转移相关基因表达与喉鳞状细胞癌淋巴结转移的关系 被引量：19

1

作者 唐桥斐 季文樾 +2 位作者 潘子民 郑晏 关超 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期213-216,共4页

目的　探讨喉鳞状细胞癌组织中转移相关基因 (metastasis associatedgene1 ,MTA1 )的表达与颈淋巴结转移的关系。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR) ,检测 32例声门上型喉鳞状细胞... 目的　探讨喉鳞状细胞癌组织中转移相关基因 (metastasis associatedgene1 ,MTA1 )的表达与颈淋巴结转移的关系。方法　应用逆转录 聚合酶链反应 (reversetranscriptionpolymerasechainreaction ,RT PCR) ,检测 32例声门上型喉鳞状细胞癌 (1 6例伴颈淋巴结转移、1 6例不伴颈淋巴结转移 )、1 6例声门型喉鳞状细胞癌 (均不伴颈淋巴结转移 )、1 6例喉正常组织中MTA1mRNA的表达。结果　RT PCR结果显示在 1 6例声门上癌颈淋巴结转移组的癌组织中 ,MTA1mRNA表达阳性 ;在不伴颈淋巴结转移的其他喉鳞状细胞癌组织 (声门上型 1 6例和声门型 1 6例 )及 1 6例喉正常组织中MTA1mRNA表达阴性。结论　MTA1mRNA的表达与喉鳞状细胞癌颈淋巴结转移密切相关 。 展开更多

关键词 转移相关基因 喉癌 鳞状细胞癌 淋巴结转移 逆转录-聚合酶链反应 早期诊断

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MiR-155-5p介导Treg/Th17免疫失衡致变应性鼻炎机制研究 被引量：15

2

作者 唐桥斐 张爽 +3 位作者 王頔 李赛楠 徐智 闫智永 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期126-132,共7页

为探讨miR-155-5p异常表达对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响及机制,将6周龄BALB/c小鼠随机平均分成6组:A.对照组(Control)、B.模型组(AR)、C.miR-155-5p空载对照组(AR+Vector)、D.miR-155-5p过表达组(AR... 为探讨miR-155-5p异常表达对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)小鼠Th17/Treg免疫平衡的影响及机制,将6周龄BALB/c小鼠随机平均分成6组:A.对照组(Control)、B.模型组(AR)、C.miR-155-5p空载对照组(AR+Vector)、D.miR-155-5p过表达组(AR+miR-155-5p)、E.miR-155-5p阴性对照组(AR+NC)、F.miR-155-5p沉默组(AR+抗miR-155-5p抗体)。采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)诱导建立AR小鼠模型,鼻腔内给予miR-155-5p过表达或沉默慢病毒进行干预。实验末对各组小鼠过敏症状进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织病理学变化,real-time PCR、Western blotting检测鼻黏膜组织中miR-155-5p、Foxp3、RORγt的表达水平,ELISA检测血清中IgE及炎性因子TGF-β1、IL-10、IL-17A、IL-6表达,流式细胞术检测外周血Treg和Th17百分比。结果发现,与对照组比较,模型组小鼠鼻炎症状评分明显增加,Foxp3、RORγt mRNA及蛋白表达水平明显升高,血清IgE、IL-17A、IL-6及Th17百分比显著上升,TGF-β1、IL-10及Treg百分比明显降低。MiR-155-5p过表达加重模型组小鼠鼻炎症状,同时促进IgE及Th17相关细胞因子的表达,抑制Treg相关细胞因子的表达,而miR-155-5p沉默后Treg/Th17免疫失衡得到缓解,小鼠鼻炎症状评分显著下降。MiR-155-5p可以显著加重AR小鼠的鼻炎症状,可能与影响Foxp3、RORγt表达,调节Treg/Th17免疫平衡有关。 展开更多

关键词 miR-155-5p 变应性鼻炎 辅助性T细胞17 调节性T细胞

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喉鳞状细胞癌组织中VEGF和MVD的表达及与颈淋巴结转移的关系 被引量：11

