非洲猪瘟流行病学及诊断技术研究进展 被引量：14

1

作者 宋浩 张丽 +2 位作者 张交儿 仇华吉 罗玉子 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1066-1076,共11页

非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种烈性、出血性、高度接触性传染病,致死率高达100%。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物传染病。... 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的猪的一种烈性、出血性、高度接触性传染病,致死率高达100%。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定报告动物疫病,我国将其列为一类动物传染病。目前尚无商品化疫苗和有效的治疗方法。2018年8月,ASF首次传入我国,随后迅速大范围蔓延,造成我国生猪存栏量急剧下降,猪肉价格大幅度上涨,给我国养猪业和食品经济造成了严重冲击。虽然目前生猪产能有较大恢复,但是ASF防控压力有增无减。2020年以来,各地陆续出现了ASFV变异株(基因Ⅱ型)和基因Ⅰ型弱毒株,与初期流行的毒株(基因Ⅱ型)相比,变异株潜伏期延长、感染猪临床症状不明显、死亡率降低,难以早期发现,给猪场ASF防控带来了新的挑战。因此,快速可靠的诊断技术和病原流行病学研究对ASF防控至关重要。本文对ASFV病原学、流行病学和实验室诊断技术进行了分析和梳理,以期为ASF流行趋势、诊断及防控提供技术参考。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 流行病学 变异株 诊断技术

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一种过硫酸氢钾复合物粉对非洲猪瘟病毒的灭活效果研究 被引量：11

2

作者 张交儿 罗玉子 +6 位作者 孙玥 孙锋 孙元 王涛 杨耀智 郝凯 仇华吉 《中国消毒学杂志》 CAS 2020年第5期321-322,325,共3页

目的研究一种过硫酸氢钾复合物粉对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果。方法采用悬液定量灭活试验和细胞培养法,观察一种过硫酸氢钾复合物粉对ASFV的灭活效果。结果用浓度为1000 mg/L的该过硫酸氢钾复合粉溶液作用5 min,可有效灭活悬液内ASF... 目的研究一种过硫酸氢钾复合物粉对非洲猪瘟病毒(ASFV)的灭活效果。方法采用悬液定量灭活试验和细胞培养法,观察一种过硫酸氢钾复合物粉对ASFV的灭活效果。结果用浓度为1000 mg/L的该过硫酸氢钾复合粉溶液作用5 min,可有效灭活悬液内ASFV。结论过硫酸氢钾复合物粉对ASFV具有良好的灭活效果,可作为猪场防控非洲猪瘟的有效消毒剂。 展开更多

关键词 过硫酸氢钾复合物粉 非洲猪瘟病毒 灭活效果

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结核分枝杆菌感染实验模型 被引量：9

3

作者 张交儿 周向梅 +3 位作者 孙斌 尹晓敏 杨建民 赵德明 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2008年第5期385-390,共6页

结核分枝杆菌是引起人结核病的主要病原,全世界约有1/3人口感染结核分枝杆菌。尽管该病原可感染并引起许多动物疾病,但人类是其中心宿主。为研究结核分枝杆菌的致病机理及宿主对本病原的保护性和免疫病理学反应,选择合适的动物模型非常... 结核分枝杆菌是引起人结核病的主要病原,全世界约有1/3人口感染结核分枝杆菌。尽管该病原可感染并引起许多动物疾病,但人类是其中心宿主。为研究结核分枝杆菌的致病机理及宿主对本病原的保护性和免疫病理学反应,选择合适的动物模型非常必要。本文阐述了结核病研究中常用的实验模型及各种模型的优缺点。实验模型的合理应用将促进我们对结核病的认识,从中获取的资料将有助于我们发现更好的预防和治疗方案。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 动物模型 组织培养模型

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体外弓形虫感染小鼠巨噬细胞对其极化的影响 被引量：6

4

作者 祝瑶 胡守萍 +4 位作者 张交儿 张卓 郑君 贾洪林 何希君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期475-478,共4页

