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改良分步消化法培养原代软骨细胞 被引量：13
1
作者 田峰 崔学生 +2 位作者 张帅 石玉泽 金群华 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期3633-3635,共3页
背景:胰蛋白酶和细菌胶原酶结合使用消化关节软骨基质获得大量纯度高的软骨细胞的方法步骤繁琐、过程复杂,容易污染,但更好的简单易行、安全可靠的方法至今少有报道。目的:采用改良分步消化法进行软骨细胞培养,以获取大量纯净的软骨细... 背景:胰蛋白酶和细菌胶原酶结合使用消化关节软骨基质获得大量纯度高的软骨细胞的方法步骤繁琐、过程复杂,容易污染,但更好的简单易行、安全可靠的方法至今少有报道。目的:采用改良分步消化法进行软骨细胞培养,以获取大量纯净的软骨细胞。方法:将新西兰白兔6只随机分2组,酶消化法组运用酶消化法分两步获取原代软骨细胞,对照组用传统法进行原代软骨细胞培养。培养1周后观察两组培养的软骨细胞的生长状态,并进行细胞鉴定、计数,评估改良后的方法对细胞的影响。结果与结论:酶消化法组采用0.2%Ⅱ型胶原酶消化软骨细胞,与对照组相比,可将6h以上的消化时间缩短至3h。两组原代软骨细胞培养24h均多呈圆形,悬浮状态,48h后贴壁,培养1周后,两组软骨细胞可铺满培养瓶底。结果证实,采用改良分步消化法进行软骨细胞培养,在缩短了消化时间的同时其细胞生长及形态变化均无改变,可以顺利获取大量纯净的软骨细胞。 展开更多
关键词 软骨细胞 关节软骨 细胞分离 原代培养 组织工程
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转化生长因子β_1及白介素-1β对终板软骨细胞的作用 被引量：7
2
作者 田峰 崔学生 +2 位作者 张帅 石玉泽 金群华 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期36-37,39,I0001,共4页
目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素-1β(IL-1β)在终板软骨细胞中的表达,探讨椎间盘退变的发病机制。方法应用免疫组化SP染色法检测TGF-β1及IL-1β在20例颈椎病及20例非颈椎病椎体软骨终板中的表达,并对其阳性表达结果进行比... 目的研究转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素-1β(IL-1β)在终板软骨细胞中的表达,探讨椎间盘退变的发病机制。方法应用免疫组化SP染色法检测TGF-β1及IL-1β在20例颈椎病及20例非颈椎病椎体软骨终板中的表达,并对其阳性表达结果进行比较。结果颈椎病组TGF-β1及IL-1β的阳性率分别为(32.907 6±3.076 4)%、(51.520 7±2.192 5)%,与非颈椎病终板软骨细胞TGF-β1及IL-1β表达的阳性率(42.481 6±2.061 7)%、(33.918 5±3.320 4)%相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β1及IL-1β参与了椎间盘退变的形成和发展,在椎间盘退变的发病中可能起重要的作用。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 椎间盘 退变 软骨细胞 白细胞介素1Β
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红霉素、阿仑膦酸钠抑制磨损颗粒对小鼠巨噬细胞分泌白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的影响 被引量：1
3
作者 崔学生 田峰 +2 位作者 石玉泽 张帅 金群华 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第26期4777-4780,共4页
背景:阿仑膦酸钠的抗骨吸收作用是通过其对破骨细胞的抑制作用完成的,近年亦有报道证实红霉素有直接抑制破骨细胞的作用。目的:观察阿仑膦酸钠和红霉素抑制钛颗粒刺激巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α、白细胞介素1,6的作用。方法:分离、培... 背景:阿仑膦酸钠的抗骨吸收作用是通过其对破骨细胞的抑制作用完成的,近年亦有报道证实红霉素有直接抑制破骨细胞的作用。目的:观察阿仑膦酸钠和红霉素抑制钛颗粒刺激巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子α、白细胞介素1,6的作用。方法:分离、培养小鼠腹腔巨噬细胞,14h后分为红霉素组及阿仑膦酸钠组,每组分为6个亚组。红霉素组:A组:仅为巨噬细胞;B组:巨噬细胞+钛颗粒;C组:巨噬细胞+钛颗粒+红霉素1μg/L;D组:巨噬细胞+钛颗粒+红霉素10μg/L;E组:巨噬细胞+钛颗粒+红霉素100μg/L;F组:巨噬细胞+钛颗粒+红霉素1000μg/L。阿仑膦酸钠组分组及剂量同红霉素组。培养24h后,用酶联免疫法检测细胞培养上清液中白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的质量浓度。结果与结论:B组白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的质量浓度明显高于其他组(P<0.05),F组白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α的质量浓度明显低于C组(P<0.05)。同剂量阿仑膦酸钠和红霉素组间差异无显著性意义(P>0.05)。提示钛颗粒可以刺激巨噬细胞分泌大量的白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α,红霉素、阿仑膦酸钠能够呈剂量依赖型地有效抑制钛颗粒诱导的巨噬细胞分泌白细胞介素1,6及肿瘤坏死因子α。 展开更多
关键词 无菌性松动 红霉素 阿仑膦酸钠 磨损颗粒 巨噬细胞
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Micro-CT评价红霉素和阿仑膦酸钠抑制磨损颗粒诱导小鼠骨溶解的实验研究 被引量：1
4
作者 崔学生 郭玉娥 +1 位作者 王军 金群华 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期10-14,共5页
目的:通过建立小鼠体内磨损颗粒颅骨溶解模型,利用显微计算机体层摄影(Micro-computed tomography,Micro-CT)对红霉素和阿仑膦酸钠抑制磨损颗粒诱导小鼠骨溶解进行三维评价,为红霉素阿仑膦酸钠防治人工关节松动提供更多的理论依据。方法... 目的:通过建立小鼠体内磨损颗粒颅骨溶解模型,利用显微计算机体层摄影(Micro-computed tomography,Micro-CT)对红霉素和阿仑膦酸钠抑制磨损颗粒诱导小鼠骨溶解进行三维评价,为红霉素阿仑膦酸钠防治人工关节松动提供更多的理论依据。方法:40只BABL/C雌性小鼠随机分为5组。A组为空白对照组;B组为阳性对照组;C组为阿仑膦酸钠组[0.3 mg(/kg.周)];D组红霉素1组[术后7 d腹腔注射红霉素2 mg(/kg.d)];E组红霉素2组[术后腹腔注射红霉素2 mg(/kg.d)];2周后取出颅骨先进行Micro-CT扫描,得到颅骨标本计算机三维图像并进行三维计量分析。然后再进行病理学分析。结果:B组的骨密度(Bone mineral density,BMD)较A组明显降低,C、D、E组的BMD与B组有显著增加。E组的BMD较C、D有明显增高,C、D组间的BMD无统计学意义。B组的骨体积分数(Bone volume fraction,BVF)较A组明显降低,C、D、E组的BVF与B组有显著增加,E组间的BVF较C、D有明显增高,C、D组间的BVF无统计学意义。病理学骨溶解区域破骨细胞数量各组比较结果和BMD的结果类似。结论:红霉素、阿仑膦酸钠可以抑制磨损颗粒诱发的骨溶解。 展开更多
关键词 钛颗粒 关节松动 骨溶解 红霉素 阿仑膦酸钠
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