3

作者 王展平 季文樾 +1 位作者 唐桥斐 潘子民 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第2期100-102,T002,共4页

目的 :探讨喉鳞状细胞癌 (LSCC)组织中血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA及蛋白的表达和微血管密度 (MVD)与颈淋巴结转移的关系。方法 :用半定量逆转录 聚合酶链式反应 (semi RT PCR)技术和免疫组织化学方法检测 6 0例LSCC组织中VEGFmRNA及... 目的 :探讨喉鳞状细胞癌 (LSCC)组织中血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA及蛋白的表达和微血管密度 (MVD)与颈淋巴结转移的关系。方法 :用半定量逆转录 聚合酶链式反应 (semi RT PCR)技术和免疫组织化学方法检测 6 0例LSCC组织中VEGFmRNA及蛋白的定量表达及MVD。结果 :VEGF的表达无论在基因水平还是蛋白水平伴有颈淋巴结转移组都显著高于不伴有颈淋巴结转移组 (P <0 .0 1)。CD31免疫组织化学染色结果显示伴颈淋巴结转移组的MVD计数显著高于不伴颈淋巴结转移组 (P <0 .0 1)。LSCC组织中MVD计数升高与VEGF高表达呈正相关 (r =0 .94 8 4 ,P <0 .0 5 ) ,且二者与颈淋巴结转移相关。结论 :VEGF表达和瘤内MVD有良好的相关性 ,提示VEGF高表达对LSCC微血管生成起重要作用 ;VEGF高表达和瘤内高MVD与LSCC的颈淋巴结转移密切相关 ,二者有可能成为预测LSCC转移和预后的生物学指标 ; 展开更多

关键词 喉肿瘤 癌 鳞状细胞 内皮生长因子 微血管密度 淋巴转移

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肿瘤坏死因子α单克隆抗体对变应性鼻炎小鼠自噬影响的实验研究 被引量：9

4

作者 张爽 闫智永 +3 位作者 王頔 李赛楠 徐智 唐桥斐 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期517-523,共7页

目的观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)单克隆抗体对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型小鼠自噬的影响。方法30只6周龄雌性BALB/c小鼠,随机数字表法分为对照组、模型组(即AR组)、TNF-α抗体干预组(即AR+TNF-α组... 目的观察肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)单克隆抗体对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型小鼠自噬的影响。方法30只6周龄雌性BALB/c小鼠,随机数字表法分为对照组、模型组(即AR组)、TNF-α抗体干预组(即AR+TNF-α组)、自噬抑制剂3-甲基嘌呤(3-methylindole, 3-MA)干预组(即AR+3-MA组)、TNF-α抗体联合自噬诱导剂雷帕霉素(rapamycin, RAP)干预组(即AR+TNF-α+RAP组)5个组,每组6只。常规方法制作AR模型,于鼻腔激发致敏前给予相应试剂,并持续整个实验过程。对小鼠进行行为学评分,眼窝静脉采血,处死小鼠收集鼻黏膜组织,苏木精-伊红染色观察鼻黏膜病理学变化,酶联免疫吸附测定法检测血清中炎性因子及IgE的表达,实时定量聚合酶链反应结合蛋白印迹法检测自噬相关指标微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein-1 light chain-3B,LC3B)、Beclin-1、死骨片重组蛋白1(sequestosome1,p62)、自噬相关基因5(autophagy-related 5,ATG5)、自噬相关基因7(autophagy-related 7,ATG7)的表达,免疫荧光观察LC3B蛋白点状聚集情况。应用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果同AR组比较,AR+TNF-α及AR+3-MA组小鼠AR症状较轻;鼻黏膜病理学变化较弱;血清IgE、TNF-α、白细胞介素4(interleukin 4,IL-4)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)的表达显著减少[IgE:666.19±78.35(±s,下同)比692.38±64.29比1 059.05±146.44,TNF-α:112.06±12.95比113.17±15.43比161.22±17.96,IL-4∶54.05±7.14比58.26±5.67比79.95±6.33,IFN-γ:28.58±4.51比30.67±2.60比39.83±3.31,P值均<0.05];鼻黏膜组织中LC3B Ⅱ/Ⅰ、Beclin-1、ATG5、ATG7的表达明显降低,p62的表达明显升高。采用自噬诱导剂RAP干预后,TNF-α单克隆抗体对AR的治疗作用被拮抗。结论TNF-α单克隆抗体可抑制自噬水平,显著改善AR小鼠鼻部症状。 展开更多