为探索体外弓形虫感染小鼠巨噬细胞对其极化的影响,本研究采用M-CSF诱导分离的小鼠骨髓细胞分化为巨噬细胞,在体外以弓形虫感染骨髓来源的巨噬细胞,分别于感染后0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h收集细胞和细胞培养液,利用Griess法和Ar... 为探索体外弓形虫感染小鼠巨噬细胞对其极化的影响,本研究采用M-CSF诱导分离的小鼠骨髓细胞分化为巨噬细胞,在体外以弓形虫感染骨髓来源的巨噬细胞,分别于感染后0 h、6 h、12 h、24 h、36 h、48 h收集细胞和细胞培养液,利用Griess法和Arginase活性试验对i NOS和Arginase-1的酶活性进行检测。通过荧光定量PCR和western blot方法分别从m RNA水平和蛋白水平测定巨噬细胞中i NOS和Arginase-1的表达量。结果显示,弓形虫感染巨噬细胞后细胞中的Arginase-1的m RNA和蛋白含量均显著上调表达,i NOS的m RNA虽有短暂小幅度上调,但蛋白的含量无明显变化。本研究表明弓形虫感染巨噬细胞后能够明显诱导静息状态的巨噬细胞朝向M2型的方向极化,从而改变巨噬细胞的表型和功能。本研究为进一步阐明弓形虫与机体免疫系统相互作用提供了实验依据。 展开更多

关键词 弓形虫 巨噬细胞 极化

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生物安全在养猪业的发展与应用

5

作者 李树稳 李永锋 +4 位作者 张交儿 孙元 张新 黄淑坚 仇华吉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期38-44,共7页

随着规模化养猪的快速发展,烈性传染病造成的经济损失越来越大,而建立科学、高效的生物安全体系是有效预防和控制动物传染病的重要措施。在养猪生产过程中采取生物安全措施可以阻止或减少外部病原的引入(外部生物安全)及病原在养殖场内... 随着规模化养猪的快速发展,烈性传染病造成的经济损失越来越大,而建立科学、高效的生物安全体系是有效预防和控制动物传染病的重要措施。在养猪生产过程中采取生物安全措施可以阻止或减少外部病原的引入(外部生物安全)及病原在养殖场内的传播(内部生物安全)。同时,科学的生物安全体系还有助于提高养殖生产效率、减少药物和疫苗的使用量。文章综述了目前国内养猪业主要采取的生物安全措施,同时系统分析了美洲和欧洲国家生物安全措施在猪场应用的发展历程,以期为完善我国养猪业生物安全防控体系提供借鉴。 展开更多

关键词 生物安全 养猪业 疾病预防 发展 生物安全规范

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伪狂犬病毒人工感染小鼠模型的建立 被引量：5

6

作者 臧素芳 黄嘉妮 +4 位作者 胡守萍 张卓 张交儿 祝瑶 何希君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期742-745,共4页

为建立伪狂犬病毒（PRV）人工感染小鼠的模型，本研究采用PRV强毒株接种猪、羊及小鼠，疫苗株接种小鼠，应用组织病理技术观察PRV人工感染不同动物导致的组织病变。以1×10^2～4．5×10^4TCID50不同梯度剂量PRv强毒株通过滴鼻... 为建立伪狂犬病毒（PRV）人工感染小鼠的模型，本研究采用PRV强毒株接种猪、羊及小鼠，疫苗株接种小鼠，应用组织病理技术观察PRV人工感染不同动物导致的组织病变。以1×10^2～4．5×10^4TCID50不同梯度剂量PRv强毒株通过滴鼻或皮下接种途径人工感染小鼠，6×10^4～2．7×10^5TCID50不同剂量疫苗株皮下接种小鼠，统计各人工感染剂量下小鼠存活率。感染PRV动物脑部病理切片经苏木素．伊红（HE）染色观察，结果显示PRV强毒株及疫苗株接种小鼠后与PRV感染猪、羊后出现相似病理变化，均可导致炎性细胞的浸润及大脑实质内小胶质细胞的增殖。免疫组化染色表明PRV可以感染小鼠脑组织。本研究最终采用小鼠作为实验动物，应用PRV疫苗株，采用1×10^5TCID50剂量通过皮下注射接种小鼠，在接种后6d观察病变。该实验模型为进一步研究PRV感染小鼠后的天然免疫机制提供了实验依据。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 人工感染 小鼠模型

