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中药对低密度脂蛋白受体基因表达的影响 被引量：24
1
作者 刘萍 张静生 +2 位作者 郑菲 富伟能 陈汝兴 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 2000年第3期141-143,共3页
目的 :探讨中药对低密度脂蛋白受体基因表达的影响。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 30例高脂血症患者外周血淋巴细胞低密度脂蛋白受体 (L DL R)信使核糖核酸 (m RNA)水平在用药前后的变化。结果 :中药组 15例患者用药... 目的 :探讨中药对低密度脂蛋白受体基因表达的影响。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测 30例高脂血症患者外周血淋巴细胞低密度脂蛋白受体 (L DL R)信使核糖核酸 (m RNA)水平在用药前后的变化。结果 :中药组 15例患者用药后的 L DL R m RNA水平 (0 .6 2 5 4± 0 .16 6 9)较用药前 (0 .2 46 5±0 .1316 )明显升高 (P<0 .0 1)。结论 :中药复方颗粒剂可增强高脂血症患者外周血淋巴细胞 L DL R基因表达水平 ,在分子水平上 ,为中药降脂作用的机制研究提供科学依据。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白受体 基因表达 中药复方 RT-PCR
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应用差异显示法对小细胞肺癌转移相关基因的筛选 被引量：12
2
作者 李明江 田大力 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期31-33,共3页
目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因,揭示肺癌的转移机制。方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段,测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BL... 目的:筛选与人小细胞肺癌转移相关基因,揭示肺癌的转移机制。方法:采用激光俘获显微切割(LCM)及mRNA差异显示技术(DD)对手术切除的小细胞肺癌、癌转移淋巴结进行筛选并克隆与转移相关的基因片段,测定其序列后在基因库(GenBank)中进行BLAST检索分析其同源性。结果:小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达具有明显差异,共获得差异片段(EST,表达序列标签)24个,选择差异明显的3个片段克隆测序后,发现3片段均位于肿瘤高度相关的3q、7q和10q,均为未知序列,未发现同源基因,可能为新的基因片段。用RT-PCR对位于抑癌基因PTEN上游的L1片段进行验证的结果证实了该片段在小细胞肺癌的高表达率,具有统计学意义(P<0.05)。结论:人小细胞肺癌原发灶与癌转移淋巴结的基因表达存在差异,所测序的3个基因片段均为未知基因序列,这些片段可能为小细胞肺癌的转移相关候选基因,其序列和功能值得进一步深入研究。应用DDRT-PCR技术有望找到调控肿瘤转移的基因,为肿瘤的诊断和治疗提供新的线索。 展开更多
关键词 激光俘获显微切割 MRNA差异显示 转移相关基因 小细胞肺癌
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医学遗传学教学中合理运用PBL教学模式的探索 被引量：14
3
作者 陈芳杰 李春义 +3 位作者 孙秀菊 富伟能 金春莲 赵彦艳 《西北医学教育》 2008年第2期304-306,共3页
PBL（problem—based learning，以问题为基础的学习）以学生为教学环节的中心位置，注重发挥学生的主观能动性，引导学生主动发现问题、解决问题，并在解决问题的过程中培养医学专业素质，加强学生将理论与实践有机结合的综合能力，同... PBL（problem—based learning，以问题为基础的学习）以学生为教学环节的中心位置，注重发挥学生的主观能动性，引导学生主动发现问题、解决问题，并在解决问题的过程中培养医学专业素质，加强学生将理论与实践有机结合的综合能力，同时也促进指导教师业务水平的提高，有效做到了教学相长，并得到了国内外众多学者的一致认同。PBL教学模式针对实际情况，有选择、有适用范围地引入医学遗传学教学体系中，本文主要对其教学效果进行了总结。 展开更多
