激振搅拌对水泥稳定碎石与煤矸石抗压强度的影响

1

作者 王稷良 郭文彬 +2 位作者 宋庆凯 徐伟东 刘鹏 《硅酸盐通报》 CAS 北大核心 2024年第2期757-765,共9页

为研究激振搅拌工艺对水泥稳定煤矸石混合料性能的影响规律,以水泥稳定碎石为基准,对比分析普通搅拌与激振搅拌对不同水泥剂量的水泥稳定基层材料无侧限抗压强度的影响。结果表明:在干拌状态下增加激振工艺对基层混合料抗压强度的提升... 为研究激振搅拌工艺对水泥稳定煤矸石混合料性能的影响规律,以水泥稳定碎石为基准,对比分析普通搅拌与激振搅拌对不同水泥剂量的水泥稳定基层材料无侧限抗压强度的影响。结果表明:在干拌状态下增加激振工艺对基层混合料抗压强度的提升效果显著,在激振气压为0.4 MPa、激振干拌30 s后普通湿拌30 s条件下,混合料的7 d无侧限抗压强度达到最佳;激振搅拌对水泥稳定碎石、水泥稳定煤矸石混合料强度的平均提升幅度约为20%,对煤矸石混合料的强度提升更加显著,水泥剂量越少,提升幅度越大。SEM结果表明激振搅拌后混合料中的水化产物分布更加均匀,结构更加致密;经线性拟合计算,当水泥剂量为2.0%~7.0%(质量分数,下同)时,激振搅拌对于碎石混合料可节约8.9%~26.3%的水泥,对于煤矸石混合料可节约12.9%~30.8%水泥,且节约率与水泥剂量成反比。 展开更多

关键词 基层材料 激振搅拌 水泥稳定碎石 煤矸石 无侧限抗压强度

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重污染企业亲社会性表现对企业高质量发展的影响——基于融资约束的中介效应研究

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作者 宋庆凯 王雨晨 宋皓杰 《经济研究参考》 2024年第2期43-61,共19页

本文以2011~2021年中国A股上市的重污染企业为研究样本,分析了重污染企业亲社会行为与企业高质量发展之间的关系,并在此基础上进一步考察了企业融资约束在企业亲社会行为和企业高质量发展之间的中介作用。研究结果发现,重污染企业的亲... 本文以2011~2021年中国A股上市的重污染企业为研究样本,分析了重污染企业亲社会行为与企业高质量发展之间的关系,并在此基础上进一步考察了企业融资约束在企业亲社会行为和企业高质量发展之间的中介作用。研究结果发现,重污染企业的亲社会行为能够显著地促进企业高质量发展,并且验证了企业融资约束在其中所起到的中介作用。企业的亲社会行为帮助企业改善了企业形象,进而影响到利益相关者并降低了企业的融资约束,促进企业更好地融资,提升了企业的市场竞争力,有助于企业实现高质量发展。此外,研究又进一步基于产权性质、地理位置等一系列因素进行了分析。本文丰富了企业高质量发展的理论内涵,并为重污染行业企业如何进行高质量转型、提升发展质量提供了实证依据和更多的思路及建议。 展开更多

关键词 企业亲社会行为 重污染企业 企业高质量发展 融资约束

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帕金森疾病动物模型的研究进展 被引量：5

3

作者 张志成 袁圆 +2 位作者 王璇 宋庆凯 代解杰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第5期21-27,共7页

帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,现多认为是遗传和环境因素相互作用的结果。典型特征是黑质纹状体中多巴胺神经元丧失以及多巴胺缺乏相关的典型帕金森运动特征。动物模型在阐明PD的发病机制、测试新的治疗方... 帕金森疾病(Parkinson’s disease,PD)是一种神经退行性疾病,现多认为是遗传和环境因素相互作用的结果。典型特征是黑质纹状体中多巴胺神经元丧失以及多巴胺缺乏相关的典型帕金森运动特征。动物模型在阐明PD的发病机制、测试新的治疗方案及药物的研究中,具有十分重要的作用。啮齿类动物、树鼩和灵长类动物等采用不同造模方法所建立的PD动物模型都拥有自己的优势和局限性,所表现出的临床特征和病理机制与人类有所不同。因此,在科学研究中选择所需使用的模型时必须仔细考虑。本文就主要神经毒素及转基因PD动物模型的相关研究进展进行综述。 展开更多