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猪伪狂犬病病毒抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：5

7

作者 张闪闪 刘永刚 +4 位作者 涂亚斌 王刚 张交儿 陈金顶 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期456-460,共5页

为建立一种快速检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的血清学方法,本实验采用原核重组表达的g E蛋白作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测PRV血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测PRV阳性血清和其它猪病病原阳性血清,除了PRV阳性血清... 为建立一种快速检测猪伪狂犬病病毒(PRV)的血清学方法,本实验采用原核重组表达的g E蛋白作为包被抗原,并对各反应条件进行优化,建立了检测PRV血清抗体的间接ELISA方法。以该方法检测PRV阳性血清和其它猪病病原阳性血清,除了PRV阳性血清呈阳性外,对其它猪病病原阳性血清的检测结果均为阴性,表明该方法具有良好的特异性。批内和批间重复试验的最大变异系数分别是5.95%和9.62%。此外,使用该方法对250份临床血清进行检测,与国内外4种商品化试剂盒的检测结果比较符合率最高为83.6%。表明该方法可以用于PRV的临床检测,为PRV流行病学调查和防控提供了一种快速有效的检测方法。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 gE 间接ELISA

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染对仔猪单核巨噬细胞系统影响的研究 被引量：2

8

作者 李易儒 陈立思 +5 位作者 胡守萍 张交儿 张卓 刘强 王龙涛 何希君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期865-868,共4页

为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染对仔猪单核巨噬细胞系统的影响,本实验采用HP-PRRSV Hu N4株人工感染30日龄的健康断奶仔猪。接种后的第7 d、10 d和14 d,分别通过组织学、免疫组织化学以及免疫荧光组织化学方法对... 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)感染对仔猪单核巨噬细胞系统的影响,本实验采用HP-PRRSV Hu N4株人工感染30日龄的健康断奶仔猪。接种后的第7 d、10 d和14 d,分别通过组织学、免疫组织化学以及免疫荧光组织化学方法对脾脏、淋巴结和肺脏组织中巨噬细胞的数量进行研究,分析病毒感染后单核巨噬细胞变化的规律。本研究实验结果显示,感染后仔猪脾脏以及淋巴结中的单核巨噬细胞逐渐增多,第14 d达到峰值;免疫组化增殖细胞核抗原(PCNA)的结果显示,在感染HP-PRRSV的仔猪肺组织和脾组织中出现大量巨噬细胞的增殖。脾组织的免疫荧光双重染色的结果显示PRRSV出现在巨噬细胞中,表明脾脏巨噬细胞是HP-PRRSV的主要靶细胞,并且诱导脾中巨噬细胞的增生。本研究对进一步研究宿主感染HP-PRRSV的天然免疫反应及阐明病毒的致病机制奠定了基础。 展开更多

关键词 HP-PRRSV 免疫组织化学 间接免疫荧光

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猪肺泡巨噬细胞极化对猪瘟病毒复制的影响 被引量：2

9

作者 高素丽 胡守萍 +3 位作者 张交儿 张卓 刘强 何希君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期91-95,共5页

为探究猪肺泡巨噬细胞(PAM)极化与猪瘟病毒(CSFV)复制之间的关系,本研究首先通过支气管肺泡灌洗液法建立了高纯度原代肺泡巨噬细胞的培养体系。通过western blot确立了PAM向M1和M2型巨噬细胞极化的鉴别体系,并用CCK8法检测巨噬细胞极化... 为探究猪肺泡巨噬细胞(PAM)极化与猪瘟病毒(CSFV)复制之间的关系,本研究首先通过支气管肺泡灌洗液法建立了高纯度原代肺泡巨噬细胞的培养体系。通过western blot确立了PAM向M1和M2型巨噬细胞极化的鉴别体系,并用CCK8法检测巨噬细胞极化后的细胞活性。在此基础上,通过间接免疫荧光试验和荧光定量PCR分别检测感染不同亚型PAM的CSFV E2蛋白的表达及其E2基因的转录水平,显示PAM向M1型的极化可减少CSFV E2蛋白的表达,从而抑制病毒的复制。本研究不仅为研究宿主对CSFV的免疫机制提供了重要线索,而且为设计基于巨噬细胞极化亚型防制CSF新策略提供一定依据。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 肺泡巨噬细胞 极化 病毒复制