关键词 PBL 医学遗传学 医学教育
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喉鳞癌Apaf-1基因表达及启动子区甲基化研究 被引量：8
4
作者 黄带发 富伟能 +3 位作者 尚超 徐振明 李增刚 孙开来 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1327-1331,共5页
喉鳞癌细胞存在多种癌基因和抑癌基因异常 ,Apaf 1(apoptoticproteaseactivatingfactor 1)基因是诱导细胞凋亡的肿瘤抑制基因。为探讨Apaf 1基因在喉鳞癌发生中的作用 ,应用半定量PCR方法分析Apaf 1的表达用比较基因组杂交 (Comparative... 喉鳞癌细胞存在多种癌基因和抑癌基因异常 ,Apaf 1(apoptoticproteaseactivatingfactor 1)基因是诱导细胞凋亡的肿瘤抑制基因。为探讨Apaf 1基因在喉鳞癌发生中的作用 ,应用半定量PCR方法分析Apaf 1的表达用比较基因组杂交 (ComparativeGenomicHybrodization ,CGH)和杂合性丢失 (LossofHeterozygosity ,LOH)分析方法对喉鳞癌病人Apaf 1基因所在的 12 q2 2 2 3区域缺失情况进行研究 ,并用甲基化特异PCR对该基因启动子区甲基化情况进行了分析。结果表明 :11例喉鳞癌组织出现Apaf 1mRNA表达明显下调 ,占 4 0 7% (11/ 2 7) ,而 6例良性喉肿瘤未发现缺失或下调 ;CGH分析发现 ,18例喉鳞癌仅发现 2例存在 12 q2 2 2 3区域缺失 ,未发现扩增 ;LOH分析发现 ,72例喉癌组织Apaf 1基因的 5个多态位点LOH发生频率低 ,分别为 18 2 % (D12S346 )、13 9%(D12S170 6 )、18 2 % (D12S32 7)、2 2 2 % (D12S16 5 7)和 16 6 % (D12S393) ,11例出现Apaf 1mRNA下调的喉癌组织均检测到启动子区甲基化 ,而 16例Apaf 1mRNA表达未下调者仅 1例有甲基化 ,两者有显著差异 (χ2 检验 ,P=0 0 0 0 1)。通过以上结果 ,首次证实Apaf 1基因与喉鳞癌相关 ,在喉鳞癌中Apaf 1基因缺失发生率低 。 展开更多
关键词 喉鳞癌 APAF-1基因 RT—PCR 杂和性丢失 比较基因组杂交 甲基化
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FHIT基因在喉癌中的缺失 被引量：11
5
作者 富伟能 张学 +6 位作者 郑姝颖 金春元 白素娟 王筠 郭星 费声重 孙开来 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期274-277,共4页
ＦＨＩＴ基因缺失是人类多种肿瘤细胞中常见的遗传学改变之一。为了探讨ＦＨＩＴ基因与喉癌发生的关系，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法，对１１例喉癌患者的癌组织及癌旁正常组织的ＦＨＩＴ基因进行了检测，结果：检出缺失８例，占７２．７％... ＦＨＩＴ基因缺失是人类多种肿瘤细胞中常见的遗传学改变之一。为了探讨ＦＨＩＴ基因与喉癌发生的关系，采用ＲＴ－ＰＣＲ的方法，对１１例喉癌患者的癌组织及癌旁正常组织的ＦＨＩＴ基因进行了检测，结果：检出缺失８例，占７２．７％，首次发现了喉癌ＦＨＩＴ基因转录本的异常，经过测序证实了两例缺失。对ＦＨＩＴ基因的深入研究有助于揭开喉癌的发病机制，开辟喉癌基因诊治的新途径。 展开更多
关键词 喉肿瘤 FHIT基因 反转录 聚合酶链反应
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FHIT基因与喉癌相关性的研究 被引量：7
6
作者 富伟能 吴东宁 +4 位作者 张学 金春元 崔勇志 徐振明 孙开来 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期436-438,共3页