关键词 鼻炎 变应性 肿瘤坏死因子Α 抗体 单克隆 自噬

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TNF-α单克隆抗体对小鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制研究 被引量：7

5

作者 唐桥斐 张爽 +3 位作者 程阳 邰旭辉 姜玉秋 闫智永 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1270-1273,1285,共5页

目的探讨TNF-α抗体干预对小鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及潜在分子机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AR模型组和TNF-α抗体干预组;采用卵清蛋白诱导致敏建立AR模型,于鼻腔刺激前滴加TNF-α单克隆抗体进行治疗;对各组小鼠... 目的探讨TNF-α抗体干预对小鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及潜在分子机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AR模型组和TNF-α抗体干预组;采用卵清蛋白诱导致敏建立AR模型,于鼻腔刺激前滴加TNF-α单克隆抗体进行治疗;对各组小鼠进行行为学评分,H-E染色观察鼻黏膜组织病理学变化,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA检测鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、Ig E表达水平,Western blotting检测NF-κB p65、IκB及凋亡相关蛋白表达变化。结果 TNF-α抗体干预组变应性鼻炎症状减轻,炎症反应程度降低,鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、Ig E含量及鼻黏膜组织中NF-κB p65、cleaved caspase-3、Bax表达水平较AR模型组显著降低,I-κB及Bcl-2表达增加。结论 TNF-α单克隆抗体干预对小鼠变应性鼻炎具有一定的治疗作用,可能通过抑制NF-κB信号通路激活、调节Th1/Th2平衡、降低炎性因子水平、抑制细胞凋亡发挥作用。 展开更多

关键词 TNF-α单克隆抗体 变应性鼻炎 NF-ΚB信号通路

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PD-L1对过敏性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞免疫失衡调节作用研究 被引量：7

6

作者 王頔 唐桥斐 +3 位作者 姜玉秋 张爽 李赛楠 闫智永 《陕西医学杂志》 CAS 2018年第3期287-291,共5页

目的:探讨PD-L1对过敏性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞免疫失衡的调节作用。方法:将30只BALB/c小鼠随机分三组,模型组和PD-L1重组蛋白干预组给予卵清蛋白(OVA)诱发过敏性鼻炎,PD-L1重组蛋白干预组给予PD-L1重组蛋白进行处理;正常对照组在相同... 目的:探讨PD-L1对过敏性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞免疫失衡的调节作用。方法:将30只BALB/c小鼠随机分三组,模型组和PD-L1重组蛋白干预组给予卵清蛋白(OVA)诱发过敏性鼻炎,PD-L1重组蛋白干预组给予PD-L1重组蛋白进行处理;正常对照组在相同时间点给予生理盐水。采用叠加量化记分法进行搔鼻、喷嚏及鼻溢症状评价;采用HE染色观察鼻黏膜组织的病理变化,采用免疫组化检测鼻黏膜组织PD-1和PD-L1的表达;Western blot检测鼻粘膜组织pAKT、、AKT、mTOR、p-mTOR的表达;RT-PCR检测鼻黏膜组织调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)重要转录因子Foxp3、RORγt表达;ELISA法检测血清IL-10、IL-17A、IL-6的水平。结果:正常对照组、模型组、PD-L1重组蛋白干预组行为学评分分别为0、(6.33±1.15)、(3.67±0.58)分,组间比较具有统一学意义(P<0.05)。与正常对照组相比较,模型组鼻粘膜组织损伤严重,鼻粘膜组织中PD-1、PD-L1和Foxp3的表达下降,RORγt、p-AKT、p-mTOR的表达增加,血清IL-10水平下降,血清中IL-17A、IL-6的水平升高,AKT、mTOR的表达无明显变化。与模型组相比较,PD-L1重组蛋白干预组鼻粘膜组织损伤减轻,鼻粘膜组织中PD-1和PD-L1和Foxp3的表达上升,RORγt、p-AKT、p-mTOR表达下降,血清IL-10水平升高,血清中IL-17A、IL-6的水平下降;组间比较差异显著(P<0.05);AKT、mTOR无明显变化。结论:PD-L1通过抑制AKT-mTOR信号进而促进Treg的分化抑制过敏性鼻炎的发生和发展。 展开更多

