山羊源志贺菌的分离鉴定及其部分生物学特性的研究 被引量：8

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作者 张兴民 张焕容 +3 位作者 黄忍 孙正楠 宋定洲 汤承 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期851-858,共8页

对采集自四川部分地区的226份羔羊粪便样本进行志贺菌的分离鉴定,同时对分离菌株进行血清型鉴定,并用PCR检测其携带sat、sen、set A、pic、sig A、ics P、ial、ics A、iut A、ipa H共10个毒力基因的情况;采用灌胃法检测携带毒力基因最多... 对采集自四川部分地区的226份羔羊粪便样本进行志贺菌的分离鉴定,同时对分离菌株进行血清型鉴定,并用PCR检测其携带sat、sen、set A、pic、sig A、ics P、ial、ics A、iut A、ipa H共10个毒力基因的情况;采用灌胃法检测携带毒力基因最多的4株优势血清型菌株培养物对BALB/c小鼠的致病力。经细菌分离鉴定,从226份样本中共分离到54株志贺菌;血清型鉴定结果显示,4株的血清型为福氏志贺菌1a型,11株的血清型为福氏志贺菌1b型,28株的血清型为福氏志贺菌2b型,11株的血清型为福氏志贺菌3b型。54株志贺菌均携带sat、sen、ipa H基因,而set A、pic、sig A、ics P、ial、ics A、iut A基因的阳性携带率分别为73.6%、65.2%、77.8%、82.0%、79.1%、79.1%,每个菌株携带4～10种毒力基因。携带10个毒力基因的4株福氏志贺菌2b型优势血清型菌株均在1.7×10^8CFU/m L剂量下致死全部试验小鼠,其中福氏志贺菌SWUN553对BALB/c小鼠的LD50为1.04×10^6CFU;致死小鼠的组织病理学检查显示,心、肝、脾、肺、结肠出现明显的坏死与炎性细胞浸润等病变,提示结肠为该菌入侵的最有可能部位。本研究阐明了山羊源志贺菌的部分生物学特性,为山羊志贺菌病的防控提供了科学依据。 展开更多

关键词 山羊 志贺菌 分离鉴定 血清型 毒力基因 致病性

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牦牛隐性乳房炎的调查及致病菌的分离鉴定 被引量：5

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作者 彭纯良 孙正楠 +2 位作者 黄忍 张焕容 汤承 《动物医学进展》 北大核心 2019年第3期140-144,共5页

为调查阿坝州红原县牦牛隐性乳房炎的发病情况,无菌采取68份无临床乳房炎牦牛奶样,采用体细胞计数、细菌分离培养、革兰染色与PCR相结合的方法分离鉴定细菌种属,并统计分析体细胞数与细菌分离情况的相关性。结果显示,牦牛奶样体细胞数从... 为调查阿坝州红原县牦牛隐性乳房炎的发病情况,无菌采取68份无临床乳房炎牦牛奶样,采用体细胞计数、细菌分离培养、革兰染色与PCR相结合的方法分离鉴定细菌种属,并统计分析体细胞数与细菌分离情况的相关性。结果显示,牦牛奶样体细胞数从4 000个/mL～240 000个/mL不等;各种细菌阳性奶样数分别为金黄色葡萄球菌1份,溶血性葡萄球菌30份,非溶血性葡萄球17份,大肠埃希菌2份,乳酸乳球菌18份和藤黄微球菌2份;未分离到无乳、停乳、乳房链球菌。结果表明,分离到溶血性葡萄球菌的牦牛奶样体细胞平均数显著高于未分离到溶血性葡萄球菌的牦牛奶样体细胞的平均数(P<0.05),当牦牛奶中体细胞数大于90 000个/mL时,溶血性葡萄球菌的阳性率大于80%(10/12)。研究结果提示溶血性葡萄球菌是引起牦牛隐性乳房炎的病原菌,为牦牛隐性乳房炎的防控提供了依据。 展开更多