目的　研究FHIT基因在喉癌发生中的作用。方法　应用RTPCR 技术筛查了喉癌细胞系Hep2 、宫颈癌细胞系HeLa 和20 例原发性喉癌的FHIT 基因转录本,对其中的2 例异常转录本进行了测序分析。同时,对另外60 例原发性喉癌FHIT 基因进行了... 目的　研究FHIT基因在喉癌发生中的作用。方法　应用RTPCR 技术筛查了喉癌细胞系Hep2 、宫颈癌细胞系HeLa 和20 例原发性喉癌的FHIT 基因转录本,对其中的2 例异常转录本进行了测序分析。同时,对另外60 例原发性喉癌FHIT 基因进行了微卫星多态分析。结果　在20 例喉癌中,14 例(70-0 % ) 显示FHIT 基因异常转录本,Hep2 和HeLa 细胞系FHIT基因转录本均存在缺失。测序发现,异常的FHIT基因转录本常缺失多个外显子,而且多发生于第5 和( 或) 第8 外显子。微卫星多态分析表明,FHIT基因在喉癌中既存在杂合性丢失,又存在微卫星不稳定现象,但以前者为主。结论　FHIT 基因参与了喉癌的发生,可能是喉癌候选抑癌基因之一。 展开更多
关键词 喉肿瘤 FHIT基因 微卫星多态性
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细胞角蛋白基因13在喉鳞状细胞癌中缺失和表达的研究 被引量：7
7
作者 贺光 富伟能 +4 位作者 邱广斌 赵震 徐振明 孙兴和 孙开来 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期390-395,T001,共7页
为了探讨细胞角蛋白基因 13(Cytokeratin 13,CK13)在喉癌发生中的作用 ,在CK13基因内部及附近选择 5个微卫星引物进行杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)分析 ,于DNA水平间接检测 72例喉鳞状细胞癌患者中该基因的缺失 ,应用Northern... 为了探讨细胞角蛋白基因 13(Cytokeratin 13,CK13)在喉癌发生中的作用 ,在CK13基因内部及附近选择 5个微卫星引物进行杂合性丢失 (lossofheterozygosity,LOH)分析 ,于DNA水平间接检测 72例喉鳞状细胞癌患者中该基因的缺失 ,应用NorthernBlot检测 16例喉鳞癌患者的配对肿瘤及癌旁正常组织中CK13基因的表达差异 :同时应用CK13蛋白单克隆抗体对不同分化程度的喉鳞癌组织进行免疫组化染色。结果表明 :5个STR位点均存在LOH ,其中D17S196 4E、D17S2 0 92、D17S791、D17S16 6 5及D17S80 8位点的LOH频率分别为 18.0 3%、2 8.13%、2 7.4 2 %、39.6 8%和 34.85 % ,其中D17S16 6 5位点的LOH频率最高 ,至少一个位点出现LOH的病例高达 77.78% (5 6 / 72 ) ,杂合性丢失与临床分期、淋巴结转移无显著相关 ,但与肿瘤分化程度高低相关 (P <0 .0 5 )。Northernblot结果表明 :16例喉鳞癌患者CK13基因在正常组织中的表达比肿瘤组织显著增强 ,免疫组化结果也显示CK13蛋白在正常组织或高分化肿瘤中的表达明显高于低分化者 ,且存在显著差异 (P <0 .0 1)。证实CK13基因可能在喉鳞状细胞癌的发生中具有重要作用 。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 细胞角蛋白基因13 杂合性丢失 免疫组化 表达
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喉癌的比较基因组杂交研究 被引量：8
8
作者 尚超 富伟能 +3 位作者 徐振明 李福才 黄带发 孙开来 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期539-544,共6页
寻找与喉癌发生进展的相关基因 ,应用比较基因组杂交技术分析了 18例喉癌患者。结果显示 ,每例喉癌细胞染色体均有不同程度的变化 ,包括染色体全部或部分的扩增或丢失。平均每例有 12 9处异常区域 ,丢失多于扩增 ,分别为每例 7 2处和 5... 寻找与喉癌发生进展的相关基因 ,应用比较基因组杂交技术分析了 18例喉癌患者。结果显示 ,每例喉癌细胞染色体均有不同程度的变化 ,包括染色体全部或部分的扩增或丢失。平均每例有 12 9处异常区域 ,丢失多于扩增 ,分别为每例 7 2处和 5 7处。主要为 3q(78% )、5 p(6 1% )、11q(5 6 % )、1q(5 0 % )、8p(4 4 % )、8q(39% )和 15q(39% )的扩增 ;3p(70 % )、5 q(78% )、9p(6 7% )、13q(5 0 % )、1p(4 4 % )和 14q(39% )的丢失。