关键词 鼻炎 过敏性 季节性/免疫学 重组蛋白质类 ＠调节性T细胞 TH17细胞 小鼠

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Let-7e-5p调控Fas/FasL影响小鼠变应性鼻炎发病的机制研究 被引量：1

7

作者 唐桥斐 曹建秋 张爽 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第4期360-365,共6页

目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(... 目的探讨let-7e-5p对小鼠变应性鼻炎的影响及机制。方法将18只BALB/c小鼠按随机数字表法均分为对照(Control)组、变应性鼻炎(AR)组、let-7e-5p激动剂阴性对照(AR+agomir-NC)组、let-7e-5p激动剂(AR+agomir)组、let-7e-5p抑制剂阴性对照(AR+antagomir-NC)组和let-7e-5p抑制剂(AR+antagomir)组。除Control组外,其余组应用卵白蛋白(OVA)致敏建立AR模型,AR+agomir组和AR+antagomir组同时给予let-7e-5p agomir或let-7e-5p antagomir进行干预,末次激发致敏后对小鼠变应性鼻炎进行评分,HE染色观察鼻黏膜组织,统计嗜酸性粒细胞数量,real-time PCR检测let-7e-5p、Fas、FasL m RNA表达,Western blot检测Fas、FasL蛋白表达,酶联免疫吸附试验检测血清免疫球蛋白E(IgE)、特异性IgE(sIgE)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4、IL-13水平,双荧光素酶实验分析let-7e-5p和Fas、FasL的靶向关系。结果与Control组比较,AR组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增生明显,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平下降,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05)。与AR+agomir-NC组比较,AR+agomir组小鼠变应性鼻炎评分降低,鼻黏膜结构清晰,嗜酸性粒细胞数量减少,let-7e-5p mRNA表达及IFN-γ、IL-12水平升高,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平下降(均P<0.05)。与AR+antagomir-NC组比较,AR+antagomir组小鼠变应性鼻炎评分升高,鼻黏膜增厚,嗜酸性粒细胞数量增加,let-7e-5p mRNA表达减少,Fas、FasL表达及IgE、sIgE、IL-4、IL-13水平升高(均P<0.05),IL-12、IFN-γ水平差异无统计学意义。与NC+3’UTR-WT组比较,let-7e-5p agomir+3’UTR-WT组荧光素酶活性下降(P<0.05)。结论Let-7e-5p通过靶向调节Fas/FasL影响1型辅助性T细胞(Th1)/2型辅助性T细胞(Th2)平衡,从而参与AR小鼠变应性鼻炎发病的进展。 展开更多

关键词 鼻炎 变应性 常年性 疾病模型 动物 let-7e-5p Fas FASL 1型辅助性T细胞 2型辅助性T细胞

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Let-7e-5p对变应性鼻炎小鼠Treg/Th17细胞失衡的影响 被引量：5

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作者 闫智永 张爽 唐桥斐 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第5期544-551,共8页