关键词 帕金森疾病 6-羟基多巴胺 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶 神经毒素 转基因 动物模型

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树鼩真菌性角膜炎模型的建立及甘露糖受体和TNF-α对炎症的影响 被引量：4

4

作者 苗雨润 贾杰 +5 位作者 黎晓慧 袁园 宋庆凯 张志成 李娜 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期752-759,共8页

目的研究茄病镰刀菌感染树鼩角膜过程中甘露糖受体和炎症因子的表达变化,探讨真菌感染性角膜炎发生机制。方法通过接触镜辅助法用茄病镰刀菌感染树鼩角膜,前段照相、病理切片及活体共聚焦显微镜观察结果对动物模型进行评价。qPCR检测树... 目的研究茄病镰刀菌感染树鼩角膜过程中甘露糖受体和炎症因子的表达变化,探讨真菌感染性角膜炎发生机制。方法通过接触镜辅助法用茄病镰刀菌感染树鼩角膜,前段照相、病理切片及活体共聚焦显微镜观察结果对动物模型进行评价。qPCR检测树鼩角膜炎病发过程中的甘露糖受体、dectin-1、IL-1β、IL-6、TNF-α的表达;体外培养树鼩原代角膜细胞并进行感染实验。结果树鼩真菌性角膜炎模型建立成功率为84%。MR与dectin-1在感染初期有高拷贝数阳性表达,引起炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达峰值,这些因子的表达与病症的严重程度呈正相关。角膜细胞体外感染前后IL-1β、IL-6、TNF-α的表达差异无显著性(P> 0.05)。结论建立的真菌性角膜炎树鼩模型,其病理表现相与人类真菌性角膜炎症状接近。甘露糖受体可能参与调控机体对真菌感染的免疫应答反应,机体自身的免疫能力可能对角膜炎病发与转归有重要作用。 展开更多

关键词 树鼩 真菌性角膜炎 甘露糖受体 TNF-Α

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树鼩粪便中沙门氏菌LAMP检测方法建立及应用 被引量：4

5

作者 王璇 袁园 +3 位作者 张志成 刘城秀 宋庆凯 孙晓梅 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第2期90-97,共8页

目的建立树鼩粪便沙门氏菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对此方法进行初步应用。方法根据沙门氏菌种属特异性基因inv A(侵袭蛋白基因A)的保守序列,设计合成特异性LAMP引物。分别设定十个... 目的建立树鼩粪便沙门氏菌的环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法,并对此方法进行初步应用。方法根据沙门氏菌种属特异性基因inv A(侵袭蛋白基因A)的保守序列,设计合成特异性LAMP引物。分别设定十个反应温度即57℃~66℃和十个反应时间即24~42 min进行优化,并测定本方法的特异性和灵敏度;同时进行普通PCR实验,作为本方法的验证和比较。用建立的LAMP法对91份野生来源的树鼩稀便样品进行检测。结果优化反应条件选出反应温度为62℃,反应时间34 min;该方法对沙门氏菌的灵敏度可达3.36×101CFU/m L,比普通PCR方法高10~100倍;对10种树鼩来源的肠道细菌进行LAMP检测,只有沙门氏菌属的肠炎沙门氏菌和乙型副伤寒沙门氏菌检测为阳性,其余为阴性;对91份野生树鼩粪便样品进行LAMP检测,阳性检出率为20.88%;LAMP法的所有反应可在40 min内完成。结果可通过肉眼观察颜色变化直接判定。结论所建立的LAMP方法具有便捷、快速、灵敏、特异等特点,可用于树鼩粪便中沙门氏菌的大规模快速检测。 展开更多