关键词 牦牛 隐性乳房炎 体细胞数 细菌 分离鉴定

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某涡轴发动机火警虚警故障分析与研究

3

作者 张秋生 景刚 +2 位作者 唐宁 孙正楠 梁小康 《环境技术》 2023年第6期95-98,共4页

通过对某涡轴发动机在飞行过程中出现火警探测器虚警现象进行分析,结合火警探测系统工作原理,发现火警探测器的锁紧螺帽松动导致火警探测器输出电阻异常。通过机理分析,发现锁紧螺帽松动导致接触不良产生虚接。给出的改进措施可为该型... 通过对某涡轴发动机在飞行过程中出现火警探测器虚警现象进行分析,结合火警探测系统工作原理,发现火警探测器的锁紧螺帽松动导致火警探测器输出电阻异常。通过机理分析,发现锁紧螺帽松动导致接触不良产生虚接。给出的改进措施可为该型发动机的设计改型提供理论支撑。 展开更多

关键词 涡轴发动机 火警探测器 虚警 电阻异常

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燃油箱警告灯异常燃亮故障树分析

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作者 孙正楠 朱做涛 +2 位作者 孙护国 张秋生 景刚 《新技术新工艺》 2023年第10期71-75,共5页

燃油箱“FUEL.Q”警告灯频繁异常燃亮严重影响飞行安全。针对某型直升机左组燃油箱警告灯异常燃亮故障,结合实际工作经验,提出了基于故障树的故障诊断方法,建立了燃油箱警告灯异常燃亮故障树模型。为高效、准确地定位故障点,结合燃油系... 燃油箱“FUEL.Q”警告灯频繁异常燃亮严重影响飞行安全。针对某型直升机左组燃油箱警告灯异常燃亮故障,结合实际工作经验,提出了基于故障树的故障诊断方法,建立了燃油箱警告灯异常燃亮故障树模型。为高效、准确地定位故障点,结合燃油系统原理,总结出警告灯异常燃亮故障排除方法,最大限度地减少了测量、试验次数,节省了时间、人力等,为后续处理类似问题积累了经验,也为机务人员排除燃油系统类问题提供了参考和借鉴。 展开更多

关键词 燃油箱 失效 故障树 分析

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山羊口疮病毒四川分离株F1L基因分子特征分析及抗原表位预测 被引量：4

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作者 孙正楠 毛从剑 张焕容 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1942-1948,共7页

为明确山羊口疮病毒(ORFV)四川分离株F1L基因分子特征并预测抗原表位,本试验利用生物信息学软件分析四川分离株ORFVF1L基因,并预测其编码蛋白的二、三级结构和B细胞表位。将F1L基因克隆转化后测序,用Mega 7.0软件比对分析该基因与其他... 为明确山羊口疮病毒(ORFV)四川分离株F1L基因分子特征并预测抗原表位,本试验利用生物信息学软件分析四川分离株ORFVF1L基因,并预测其编码蛋白的二、三级结构和B细胞表位。将F1L基因克隆转化后测序,用Mega 7.0软件比对分析该基因与其他地区来源的ORFV F1L基因的变异情况,利用SOPMA服务器预测F1L蛋白的二级结构,以DNAStar软件预测其亲水性、表面可及性、柔韧性及抗原性,以ABCpred方案作为验证并输出B细胞表位,在SWISS-MODEL服务器预测三级结构后,进一步在建模区域再验证抗原表位,最终回归蛋白质序列比对。结果显示,四川分离株ORFVF1L基因大小为1 029bp,编码342个氨基酸,基因及其编码蛋白较其他地区来源毒株有一定变异;F1L蛋白预测分析存在9个可能B细胞表位,综合三级结构预测,其122—137肽段为最优表位;所预测的四川分离株ORFV F1L蛋白优势抗原表位较其他地区具有一定特异性,较多地区在124、131、137位氨基酸出现不同。本研究结果为四川地区ORFV基因工程疫苗及特异性检测方法的研究提供了理论依据。 展开更多

