目的探讨静脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗脑梗死的疗效及其机制。方法全骨髓贴壁法分离、培养BMSCs;流式细胞仪鉴定BMSCs;线栓法制作MCAO大鼠模型;采用粘附实验和改良神经功能损伤评分(mNSS)评估大鼠的行为功能恢复;直接免疫荧光...目的探讨静脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗脑梗死的疗效及其机制。方法全骨髓贴壁法分离、培养BMSCs;流式细胞仪鉴定BMSCs;线栓法制作MCAO大鼠模型;采用粘附实验和改良神经功能损伤评分(mNSS)评估大鼠的行为功能恢复;直接免疫荧光法检测Brdu标记的BMSCs;免疫组织化学染色检测大鼠脑组织NSE、Nogo-A、SYN、Ki-67、GFAP、VEGF表达;Bielshowsky's-Luxol fast blue双染检测神经纤维的变化。结果 BMSCs中表达CD106,低表达CD34、CD45、CD11b,高表达CD90、CD29。BMSCs移植后MCAO大鼠模型的神经功能明显好转(P<0.05),梗死侧的神经纤维明显增多,脑组织SYN、Ki-67、GFAP、VEGF的表达增多(P<0.05),Nogo-A表达降低(P<0.05),NSE无显著变化(P>0.05),脑梗死体积和胶质瘢痕厚度与PBS组比较无统计学差异(P>0.05)。结论静脉移植BMSCs能改善脑梗死的神经功能,其作用机制可能为促进血管再生和突触重建,增强神经纤维修复和内源性细胞增殖。展开更多
目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗脑缺血模型大鼠的时间窗及最佳移植时间点。方法雄性SD大鼠56只,随机分为移植组32只和对照组24只,在建立大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注模型后分为1、7、14、21 d 4个时间点。对大鼠进行改良神经...目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗脑缺血模型大鼠的时间窗及最佳移植时间点。方法雄性SD大鼠56只,随机分为移植组32只和对照组24只,在建立大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注模型后分为1、7、14、21 d 4个时间点。对大鼠进行改良神经功能缺损评分、HE染色、Bielshowsky Iuxol Fast Blue染色、直接免疫荧光染色和免疫组织化学染色。结果移植组1、7 d在移植14 d后,14、21 d在移植21 d后改良神经功能缺损评分明显低于对照组(P<0.05)。移植组1、7 d胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数、突触素累计吸光度值、胼胝体面积明显高于对照组(P<0.05)。移植组1、7、14、21 d Ki-67阳性细胞数明显高于对照组(P<0.05)。移植组7 d神经元特异性烯醇酶累计吸光度值明显高于对照组(P<0.05)。移植组1、7 d Nogo A阳性细胞数明显低于对照组(P<0.05)。结论 MSCs移植治疗大鼠脑缺血模型的时间窗可延长至制模后的21 d,最佳移植时间点为制模后7 d。MSCs移植治疗脑梗死的作用机制可能与其促进内源性修复相关。展开更多
目的明确妊娠期实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的神经功能的变化情况,并进一步探索其可能的作用机制。方法采用MOG35-55多肽诱导制作雌性EAE小鼠模型,按雌雄小鼠2:1比例合笼受孕,以成...目的明确妊娠期实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的神经功能的变化情况,并进一步探索其可能的作用机制。方法采用MOG35-55多肽诱导制作雌性EAE小鼠模型,按雌雄小鼠2:1比例合笼受孕,以成功妊娠的小鼠为妊娠组(n=10);未配孕的小鼠为对照组(n=10)。比较2组神经功能评分(5分评分法),脊髓实质内炎症细胞的浸润(HE法)及神经脱髓鞘(Bielshowsky’s-Luxol fast blue staining染色)情况,血清IFN-γ、IL-17、IL-10浓度(ELISA法),脾脏中Treg细胞数百分比(流式细胞术)。结果妊娠组小鼠神经功能缺损程度在妊娠后第10、13天较对照组显著降低(P<0.05),且妊娠组小鼠脊髓病灶区炎症细胞浸润程度较对照组显著降低(P<0.05);2组小鼠的脑和脊髓白质内均可见神经脱髓鞘改变,妊娠组的脱髓鞘程度较对照组轻(P<0.05);妊娠组小鼠血清的IFN-γ、IL-17浓度较对照组显著降低(P<0.05),但血清IL-10浓度较对照组显著升高(P<0.05);妊娠组小鼠脾脏中调节性T细胞(Treg细胞)数百分比较对照组显著升高(P<0.05)。结论妊娠期EAE小鼠的临床症状缓解且脊髓实质内炎症反应减轻;其可能的作用机制为上调Treg细胞的抗炎因子和抑制促炎因子的分泌。展开更多
文摘目的探讨静脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗脑梗死的疗效及其机制。方法全骨髓贴壁法分离、培养BMSCs;流式细胞仪鉴定BMSCs;线栓法制作MCAO大鼠模型;采用粘附实验和改良神经功能损伤评分(mNSS)评估大鼠的行为功能恢复;直接免疫荧光法检测Brdu标记的BMSCs;免疫组织化学染色检测大鼠脑组织NSE、Nogo-A、SYN、Ki-67、GFAP、VEGF表达;Bielshowsky's-Luxol fast blue双染检测神经纤维的变化。结果 BMSCs中表达CD106,低表达CD34、CD45、CD11b,高表达CD90、CD29。BMSCs移植后MCAO大鼠模型的神经功能明显好转(P<0.05),梗死侧的神经纤维明显增多,脑组织SYN、Ki-67、GFAP、VEGF的表达增多(P<0.05),Nogo-A表达降低(P<0.05),NSE无显著变化(P>0.05),脑梗死体积和胶质瘢痕厚度与PBS组比较无统计学差异(P>0.05)。结论静脉移植BMSCs能改善脑梗死的神经功能,其作用机制可能为促进血管再生和突触重建,增强神经纤维修复和内源性细胞增殖。
文摘目的明确妊娠期实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)小鼠的神经功能的变化情况,并进一步探索其可能的作用机制。方法采用MOG35-55多肽诱导制作雌性EAE小鼠模型,按雌雄小鼠2:1比例合笼受孕,以成功妊娠的小鼠为妊娠组(n=10);未配孕的小鼠为对照组(n=10)。比较2组神经功能评分(5分评分法),脊髓实质内炎症细胞的浸润(HE法)及神经脱髓鞘(Bielshowsky’s-Luxol fast blue staining染色)情况,血清IFN-γ、IL-17、IL-10浓度(ELISA法),脾脏中Treg细胞数百分比(流式细胞术)。结果妊娠组小鼠神经功能缺损程度在妊娠后第10、13天较对照组显著降低(P<0.05),且妊娠组小鼠脊髓病灶区炎症细胞浸润程度较对照组显著降低(P<0.05);2组小鼠的脑和脊髓白质内均可见神经脱髓鞘改变,妊娠组的脱髓鞘程度较对照组轻(P<0.05);妊娠组小鼠血清的IFN-γ、IL-17浓度较对照组显著降低(P<0.05),但血清IL-10浓度较对照组显著升高(P<0.05);妊娠组小鼠脾脏中调节性T细胞(Treg细胞)数百分比较对照组显著升高(P<0.05)。结论妊娠期EAE小鼠的临床症状缓解且脊髓实质内炎症反应减轻;其可能的作用机制为上调Treg细胞的抗炎因子和抑制促炎因子的分泌。
