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辣椒SRAP-PCR反应体系的建立与优化 被引量:149
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作者 任羽 王得元 +2 位作者 李颖 王恒明 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第5期689-693,共5页
SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑... SRAP标记(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)是由Li和Quiros发展了一种新的分子标记技术。SRAP标记具有简便、稳定、中等产率、在基因组中分布均匀的特点,已经应用于在水稻、棉花、油菜、马铃薯、苹果、柑橘类果树、樱桃、梅子、大蒜、莴苣及芹菜等植物和水稻稻瘟病的研究中,对开展遗传图谱构建、基因定位与克隆、比较基因组学、cDNA指纹图谱、生物多样性研究、预测杂种优势等研究是一个十分实用的工具。本研究对辣椒SRAP反应体系的程序、模板、Mg2+等参数进行优化研究,结果表明:辣椒的PCR程序为94℃预变性5min,94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min,5循环,94℃变性1min,50℃复性1min,72℃延伸1min,35循环,最后72℃延伸10min;25滋l反应体系中,模板量为15ng,Mg2+为2.0mmol/L。本研究建立的辣椒SRAP体系重复性好、稳定性强。 展开更多
关键词 辣椒 SRAP-PCR反应体系 体系建立 优化技术
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相关序列扩增多态性(SRAP)一种新的分子标记技术 被引量:59
2
作者 任羽 王得元 《中国农学通报》 CSCD 2004年第6期11-13,22,共4页
SRAP是一种新的DNA分子标记,具有简便、稳定、中等产率和容易得到选择条带序列的特点。SRAP是一种基于PCR技术的新的分子标记技术,其利用独特的引物设计对ORFs进行扩增,上游引物长17bp,对外显子进行特异扩增,下游引物长18bp,对内含子区... SRAP是一种新的DNA分子标记,具有简便、稳定、中等产率和容易得到选择条带序列的特点。SRAP是一种基于PCR技术的新的分子标记技术,其利用独特的引物设计对ORFs进行扩增,上游引物长17bp,对外显子进行特异扩增,下游引物长18bp,对内含子区域、启动子区域进行特异扩增,因个体不同以及物种的内含子、启动子与间隔长度不等而产生多态性。扩增产物用变性的聚丙烯酰胺凝胶分离,然后用放射自显影检测。本文在阐述SRAP的原理和流程后,详细论述了SRAP标记目前在植物遗传图谱构建、遗传多样性、基因定位、比较基因组学、杂种优势预测等方面的研究进展及应用前景。 展开更多
关键词 相关序列扩增多态性 SRAP 分子标记 技术原理 遗传图谱 遗传多样性 基因定位 比较基因组学 杂种优势预测
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应用于模具自由曲面的新型气囊抛光技术 被引量:73
3
作者 计时鸣 金明生 +3 位作者 袁巨龙 《机械工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期2-6,共5页
为提高模具自由曲面抛光的效率和品质,提出一种基于柔性抛光理念的新型气囊抛光技术。建立相应的机器人抛光系统,研究旋转型膨胀气囊抛光工具及抛光过程中各因素对抛光表面粗糙度的影响。对气囊抛光工具的位置和姿态控制问题以及抛光工... 为提高模具自由曲面抛光的效率和品质,提出一种基于柔性抛光理念的新型气囊抛光技术。建立相应的机器人抛光系统,研究旋转型膨胀气囊抛光工具及抛光过程中各因素对抛光表面粗糙度的影响。对气囊抛光工具的位置和姿态控制问题以及抛光工具,以一定下陷深度和倾斜角度与被抛工件接触时的接触区域的相关特性进行分析。在机器人抛光系统上进行抛光正交试验和试验数据分析,获取表面粗糙度的不同影响因数的最优参数组合,试验中被抛光曲面平均表面粗糙度达到了0.007μm。研究结果表明,气囊抛光技术可实现抛光工具与被抛光工件的大面积柔性接触,通过气囊内部气压的调节和机器人抛光系统对抛光工具的运动轨迹和姿态的精确控制,可有效地提升自由曲面抛光的品质和效率。 展开更多
关键词 气囊抛光技术 机器人抛光系统 抛光工具 接触区域 表面粗糙度
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核桃早实性状的RAPD分析 被引量:22
4
作者 杨克强 王跃进 +1 位作者 郑学勤 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期573-574,共2页
