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组织工程化人工骨血管化研究 被引量:49
1
作者 杨志明 樊征夫 +2 位作者 解慧琪 秦廷武 彭文珍 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期119-122,共4页
目的 比较三种促进组织工程化人工骨体内血管化方法的效果及研究血管化与成骨的相关关系。 方法 将HA/β TCP与PDLLA形成复合支架材料 ,再复合Ⅰ型胶原、rhBMP 2 ,与成骨细胞联合培养 ,仿生制备成组织工程化人工骨。采用包裹带血管... 目的 比较三种促进组织工程化人工骨体内血管化方法的效果及研究血管化与成骨的相关关系。 方法 将HA/β TCP与PDLLA形成复合支架材料 ,再复合Ⅰ型胶原、rhBMP 2 ,与成骨细胞联合培养 ,仿生制备成组织工程化人工骨。采用包裹带血管蒂筋膜、复合血管内皮细胞或两者联合的促血管化手段 ,将人工骨修复兔桡骨干骨膜 骨完全缺损。手术后 4、8、12周 ,观察移植物组织学 ,体视学方法观察血管化、成骨作用及其两者的关系。 结果  3种方法均有促血管作用 ,其优劣依次为 :材料包裹带血管蒂筋膜及复合血管内皮细胞大于材料单纯复合血管内皮细胞 ,后者又大于材料单纯包裹带血管蒂筋膜。术后 4周为快速血管化阶段 ,4~ 8周间血管化有平缓发展 ,12周完全血管化。血管化与新骨生成数量成正相关。 结论 促血管化手段对组织工程化人工骨移植修复骨缺损的效果起重要促进作用。 展开更多
关键词 组织工程化人工骨 血管化 研究 骨缺损 修复
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类胰岛素生长因子_1促腱细胞生长的实验研究 被引量:35
2
作者 项舟 杨志明 +1 位作者 魏大鹏 彭文珍 《中华手外科杂志》 CSCD 1997年第3期183-186,共4页
探索促进肌腱细胞增殖的方法。方法:将原代人死胎肌腱细胞和第6代,第13代冻存后复苏的人胎儿肌腱细胞进行体外培养,并在培养基中加入不同浓度的类胰岛素生长因子1。通过绘制生长曲线%3H-TdR渗入等方法,观察IGF-1对... 探索促进肌腱细胞增殖的方法。方法:将原代人死胎肌腱细胞和第6代,第13代冻存后复苏的人胎儿肌腱细胞进行体外培养,并在培养基中加入不同浓度的类胰岛素生长因子1。通过绘制生长曲线%3H-TdR渗入等方法,观察IGF-1对肌腱细胞的作用。结果:IGF-1能使培养的肌腱细胞增殖加快,提前进入平顶期。 展开更多
关键词 实验 胚胎 细胞培养 IGF-1
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附子多糖诱导人早幼粒白血病细胞分化研究 被引量:25
3
作者 彭文珍 吴雄志 +2 位作者 曾升平 陈丹 陈佩钰 《职业卫生与病伤》 2003年第2期123-124,共2页
关键词 附子多糖注射液 人早幼粒白血病 细胞分化 温阳散寒 抗原 检测
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丹参抑制牵张诱导的心肌细胞NF-κB激活的观察 被引量:26
4
作者 肖准 彭文珍 王正荣 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期257-258,261,共3页
目的 :探讨丹参改善高血压及慢性心力衰竭等心血管疾病的药理机制。方法 :用牵张刺激离体培养心肌细胞 ,造成心肌超负荷 ,并通过免疫组织化学方法观察丹参对牵张诱导的心肌细胞NF κB激活的影响。结果 :牵张心肌细胞 1 0小时后 ,NF κB... 目的 :探讨丹参改善高血压及慢性心力衰竭等心血管疾病的药理机制。方法 :用牵张刺激离体培养心肌细胞 ,造成心肌超负荷 ,并通过免疫组织化学方法观察丹参对牵张诱导的心肌细胞NF κB激活的影响。结果 :牵张心肌细胞 1 0小时后 ,NF κB被激活 ;丹参抑制牵张诱导的心肌细胞NF κB的激活。结论 :研究结果提示丹参通过抑制NF κB信号传递系统的激活 ,引起细胞内有关分子表达调控机制改变 。 展开更多
关键词 丹参 核因子-КB 牵张 心肌细胞
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人胚腱细胞体外培养及生物学特性研究 被引量:22
5
作者 蔚芃 杨志明 彭文珍 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 1995年第3期161-164,共4页