目的:探讨let-7e-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型后随机均分为模型组(仅造模)、let-7e-5p激动... 目的:探讨let-7e-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型后随机均分为模型组(仅造模)、let-7e-5p激动剂对照组(鼻内滴注let-7e-5p agomir阴性对照)及let-7e-5p激动剂组(鼻内滴注let-7e-5p agomir);采用行为学评分考察各组小鼠的过敏症状,酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素17-A(IL-17A)和白细胞介素-10(IL-10)水平,HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织学变化,采用实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p的表达、蛋白印迹法检测RORγt和Foxp3蛋白的表达,采用流式细胞术检测各组小鼠外周血CD4^+Foxp3^+Treg和CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群变化。结果:模型组小鼠较正常组的行为学评分、血清IgE及IL-17A水平明显增高、IL-10水平明显降低(P<0.01),let-7e-5p激动剂组较模型组的行为学评分、IgE及IL-17A水平明显下降、IL-10水平明显升高(P<0.01);同模型组比较,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏膜基底层结构清晰,炎性细胞浸润明显减少;模型组小鼠鼻黏膜组织let-7e-5p基因的表达较正常组减少,let-7e-5p激动剂组则较模型组升高(P<0.05);模型组小鼠鼻黏膜组织RORγt蛋白表达较正常组增加、Foxp3蛋白表达减少,let-7e-5p激动剂组小鼠鼻黏黏膜组织RORγt蛋白表达较模型组减少、Foxp3蛋白表达增加(P<0.05);模型组小鼠较正常组外周血中CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例明显降低,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显升高(P<0.01);let-7e-5p激动剂组小鼠较模型组的CD4^+Foxp3^+Treg细胞亚群比例显著升高,CD4^+IL-17A+Th17细胞亚群比例明显降低(P<0.01)。结论:Let-7e-5p可能通过调节AR小鼠Foxp3和RORγt蛋白的表达,介导Treg/Th17细胞平衡,减轻炎症反应,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。 展开更多

关键词 小鼠 变应性鼻炎 let-7e-5p基因 辅助性T细胞17 调节性T细胞 1型辅助性T细胞 2型辅助T细胞

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miR-149-5p对变应性鼻炎小鼠Notch1表达和Treg/Th17免疫平衡的影响 被引量：5

9

作者 闫智永 张爽 唐桥斐 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第6期660-667,共8页

目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型... 目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型,再随机均分为模型组(仅造模)、miR-149-5p激动剂对照组(鼻内滴注miR-149-5p agomir阴性对照)及miR-149-5p激动剂组(鼻内滴注miR-149-5p agomir);采用行为学评分考察各组各组小鼠过敏症状、苏木精/伊红染色(HE)分析各组小鼠鼻黏膜病理学变化、实时荧光定量PCR(q PCR)检测各组小鼠鼻黏膜组织miR-149-5p,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析各组小鼠血清免疫球蛋白E(Ig E)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平,采用蛋白印迹法检测各组小鼠鼻黏膜组织Notch1、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)及叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达;利用miRDB网站预测miR-149-5p与Notch1 3’-UTR结合位点,构建Notch1 3’-UTR区野生型(WT)和突变型(MUT)荧光素酶报告载体,转染293T细胞,设置NC+Notch1(MUT)组、miR-149-5p agomir+Notch1(MUT)组、NC+Notch1(WT)组及miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组,采用双荧光素酶实验分析并计算荧光素酶相对活性。结果:与模型组比较,miR-149-5p激动剂组小鼠行为学评分明显下降,鼻黏膜炎症反应减轻,上皮结构趋于完整,miR-149-5p的表达显著增加,血清中Ig E、IL-6水平下降,IL-10水平升高,Foxp3蛋白的表达增加,Notch1和RORγt蛋白的表达减少(P <0. 05或P <0. 01);miRDB网站预测miR-149-5p与Notch1 3’-UTR存在互补位点,双荧光素酶实验结果显示,miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组的荧光素酶相对活性较NC+Notch1(WT)组降低(P <0. 05)。结论:miR-149-5p可能通过靶向Notch1调节Foxp3和RORγt蛋白表达,影响Treg/Th17细胞平衡,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。 展开更多