有多条染色体区带上出现特异的扩增或丢失 ,特别是 1p13 2 1(8/ 18)、3p2 1 2 3(14 / 18)、5 p2 1 2 2 (14 / 18)、9p12 pter(10 / 18)和 13q2 1 31(8/18)的拷贝数增加明显 ,而 1q11 2 1(11/ 18)、3q15 2 1(12 / 18)、8p2 2 2 4 (6 / 18)、11q12 13(8/ 18)、15q2 1 2 3(7/ 18)和18p11(8/ 18)区域的丢失为喉癌的特征性变化 ,说明这些区域中存在与喉癌发生发展密切相关的癌基因。 展开更多
关键词 喉癌 比较基因组杂交 癌基因 抑癌基因
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喉癌中STK15基因扩增及表达的研究 被引量：6
9
作者 叶燕 李福才 +6 位作者 王淑云 李婵媛 袁海明 赵旭 富伟能 徐振明 孙开来 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期326-329,共4页
目的研究喉癌中STK15基因扩增、mRNA和蛋白表达增高在喉癌发生、发展中的作用。方法应用差异PCR方法检测40例喉鳞状细胞癌及癌旁正常对照组织STK15基因扩增的情况;应用逆转录PCR方法检测同批标本STK15mRNA表达情况;用免疫组织化学方法分... 目的研究喉癌中STK15基因扩增、mRNA和蛋白表达增高在喉癌发生、发展中的作用。方法应用差异PCR方法检测40例喉鳞状细胞癌及癌旁正常对照组织STK15基因扩增的情况;应用逆转录PCR方法检测同批标本STK15mRNA表达情况;用免疫组织化学方法分析STK15蛋白表达。结果肿瘤组织中STK15基因扩增率为35%(14/40);STK15mRNA表达增高占67.5%(27/40);STK15蛋白表达的阳性率为72.5%(29/40);将扩增与表达的结果与喉癌患者的临床各项指标进行统计学分析,STK15基因扩增、STK15mRNA表达增高与肿瘤的分化程度显著相关(P<0.05);STK15蛋白表达与肿瘤的分化程度和病理分级显著相关(P<0.05)。结论喉癌中STK15基因扩增、mRNA和蛋白表达水平增高,导致中心体复制异常、染色体不稳定,可能在喉癌的发生及恶性进展中起一定作用。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 STK15基因 差异-聚合酶链反应 基因扩增
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miR-362-3p在喉癌组织中的表达及其对喉癌Hep-2细胞迁移的影响 被引量：8
10
作者 赵越 孙媛媛 +2 位作者 佟雪 岳鹏杰 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期236-239,共4页
目的探讨miR-362-3p在喉癌组织中的表达水平及其对喉癌Hep-2细胞迁移能力的影响。方法收集50例喉癌组织及对应癌旁组织标本,实时PCR方法检测miR-362-3p在喉癌组织和癌旁组织中表达水平,分析miR-362-3p的表达与喉癌患者临床病理特征的关... 目的探讨miR-362-3p在喉癌组织中的表达水平及其对喉癌Hep-2细胞迁移能力的影响。方法收集50例喉癌组织及对应癌旁组织标本,实时PCR方法检测miR-362-3p在喉癌组织和癌旁组织中表达水平,分析miR-362-3p的表达与喉癌患者临床病理特征的关系;将miR-362-3p模拟物、抑制剂以及阴性对照miRNA分别转染喉癌Hep-2细胞,实时PCR检测转染效率;划痕和Transwell实验检测miR-362-3p对喉癌Hep-2细胞迁移能力的影响。结果 miR-362-3p在喉癌组织中表达水平显著高于癌旁组织(P <0.05),且与喉癌患者淋巴结转移及临床分期有关;上调miR-362-3p表达水平能促进喉癌Hep-2细胞的迁移能力,下调miR-362-3p表达水平能抑制喉癌Hep-2细胞的迁移能力(均P <0.05)。结论 miR-362-3p在喉癌组织中表达上调,且能够促进喉癌细胞的迁移能力,提示其发挥潜在癌基因作用。 展开更多
关键词 miR-362-3p表达 喉癌 迁移
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喉癌中转谷氨酰胺酶3基因杂合性丢失和表达研究 被引量：8
11