关键词 山羊口疮病毒(ORFV) F1L基因 蛋白结构 B细胞抗原表位

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四川部分猪场猪3种呼吸道病原菌分离鉴定及敏感药物筛选 被引量：4

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作者 孙正楠 诸明欣 张焕容 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期84-86,90,共4页

为了在对四川部分猪场3种呼吸道病原菌即支气管败血波氏杆菌(Brodetella bronchiseptica,B.bronchiseptica)、副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,H.parasuis)及胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,A.pleuropneumoniae)... 为了在对四川部分猪场3种呼吸道病原菌即支气管败血波氏杆菌(Brodetella bronchiseptica,B.bronchiseptica)、副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,H.parasuis)及胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,A.pleuropneumoniae)分离鉴定的基础上,分析这3种病原菌单一和混合感染的情况,并通过药敏试验筛选敏感药物,为临床药物治疗提供参考。从16头病死猪肺脏样品中分离鉴定出B.bronchieseptica、H.parasuis各6株,分离率为37.5%(6/16),A.Pleuropneumoniae 5株,分离率为31.25%(5/16);B.bronchiseptica与H.parasuis、B.bronchiseptica与A.pleuropneumoniae、H.parasuis与A.pleuropneumoniae二重感染率分别为6.25%(1/16),B.bronchieseptica、H.parasuis与A.pleuropneumoniae三重感染率为6.25%(1/16)。药敏试验结果显示,分离的3种菌共17株菌皆对头孢噻肟敏感;对阿莫西林、青霉素、红霉素、罗红霉素、环丙沙星、氟哌酸、头孢拉定、链霉素、卡那霉素、氟苯尼考、庆大霉素、氨苄西林、四环素等13种抗生素均存在一定的耐药性。本试验丰富了四川地区猪呼吸道多种病原菌感染的数据,并为部分猪场合理用药提供了依据。 展开更多

关键词 支气管败血波氏杆菌 副猪嗜血杆菌 胸膜肺炎放线杆菌 分离鉴定 感染 混合感染 药敏试验

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山羊肺炎病原菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：3

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作者 黄忍 张焕容 +2 位作者 毛从剑 彭纯良 孙正楠 《动物医学进展》 北大核心 2018年第11期130-133,共4页

无菌采集死亡羔羊肺脏样品接种于含100mL/L马血清的TSA平板,37℃培养24h^48h分离病原菌,观察分离菌菌落特征、染色特性,分析其溶血性等,采用山羊肺炎常见病原菌的特异性引物,以无菌水稀释菌落,微波炉热处理稀释菌落释放的细菌基因组DNA... 无菌采集死亡羔羊肺脏样品接种于含100mL/L马血清的TSA平板,37℃培养24h^48h分离病原菌,观察分离菌菌落特征、染色特性,分析其溶血性等,采用山羊肺炎常见病原菌的特异性引物,以无菌水稀释菌落,微波炉热处理稀释菌落释放的细菌基因组DNA为模板,PCR扩增病原菌目的基因片段鉴定分离的病原菌,通过药敏试验筛选敏感药物。结果表明,分离鉴定出2种病原菌分别为多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌,其中溶血性曼氏杆菌呈β溶血;分离鉴定的2种病原菌均能分别致死Balb/c小鼠;2株分离菌对头孢噻肟、头孢唑林、头孢拉定、头孢美唑、庆大霉素、丁胺卡那、诺氟沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、四环素和多西环素共11种抗菌药物高度敏感。表明多杀性巴氏杆菌和溶血性曼氏杆菌是致该病例山羊羔死亡的重要病原菌,为该羊场山羊细菌性肺炎的防控提供了依据。 展开更多