关键词 变应性鼻炎 miR-149-5 p基因 神经源性位点缺口同系物蛋白1 辅助性T细胞17 调节性T细胞 叉头状螺旋转录因子3 维甲酸相关核孤儿受体γt

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MTA1基因表达与下咽癌颈淋巴结转移的关系 被引量：4

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作者 程阳 唐桥斐 赵丽妮 《沈阳医学院学报》 2015年第1期28-30,共3页

目的:探讨下咽癌组织中转移候选基因(metastasis-associated gene1,MTA1)的表达与颈淋巴结转移的关系,阐明该基因可能是下咽癌淋巴结转移的分子机制之一。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain react... 目的:探讨下咽癌组织中转移候选基因(metastasis-associated gene1,MTA1)的表达与颈淋巴结转移的关系,阐明该基因可能是下咽癌淋巴结转移的分子机制之一。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测17例下咽癌(11例伴颈淋巴结转移、6例不伴颈淋巴结转移),8例癌旁正常黏膜中MTA1mRNA的表达。结果:RT-PCR结果显示在11例下咽癌转移组的癌组织中,MTA1 mRNA表达阳性率为90.9%(10/11);在6例不伴颈淋巴结转移的其它下咽癌组织及8例癌旁正常黏膜中MTA1 mRNA的表达率分别为33.3%(2/6)和0%。转移组的表达率与其他2组之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论:MTA1 mRNA的表达与下咽癌颈淋巴结转移密切相关,提示MTA1 mRNA的检测可作为下咽癌颈淋巴结转移的诊断指标。 展开更多

关键词 转移候选基因(MTA1) 下咽鳞状细胞癌 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 颈淋巴结转移

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PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用 被引量：4

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作者 闫智永 唐桥斐 +3 位作者 李赛楠 姜玉秋 徐智 张爽 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第12期23-26,共4页

目的探讨PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为四组,每组6只。模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组均给予卵清蛋白(OVA)诱发变应性鼻炎,PDL1单克隆抗体组和PDL1重组蛋白组再分别给予PDL1... 目的探讨PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为四组,每组6只。模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组均给予卵清蛋白(OVA)诱发变应性鼻炎,PDL1单克隆抗体组和PDL1重组蛋白组再分别给予PDL1单克隆抗体、PDL1重组蛋白处理;对照组在相同时间点给予生理盐水。采用叠加量化记分法进行搔鼻、喷嚏及鼻溢症状评价;采用免疫组化检测鼻黏膜组织PD1、PDL1阳性细胞积分光密度值;采用ELISA法检测血清TGF-β、IL-10、IL-17水平;采用Western blotting法检测鼻黏膜组织调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)特异性转录因子Foxp3、RORγt表达。结果对照组、模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组行为学评分分别为0、(6.17±0.98)、(7.33±0.82)、(3.17±1.17)分,四组间比较P均<0.01。与对照组比较,模型组、PDL1单克隆抗体组血清TGF-β、IL-10水平降低,血清IL-17水平升高,鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量降低、RORγt蛋白相对表达量升高,组间比较P均<0.01。与模型组比较,PDL1单克隆抗体组血清TGF-β、IL-10水平下降,血清IL-17水平增加,PDL1单克隆抗体组鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量降低、RORγt蛋白相对表达水平升高;PDL1重组蛋白干预组血清TGF-β、IL-10水平升高,血清IL-17水平降低,鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量升高、RORγt相对表达量降低;组间比较P<0.05或<0.01。结论 PD1/PDL1信号通路参与过敏性鼻炎的发生、发展,下调TGF-β、IL-10、Foxp3表达,上调IL-17、RORrt表达,可能是PDL1抑制过敏性鼻炎发生的机制之一。 展开更多

关键词 变应性鼻炎 PD1/PDL1信号途径 调节性T细胞 辅助性T细胞17

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长链非编码RNA UCA1对人下咽鳞状细胞癌FaDu细胞增殖、侵袭、凋亡及周期的影响 被引量：3

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作者 张杰 唐桥斐 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第8期789-793,共5页