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一例猫胰腺癌的病理学诊断 被引量：2

10

作者 杜凤林 张卓 +1 位作者 张交儿 胡守萍 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 CAS 北大核心 2015年第6期70-70,184,共2页

胰腺癌多发生于中老年人,在发达国家的发病率高于发展中国家。近年来胰腺癌的发病率呈现上升的趋势,并且有年轻化的倾向。随着宠物猫饲养的增加,临床上猫患肿瘤疾病的比例也逐渐增多。哈尔滨兽医研究所病理研究室收到某宠物医院送检的... 胰腺癌多发生于中老年人,在发达国家的发病率高于发展中国家。近年来胰腺癌的发病率呈现上升的趋势,并且有年轻化的倾向。随着宠物猫饲养的增加,临床上猫患肿瘤疾病的比例也逐渐增多。哈尔滨兽医研究所病理研究室收到某宠物医院送检的来自于猫体内的不明肿大物,经病理组织学及免疫组织化学检测,最终诊断为胰腺癌。 展开更多

关键词 胰腺外分泌 病理学诊断 肿瘤疾病 病理组织学 宠物猫 肿瘤病 胰腺肿瘤 免疫组织化学 组织病理学变化 胰腺腺泡

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一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体PCR方法的建立 被引量：2

11

作者 文辉强 刘永刚 +4 位作者 石文达 武嘉男 姜成刚 张交儿 蔡雪辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期18-20,23,共4页

本试验目的是建立一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法。根据GenBank上猪嗜血支原体16S rRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列... 本试验目的是建立一种基于16SrRNA基因检测猪嗜血支原体的PCR方法。根据GenBank上猪嗜血支原体16S rRNA基因(ID:U88565)设计特异引物,对哈尔滨采集病料进行PCR并克隆pMD18-T,测序所扩增的片段为411bp,同源性分析表明,该序列与参考序列同源性97.57%。特异性和敏感性试验表明,所建立的PCR诊断方法对猪肺炎支原体、大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌无交叉反应;血液基因组DNA最小检出量为0.75fg/μL。该方法具有快速、特异、敏感等特点,为猪嗜血支原体病的快速诊断及流行病学调查提供了新的手段。 展开更多

关键词 猪嗜血支原体 PCR 16S RRNA基因

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猪戊型肝炎病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：2

12

作者 闫蕾 涂亚斌 +5 位作者 李海 张交儿 王刚 刘永刚 陈志宝 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期322-325,共4页

为建立猪戊型肝炎病毒(SHEV)的TaqMan荧光定量PCR检测方法,本研究根据SHEV基因ORF2保守区设计引物及探针,并对PCR反应条件进行优化。结果表明,该方法扩增的相关系数可达0.999,在102拷贝/μL^109拷贝/μL内具有良好的线性关系。对猪圆环... 为建立猪戊型肝炎病毒(SHEV)的TaqMan荧光定量PCR检测方法,本研究根据SHEV基因ORF2保守区设计引物及探针,并对PCR反应条件进行优化。结果表明,该方法扩增的相关系数可达0.999,在102拷贝/μL^109拷贝/μL内具有良好的线性关系。对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病毒的RNA或DNA进行检测,结果均为阴性。该方法可以检出最低拷贝数为10拷贝/μL。重复性试验结果表明该方法的批内和批间变异系数均小于3.0%。本研究使用该荧光定量PCR检测方法对黑龙江省临床收集的131份样品(肝脏45份、粪便86份)进行检测,总阳性率为11.45%,其中肝脏阳性率为22.22%,粪便阳性率为5.81%。该方法的建立为SHEV的快速检出及绝对定量奠定了良好的基础。 展开更多