关键词 沙门氏菌 环介导等温扩增 粪便样品 树鼩

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树鼩小肠上皮细胞的体外分离培养与鉴定 被引量：4

6

作者 尹博文 陈玲霞 +4 位作者 李振宇 李晓飞 宋庆凯 苗雨润 孙晓梅 《实验动物科学》 2017年第2期11-15,共5页

目的从树鼩小肠分离小肠上皮细胞,探索分离培养方法和条件,为药物开发和病原感染机制研究提供体外细胞模型,并且为建立树鼩小肠上皮细胞系奠定基础。方法采用胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ及DTT联合消化树鼩小肠组织块,得到的细胞经完全培养... 目的从树鼩小肠分离小肠上皮细胞,探索分离培养方法和条件,为药物开发和病原感染机制研究提供体外细胞模型,并且为建立树鼩小肠上皮细胞系奠定基础。方法采用胶原酶Ⅺ和中性蛋白酶Ⅰ及DTT联合消化树鼩小肠组织块,得到的细胞经完全培养液培养,用相差显微镜观察细胞形态,通过MTT法测定细胞生长曲线,并采用细胞角蛋白荧光染色等方法鉴定细胞。结果经优化分离法得到的肠上皮隐窝细胞团在24 h后贴壁,6 d汇合成片,在显微镜下观察发现细胞团延辐射状向外长出铺路石样和多角状的细胞;第二代后,每隔2~3 d可传代1次;细胞接种3~6 d为对数生长期;细胞角蛋白18进行免疫荧光鉴定后确定为小肠上皮细胞。结论本实验成功地从树鼩小肠分离到了小肠上皮细胞,并且建立了树鼩小肠上皮细胞体外培养的方法。 展开更多

关键词 树鼩 小肠上皮细胞 酶消化 免疫荧光 鉴定

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公路工程施工技术创新与施工管理策略研讨

7

作者 宋庆凯 《前卫》 2023年第8期222-224,共3页

随着我国经济的发展,公路工程施工技术取得了长足的进步,当前我国的公路工程总量以及增速均位于世界前列。但需要注意的是,由于我国幅员辽阔,各地的情况差异显著,很多偏远地区公路工程管理水平尚显不足,给工程质量和经济效益带来较大的... 随着我国经济的发展,公路工程施工技术取得了长足的进步,当前我国的公路工程总量以及增速均位于世界前列。但需要注意的是,由于我国幅员辽阔,各地的情况差异显著,很多偏远地区公路工程管理水平尚显不足,给工程质量和经济效益带来较大的影响,对区域经济发展也会产生不利影响。基于此,本文对公路工程施工技术创新应用进行了阐述,提出了相应的施工管理策略,以供参考。 展开更多

关键词 公路施工 施工技术 技术创新 施工管理

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树鼩角膜原代上皮细胞的分离培养、纯化与鉴定 被引量：3

8

作者 苗雨润 宋庆凯 +4 位作者 匡德宣 陈玲霞 尹博文 李晓飞 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第2期130-135,共6页

目的建立树嗣角膜上皮细胞(CECs)稳定的体外培养技术,为人类角膜疾病研究提供新的实验材料。方法使用改进的双酶消化法取得树嗣CECs,周转化生长因子-β(TGF-β)抑制剂配合梯度消化对树鼩CECs进行纯化,角蛋白3/12抗体对CECs进行免疫荧光... 目的建立树嗣角膜上皮细胞(CECs)稳定的体外培养技术,为人类角膜疾病研究提供新的实验材料。方法使用改进的双酶消化法取得树嗣CECs,周转化生长因子-β(TGF-β)抑制剂配合梯度消化对树鼩CECs进行纯化,角蛋白3/12抗体对CECs进行免疫荧光检测及鉴定。结果优化的酶消化法可以快速、有效得到高纯度的树鼩CECs。TGF-β抑制剂及梯度消化法可以达到良好的纯化目的,纯化的CECs在传代过程中仍保持良好形态。树鼩CECs免疫荧光染色显示角蛋白3/12单克隆抗体阳性。结论成功建立了一种有效、简单、经济适用的树鼩角膜上皮原代细胞的体外培养技术,所获得的原代细胞具有较好的上皮细胞形态特征并可以连续传代,为眼科疾病的研究提供一种新材料。 展开更多