用BSA (BulkedSegregantAnalysis)法获得了与核桃早实性状相关的RAPD标记OPB 0 890 0 。混合分离群体的混合样来自早实品种辽 1的自然授粉实生后代。用 2 2 0个随机引物扩增早实和晚实混合样 ,只有引物OPB 0 8(5’GTCCACACGG 3’)在早... 用BSA (BulkedSegregantAnalysis)法获得了与核桃早实性状相关的RAPD标记OPB 0 890 0 。混合分离群体的混合样来自早实品种辽 1的自然授粉实生后代。用 2 2 0个随机引物扩增早实和晚实混合样 ,只有引物OPB 0 8(5’GTCCACACGG 3’)在早实混合样及其个体上扩增出了约 90 0bp的特异带OPB 0 890 0 ,而在晚实混合样及其个体上无此特异带。用OPB 0 8为引物 ,以 19个品种和 3个株系的DNA为模板进行扩增 ,特异带OPB 0 890 0 在 17个早实品种中的 12个个体上出现 ,而 5个晚实品种 (系 )上均无此带。 展开更多
关键词 RAPD 早实性状 核桃
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ISSR标记技术在药用植物资源中的研究进展及应用 被引量:35
5
作者 任梦云 陈彦君 +4 位作者 杜乐山 刘方 关潇 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期63-69,共7页
简单重复系列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)是在简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)基础上发展起来的一种新型分子标记技术。目前药用植物研究与开发面临资源枯竭、药效物质不明确及质量难以控制等难题,DNA分子标记技... 简单重复系列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)是在简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)基础上发展起来的一种新型分子标记技术。目前药用植物研究与开发面临资源枯竭、药效物质不明确及质量难以控制等难题,DNA分子标记技术,包括ISSR技术为上述难题提供了新的解决办法。比较了几种常用分子标记的优缺点,最后着重介绍了目前广泛应用于药用植物研究中的DNA分子标记ISSR的技术原理和特点,综述了ISSR分子标记技术在药用植物的遗传多样性和遗传结构、种质资源鉴定、中药品质鉴定,以及遗传图谱等方面的研究进展及应用前景,旨为药用植物的开发和利用提供参考。 展开更多
关键词 ISSR 分子标记 药用植物 品质鉴定 基因图谱
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3种氧化酶与辣椒抗蚜性的相关性 被引量:26
6
作者 陈青 《热带作物学报》 CSCD 2004年第3期42-46,共5页
采用分光光度法和垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、抗坏血酸氧化酶(AsA-POD)与辣椒抗蚜性的相关性。结果表明:抗、感品种叶组织内PPO,POD,AsA-POD活性在受蚜虫侵害后均明显提高,但高抗和抗蚜品种较... 采用分光光度法和垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、抗坏血酸氧化酶(AsA-POD)与辣椒抗蚜性的相关性。结果表明:抗、感品种叶组织内PPO,POD,AsA-POD活性在受蚜虫侵害后均明显提高,但高抗和抗蚜品种较高感和感蚜品种反应更灵敏,在接虫初期其POD,PPO和AsA-POD活性即上升到一个很高水平,活性增强远远高于高感和感蚜品种,且在受蚜虫侵害后保持稳定的高活性水平;高抗和抗蚜品种叶组织内的POD和PPO同工酶谱带在受蚜虫侵害前后均保持稳定不变,没有新谱带的出现,而高感和感蚜品种在受蚜虫侵害后POD和PPO同工酶谱带均有变化,蚜虫侵害前其POD和PPO同工酶谱带均与高抗和抗蚜品种相同,但受蚜虫侵害后分别减少2条和3条。相关分析表明,辣椒受蚜虫侵害后,叶组织内POD,PPO和AsA-POD活性的增强及POD和PPO同工酶谱的稳定性与辣椒抗蚜性显著相关。 展开更多
关键词 氧化酶 辣椒 抗蚜性 相关性
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双价抗菌肽基因转化辣椒 被引量:23
7
作者 李乃坚 余小林 +3 位作者 李颖 黄自然 王得元 《热带作物学报》 CSCD 2000年第4期45-51,共7页
在建立高效快速辣椒(Capsicum  annuum  L,)子叶离体培养和植株再生体系的基础上,将昆虫抗菌肽B、D基因构建而成的双价质粒pCDB-II以农杆菌为介导转入5个辣椒栽培品种,共获得KanR植株1200多株... 在建立高效快速辣椒(Capsicum  annuum  L,)子叶离体培养和植株再生体系的基础上,将昆虫抗菌肽B、D基因构建而成的双价质粒pCDB-II以农杆菌为介导转入5个辣椒栽培品种,共获得KanR植株1200多株,对部分KanR植株进行点杂交、PCR、Southern杂交检测,结果证明了外源基因被成功整合。盆栽接青枯菌试验,结果显示,转基因植株具有较强的抗病力。 展开更多