应用显微外科技术剥除人胚肌腱外膜组织后,经过胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出人胚腱细胞,使用含20%新生小牛血清的F-12培养液将其传代培养15代后全部冻存。该细胞贴壁生长,具有接触抑制的性质。细胞群体倍增时间大致为4... 应用显微外科技术剥除人胚肌腱外膜组织后,经过胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出人胚腱细胞,使用含20%新生小牛血清的F-12培养液将其传代培养15代后全部冻存。该细胞贴壁生长,具有接触抑制的性质。细胞群体倍增时间大致为4天与细胞有丝分裂高峰时间相符。在传代培养过程中探索了体外培养的腱细胞生长的最适宜条件。通过冻存后复苏的细胞继续培养发现,冻存对其生长、形态、遗传学等特征无明显影响。本研究测定了培养细胞分泌羟脯氨酸量,提示培养的人胚腱细胞与体内腱细胞同样具有合成胶原的能力,并且这种能力不为传代所改变。 展开更多
关键词 人胚腱细胞 细胞培养 体外培养 肌腱愈合
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组织工程人工肌腱的实验研究 被引量:16
6
作者 项舟 杨志明 +3 位作者 蔚凡 张前法 魏大鹏 彭文珍 《中华手外科杂志》 CSCD 2000年第3期140-143,共4页
目的 为构建组织工程肌腱积累经验。方法 应用显微外科技术剥除人胚肌腱外膜组织后 ,经过胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出人胚腱细胞 ,使用F12培养液将其传代培养。该细胞贴壁生长 ,具有接触抑制的性质。细胞群体倍增时间大致为 4d。... 目的 为构建组织工程肌腱积累经验。方法 应用显微外科技术剥除人胚肌腱外膜组织后 ,经过胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出人胚腱细胞 ,使用F12培养液将其传代培养。该细胞贴壁生长 ,具有接触抑制的性质。细胞群体倍增时间大致为 4d。通过冻存后复苏的细胞继续培养后发现 ,冻存对其生长、形态、遗传学等特征无明显影响。经测定培养细胞分泌的羟脯氨酸含量 ,证实培养的人胚腱细胞与体内腱细胞同样具有合成胶原的能力 ,并且这种能力不为传代所改变。将肌腱细胞与碳纤维、PGA、胶原及其共混编织材料进行体外联合培养 ,观察细胞与材料的相容性以及细胞在材料上的生长情况 ,筛选出最佳支架材料 ;并用该材料与肌腱细胞复合后植入兔体内 ,分期观察肌腱细胞的形态学改变及合成胶原的类型。结果 在体外培养条件下 ,碳纤维增强PGA加胶原表面涂层材料与肌腱细胞的相容性最好。肌腱细胞与碳纤维增强PGA加胶原表面涂层材料复合植入体内后肌腱细胞能继续增殖 ,并能合成Ⅰ型胶原。肌腱细胞在植入 2周起在整个支架材料立体空间内增殖、合成胶原 ,其胶原纤维相互衔接 ,形成了致密的组织结构。在肌腱缝合处 ,胶原纤维互相衔接 ,表明植入体与受体肌腱已愈合。扫描电镜下观察 ,见肌腱细胞在碳纤维间排列整齐、均匀 。 展开更多
关键词 人工肌腱 人工植入物 培养的细胞 组织工程
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组织工程化人工骨移植修复长骨干缺损的成骨研究 被引量:14
7
作者 樊征夫 杨志明 +2 位作者 解慧琪 彭文珍 秦廷武 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期304-308,共5页
目的研究仿生制备的组织工程化人工骨移植修复长骨干缺损的成骨性能、修复效果及可能的修复机制。方法采用人工合成双相羟基磷灰石(HA/β-TCP)为支架材料,与聚-DL-乳酸(PDLLA)复合后再复合Ⅰ型胶原及重组合人类骨形态发生蛋白-2(rhBMP-... 目的研究仿生制备的组织工程化人工骨移植修复长骨干缺损的成骨性能、修复效果及可能的修复机制。方法采用人工合成双相羟基磷灰石(HA/β-TCP)为支架材料,与聚-DL-乳酸(PDLLA)复合后再复合Ⅰ型胶原及重组合人类骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2),与兔骨膜成骨细胞及肾脏血管内皮细胞复合培养。将仿生制备的组织工程化人工骨移植到日本大耳白兔桡骨完全骨膜-骨缺损区,分别于术后第4、8、12周进行大体解剖观察、X线观察、HE染色及Masson三色法染色组织学观察、图像分析、扫描电镜、X线能谱分析,研究骨缺损的修复情况。结果术后第4周可见新生板层骨;第8周植入物与自体骨呈皮质骨融合,有新骨髓长入;第12周植入物外周被新生皮质骨完全替代,组织学新生骨呈数个连续过渡的条带样分布区。新生骨定量4周组与8周组及12周组比较差异有显著性,8周组与12周组差异无显著性。随植入时间延长,植入体中钙/磷比值趋向于自体皮质骨。结论仿生构建的组织工程化人工骨植入体内修复长骨干缺损,修复效果好,其骨再生机制为软骨内化骨。 展开更多