关键词 树鼩角膜上皮细胞(CECs) 原代培养优化鉴定

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体外诱导树鼩骨髓间充质干细胞向神经元样细胞分化的实验研究 被引量：2

9

作者 苗雨润 李娜 +5 位作者 匡德宣 宋庆凯 袁圆 王璇 张志成 陆彩霞 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第5期337-343,共7页

目的探讨树鼩骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向神经元样细胞分化的可行性。方法通过采用不同诱导物浓度的神经元样细胞诱导液对体外培养的树鼩BM-MSCs向神经元样细胞进行诱导分化,用PCR法检测细胞神经元烯醇化酶(NES)和α-突触核蛋白(α-SYN... 目的探讨树鼩骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)向神经元样细胞分化的可行性。方法通过采用不同诱导物浓度的神经元样细胞诱导液对体外培养的树鼩BM-MSCs向神经元样细胞进行诱导分化,用PCR法检测细胞神经元烯醇化酶(NES)和α-突触核蛋白(α-SYN)表达情况,并用NES抗体进行细胞免疫荧光染色鉴定。结果使用浓度为10 ng/mL表皮生长因子(EGF)和20 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导液在体外诱导培养树鼩BM-MSCs至12 d时可以得到良好诱导结果。结论优化的双细胞因子诱导培养液可以成功将树鼩BM-MSCs诱导分化为神经元样细胞,分化的细胞符合神经元样细胞的一般特征。 展开更多

关键词 树鼩 间充质干细胞(MSCs) 体外诱导培养 神经元样细胞

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MPTP诱导树鼩帕金森疾病模型行为学检测方法研究 被引量：2

10

作者 张志成 宋庆凯 +6 位作者 黎晓慧 李娜 黄鑫 袁圆 王璇 李明学 代解杰 《实验动物与比较医学》 CAS 2019年第1期9-14,共6页

目的建立树鼩急性帕金森疾病(PD)模型,对Catwalk、FPA检测系统作为评价PD行为学的方法进行研究。方法选取14只成年、健康的普通级滇缅树鼩,随机分为模型组(n=10)和对照组(n=4),1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)药物腹腔注射建立急... 目的建立树鼩急性帕金森疾病(PD)模型,对Catwalk、FPA检测系统作为评价PD行为学的方法进行研究。方法选取14只成年、健康的普通级滇缅树鼩,随机分为模型组(n=10)和对照组(n=4),1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)药物腹腔注射建立急性PD模型,对照组注射等体积0.9%氯化钠溶液。结果成功建立树鼩急性PD模型。建模1d后,与对照组树鼩相比,模型组树鼩空间利用指数下降、低运动性出现次数(BLM)指数显著升高(P均<0.001),表明模型组空间利用能力受损、活动度下降;模型组右前爪(RF)、左前爪(LF)最大接触面积减少,RF、LF和右后爪(RH)爪印最大接触面积平均压力,以及RF、RH、LF爪印平均压力及四肢平均力量均下降(P均<0.05),反映了树副肌肉僵硬度升高,可以作为PD步态分析的定量指标;0~15 Hz(TI1)震颤显著增强(P<0.01),能较好模拟PD患者静止性震颤的临床表现。结论MPTP致树鼩急性PD模型能较好模拟PD早期的临床表现。Catwalk、FDA检测系统可提供系统、客观、可靠的PD行为学数据。 展开更多