关键词 辣椒 抗菌肽 双基因表达载体 基因转化
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离体培养橡胶树体细胞诱导纯多倍性无性系方法的研究初报 被引量:20
8
作者 曾宪松 树珍 +4 位作者 郑学勤 陈惠吟 刘北洋 郑楷 《热带作物学报》 CSCD 1997年第2期15-20,共6页
研究结果表明,用0.5%的秋水仙素处理橡胶树二倍体花药体细胞愈伤组织(浸泡或滴渍)1d可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株,通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的,其体细... 研究结果表明,用0.5%的秋水仙素处理橡胶树二倍体花药体细胞愈伤组织(浸泡或滴渍)1d可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株,通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的,其体细胞染色体数为2n=72,未见嵌合现象,对照的2n=36。 展开更多
关键词 橡胶树 体细胞 离体培养 多倍体无性系 无性系
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抗菌肽基因转化辣椒的研究 被引量:15
9
作者 唐跃 曾宪松 《华南热带农业大学学报》 2000年第1期1-4,共4页
以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3~ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1~ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5~ 1m... 以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3~ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1~ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5~ 1mg/L。利用农杆菌介导的三亲交配法将抗菌肽基因CecropinB ,CecropinD导入辣椒 ,获得了再生植株 ,经PCR和Southern杂交检测 ,表明目的基因已整合到辣椒核基因组中 。 展开更多
关键词 细菌病 辣椒 抗菌肽基因 转基因育种 抗病育种
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大花蕙兰的组织培养 被引量:15
10
作者 树珍 曾宪松 +2 位作者 郑学勤 陈惠吟 《热带作物研究》 1995年第4期26-28,共3页
大花蕙兰的茎尖先诱导形成原球茎,再通过原球茎→原球茎→丛生芽→完整植株,可在短期内获得大量种苗。在原球茎或丛生芽的继代增殖过程中,在培养基中加入0.5~1.0g/L活性炭,可抑制培养物产生红色的多酚氧化物,从而提高繁... 大花蕙兰的茎尖先诱导形成原球茎,再通过原球茎→原球茎→丛生芽→完整植株,可在短期内获得大量种苗。在原球茎或丛生芽的继代增殖过程中,在培养基中加入0.5~1.0g/L活性炭,可抑制培养物产生红色的多酚氧化物,从而提高繁殖速度。 展开更多
关键词 大花蕙兰 组织培养
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基因枪法转化甘蔗胚性愈伤组织获得转基因甘蔗白化苗 被引量:14
11
作者 林俊芳 +1 位作者 陈如凯 郑学勤 《福建农业大学学报》 CSCD 1997年第1期18-23,共6页
采用JQ-700型高速基因枪,以NPTⅡ基因为选择标记基因,以抗菌肽D基因为目的基因,设25mm和35mm2种火药套管,长短2种容器室,一次和两次轰击共8种处理组合,对甘蔗胚性愈伤组织进行轰击转化.结果25mm火药套... 采用JQ-700型高速基因枪,以NPTⅡ基因为选择标记基因,以抗菌肽D基因为目的基因,设25mm和35mm2种火药套管,长短2种容器室,一次和两次轰击共8种处理组合,对甘蔗胚性愈伤组织进行轰击转化.结果25mm火药套管短容器室二次轰击和35mm火药套管短容器室二次轰击的2种处理组合。 展开更多
关键词 甘蔗 基因枪法 遗传转化 转基因甘蔗
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微流体油液检测芯片设计 被引量:20
12
作者 洪朋 兴明 +2 位作者 郭力 孙玉清 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第4期762-767,共6页