作者 贺光 赵震 +3 位作者 富伟能 孙兴和 徐振明 孙开来 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第2期120-123,共4页
目的　探讨转谷氨酰胺酶 3(transglutaminase3,TGM3)基因在喉癌发生中的作用。方法　在 TGM3基因内部及附近选择微卫星标记进行杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)分析 ,于 DNA水平间接检测 72例喉癌患者中该基因的缺失 ;并进一... 目的　探讨转谷氨酰胺酶 3(transglutaminase3,TGM3)基因在喉癌发生中的作用。方法　在 TGM3基因内部及附近选择微卫星标记进行杂合性丢失 (loss of heterozygosity,L OH)分析 ,于 DNA水平间接检测 72例喉癌患者中该基因的缺失 ;并进一步应用 Northern杂交检测 8例喉癌患者配对肿瘤及癌旁正常组织中 TGM3基因的表达差异。结果　 4个短串联重复序列 (shorttandem repeats,STR)位点均存在 L OH,其中 D2 0 S17、D2 0 S6 0 7、D2 0 S99和 D2 0 S841位点的 L OH频率分别为 2 5 .76 %、2 0 .0 0 %、38.10 %和 18.75 % ,至少 1个位点出现 L OH的病例占 6 1.11% ,杂合性丢失与临床分期、淋巴结转移和分化程度无显著相关性 ;Northern杂交结果显示 8例喉癌患者 TGM3基因在正常组织中的表达比肿瘤组织显著增强。结论　 TGM3基因在喉癌的发生中具有重要作用 ,具体机理有待进一步研究。 展开更多
关键词 喉癌 转谷氨酰胺酶3基因 杂合性丢失 基因表达
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马蹄内翻足胎大鼠胫骨后肌组织的蛋白质组学分析 被引量：6
12
作者 周海涛 孙开来 +3 位作者 富伟能 吉士俊 赵彦艳 金春莲 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期289-295,共7页
目的寻找马蹄内翻足畸形相关蛋白。方法提取全反式维A酸诱导的单纯马蹄内翻足畸形胎大鼠及正常对照胎大鼠胫骨后肌群总蛋白,进行双向电泳,考马斯亮蓝染色;经PDQuest软件分析,选择重复出现的差异点,质谱分析鉴定蛋白。结果获得了分辨率... 目的寻找马蹄内翻足畸形相关蛋白。方法提取全反式维A酸诱导的单纯马蹄内翻足畸形胎大鼠及正常对照胎大鼠胫骨后肌群总蛋白,进行双向电泳,考马斯亮蓝染色;经PDQuest软件分析,选择重复出现的差异点,质谱分析鉴定蛋白。结果获得了分辨率及重复性均好的双向电泳图谱。畸形胎大鼠与正常对照比较,有蛋白质点缺失、额外增加及明显上调或下调。质谱鉴定发现畸形胎大鼠肌组织慢骨骼肌肌钙蛋白T(sTnT)缺失,X连锁凋亡蛋白抑制因子(XIAP)下调,羧酸酯酶AY034877额外表达。结论畸形胎大鼠胫骨后肌组织与正常胎大鼠比较存在蛋白质组差异,畸形胎大鼠sTnT,XIAP及羧酸酯酶AY034877表达改变,可能与马蹄内翻足畸形相关。 展开更多
关键词 马蹄内翻足 蛋白质组 模型 动物
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HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的相关研究 被引量：6
13
作者 王莉莉 富伟能 +1 位作者 李增刚 孙开来 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期46-50,共5页
为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL... 为研究HOXD13、FHL1和先天性马蹄内翻足的关系,应用变性梯度凝胶电泳技术检测HOXD13基因在先天性马蹄内翻足个体中的突变,应用半定量RT-PCR及免疫组织化学技术检测HOXD13、FHL1在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中的表达;并用软件预测FHL1基因上游HOXD13的结合位点,凝胶阻滞试验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)验证HOXD13和FHL1的相互作用。结果84例先天性马蹄内翻足患者中未发现HOXD13基因编码区突变存在。与同期正常足部肌肉组织相比HOXD13(33.3%),FHL1(46.6%)在先天性马蹄内翻足患者肌肉组织中表达明显下调。EMSA结果表明,当HOXD13存在时出现特异的DNA阻滞条带。上述结果说明:HOXD13的编码区突变可能不是先天性马蹄内翻足发生的原因,而HOXD13和FHL1表达水平的改变可能与马蹄内翻足畸形的发生有关,HOXD13可能通过直接调控FHL1发挥作用。 展开更多