关键词 山羊 多杀性巴氏杆菌 溶血性曼氏杆菌 分离鉴定 药敏试验

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口疮病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用 被引量：2

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作者 孙正楠 张焕容 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期168-175,共8页

为建立检测口疮病毒(orf virus,ORFV)抗体的间接ELISA方法,原核表达口疮病毒B2L蛋白与6×组氨酸标签的重组蛋白;对纯化复性后的重组B2L蛋白进行Western-blot鉴定;用复性后的重组B2L蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立检测ORFV抗体... 为建立检测口疮病毒(orf virus,ORFV)抗体的间接ELISA方法,原核表达口疮病毒B2L蛋白与6×组氨酸标签的重组蛋白;对纯化复性后的重组B2L蛋白进行Western-blot鉴定;用复性后的重组B2L蛋白作为包被抗原,优化反应条件,建立检测ORFV抗体的间接ELISA,并进行特异性、灵敏度和重复性评价,最后应用所建立的间接ELISA对来自四川部分地区的384份山羊血清样品进行检测。结果显示,成功原核表达出42 ku的重组ORFV B2L蛋白。Western-blot结果表明,重组蛋白具有良好的抗原反应性。间接ELISA最佳反应条件为:包被抗原质量浓度为5μg/m L,1∶100稀释血清作用2 h,酶标二抗以1∶2000稀释作用30 min,TMB显色时间为15 min。在该优化条件下,D450≥0.31为阳性。该方法具有良好的特异性、灵敏度和重复性。临床样品的间接ELISA检测结果显示,总阳性率为66.67%(256/384),其中未接种过疫苗的羊只抗体阳性率为34.81%(55/158)。上述结果表明,建立的间接ELISA可用于ORFV抗体的检测,四川部分地区山羊场羊只感染野毒的概率较大,疫苗免疫效果不佳。 展开更多

关键词 山羊 口疮病毒 重组B2L蛋白 原核表达 间接ELISA

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羊口疮病毒B2L截短重组蛋白刺激小鼠产生特异性抗体的研究 被引量：2

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作者 刘丽佳 孙正楠 +2 位作者 向华 杨发龙 张焕容 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期66-73,共8页

为研究羊口疮病毒(ORFV)新型亚单位疫苗,设计了ORFV B2L优势抗原表位截短重组蛋白,命名为HBBH并经原核表达和鉴定。以不同剂量HBBH不加或加不同佐剂,经滴鼻或颈部皮下注射免疫BALB/c小鼠,其中滴鼻共4组(HBBH 10μg、20μg、30μg和20μg... 为研究羊口疮病毒(ORFV)新型亚单位疫苗,设计了ORFV B2L优势抗原表位截短重组蛋白,命名为HBBH并经原核表达和鉴定。以不同剂量HBBH不加或加不同佐剂,经滴鼻或颈部皮下注射免疫BALB/c小鼠,其中滴鼻共4组(HBBH 10μg、20μg、30μg和20μg+LTB),注射组(HBBH 20μg+201佐剂)。同时设ORFV组织灭活抗原+201佐剂注射免疫对照和空白对照,每组共免疫3次,每次间隔7 d。HBBH间接ELISA检测一免、二免、三免后7 d以及三免后14 d血清中ORFV IgG、IgA和三免后14 d肺灌洗液sIgA的抗体水平,取不同水平的IgG ELISA阳性血清检测细胞中和抗体效价。结果显示,表达并鉴定了具有良好反应原性的包含ORFV B2L蛋白优势抗原表位的截短重组蛋白HBBH。免疫小鼠试验结果表明,不同剂量HBBH通过滴鼻或颈部皮下注射均可刺激小鼠产生ORFV特异性IgG抗体,20μg HBBH+201佐剂注射免疫能最大刺激小鼠血清IgG抗体的产生。实验小鼠三免后14 d肺灌洗液特异性sIgA仅在HBBH滴鼻免疫剂量≥20μg的三个组中检测到,其中30μg HBBH组刺激小鼠产生了最高水平的sIgA。在同为20μg HBBH滴鼻免疫时,添加LTB佐剂刺激小鼠产生了更高水平的sIgA。表明一定剂量的HBBH+LTB佐剂滴鼻免疫可更好地刺激小鼠产生sIgA。HBBH间接ELISAIgG阳性血清的细胞中和抗体效价可高达1:128,且能中和4株ORFV分离株。结果表明,20μgHBBH+201佐剂注射免疫3次和20μg HBBH+LTB佐剂滴鼻免疫3次均能刺激BALB/c小鼠产生高水平的抗ORFV血清中和抗体IgG和黏膜抗体sIgA。本研究为ORFV B2L优势抗原表位截短重组蛋白作为亚单位疫苗提供了数据支持。 展开更多