关键词 帕金森疾病 树鼩 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶(MPTP) 动物模型 行为学 Catwalk步态分析系统 FPA分析系统

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树鼩胸主动脉血管内皮细胞的分离培养与鉴定 被引量：2

11

作者 宋庆凯 尹博文 +4 位作者 陈玲霞 李晓飞 苗雨润 代解杰 孙晓梅 《实验动物科学》 2018年第6期62-65,共4页

目的体外分离、培养树鼩(Tupaia belangeri)胸主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells, VECs),并对培养细胞进行初步鉴定,为新型实验动物树鼩的应用研究提供体外模型。方法无菌取幼龄树鼩胸主动脉,采用组织块培养法和胰蛋白酶... 目的体外分离、培养树鼩(Tupaia belangeri)胸主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells, VECs),并对培养细胞进行初步鉴定,为新型实验动物树鼩的应用研究提供体外模型。方法无菌取幼龄树鼩胸主动脉,采用组织块培养法和胰蛋白酶、胶原酶连续消化法分别进行树鼩胸主动脉血管内皮细胞分离,经完全培养液培养,倒置显微镜观察细胞形态,并用抗Ⅷ因子抗体进行荧光染色鉴定细胞。结果经组织块培养法分离培养的血管内皮细胞,3 d有细胞贴壁,7 d后细胞从组织块中大量长出,15 d汇合为单层;酶消化法所得细胞12 h即贴壁,3～7 d生长较快,12 d汇合成单层,镜下观察发现细胞呈典型的铺路石状;两种方法分离所得原代细胞经体外培养传代,6代内,细胞生长均良好;利用血管内皮细胞标志分子Ⅷ因子进行免疫荧光鉴定后确定为阳性。结论本研究采用简便的方法成功分离到了树鼩胸主动脉血管内皮细胞,为血管内皮细胞相关研究提供了实验模型。 展开更多

关键词 树鼩 血管内皮细胞 分离培养 免疫荧光 鉴定

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树鼩角膜内皮细胞体外原代培养方法的建立 被引量：2

12

作者 苗雨润 宋庆凯 +3 位作者 陈玲霞 尹博文 李晓飞 代解杰 《实验动物科学》 2016年第5期1-8,共8页

目的建立树鼩角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)体外分离、培养及纯化的稳定技术,为人类眼科角膜疾病提供新的实验材料。方法通过比较揭膜法、双酶消化法及揭膜-消化两步法,确定每种树鼩原代CECs取材方法的优劣性。分别使用... 目的建立树鼩角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)体外分离、培养及纯化的稳定技术,为人类眼科角膜疾病提供新的实验材料。方法通过比较揭膜法、双酶消化法及揭膜-消化两步法,确定每种树鼩原代CECs取材方法的优劣性。分别使用DMEM/F12,M199,Ham’s F12/M199三种培养液以确定树鼩CECs原代细胞最适培养液。使用TGF-β抑制剂、低血清培养法及梯度消化法来探讨树鼩CECs纯化的可行性。苏木精-伊红染色观察细胞形态,根据树鼩神经元烯醇化酶(NES)设计并筛选特异性引物,使用PCR方法检测细胞NES表达情况并用NES抗体进行细胞免疫荧光染色鉴定。结果揭膜法可以快速、有效得到高纯度的树鼩CECs细胞。Ham’s F12/M199培养液是树鼩CECs的最适培养液。使用TGF-β抑制剂可以达到CECs的纯化目的。结论优化的树鼩CECs细胞培养纯化方法对树鼩CECs的体外培养更适宜,优化条件下分离培养的细胞符合CECs的一般特征。 展开更多

关键词 树鼩 角膜内皮细胞 体外 原代培养 优化

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不同诱导条件对树鼩骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响 被引量：2