液压油中的磨损颗粒会引发液压系统故障,同时也是机械故障信息的重要载体,因此对液压油中的磨损颗粒进行检测和分析十分重要。基于电感测量技术和微流体技术,设计出微流体油液检测芯片。在该芯片中,磨损颗粒与平面电感线圈的理论间距为0... 液压油中的磨损颗粒会引发液压系统故障,同时也是机械故障信息的重要载体,因此对液压油中的磨损颗粒进行检测和分析十分重要。基于电感测量技术和微流体技术,设计出微流体油液检测芯片。在该芯片中,磨损颗粒与平面电感线圈的理论间距为0,检测装置的灵敏度得到极大地提高。本文通过数值仿真和实验验证手段研究了平面电感线圈几何参数与电感变化量的关系。结果表明,当铁磁质颗粒通过检测通道时,测得的电感变化量随着线圈匝数的增加而增大,但是随着线圈线宽的增大而减小。本研究为解决油液金属颗粒检测问题提供了一个良好的方案。 展开更多
关键词 磨粒 液压油 微流体芯片 平面电感
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微流体油液检测芯片分辨率-频率特性研究 被引量:20
13
作者 兴明 洪朋 +2 位作者 陈海泉 孙玉清 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期427-433,共7页
金属磨粒是润滑油的主要污染物,也是机器系统运行状态的重要指标。介绍了基于电感原理的微流体油液金属颗粒计数器。该装置的设计使得油液中的磨粒与检测线圈之间具有很小的距离,因而具有较高的检测灵敏度,该方法可以有效区分铁磁性金... 金属磨粒是润滑油的主要污染物,也是机器系统运行状态的重要指标。介绍了基于电感原理的微流体油液金属颗粒计数器。该装置的设计使得油液中的磨粒与检测线圈之间具有很小的距离,因而具有较高的检测灵敏度,该方法可以有效区分铁磁性金属颗粒和非铁磁性金属微粒,目前实验条件下可以对液压油中19μm的铁颗粒和40μm的铜颗粒进行检测计数。对芯片激励源频率与微流体芯片检测分辨率的关系进行了实验研究和建模仿真,结果表明,若要提高芯片的检测分辨率,铁磁性金属颗粒检测需采用低频率激励,而对非铁磁性颗粒的检测需要尽量采用高的激励频率。 展开更多
关键词 微流体芯片 金属颗粒检测 分辨率-频率特性
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药用植物锁阳的研究进展 被引量:20
14
作者 任梦云 杨光 +5 位作者 杜乐山 刘方 沈奇 关潇 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期95-98,共4页
锁阳(Cynomorium songaricum Rupr)为锁阳科(Cynomoriaceae)锁阳属(Cynomorium songaricum)多年生、全寄生草本植物,具补肾助阳、益精血、润肠通便之功效,是一种珍稀濒危药用植物,目前常用于中、蒙、藏药中。综述了锁阳的生物学特征、... 锁阳(Cynomorium songaricum Rupr)为锁阳科(Cynomoriaceae)锁阳属(Cynomorium songaricum)多年生、全寄生草本植物,具补肾助阳、益精血、润肠通便之功效,是一种珍稀濒危药用植物,目前常用于中、蒙、藏药中。综述了锁阳的生物学特征、遗传多样性、化学成分及药理作用、以及人工栽培技术等方面的研究进展,在此基础上提出了今后研究重点与热点,即着重研究锁阳生物活性成分的药理作用机制,构建一套完整的锁阳药材质量评估体系,其次应深入研究锁阳种质资源、资源保护与再生,加强锁阳的人工繁育技术,以期为锁阳的合理利用与保护提供理论参考。 展开更多
关键词 锁阳 药理活性 生物学特征 遗传多样性 资源保护
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抗菌肽B基因的点突变及在昆虫细胞中的表达 被引量:12
15
作者 吴代飞 曾宪松 +3 位作者 彭存智 黄亚 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1999年第3期54-59,共6页
抗菌肽B基因经PCR定点突变技术改造后,克隆到杆状病毒转移载体pAcGP67B中的信号肽位点上,随后与野生AcNPV-DNA共转染Sf9细胞,经空斑筛选、PCR检测证实获得含该基因的重组病毒。重组病毒在Sf9细胞中扩... 抗菌肽B基因经PCR定点突变技术改造后,克隆到杆状病毒转移载体pAcGP67B中的信号肽位点上,随后与野生AcNPV-DNA共转染Sf9细胞,经空斑筛选、PCR检测证实获得含该基因的重组病毒。重组病毒在Sf9细胞中扩增并表达抗菌肽B基因。取含表达产物的细胞培养液检测其生物活性表明:改造过的抗菌肽B基因在Sf9细胞中获得初步表达,且表达的分泌型产物对EscherichiacoliK12D31有抑菌活性。 展开更多
关键词 抗菌肽 PCR 杆状病毒 SF9细胞 表达
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与辣椒抗蚜性基因连锁的RAPD标记 被引量:9
16
作者 陈青 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期737-738,共2页