关键词 骨干 骨移植 羟基磷灰石类 组织工程 长骨干缺损
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沙棘总黄酮改善心肌肥大的分子药理机制 被引量:11
8
作者 肖准 彭文珍 +1 位作者 朱彬 王正荣 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期283-285,共3页
目的 探讨沙棘总黄酮改善高血压及慢性心力衰竭等疾病造成的心肌肥大的分子药理机制。方法 用机械牵张负荷离体培养大鼠心肌细胞 ,使心肌压力超负荷 ,造成肥大 ;并通过免疫组织化学方法观察不同浓度沙棘总黄酮对牵张诱导的心肌细胞 NF... 目的 探讨沙棘总黄酮改善高血压及慢性心力衰竭等疾病造成的心肌肥大的分子药理机制。方法 用机械牵张负荷离体培养大鼠心肌细胞 ,使心肌压力超负荷 ,造成肥大 ;并通过免疫组织化学方法观察不同浓度沙棘总黄酮对牵张诱导的心肌细胞 NF-κB激活的影响。结果 牵张离体培养心肌细胞 10 h后 ,NF-κB被激活 ;沙棘总黄酮抑制牵张诱导的心肌细胞 NF-κB的激活 ,其抑制作用与沙棘总黄酮存在浓度依赖关系。结论 沙棘总黄酮通过抑制 NF-κB信号传递系统的激活 ,引起细胞内相关分子表达调控机制改变 。 展开更多
关键词 沙棘总黄酮 核因子-ΚB 牵张 心肌细胞 肥大
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p16INK4A和p15INK4B对人肝癌细胞增殖和凋亡影响的研究 被引量:11
9
作者 覃扬 刘建余 +4 位作者 李波 彭文珍 傅明德 孙芝琳 孙泽芳 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2004年第2期132-137,共6页
目的 为探讨抑癌基因 p16 INK4 A和 p15 INK4 B对 Rb基因状态不同的人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法 在分析细胞系遗传背景鉴定基础上采用脂质体将构建的 p XJ- p16、p XJ- p15重组质粒转染人肝癌细胞系 BEL74 0 2 (p16 +/ p15 +R... 目的 为探讨抑癌基因 p16 INK4 A和 p15 INK4 B对 Rb基因状态不同的人肝癌细胞系增殖和凋亡的影响。方法 在分析细胞系遗传背景鉴定基础上采用脂质体将构建的 p XJ- p16、p XJ- p15重组质粒转染人肝癌细胞系 BEL74 0 2 (p16 +/ p15 +Rb+)和 SMMC772 1(p16 +/ p15 +/ Rb- )。应用 PCR、RNA斑点印迹、MTT、集落形成、流式细胞仪等技术检测外源性 p16和 p15基因、m RNA表达及其对肝癌细胞增殖、凋亡的影响。结果 经转染的 BEL74 0 2 - p16 ,BEL74 0 2 - p15细胞 ,分别存在外源性 p16、p15基因 ,在含外源基因细胞中相应的 m RNA表达增强 ;BEL74 0 2 - p15细胞生长速度、集落形成率显著低于对照细胞 BEL 74 0 2 (P<0 .0 1) ;细胞周期分析观察到与亲本细胞比较 ,BEL 74 0 2 - p15的 G1期细胞由 37.7%增高到 4 3.6 % ,S期细胞由 2 2 %下降到 13% (P<0 .0 5 ) ,并出现 G1亚峰 (凋亡峰 )。与此相反 ,BEL74 0 2 - p16细胞增殖未见抑制 ,细胞周期分布无明显差异 ,集落形成率也未见减少。此外 ,SMMC772 1- p16细胞增殖也无抑制。结论 外源性 p15 INK4 B具有抑制人肝癌细胞生长 ,诱导细胞凋亡的作用 ,其作用不受内源性p15影响。而 p16 INK4 A对肝癌细胞生长抑制的作用可能依赖于 RB途径的完整性。 展开更多
关键词 P16INK4A P15INK4B 肝癌 细胞增殖 细胞凋亡
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人胚颞颌关节软骨细胞培养及生物学特性研究 被引量:11
