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大蒜新素对巨细胞病毒感染小鼠细胞因子TGF-β_1的影响 被引量：2
5
作者 杨助锋 方峰 +4 位作者 舒赛男 朱单丹 李亚男 李革 董永绥 《医药导报》 CAS 2008年第1期11-14,共4页
目的探讨大蒜新素对全身播散型小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染模型鼠转化生长因子β1（TGF—β1）基因转录和蛋白表达的影响。方法建立MCMV全身播散型感染BALB／c小鼠模型，将60只模型鼠随机分为安慰药组和大蒜新素（25mg·kg^-1·... 目的探讨大蒜新素对全身播散型小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染模型鼠转化生长因子β1（TGF—β1）基因转录和蛋白表达的影响。方法建立MCMV全身播散型感染BALB／c小鼠模型，将60只模型鼠随机分为安慰药组和大蒜新素（25mg·kg^-1·d^-1）治疗组，并设60只同期模拟感染小鼠为对照，随机分为模拟对照组和大蒜新素对照组，每组30只。于药物治疗后1，3，7，14和28d获取血清和脾细胞（体外培养刺激物为灭活MCMV抗原）。用双抗体夹心EUSA法检测血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测脾细胞TGF—β1 mRNA表达强度。结果安慰药组在治疗后3d血清TGF—β1水平即显著上升达高峰，随后逐渐下降，但至28d仍明显高于模拟对照组；其脾细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化一致，均在治疗后3d明显增高，7d达高峰，28d回落到稍高于模拟对照组水平。与安慰药组比较，大蒜新素治疗组3d后血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平均有降低，以治疗后3～7d差异最为显著；而脾细胞TGF-β1 mRNA表达与大蒜新素对照组相近。结论MCMV在急性感染期可诱导免疫抑制因子TGF—β1基因转录和蛋白表达明显增高，而大蒜新素治疗可完全阻遏病毒诱导的脾细胞TGF—β1基因转录，并明显降低模型鼠血清和脾细胞TGF-β1表达水平. 展开更多
关键词 大蒜新素 巨细胞病毒 TGF—β1
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急慢性MCMV感染对小鼠脾细胞Foxp3/T-bet/GATA-3蛋白表达水平的影响 被引量：1
6
作者 李亚男 方峰 +3 位作者 朱单丹 舒赛男 杨助峰 李革 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期563-566,共4页
目的:在整体水平研究鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠辅助性T细胞亚群Th1、Th2和调节性T细胞(Treg)分化特异性转录因子T-bet、GATA-3和Foxp3蛋白表达水平的影响。方法:建立MCMV播散型感染模型,依据主要脏器内病毒滴度,确定感染后28天为本... 目的:在整体水平研究鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠辅助性T细胞亚群Th1、Th2和调节性T细胞(Treg)分化特异性转录因子T-bet、GATA-3和Foxp3蛋白表达水平的影响。方法:建立MCMV播散型感染模型,依据主要脏器内病毒滴度,确定感染后28天为本模型急、慢性期界定点。42只模型鼠分别于接种MCMV Smith株后第1、3、7、14、28、45天和60天各处死6只,分离脾细胞;另设42只正常小鼠作为模拟感染对照。Western blot法检测脾细胞中特异转录因子T-bet、GATA-3和Foxp3蛋白表达水平。结果:MCMV感染后第3天T-bet蛋白表达显著增高达峰值,与模拟感染对照组比较有显著差异(P<0.01),随后下降,第28天后降至模拟感染对照组相当水平;而GATA-3蛋白表达在感染后第3天开始升高,第7天达峰值(P<0.01),第14天开始缓慢下降,但至第60天仍显著高于模拟感染对照组(P<0.05);Foxp3蛋白表达在感染后7天明显低于模拟感染对照组,第28天降至最低(P<0.01),第45天和60天表达明显上调,并显著高于模拟感染对照组水平(P<0.05)。结论:感染急性期,MCMV上调Th1/Th2特异性转录因子T-bet和GATA-3的蛋白表达;感染慢性期,MCMV诱导Treg特异性转录因子Foxp3蛋白表达上调,同时显著抑制T-bet和GATA-3蛋白表达,提示CMV诱导Foxp3表达增加可能是其抑制宿主抗病毒免疫,导致慢性持续性感染的重要原因。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 调节性T细胞 T-BET GATA-3 FOXP3
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