13

作者 苗雨润 李娜 +5 位作者 匡德宣 宋庆凯 袁圆 王璇 张志成 陆彩霞 《实验动物科学》 2018年第5期46-51,共6页

目的探讨不同诱导条件对树鼩骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)体外向成骨细胞分化的影响。方法取P3代树鼩骨髓间充质干细胞分成7组进行诱导。A组:高糖DMEM+1μmol/L地塞米松+100μmol/L维生素C+10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠;B组:高糖DMEM+50 ng/mL ... 目的探讨不同诱导条件对树鼩骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)体外向成骨细胞分化的影响。方法取P3代树鼩骨髓间充质干细胞分成7组进行诱导。A组:高糖DMEM+1μmol/L地塞米松+100μmol/L维生素C+10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠;B组:高糖DMEM+50 ng/mL BMP-2;C组:高糖DMEM+80 ng/mL BMP-2;D组:高糖DMEM+50μmol/L维生素C+10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠+20ng/mL BMP-2; E组:高糖DMEM+1μmol/L地塞米松+100μmol/L维生素C+20 mmol/Lβ-磷酸甘油钠;F组:高糖DMEM+100μmol/L地塞米松+100μmol/L维生素C+10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠;G组:DMEM/F12+0.1μmol/L地塞米松+50μmol/L维生素C+10 mmol/Lβ-磷酸甘油钠。诱导18 d后进行碱性磷酸酶和茜素红染色鉴定其诱导分化情况。结果每一组碱性磷酸酶染色呈不同程度的阳性,茜素红染色可在A、B、C、D和E组观察到明显矿化结节。结论 A组、B组、C组、D组和E组可以诱导树鼩BM-MSCs向成骨细胞分化,其中以A组和B组效果最为突出。 展开更多

关键词 树鼩 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 诱导

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新生树鼩心肌细胞与心肌成纤维细胞的分离培养、纯化及鉴定 被引量：1

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作者 苗雨润 宋庆凯 +4 位作者 匡德宣 陈玲霞 尹博文 李晓飞 代解杰 《中国心血管病研究》 CAS 2017年第10期950-954,I0002,共6页

目的研究应用树鼩建立人类心血管病理、毒理细胞模型的纯度较高、活力较强的心肌细胞和心肌成纤维细胞的方法。方法使用差速贴壁1．5h纯化心肌细胞进行培养，并比较5-溴-2-脱氧尿苷、阿糖胞苷及TGF—β抑制剂的纯化效率以获取最适纯化... 目的研究应用树鼩建立人类心血管病理、毒理细胞模型的纯度较高、活力较强的心肌细胞和心肌成纤维细胞的方法。方法使用差速贴壁1．5h纯化心肌细胞进行培养，并比较5-溴-2-脱氧尿苷、阿糖胞苷及TGF—β抑制剂的纯化效率以获取最适纯化方案，培养过程在37℃、5％CO2条件下进行。使用MTT法测定细胞活力以确定方法可行性。利用α-横纹肌肌钙蛋白（α-SA）及心肌肌钙蛋白I（TnI）对树鼩心肌细胞进行免疫组化及免疫荧光鉴定，利用波性蛋白（Vimentin）对树购心肌成纤维细胞进行免疫荧光染色以达到鉴定目的。结果原代培养新生树鼩心肌细胞生长良好。在倒置显微镜下观察，培养10d左右的心肌细胞可以基本完成局部融合并伴有细胞搏动。MTT法检测结果显示，心肌细胞活力可以在最少15d内保持良好水平。细胞鉴定结果显示，树鼩心肌细胞α—SA免疫组化呈阳性，TnI免疫荧光鉴定呈阳性，心肌成纤维细胞呈阴性，符合一般心肌细胞特征；心肌成纤维Vimentin免疫荧光结果呈阳性。结论分离纯化得到的树鼢心肌细胞和心肌成纤维细胞纯度较高、结构完整并具有相对较高的细胞活力，是一种较为理想的、可以应用于树鼩建立人类心血管病理、毒理细胞模型的心肌细胞和心肌成纤维细胞。 展开更多