10
作者 焦岩涛 王大章 +1 位作者 田卫东 彭文珍 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期187-189,共3页
采用机械分离及胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化的方法,简便、快速地获得大量成活率高的人TMJ软骨细胞。在DMEM培养基中进行原代和传代培养,并对原代培养软骨细胞进行了组化及免疫组化鉴定,相差显微镜、光镜及超微结构的观察。... 采用机械分离及胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶联合消化的方法,简便、快速地获得大量成活率高的人TMJ软骨细胞。在DMEM培养基中进行原代和传代培养,并对原代培养软骨细胞进行了组化及免疫组化鉴定,相差显微镜、光镜及超微结构的观察。结果显示,光镜观察,原代培养细胞呈多角形,单层排列,电镜可见细胞内有丰富的粗面内质网及线粒体,细胞呈多极性,表面有突起。TMJ软骨细胞免疫组化Ⅱ型胶原染色阳性。甲苯胺蓝染色细胞质内有大量异染基质颗粒,说明本实验培养的TMJ软骨细胞保持了体内的基本特征。 展开更多
关键词 颞颌关节 软骨 细胞培养 生物学特性
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人脑髓鞘碱性蛋白对H_2O_2诱导人肺癌细胞YTLMC-90凋亡的抑制作用 被引量:9
11
作者 陈建业 王晓明 +5 位作者 刘戟 陈璟歆 王若菡 彭文珍 程汉华 陈俊杰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第2期170-174,共5页
背景与目的:人脑髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)广泛分布于神经系统及多种非神经组织之中,而且在肺癌、乳腺癌、神经胶质瘤等多种肿瘤细胞中均检查到MBP的表达。但MBP与癌细胞侵犯神经组织的活性是否相关、与肺癌细胞的生物学行... 背景与目的:人脑髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)广泛分布于神经系统及多种非神经组织之中,而且在肺癌、乳腺癌、神经胶质瘤等多种肿瘤细胞中均检查到MBP的表达。但MBP与癌细胞侵犯神经组织的活性是否相关、与肺癌细胞的生物学行为是否相关尚未见报道。本研究主要探讨MBP对过氧化氢(H2O2)诱导人肺癌细胞YTLMC-90凋亡的影响。方法:实验分为MBPcDNA微基因pSVCEPMBPCAT转染组(试验组)、空质粒pSVCEPCAT转染组和未转染组(对照组)。将含人Ⅰ型胶原a1链(COLⅠA1)基因启动子和增强子元件、并在其3′端接MBPcDNA的微基因,转染YTLMC-90细胞,并驱动MBP异位表达;采用MTT法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色显微镜和电镜观察细胞形态及其超微结构的改变;琼脂糖凝胶电泳检测染色质DNA断裂。结果:200μmol/LH2O2作用24h后,转染组、未转染组和空载体pSVCEPCAT转染组YTLMC-90细胞的生长抑制率分别为36.67%、84.00%和78.67%(P<0.001);对照组YTLMC-90细胞普遍可见凋亡细胞特有的形态学及生物化学改变,如胞核固缩、染色质断裂,DNA电泳呈梯状条带;而MBPcDNA微基因转染的YTLMC-90细胞未发现上述凋亡特征。结论:MBP促进YTLMC-90细胞增殖和拮抗H2O2诱导的凋亡,明显减少H2O2对YTLMC-90的细胞毒作用。 展开更多
关键词 髓鞘碱性蛋白 微基因 过氧化氢 肺肿瘤 YTLMC-90细胞系 凋亡
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仿生复合人工骨材料的组织工程细胞相容性研究 被引量:5
12
作者 樊征夫 杨志明 +2 位作者 彭文珍 解慧琪 秦廷武 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期579-580,共2页
