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题名重组谷氨酸脱羧酶的分离纯化与酶学性质研究
被引量：5
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作者
时粲
刘昭明
黎娅
易弋
伍时华
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机构
广西科技大学生物与化学工程学院
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出处
《食品工业》
CAS
北大核心
2016年第2期184-188,共5页
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基金
广西科学基金(2013GXNSFBA019081)
广西科学基金(2014GXNSFAA118086)
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文摘
利用大肠杆菌原核表达系统获得高活力重组谷氨酸脱羧酶(GAD)并对其酶学性质进行分析。结果表明,纯酶比活力为9.9 U/mg;最适p H为4.6,最适温度为40℃,重组酶有良好的热稳定性,在70℃处理30 min仍有80%活性,在0℃保存一个月基本不失活;辅酶PLP及金属离子Fe2+、Ca2+、Mg2+、Cu2+对重组酶活力都有一定的促进作用,其中PLP最适浓度为0.005 mmol/L;吐温20作为非离子表面活性剂对重组GAD活力有促进作用,而阴离子表面活性剂SDS对其活力有明显抑制作用;有机溶剂异戊醇对其活力有促进作用。重组GAD的Km=23.33 mmol/L,Vmax=1.133μmol/(min·L)。
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关键词
重组酶
谷氨酸脱羧酶
酶学性质
Γ-氨基丁酸
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Keywords
recombinase
glutamate decarboxylase （GAD）
enzyme characterization
7-aminobutyric acid （GABA）
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分类号
Q55
[生物学—生物化学]
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题名豆豉中产γ-氨基丁酸乳酸菌的分离鉴定
被引量：3
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作者
张竺英
刘昭明
黄翠姬
时粲
徐财凤
陆金池
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机构
广西科技大学生物与化学工程学院
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出处
《中国调味品》
CAS
北大核心
2014年第5期53-58,共6页
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文摘
为从豆豉中获得产γ-氨基丁酸的乳酸菌,采用高效液相色谱法对从广西黄姚豆豉中分离筛选得到的16株乳酸菌的产γ-氨基丁酸能力进行了研究。结果表明:菌株HY15的产γ-氨基丁酸能力较好。该菌株在含1%(W/W)谷氨酸钠的MRS发酵培养基中37℃厌氧培养48h后,发酵液中γ-氨基丁酸产量达到0.161g/L。经形态学特征、生理生化试验和16SrDNA基因鉴定,确定菌株HY15为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。
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关键词
Γ-氨基丁酸
乳酸菌
筛选
鉴定
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Keywords
γ-aminobutyric acid
lactic acid bacteria
screening
identification
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分类号
TS214.2
[轻工技术与工程—粮食、油脂及植物蛋白工程]
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题名植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆及原核表达
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作者
时粲
刘昭明
黎娅
易弋
伍时华
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机构
广西科技大学生物与化学工程学院
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出处
《湖北农业科学》
2015年第17期4328-4331,共4页
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基金
广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019081
2014GXNSFAA118086)
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文摘
根据Gen Bank中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)基因组序列设计引物,利用PCR技术扩增了植物乳杆菌QL-14的谷氨酸脱羧酶编码基因gad B,克隆至表达载体p GEX-4T-3,转化大肠杆菌(Escherichia coli)后进行原核表达,对表达条件进行了优化并对表达蛋白质进了纯化。结果表明,扩增目的gad B基因的开放阅读框(ORF)全长1 407 bp,编码469个氨基酸,氨基酸序列与植物乳杆菌WCFS1同源性为99.6%。通过优化诱导表达条件,得到纯化蛋白质GAD大小为53.6 ku,等电点为5.58,比活力为9.9 U/mg。
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关键词
植物乳杆菌(Lactobacillus
plantarum)
Γ-氨基丁酸
谷氨酸脱羧酶
原核表达
GST标签蛋白质
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Keywords
Lactobacillus plantarum
γ-aminobutyric acid
glutamate decarboxylase
prokaryotic expression
GST tag protein
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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