关键词 猪戊型肝炎病毒 荧光定量PCR TAQMAN探针 应用

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体外弓形虫感染小鼠小胶质细胞及对其极化的影响

13

作者 陈立思 胡守萍 +5 位作者 张交儿 张卓 刘强 贾洪林 王龙涛 何希君 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期243-247,共5页

为探究体外弓形虫(T.gondii)感染小鼠小胶质细胞(Microglia)后对其极化的影响,将PLK株弓形虫接种原代小胶质细胞,分别在弓形虫感染细胞后6 h、12 h、24 h、36 h以及48 h收集细胞及培养上清,利用荧光定量PCR、western blot分别检测小胶... 为探究体外弓形虫(T.gondii)感染小鼠小胶质细胞(Microglia)后对其极化的影响,将PLK株弓形虫接种原代小胶质细胞,分别在弓形虫感染细胞后6 h、12 h、24 h、36 h以及48 h收集细胞及培养上清,利用荧光定量PCR、western blot分别检测小胶质细胞M1型以及M2型标记分子的表达水平。采用Griess法和精氨酸酶活性试验分别检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arginase-1)的酶活性。结果显示,弓形虫感染细胞后M1型标记分子iNOS与IL-6的mRNA转录水平与蛋白水平均显著上调(p<0.001),而M2型标记分子Arginase-1与IL-10无明显变化(p>0.05)。此外,酶活性检测结果显示iNOS在弓形虫感染6 h～48 h与对照组相比其表达水平有显著差异(p<0.001),而Arginase-1在该时间段表达差异并不显著。本研究结果表明,弓形虫感染小胶质细胞后能够明显诱导静息状态的小胶质细胞向M1型极化,从而改变小胶质细胞的表型和生物学功能,本研究为进一步阐明弓形虫与机体免疫系统相互作用提供了依据。 展开更多

关键词 弓形虫 小胶质细胞 极化

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IFN-γ诱导感染牛分枝杆菌的THP-1细胞凋亡及AIF信号通路

14

作者 张交儿 孙斌 +4 位作者 黄瑛 许立华 周向梅 尹晓敏 赵德明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1217-1222,共6页

将质量浓度为15μg/L的IFN-γ作用于不同剂量M.bovis(MOI10∶1,20∶1)北京株感染的THP-1细胞,在感染后12,24,36,48、72h,使用流式细胞仪测定其细胞凋亡百分比。结果表明:IFN-γ诱导了牛分枝杆菌北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相... 将质量浓度为15μg/L的IFN-γ作用于不同剂量M.bovis(MOI10∶1,20∶1)北京株感染的THP-1细胞,在感染后12,24,36,48、72h,使用流式细胞仪测定其细胞凋亡百分比。结果表明:IFN-γ诱导了牛分枝杆菌北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相关性。在相同时间,感染剂量为MOI10∶1和MOI20∶1的THP-1细胞经IFN-γ诱导后,细胞凋亡数无显著差异(P>0.05)。将IFN-γ(15μg/L)和牛分枝杆菌北京株(MOI10∶1)处理的THP-1细胞孵育36h后,使用免疫细胞化学的方法检测细胞核内凋亡诱导相关因子(AIF)的变化,结果发现,细胞核内牛分枝杆菌单独感染和IFN-γ刺激的牛分枝杆菌感染的巨噬细胞的AIF的百分比分别为(11.38±1.00)%和(23.26±1.85)%,两者相比差异显著(P<0.05)。表明在IFN-γ诱导的牛分枝杆菌感染的THP-1细胞凋亡过程中,AIF介导的凋亡信号通路被激活。本研究首次报道了在IFN-γ诱导的牛分枝杆菌北京株感染的THP-1细胞凋亡过程中AIF相关信号通路,对阐明IFN-γ在牛分枝杆菌感染中的作用机制具有重要意义。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 IFN-Γ THP-1细胞 细胞凋亡 AIF 信号通路