目的 探讨组织工程化人工骨的仿生构建模式及具有不同细胞相容性支架材料的选择。方法 分别采用人工合成材料生物活性玻璃陶瓷 (BGC)与双相羟基磷灰石 (HA/β TCP)为支架材料 ,与聚 DL 乳酸 (PDLLA)复合后 (重量比分别为 65∶1及 50∶... 目的 探讨组织工程化人工骨的仿生构建模式及具有不同细胞相容性支架材料的选择。方法 分别采用人工合成材料生物活性玻璃陶瓷 (BGC)与双相羟基磷灰石 (HA/β TCP)为支架材料 ,与聚 DL 乳酸 (PDLLA)复合后 (重量比分别为 65∶1及 50∶1 )再复合I型胶原及重组合人类骨形态发生蛋白 (rhBMP 2 ) ,与兔骨膜成骨细胞 (密度 1× 1 0 6 /ml)复合培养 ,进行一般与超微形态学观察 ,测定生长曲线及成骨细胞碱性磷酸酶 (ALP)、骨钙素和I型胶原合成量的测定 ,比较细胞粘附能力、增殖活力及成骨活性。结果 生物活性玻璃陶瓷、双相羟基磷灰石分别与成骨细胞复合后的粘附能力、增殖活力 (1d组 :0 .380± 0 .0 32 ,0 .2 50± 0 .0 1 9;7d组 :0 .950± 0 .0 60 ,0 .650±0 .0 4 0 )、成骨活性 (3H 脯氨酸掺入活性 :6 .2 2 8± 1 .785 ,3 .81 8± 0 .858;骨钙素含量 :0 .70 9± 0 .1 1 5 ,0 .386± 0 .0 93 ;碱性磷酸酶 :0 .1 2 3± 0 .0 32 ,0 .0 83± 0 .0 1 8) ,前者均优越于后者。结论 该种仿生组织工程化人工骨的构建模式能较满意模拟天然骨优势 ,生物活性玻璃陶瓷、双相羟基磷灰石两种材料的共混体 。 展开更多
关键词 仿生复合人工骨材料 组织工程细胞 相容性研究
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肌腱细胞体外转化的实验研究 被引量:7
13
作者 项舟 杨志明 +2 位作者 黄富国 李涛 彭文珍 《现代康复》 CSCD 2000年第8期1188-1189,1197,共3页
目的建立一株既保存细胞的功能特性,又容易长期和大量繁殖的标准肌腱细胞。方法采用电穿孔法,在960μF、400V条件下将国外构建的质粒ptsA58H导入肌腱细胞。结果经潮霉素B严格筛选,挑选出了阳性克隆。结论该转化成功... 目的建立一株既保存细胞的功能特性,又容易长期和大量繁殖的标准肌腱细胞。方法采用电穿孔法,在960μF、400V条件下将国外构建的质粒ptsA58H导入肌腱细胞。结果经潮霉素B严格筛选,挑选出了阳性克隆。结论该转化成功的为肌腱细胞标准细胞株建立了转化模型。 展开更多
关键词 组织工程 肌腱细胞 转化
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兔腱细胞体外培养及其生物学特性的研究 被引量:4
14
作者 张前法 杨志明 彭文珍 《中华手外科杂志》 CSCD 1997年第3期187-189,共3页
目的:了解腱细胞的生长、形态、合成胶原的能力及冻存对腱细胞生长的影响。方法:应用显微外科技术剥除兔屈肌腱外膜组织后,经胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出腱细胞。细胞经含20%新生小牛血清的F-12培养液传代培养6代后全部冻存。腱细... 目的:了解腱细胞的生长、形态、合成胶原的能力及冻存对腱细胞生长的影响。方法:应用显微外科技术剥除兔屈肌腱外膜组织后,经胰蛋白酶及胶原酶分步消化分离出腱细胞。细胞经含20%新生小牛血清的F-12培养液传代培养6代后全部冻存。腱细胞合成的胶原类型以免疫组织化学(ABC)法进行鉴定。结果:腱细胞具有贴壁生长,接触抑制的特性。细胞群体的倍增时间大致为6天与细胞有丝分裂高峰相符。体外培养的腱细胞仅合成I型胶原。结论:兔腱细胞在体外培养的条件下,同样具有传代与合成胶原的能力,并且不为传代所改变。 展开更多
关键词 细胞 培养的 生物学鉴定法 免疫组织化学
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腱细胞与人工材料体外联合培养的形态学观察 被引量:5
15
作者 杨志明 张前法 彭文珍 《中华手外科杂志》 CSCD 1997年第2期100-102,共3页
目的:为了探索肌腱细胞与人工材料是否有可能复合形成新型有活性的人工肌腱,特设计了本项研究。方法:取第4代腱细胞,复苏后分别加入碳纤维编织带、涤纶编织带及几丁质编织带联合培养,在倒置显微镜及透射电镜下观察形态学改变及细... 目的:为了探索肌腱细胞与人工材料是否有可能复合形成新型有活性的人工肌腱,特设计了本项研究。方法:取第4代腱细胞,复苏后分别加入碳纤维编织带、涤纶编织带及几丁质编织带联合培养,在倒置显微镜及透射电镜下观察形态学改变及细胞与材料的相容性。结果:腱细胞与碳纤维有良好的相容性。腱细胞沿碳纤维生长、繁殖,并合成胶原。腱细胞与涤纶的相容性较差,在几丁质上无细胞附着。结论:腱细胞与碳纤维联合培养后,保持了腱细胞的形态特征,与碳纤维的相容性最好。 展开更多