目的探讨长链非编码RNA尿路上皮癌抗原1(lncRNA UCA1)对人下咽鳞状细胞癌FaDu细胞增殖、侵袭、凋亡及周期的影响。方法向FaDu细胞转染UCA1-siRNA(si-UCA1组),以转染阴性干扰RNA为阴性对照组(si-NC组),以未转染组为空白对照组(Control组)... 目的探讨长链非编码RNA尿路上皮癌抗原1(lncRNA UCA1)对人下咽鳞状细胞癌FaDu细胞增殖、侵袭、凋亡及周期的影响。方法向FaDu细胞转染UCA1-siRNA(si-UCA1组),以转染阴性干扰RNA为阴性对照组(si-NC组),以未转染组为空白对照组(Control组),通过实时荧光定量PCR确定UCA1-siRNA的干扰效果;通过CCK-8实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术分别检测UCA1-siRNA对FaDu细胞增殖、侵袭以及细胞周期的影响;Western blot实验检测UCA1-siRNA对FaDu细胞增殖、凋亡及周期相关因子Bax、Bcl-2、cleaved-Caspase9、cyclin D1和PCNA蛋白表达的影响。结果si-UCA1可有效下调FaDu细胞中UCA1的表达,与Control组及si-NC组相比,si-UCA1组FaDu细胞增殖及侵袭能力显著降低,G1期细胞比例显著升高,S期及G2期细胞比例显著下降,凋亡相关蛋白Bax、cleaved-Caspase9表达水平显著升高,Bcl-2表达水平显著下调,细胞周期、增殖相关蛋白cyclin D1、PCNA表达水平显著降低(P<0.05)。结论下调lncRNA UCA1的表达可抑制下咽鳞状细胞癌FaDu细胞增殖、侵袭能力,阻滞细胞周期,并可促进FaDu细胞凋亡。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 癌 鳞状细胞 细胞系 肿瘤 RNA 小分子干扰 细胞增殖 细胞凋亡 尿路上皮癌抗原1

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SOM模型大鼠中耳黏膜及耳积液中TNF-α的表达及抗TNF-α治疗的机制研究 被引量：3

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作者 张爽 唐桥斐 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第18期12-16,共5页

目的探讨抗TNF-α单克隆抗体对大鼠分泌性中耳炎(SOM)的治疗作用及其机制。方法应用随机数字表法将90只健康成年SD大鼠分成三组:对照组、SOM组、抗TNF-α治疗组,每组又根据SOM制成后不同时点,再分为6 h、1 d、3 d、7 d和14 d组,每组6只... 目的探讨抗TNF-α单克隆抗体对大鼠分泌性中耳炎(SOM)的治疗作用及其机制。方法应用随机数字表法将90只健康成年SD大鼠分成三组:对照组、SOM组、抗TNF-α治疗组,每组又根据SOM制成后不同时点,再分为6 h、1 d、3 d、7 d和14 d组,每组6只动物。HE染色后观察中耳黏膜上皮组织病理变化,应用免疫组织化学法检测中耳黏膜上皮组织中TNF-α的表达情况,并采用酶联免疫吸附(ELISA法)检测大鼠耳积液(MEE)中TNF-α的表达水平。结果制模后各时相,对照组标本中无TNF-α的阳性表达,而SOM组和抗TNF-α治疗组中耳黏膜上皮细胞中TNF-α表达灰度值均呈逐渐升高趋势,且较对照组均显著增强(P<0.05)。制模后各时相SOM组和抗TNF-α治疗组之间比较,除6 h组外,抗TNF-α治疗组其余3个时相中耳黏膜上皮细胞中TNF-α表达灰度值均明显低于SOM组(P<0.05)。制模后各时相SOM组MEE中TNF-α的表达水平均高于对照组,呈逐步上升趋势,差异均有显著性(P<0.05)。制模后各时相抗TNF-α治疗组MEE中TNF-α蛋白含量的变化曲线与SOM组相似。两组间不同时间点比较,抗TNF-α治疗组MEE中TNF-α蛋白含量明显均低于SOM组(P<0.05)。结论抗TNF-α治疗通过拮抗TNF-α的炎症介导作用而抑制中耳炎症及免疫反应,有助于减轻急性期炎症反应和阻止慢性SOM的发生。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 分泌性中耳炎 SD大鼠