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TNF-α在IFN-γ诱导的感染牛分枝杆菌的THP-1细胞凋亡过程中的作用及相关信号通路分析

15

作者 张交儿 王志远 +4 位作者 黄瑛 王洋 尹晓敏 周向梅 赵德明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期581-586,共6页

为研究IFN-γ对感染牛分枝杆菌的THP-1细胞的促凋亡作用,及TNF-α在此细胞凋亡过程中的作用和相关信号分子的变化,使用浓度为15 ng.mL-1的IFN-γ作用于不同剂量牛分枝杆菌北京株(MOI10∶1,20∶1)感染的THP-1细胞,在感染后12、24、36、48... 为研究IFN-γ对感染牛分枝杆菌的THP-1细胞的促凋亡作用,及TNF-α在此细胞凋亡过程中的作用和相关信号分子的变化,使用浓度为15 ng.mL-1的IFN-γ作用于不同剂量牛分枝杆菌北京株(MOI10∶1,20∶1)感染的THP-1细胞,在感染后12、24、36、48和72 h,使用流式细胞仪测定细胞凋亡百分比。结果显示,IFN-γ诱导了M.bovis北京株感染的细胞凋亡,并且凋亡呈时间相关性。随着细胞凋亡百分比的增加,牛分枝杆菌的CFU降低。在IFN-γ和M.bovis北京株(MOI10∶1)处理的巨噬细胞内加入抗TNF-α单克隆抗体,感染后36 h,细胞凋亡百分比测定结果显示,加入抗TNF-α单抗抑制了IFN-γ诱导的M.bovis感染的THP-1细胞的凋亡,与对照组相比,差异显著(P<0.05);用分光光度计检测表明Caspase-3和Caspase-8的激活是TNF-α依赖性的。在IFN-γ和M.bovis北京株(MOI10∶1)作用的THP-1细胞内分别加入JNKinhibitor I或NEMO-Binding Domain BindingPeptide,或同时加入2种抑制剂,36 h后测定细胞凋亡情况,与对照组相比,加入抑制剂后,细胞凋亡无显著差异(P>0.05),说明在本试验中,JNK通路和NF-κB凋亡通路未被激活。本研究初步阐明了TNF-α在IFN-γ诱导的感染牛分枝杆菌的细胞凋亡过程中的作用及相关信号通路。 展开更多

关键词 牛分枝杆菌 IFN-Γ THP-1细胞 细胞凋亡 TNF-Α 信号通路

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猫β干扰素基因的克隆及表达

16

作者 刘宝山 赵玉军 张交儿 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期205-208,共4页

根据GeneBank上的猫IFN-β基因序列,设计了1对特异性引物,对猫肝组织中提取的DNA进行PCR扩增,然后将扩增产物插入pUCm-T克隆载体进行了克隆。测序分析表明,克隆的IFN-β基因序列与GeneBank中的基因(NM_001009297)存在一个碱基差异,第44... 根据GeneBank上的猫IFN-β基因序列,设计了1对特异性引物,对猫肝组织中提取的DNA进行PCR扩增,然后将扩增产物插入pUCm-T克隆载体进行了克隆。测序分析表明,克隆的IFN-β基因序列与GeneBank中的基因(NM_001009297)存在一个碱基差异,第446位碱基由T变为C,二者同源性高达99.82%,同时这个碱基的差异没有引起氨基酸的改变。将其双酶切后插入原核表达载体pGEX-KG,构建成功重组表达载体pGEX-IFNB,将其转化BL21(DE3)后成功进行了诱导表达。SDS-PAGE和Western-Blot分析表明,在35KDa处出现蛋白表达条带,表达量占菌体蛋白的12%。在Western-Blot中其能和GST抗体发生特异性反应,说明为GST-IFN-β融合蛋白。 展开更多

关键词 Β干扰素 猫 克隆 表达

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朊蛋白多肽PrP 106-126对N2a细胞活性及PrP mRNA表达的影响