关键词 细胞 组织培养 异种移植 生物假体
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615小鼠MHC Ⅰ cDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装 被引量:2
16
作者 龚浩 李龙江 +3 位作者 温玉明 王昌美 陈俊杰 彭文珍 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期404-407,共4页
目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,... 目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株。方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株。结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104~1.1×105 CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物。结论:H-2Kk cDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础。 展开更多
关键词 基因治疗 MHCⅠ目的基因 PA317细胞 基因载体 重组逆转录病毒质粒 肿瘤治疗
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BDNF对H_2O_2诱导人肺癌细胞YTMLC-90凋亡的抑制效应 被引量:3
17
作者 陈建业 刘戟1 +5 位作者 王若菡 彭文珍 刘智敏 王晓明 陈海燕 陈俊杰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期938-942,共5页
背景与目的:已证实在神经系统内外多种细胞中均可合成神经营养因子,如神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)、脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)和神经营养素3/4(NT-3/4)。这些神经营养因子不仅能促进神经细胞... 背景与目的:已证实在神经系统内外多种细胞中均可合成神经营养因子,如神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)、脑源性神经营养因子(brainderivedneurotrophicfactor,BDNF)和神经营养素3/4(NT-3/4)。这些神经营养因子不仅能促进神经细胞的存活、增殖和凋亡,也与癌细胞侵犯神经组织的活性有关;但BDNF与肺癌细胞的生物学行为是否相关尚未见报道。本文旨在研究BDNF对过氧化氢(H2O2)诱导人肺癌细胞YTMLC-90凋亡的作用。方法:用含人I型胶原a1链(COLIA1)基因启动子和增强子元件及在其3'端接BDNFcDNA的微基因pSVCEPBFCAT,转染人肺癌细胞YTMLC-90并驱动BDNF异位表达,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)显色法检测细胞增殖,吖啶橙荧光染色显微镜和电镜观察细胞形态及其超微结构的改变,琼脂糖凝胶电泳检测染色质DNA断裂。结果:经200μmol/LH2O2作用24h,转染pSVCEPBFCAT的YTMLC-90细胞生长抑制率为30.0%,而未转染YTMLC-90和转染空载体pSVCEPCAT的YTMLC-90细胞生长抑制率分别为84.60%和80.00%,实验组与两个对照组之间的差异均有显著性(P<0.01);对照组YTMLC-90细胞可见凋亡特有的形态学及生物化学改变,如胞浆和核固缩、染色质断裂、DNA电泳呈梯状条带,而转染pSVCEPBFCAT的YTMLC-90细胞未发现上述凋亡特征。结论:BDNF促进YTMLC-90? 展开更多
关键词 BDNF H2O2 诱导 人肺癌细胞 YTMLC-90 抑制效应 细胞凋亡
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基因修饰的成骨细胞经髓芯减压移植治疗早期股骨头缺血性坏死的实验观察 被引量:3
18