关键词 树鼩 原代培养 心肌细胞 心肌成纤维细胞 鉴定

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腹泻树鼩肠道阿米巴原虫携带情况调查 被引量：1

15

作者 宋庆凯 苗雨润 +3 位作者 尹博文 陈玲霞 代解杰 孙晓梅 《实验动物与比较医学》 CAS 2016年第6期415-418,共4页

目的调查腹泻树鼩肠道中阿米巴原虫携带情况，查找可能导致树鼩腹泻的寄生虫类病原，为实验树鼩的寄生虫质量控制提供依据。方法采集78只腹泻树鼩新鲜粪便和全血，分离血清，其中野生来源样本45份，人工繁育样本33份。分别采用生理盐水... 目的调查腹泻树鼩肠道中阿米巴原虫携带情况，查找可能导致树鼩腹泻的寄生虫类病原，为实验树鼩的寄生虫质量控制提供依据。方法采集78只腹泻树鼩新鲜粪便和全血，分离血清，其中野生来源样本45份，人工繁育样本33份。分别采用生理盐水涂片法、碘液染色法进行阿米巴原虫形态学检测，采用ELISA方法进行粪便中阿米巴抗原和血清中IgG抗体检测。结果形态学镜检结果显示，野生来源和人工繁育腹泻树鼩肠道中阿米巴原虫携带率分别为42．22％（19／45）、33．33％（11／33）；经ELISA检测粪便中阿米巴抗原，阿米巴原虫携带率分别为64．44％（29／45）、42．42％（14／33）。采用ELISA粪便抗原检出率高于形态学镜检法。经ELISA检测血清IgG抗体阳性率分别为66．67％（30／45）、63．63％（21／33）。结论腹泻树鼩对阿米巴原虫的携带率较高，该原虫可能是导致树询腹泻的病原之一。日常饲养过程中应加强阿米巴病的监测和防治，防止肠道寄生虫病的传播。 展开更多

关键词 树鼩 阿米巴原虫 形态学检测 ELISA检测

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树鼩腺病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：1

16

作者 宋庆凯 李晓飞 +5 位作者 苗雨润 张志成 王璇 袁圆 代解杰 孙晓梅 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期72-77,共6页

目的通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒。方法根据TAV全基因组3’端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV ... 目的通过建立树鼩腺病毒(tree shrew adenovirus,TAV)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,快速准确地检测树鼩腺病毒。方法根据TAV全基因组3’端保守序列设计合成特异性引物;用含目的基因片段的重组质粒作为标准品进行标准曲线绘制,建立TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。结果建立的TAV实时荧光定量PCR检测方法特异性好,与树鼩源及其他物种常见病毒无交叉反应;方法的最低检测限度为每微升3.7拷贝,灵敏性强;相关检测系数R2为0.998,扩增效率为95.7%;扩增结果具有良好的线性关系,且重复性检测效果好。结论成功建立了TAV TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,灵敏度高,重复性好,可用于TAV感染的早期快速检测。 展开更多

关键词 树鼩腺病毒 3’保守区域 TAQMAN 实时荧光定量PCR

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树鼩粪便中病毒三种浓缩方法的效果比较

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作者 陈玲霞 尹博文 +3 位作者 苗雨润 宋庆凯 李晓飞 代解杰 《实验动物科学》 2018年第2期38-41,46,共5页