关键词 羊口疮病毒 B2L截短重组蛋白 亚单位疫苗 中和抗体 黏膜免疫

原文传递

羊口疮病毒B2L蛋白抗原表位预测及重组蛋白设计与验证 被引量：1

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作者 孙正楠 张焕容 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期686-695,共10页

为得到羊口疮病毒(ORFV)B2L蛋白的可能抗原表位及截短后高效表达的表位蛋白,本试验采用DNAStar、Mega 7.0等软件对部分NCBI已登录的B2L基因序列进行分析,并应用不同在线服务器对其编码蛋白的信号肽、跨膜区、细胞毒性T细胞表位、辅助性... 为得到羊口疮病毒(ORFV)B2L蛋白的可能抗原表位及截短后高效表达的表位蛋白,本试验采用DNAStar、Mega 7.0等软件对部分NCBI已登录的B2L基因序列进行分析,并应用不同在线服务器对其编码蛋白的信号肽、跨膜区、细胞毒性T细胞表位、辅助性T细胞表位、B细胞表位和二级结构进行预测,同时参考多模板进行三级结构预测,综合抗原表位、亲水性、表面可及性和抗原指数等主要预测数据进行抗原位点分析及融合His·tag抗原表位蛋白的设计,构建并原核表达截短后高效表达的表位蛋白。结果显示,得到了几个可能的优质抗原表位,分别为88-93、133-138、172-175、251-254、311-313和370-377位氨基酸;纯化并复性的蛋白以多聚体形式存在;Western blotting结果显示,其具有良好的反应原性。该研究确定了ORFV B2L蛋白抗原位点,构建并原核表达了截短后高效表达的表位蛋白,为羊口疮诊断制剂及亚单位疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 羊口疮病毒(ORFV) B2L基因 蛋白结构 抗原表位 重组蛋白

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再解孔子伦理思想视野下的和谐理念及现实意义

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作者 孙正楠 《活力》 2011年第1期79-79,共1页

纵观孔子的思想体系．最为突出的一点，就是和为贵。关于“和”的精辟概括一直影响着中国传统文化的发展．也具体体现在孔子的“礼治”思想、“德治”思想、“仁学”思想。

关键词 孔子伦理思想 和谐理念 现实意义

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我国宗教文化发展的新趋势

12

作者 孙正楠 《活力》 2011年第2期118-118,共1页

当今世界的文化格局是一个文化冲突不断，价值观多元对立的复杂局面。人类经过了两次世界大战的洗礼，经历了数次经济危机的冲击，在世界政治和经济版图不断变化的背景下，世界文化的发展正在跨越文化焦虑和文化危机的鸿沟，文化输出悄... 当今世界的文化格局是一个文化冲突不断，价值观多元对立的复杂局面。人类经过了两次世界大战的洗礼，经历了数次经济危机的冲击，在世界政治和经济版图不断变化的背景下，世界文化的发展正在跨越文化焦虑和文化危机的鸿沟，文化输出悄然间在世界范围内蔓延。 展开更多

关键词 宗教文化 发展 趋势

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