关键词 先天性马蹄内翻足 HOXD13 FHL1 突变 表达
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胰腺癌端粒酶活性的研究 被引量：6
14
作者 许元鸿 富伟能 郭仁宣 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期427-428,共2页
关键词 胰腺癌 端粒酶活性 诊断 治疗
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喉癌p16区域的杂合性丢失和微卫星序列不稳定性分析 被引量：5
15
作者 吴东宁 富伟能 +4 位作者 姜莉 张学 李福才 郭星 孙开来 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第2期99-102,共4页
目的缩小喉癌抑癌基因的寻找范围，探讨ｐ１６基因在喉癌发生中的作用。方法选择ｐ１６基因附近５个微卫星多态标记对６０例喉癌进行杂合性丢失和微卫星序列不稳定性分析。结果５个标记在喉癌中杂合性丢失频率均不高，最高仅达２３．１... 目的缩小喉癌抑癌基因的寻找范围，探讨ｐ１６基因在喉癌发生中的作用。方法选择ｐ１６基因附近５个微卫星多态标记对６０例喉癌进行杂合性丢失和微卫星序列不稳定性分析。结果５个标记在喉癌中杂合性丢失频率均不高，最高仅达２３．１％，但２个标记的微卫星序列不稳定性的频率较高，其中一个标记微卫星序列不稳定性频率高达４６．１％。结论提示ｐ１６基因在喉癌的发生中不以缺失为主，在Ｄ９Ｓ１７５２附近可能存在参与喉癌演进的基因。 展开更多
关键词 喉癌 杂合性丢失 微卫星序列 不稳定性
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p53基因突变和STK15基因过表达与喉癌发生的关系 被引量：4
16
作者 赵旭 李福才 +5 位作者 李英慧 富伟能 黄带发 叶燕 徐振明 孙开来 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期134-137,共4页
目的　探讨p5 3基因突变和STK15基因表达与喉癌发生发展的关系。方法　自 5 5例术前未经化疗和放疗的喉鳞状细胞癌患者的新鲜手术标本中 ,分别取配对癌组织和癌旁正常组织进行以下检测 :(1)提取DNA ,采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (P... 目的　探讨p5 3基因突变和STK15基因表达与喉癌发生发展的关系。方法　自 5 5例术前未经化疗和放疗的喉鳞状细胞癌患者的新鲜手术标本中 ,分别取配对癌组织和癌旁正常组织进行以下检测 :(1)提取DNA ,采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)银染结合DNA直接测序 ,检测喉鳞癌组织中p5 3基因第 7外显子 (p5 3E7)和第 8外显子 (p5 3E8)的突变情况 ;(2 )提取总RNA ,反转录合成cDNA ,以 β actin为内对照进行PCR扩增 ,分析STK15基因表达的水平。结果　 5 5例喉癌组织中 ,17例 (30 .9% )发生p5 3E7突变 ,未发现p5 3E8突变 ;癌组织STK15基因表达与 β actin表达平均密度比值 (ADV)为 1.2 2± 0 .4 9。癌旁正常组织发生p5 3E7突变 1例 (1.8% ) ,p5 3E8突变 1例 (1.8% ) ;癌旁正常组织ADV为 0 .99± 0 .5 4。喉癌组织p5 3E7突变率显著高于癌旁正常组织 (χ2 =8.6 6 ,P <0 .0 1)。癌组织STK15基因表达高于癌旁正常组织 (t=4 .5 39,P <0 .0 1)。 17例p5 3基因突变的患者中 ,14例 (82 .4 % )癌组织STK15基因表达高于癌旁正常组织 ;38例癌组织STK15基因表达高于癌旁正常组织的患者中 ,14例 (36 .8% )存在p5 3E7突变。 2 5 .5 %的喉癌患者同时发生p5 3E7突变与STK15基因表达增高。结论　同时发生p5 展开更多