目的比较树鼩粪便中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为病毒浓缩方法的最佳选择提供依据。方法将指示病毒(树鼩呼肠孤病毒,tree shrew’s reovirus,TRV)加入经离心过滤处理后的野生树鼩粪便上清中,采用PEG(聚乙二醇,polyehhyle... 目的比较树鼩粪便中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为病毒浓缩方法的最佳选择提供依据。方法将指示病毒(树鼩呼肠孤病毒,tree shrew’s reovirus,TRV)加入经离心过滤处理后的野生树鼩粪便上清中,采用PEG(聚乙二醇,polyehhylene glycol)沉淀结合超声分离法、铁离子絮凝的化学方法和GBviroFast病毒浓缩试剂盒对树鼩粪便上清分别进行浓缩,经实时荧光定量PCR技术对指示病毒进行绝对定量,比较各方法的浓缩效果。结果 TRV病毒悬液的载量为1.34E+05;铁离子絮凝的化学方法浓缩的TRV载量为1.86E+04,浓缩效率为49.57%;GBviroFast病毒浓缩试剂盒浓缩的TRV载量为0.98E+04,浓缩效率为26.12%;PEG沉淀结合超声分离法浓缩的TRV载量为2.30E+03,浓缩效率为6.13%。结论三种方法均能浓缩粪便上清中低浓度的肠道病毒,铁离子絮凝方法最佳,GBviroFast病毒浓缩试剂盒其次,PEG结合超声分离效果最差。 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR 病毒浓缩 粪便 树鼩

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树鼩HGF全长编码序列的克隆及分子特征分析

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作者 李振宇 陈玲霞 +3 位作者 尹博文 苗雨润 宋庆凯 代解杰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第5期10-18,共9页

目的获取树鼩肝细胞生长因子的全长编码序列并进行分子特征分析。方法以树鼩肝组织总RNA为材料,通过RT-PCR扩增和序列拼接获得树鼩肝细胞生长因子全长编码序列,进而通过DNAMAN,Pymol等生物信息学软件对其序列和分子特征进行分析。结果树... 目的获取树鼩肝细胞生长因子的全长编码序列并进行分子特征分析。方法以树鼩肝组织总RNA为材料,通过RT-PCR扩增和序列拼接获得树鼩肝细胞生长因子全长编码序列,进而通过DNAMAN,Pymol等生物信息学软件对其序列和分子特征进行分析。结果树鼩HGF分子结构在进化中相对保守,树鼩HGF整体结构与人相似。但树鼩HGFαNK1区域相比人HGF多出一个α螺旋,并且有两个更长的β折叠片,另外,树鼩在该区域存在一个很强的表面正电荷区域。这些差异可能会对树鼩HGF与其受体的作用方式产生影响。结论本实验为明确树鼩HGF与其受体的作用方式和树鼩HGF的合成与制备奠定了基础。 展开更多

关键词 树鼩 肝细胞生长因子 分子克隆 结构预测

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山区高速公路桥梁桩基施工中钻孔与挖孔的利弊研究 被引量：3

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作者 张志强 宋庆凯 《中小企业管理与科技》 2015年第22期105-105,共1页

随着我国基础设施建设快速推进,我国绝大部分山区都通上了公路,全国交通大动脉建设成绩喜人。公路桥梁的建设为我国经济发展提供了有力保障,方便了群众出行。由于山区特殊的地理环境,给公路桥梁的桩基施工带来了不小的挑战。钻孔与挖孔... 随着我国基础设施建设快速推进,我国绝大部分山区都通上了公路,全国交通大动脉建设成绩喜人。公路桥梁的建设为我国经济发展提供了有力保障,方便了群众出行。由于山区特殊的地理环境,给公路桥梁的桩基施工带来了不小的挑战。钻孔与挖孔是桩基施工的主要方式,各具优缺点。钻孔是较为安全的施工方式,但若地形限制则钻孔技术无法开展;挖孔依靠人力方式进行,可适应多变的山区地形环境,但安全问题较为显眼。 展开更多

关键词 山区公路桥梁 桩基施工 钻孔与挖孔

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关于沥青混凝土路面施工工艺与质量控制

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作者 宋庆凯 《经济视野》 2014年第7期381-381,共1页

我们在沥青混凝土路面施工中,从选材到工艺控制、现场施工都加以严格的控制.笔者通过多年的施工实践,对沥青混凝土施工质量控制进行分析,

关键词 沥青凝土路面 施工 质量控制

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