运用RAPD技术,在F2代群体中采用混合分组分析法(bulked.segregant analysis,BSA)进行分子标记研究,找到一个与辣椒抗蚜性基因连锁的RAPD标记OPA18600,并在杂种后代F2群体和供试抗、感品种中得到了验证。
关键词 辣椒 蚜虫 抗虫性 基因连锁 RAPD标记
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基于事故统计分析的水上交通安全管理研究 被引量:15
17
作者 李文华 马晓雪 +2 位作者 陈海泉 乔卫亮 《安全与环境工程》 CAS 北大核心 2013年第1期132-137,共6页
为了预防和减少水上交通事故的发生,本文通过统计分析长江某段水域近6年间水上交通事故资料,探讨了长江某段水域内水上交通事故的发生规律,分析了导致水上交通事故频发的人、船舶、环境、管理各方面的主要原因,并提出了相应的安全管理对... 为了预防和减少水上交通事故的发生,本文通过统计分析长江某段水域近6年间水上交通事故资料,探讨了长江某段水域内水上交通事故的发生规律,分析了导致水上交通事故频发的人、船舶、环境、管理各方面的主要原因,并提出了相应的安全管理对策,以为制定科学合理的水上交通安全管理措施以及海事管理机构有针对性地实施监管提供依据。 展开更多
关键词 水上交通 事故统计分析 安全管理
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农杆菌介导的枳壳转化系统建立研究初报 被引量:9
18
作者 韩美丽 李耿光 +3 位作者 贺红 兰英 陆荣生 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期47-51,共5页
以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植... 以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植体水平面放置时 ,选择剂的剂量是 50~ 70mg/ L。转化研究中发现感染液中乙酰丁香酮 10 0μmol/ L的加入促进转化外植体 Gus表达阳性率的提高。延迟 1a的选择培养 ,有助于 Gus阳性芽的增多。所得 Gus阳性无性系经 Southern blot杂交检测 ,证明外源基因已稳定整合到了植物基因组中 ,所得 展开更多
关键词 枳壳 农杆菌 抗病育种 衰退病病毒外壳蛋白基因
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应用SRAP分子标记评价辣椒自交系的遗传关系 被引量:10
19
作者 任羽 +1 位作者 尹俊梅 王得元 《热带作物学报》 CSCD 2008年第1期47-52,共6页
将新型分子标记SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)应用于辣椒自交系的遗传关系的研究,采用30个引物组合对31个辣椒自交系进行扩增,其中有27个引物组合可以获得多态性扩增,显示了较高的多态性。27个引... 将新型分子标记SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)应用于辣椒自交系的遗传关系的研究,采用30个引物组合对31个辣椒自交系进行扩增,其中有27个引物组合可以获得多态性扩增,显示了较高的多态性。27个引物组合共扩增出310个多态性条带,平均每个引物组合产生11.5个多态性条带。31个自交系间的相似系数为0.133~0.997。聚类分析将31个自交系分为:在相似系数D为0.55处,将辣椒的2个变种分开;在相似系数D为0.67处,将辣椒分为4类。结果显示,SRAP是辣椒自交系研究中一种较好标记,其分类结果有助于利用这些自交系进行杂交亲本的选配。 展开更多
关键词 辣椒 SRAP 聚类分析
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分子标记预测作物杂种优势的研究进展 被引量:7
20
作者 任羽 王得元 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第3期401-406,共6页
杂种优势育种是蔬菜作物的一种重要育种技术。国内外利用RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR等分子标记技术开展了作物杂种优势预测的方法研究,取得了富有启示性的研究结果。本文分析和述评了国内外作物杂种优势分子预测的遗传距离法、杂种优... 杂种优势育种是蔬菜作物的一种重要育种技术。国内外利用RFLP、RAPD、AFLP、SSR、ISSR等分子标记技术开展了作物杂种优势预测的方法研究,取得了富有启示性的研究结果。本文分析和述评了国内外作物杂种优势分子预测的遗传距离法、杂种优势类群法、QTL法认为基于QTL的杂种优势类群和遗传距离相结合的方法将是作物杂种优势预测研究今后的研究重点和热点,并最有可能在育种实践中得以应用。 展开更多
关键词 分子标记 预测预报 杂种优势 蔬菜作物
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