作者 党洪胜 裴福兴 +4 位作者 沈彬 杨静 周宗科 鲁芳 彭文珍 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期484-489,共6页
目的评价重组人肝细胞生长因子(hHGF)基因修饰的成骨细胞经髓芯减压移植促进早期股骨头缺血坏死的血管新生及局部骨修复的效果。方法二步酶消化法和差速贴壁法分离培养胎兔成骨细胞,利用脂质体介导hHGF基因转染成骨细胞,然后通过髓... 目的评价重组人肝细胞生长因子(hHGF)基因修饰的成骨细胞经髓芯减压移植促进早期股骨头缺血坏死的血管新生及局部骨修复的效果。方法二步酶消化法和差速贴壁法分离培养胎兔成骨细胞,利用脂质体介导hHGF基因转染成骨细胞,然后通过髓芯减压移植于兔缺血坏死的股骨头内,同时设置单纯细胞移植组和髓芯减压组,于术后第2、4、8周通过CT、组织学和微血管墨汁灌注等观察血管形成及成骨情况。结果分离培养的胎兔成骨细胞经Ⅰ型胶原和碱性磷酸酶鉴定纯度较高。hHGF基因转染成骨细胞体外及体内检测均有hHGF蛋白的表达。通过髓芯减压移植细胞8周后转基因组和单纯成骨细胞组的新生骨小梁与单纯髓芯减压组比较有差异性,而术后2、4周转基因组的新生血管数(29.5±1.6)和(34.0±1.7)较对照组(20.6±1.9)和(25.6±2.2)差异有统计学意义(P〈0.01)。结论转染hHGF基因的成骨细胞移植于缺血坏死的股骨头后,早期可促进血管新生,并增加骨形成,显著促进坏死骨修复。 展开更多
关键词 股骨头坏死 肝细胞生长因子 成骨细胞 转染 细胞移植
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阳离子脂质体介导IL-2基因治疗SCCⅦ移植瘤的初步研究 被引量:3
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作者 杨焕 刘世喜 +1 位作者 梁传余 彭文珍 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期9-11,30,共4页
目的 探讨多价阳离子脂质体介导的白细胞介素 2 (IL- 2 )基因治疗头颈鳞癌的最佳比例和免疫机理。方法 利用 SCC 细胞株在 C3H/He J小鼠口底建立头颈鳞癌荷瘤动物模型。用不同比例的脂质体与 DNA混合物及裸 DNA进行体内外转染 ,用 EL ... 目的 探讨多价阳离子脂质体介导的白细胞介素 2 (IL- 2 )基因治疗头颈鳞癌的最佳比例和免疫机理。方法 利用 SCC 细胞株在 C3H/He J小鼠口底建立头颈鳞癌荷瘤动物模型。用不同比例的脂质体与 DNA混合物及裸 DNA进行体内外转染 ,用 EL ISA方法检测其转染后 IL- 2基因的蛋白表达水平 ,用乳酸脱氢酶 (L DH)法检测荷瘤小鼠脾脏的自然杀伤细胞 (NK)和细胞毒 T淋巴细胞 (CTL)活性。结果 最佳 IL- 2分泌水平在体外细胞株与体内瘤内转染时的脂质混和物比例不一致。与裸 DNA和空载体相比 ,合适比例的脂质混和物转染可增强脾脏NK和 CTL 的杀伤活性。结论 脂质复合物在瘤内直接基因转染的良好效能取决于其合适的构成比例 ,体外细胞转染的最佳脂质混和物比例不能作为体内转染的参考 ;与裸 DNA转染相比 。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 白细胞介素2 基因治疗 头颈肿瘤
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结构化简教深学“和与积的奇偶性”
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作者 彭文珍 《中小学数学(小学版)》 2024年第1期79-81,共3页
缘起:因为教学设计荣获省一等奖,我有了进一步参加省赛课的机会。清楚地记得首次试教,课堂氛围活跃,教学效果很好,我满心期待着师父能给好评。哪知道我自认为的亮点被师父一个个砍掉。我好不容易想出的课始的读心术、课末的翻杯子游戏... 缘起:因为教学设计荣获省一等奖,我有了进一步参加省赛课的机会。清楚地记得首次试教,课堂氛围活跃,教学效果很好,我满心期待着师父能给好评。哪知道我自认为的亮点被师父一个个砍掉。我好不容易想出的课始的读心术、课末的翻杯子游戏以及中间的完全归纳证明被去掉,与别人的课类似的摇奖环节也未能幸存。 展开更多
关键词 试教 归纳证明 和与积的奇偶性 教学效果 赛课 教学设计 课堂氛围 课始
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