关键词 STK15基因 癌旁正常组织 表达 喉癌 P53基因突变 癌组织 癌发生 DNA 银染 反转录
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人喉癌组织中p15、p16基因缺失和STK15基因过表达的研究 被引量：4
17
作者 李福才 李英慧 +5 位作者 赵旭 康宁 富伟能 徐振明 李增刚 孙开来 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期316-319,共4页
目的 探讨p15、p16基因和STK(丝氨酸/苏氨酸激酶)15基因表达与喉癌发生、发展的关系。方法 自50例术前未经化疗和放疗的喉鳞状细胞癌患者的新鲜手术标本中,分别取癌组织和癌旁正常组织进行以下检测:(1)提取DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技... 目的 探讨p15、p16基因和STK(丝氨酸/苏氨酸激酶)15基因表达与喉癌发生、发展的关系。方法 自50例术前未经化疗和放疗的喉鳞状细胞癌患者的新鲜手术标本中,分别取癌组织和癌旁正常组织进行以下检测:(1)提取DNA,采用聚合酶链反应(PCR)技术,进行p15基因第二外显子(p15E2)和p16基因第二外显子(p16E2)纯合缺失研究;(2)提取RNA,反转录合成cDNA,以β-肌动蛋白基因为内对照进行PCR扩增,分析STK15基因表达的水平。同时检测人喉鳞状细胞癌Hep-2细胞系STK15基因表达水平。结果 喉癌组织p15E2纯合缺失率为12％(6/50),p16E2纯合缺失率为14％(7/50),p15E2、p16E2共同缺失率为6％(3/50)。50例患者中34例(68％)癌组织STK15基因表达高于癌旁正常组织;全组患者癌组织STK15基因表达/β-肌动蛋白基因表达平均密度比值(ADV)为1.03±0.30,癌旁正常组织STK15基因表达/β-肌动蛋白基因表达ADV为0.89±0.22,其间差异有非常显著意义(t=4.333,P<0.01)。Hep-2细胞系中STK15基因表达高于内对照β-肌动蛋白基因。结论p15E2、p16E2纯合缺失和STK15基因过表达可能在喉癌的发生及恶性进展中发挥一定作用。 展开更多
关键词 喉癌 P15 P16 基因缺失 STK15基因 过表达
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IL-8基因在幽门螺杆菌相关性胃疾病中的表达 被引量：6
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作者 付浩 王旭光 +3 位作者 富伟能 孙秀菊 袁媛 孙开来 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期26-27,共2页
目的研究白细胞介素8(IL-8)基因与幽门螺杆菌(H.pylor)i相关性胃疾病发生发展的关系。方法采用免疫组化技术检测144例H.pylori相关性胃疾病胃黏膜标本中IL-8蛋白表达,其中浅表性胃炎54例、胃溃疡33例、萎缩性胃炎57例;另外探讨了72例不... 目的研究白细胞介素8(IL-8)基因与幽门螺杆菌(H.pylor)i相关性胃疾病发生发展的关系。方法采用免疫组化技术检测144例H.pylori相关性胃疾病胃黏膜标本中IL-8蛋白表达,其中浅表性胃炎54例、胃溃疡33例、萎缩性胃炎57例;另外探讨了72例不同胃黏膜标本H.pylori感染及其根除治疗对IL-8蛋白产生的影响。结果胃疾病IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组(55.4%,40.3%);浅表性胃炎IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组(P<0.05);胃溃疡和萎缩性胃炎IL-8蛋白阳性表达率H.pylori阳性组高于H.pylori阴性组。H.pylori阳性组和H.pylori阴性组从浅表性胃炎→胃溃疡→萎缩性胃炎中IL-8蛋白阳性表达率逐渐上升(P<0.05)。根除H.pylori治疗后IL-8蛋白阳性表达率低于根除H.pylori治疗前。结论IL-8表达增强可能与HP相关性胃疾病有关。H.pylori感染可能通过IL-8介导促进癌前状态的发生。根除H.pylori治疗可以影响癌前状态。 展开更多
关键词 白细胞介素8 幽门螺杆菌 癌前状态
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声门上喉癌的染色体异常和重要相关基因的研究(英文) 被引量：5