17

作者 白瑜 张交儿 +2 位作者 尹晓敏 周向梅 赵德明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期21-23,共3页

关键词 PrP^c MRNA表达 蛋白多肽 细胞活性 神经元 错误折叠 正常细胞 朊病毒

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猪戊型肝炎病毒黑龙江分离株SWHLJ-BXBX全基因组序列的测定与分析

18

作者 李海 王刚 +6 位作者 张交儿 何希君 刘永刚 姜成刚 王淑杰 涂亚斌 蔡雪辉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第6期176-178,共3页

为了研究猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)黑龙江分离株SWHLJ-BXBX的全基因组序列,并对其序列特征和进化关系进行分析,试验采用RT-n PCR、5'-RACE、3'-RACE方法和Megalign、MEGA 6等生物学软件对SWHLJ-BXBX的全基因组序... 为了研究猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)黑龙江分离株SWHLJ-BXBX的全基因组序列,并对其序列特征和进化关系进行分析,试验采用RT-n PCR、5'-RACE、3'-RACE方法和Megalign、MEGA 6等生物学软件对SWHLJ-BXBX的全基因组序列进行了研究。结果表明:SWHLJ-BXBX全基因组序列去除poly A后全长为7 240 bp,5'UTR有25个碱基,3'UTR全长为70 bp,ORF1编码1 707个氨基酸,ORF2编码674个氨基酸,ORF3编码114个氨基酸,进化树分析表明SWHLJBXBX属于HEVⅣd基因亚型。 展开更多

关键词 猪戊型肝炎病毒(HEV) Ⅳd基因亚型 序列分析 全基因组测序 序列特征 进化树

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仔猪临床常见消化道疾病及对策 被引量：1

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作者 张交儿 《北方牧业》 2018年第18期9-10,共2页

一、腹泻对养猪业的危害腹泻可造成仔猪不同程度的死亡,育肥猪生长期延长,饲料报酬降低,药费开支增加,管理人员劳动强度加大,严重影响猪场生产计划。二、仔猪腹泻的发病机理细菌、病毒等病原微生物侵入肠道后,导致肠道上皮细胞坏死,肠... 一、腹泻对养猪业的危害腹泻可造成仔猪不同程度的死亡,育肥猪生长期延长,饲料报酬降低,药费开支增加,管理人员劳动强度加大,严重影响猪场生产计划。二、仔猪腹泻的发病机理细菌、病毒等病原微生物侵入肠道后,导致肠道上皮细胞坏死,肠黏膜正常组织结构被破坏,小肠绒毛受损脱落,小肠黏膜吸收水分和电解质的能力受损。 展开更多

关键词 仔猪腹泻 消化道疾病 临床 小肠绒毛 病原微生物 饲料报酬 劳动强度 管理人员

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Ana-1巨噬细胞分泌exosomes的提取及免疫鉴定

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作者 王桂花 周向梅 +5 位作者 尹晓敏 杨利锋 周海云 张交儿 刘爱林 赵德明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期84-85,88,共3页

目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exo-somes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exosomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70... 目的:为了证实Ana-1巨噬细胞是否分泌exo-somes。方法:采用分级离心的方法,从Ana-1巨噬细胞培养的上清液提取exosomes。样品用醋酸双氧铀负染,在透射电镜下观察其形态、大小;并分别用Flotillin多克隆抗体、Tsg101单克隆抗体(mAb)、Hsp70mAb和calnexin多克隆抗体,通过免疫印迹法和免疫金标记法进行免疫鉴定。结果:电镜下可以观察到提取的exosomes平均大小为50～100nm。免疫印迹法分析结果显示,提取的exosomes表达Flotillin、Tsg101和Hsp70蛋白,相对分子质量(Mr)分别为45000、43000和70000,但不表达calnexin蛋白;免疫电镜分析显示ex-osomes膜表面和内部有明显的金颗粒。结论:Ana-1巨噬细胞分泌exosomes。 展开更多

关键词 Ana-1巨噬细胞 小囊泡 免疫胶体金 免疫印迹

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