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作者 富伟能 尚超 +3 位作者 黄带发 徐振明 孙兴和 孙开来 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期7-11,共5页
目的筛查声门上喉癌发生、发展及转移相关的异常染色体和重要基因。方法应用比较基因组杂交(comparative ge-nomic hybridization,CGH)分析喉声门上鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell cancer,LSCC)癌组织和癌旁组织DNA拷贝数的差异。... 目的筛查声门上喉癌发生、发展及转移相关的异常染色体和重要基因。方法应用比较基因组杂交(comparative ge-nomic hybridization,CGH)分析喉声门上鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell cancer,LSCC)癌组织和癌旁组织DNA拷贝数的差异。应用cDNA芯片结合聚类分析研究喉声门上癌癌旁组织、癌组织和转移淋巴组织中差异表达的基因。结果CGH结果表明每例喉癌平均涉及12.9个染色体的异常,其中出现高频率扩增的染色体区集中在3q15-21(14/18)、5p12-13(11/18)、8q22-24(6/18)、11q12-13(8/18)、15q21-23(7/18)and18p11(8/18),而高频率缺失的染色体区集中在1p13-21(8/18)、3p21-23(14/18)、5q21-22(14/18)、9p12-pter(11/18)and13q21-31(8/18)。聚类分析将表达差异的基因分为3组。表达差异在5倍以上的基因12个,在由癌旁至癌阶段、癌至转移阶段均存在表达异常的基因3个。这15个重要基因是喉癌新的相关基因,其中4个基因cytochrome C oxidaseⅤa,PPBP,EPHX2and PON1与喉癌相关性的研究未见报道,而且,SH3GL2位于高频率缺失的染色体区9p12-pter。结论我们发现的特异染色体区和重要基因将为喉癌发生、发展和转移的研究提供重要线索。 展开更多
关键词 比较基因组杂交 CDNA芯片 喉鳞状细胞癌 癌发生
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喉癌组织中Mst1基因表达与喉癌的相关性及其对人Hep2细胞化疗敏感性的影响 被引量：5
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作者 尚超 李巍 +2 位作者 郭艳 富伟能 孙开来 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第27期25-27,共3页
目的探讨Mst1基因在喉癌发生、发展中的作用,并指导化疗用药。方法荧光定量PCR法检测74例喉癌及相应癌旁组织中Mst1 mRNA表达;实验分为实验组、空白对照组和阴性对照组,实验组转染真核表达载体pcDNA3.1-Mst1,空白对照组未转染,阴性对照... 目的探讨Mst1基因在喉癌发生、发展中的作用,并指导化疗用药。方法荧光定量PCR法检测74例喉癌及相应癌旁组织中Mst1 mRNA表达;实验分为实验组、空白对照组和阴性对照组,实验组转染真核表达载体pcDNA3.1-Mst1,空白对照组未转染,阴性对照组转染空载体。Western blot法检测三组Mst1蛋白表达。三组细胞培养基中分别加入0、1、3、5μg/ml顺铂(DDP)进行干预,作用12 h,MTT法测定三组细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果喉癌组织中Mst1 mRNA表达明显低于癌旁组织;实验组Mst1蛋白表达、细胞凋亡率明显高于空白对照组及阴性对照组,细胞增殖活力明显低于空白对照组及阴性对照组;DDP干预后,随DDP浓度增加,实验组细胞凋亡率明显升高,增殖活力明显降低。结论喉癌发生与Mst1 mRNA表达降低相关,Mst1蛋白表达增加能抑制Hep2细胞增殖并促进凋亡,并可在一定程度上增强肿瘤细胞对DDP的敏感性,可将Mst1基因作为指导喉癌化疗用药的参考指标。 展开更多
关键词 哺乳动物绝育20样激酶1 喉肿瘤 喉癌 细胞凋亡
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