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银杏叶提取物预防心肌缺血再灌注损伤的研究 被引量：3

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作者 程阳 唐桥斐 赵丽妮 《中国卫生产业》 2014年第18期169-170,共2页

目的：探讨银杏叶提取物对心肌缺血再灌注损伤的临床预防效果。方法随机选取50只SD大鼠，建立缺血再灌注损伤模型，将其随机平均分配为5组，给予药物1组-3组大鼠银杏叶提取物进行治疗，给予对照组大鼠生理盐水静脉注射，假手术组不做处... 目的：探讨银杏叶提取物对心肌缺血再灌注损伤的临床预防效果。方法随机选取50只SD大鼠，建立缺血再灌注损伤模型，将其随机平均分配为5组，给予药物1组-3组大鼠银杏叶提取物进行治疗，给予对照组大鼠生理盐水静脉注射，假手术组不做处理，对比各组模型一氧化氮、心肌组织丙二醛水平。结果实验组心肌组织丙二醛及一氧化氮水平明显低于对照组大鼠，差异具有显著性（P〈0.05）；不同剂量银杏叶提取物注射组之间差异无显著性（P〉0.05）。结论通过给予心肌缺血再灌注损伤患者银杏叶提取物治疗，能够有效降低机体一氧化氮及氧自由基水平，起到良好的预防效果。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注损伤 银杏叶提取物 预防研究

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没食子酸与环丙沙星联用对小鼠慢性鼻-鼻窦炎模型的作用 被引量：2

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作者 姜玉秋 唐桥斐 +1 位作者 张爽 闫智永 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期600-604,共5页

探讨没食子酸与环丙沙星联用对小鼠慢性鼻-鼻窦炎模型(CRS)的作用。收集难治性CRS患者鼻黏膜样本,分离铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)构建小鼠CRS模型,没食子酸(GA)与环丙沙星(CIP)单独或联合灌胃治疗,HE染色观察小鼠鼻黏膜病... 探讨没食子酸与环丙沙星联用对小鼠慢性鼻-鼻窦炎模型(CRS)的作用。收集难治性CRS患者鼻黏膜样本,分离铜绿假单胞杆菌(Pseudomonas aeruginosa)构建小鼠CRS模型,没食子酸(GA)与环丙沙星(CIP)单独或联合灌胃治疗,HE染色观察小鼠鼻黏膜病理变化,ELISA检测血清炎性因子TNF-α、IL-6、IL-8的表达、试剂盒检测SOD活性、MDA及ROS含量,Western blot检测鼻黏膜组织中TNF-α、IL-6、IL-8、IκB及NF-κB p65的表达。结果显示,GA与CIP可显著降低CRS小鼠TNF-α、IL-6、IL-8、MDA、ROS及NF-κB p65的含量,增加SOD活性及IκB的表达,且联合用药效果更显著。结果说明,GA与CIP联用治疗CRS效果优于单独用药,可能通过抑制NF-κB信号通路,下调TNF-α、IL-6、IL-8表达发挥作用。 展开更多

关键词 慢性鼻-鼻窦炎 没食子酸 环丙沙星 铜绿假单胞杆菌 联合用药

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LncRNA PVT1通过竞争miR-149-5p上调CHI3L1并影响变应性鼻炎进展的研究 被引量：1

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作者 姜玉秋 唐桥斐 +1 位作者 闫智永 张爽 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第3期259-264,共6页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、AR+shPVT1组(尾静脉注射LncRNA PVT1干扰载体慢病毒),每组6只。采用行为学评分评估各组小鼠过敏症状;HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织病理学改变;实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织中LncRNA PVT1、miR-149-5p和几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)mRNA的表达;Western blot检测CHI3L1蛋白表达;ELISA分析各组小鼠血清IgE、白细胞介素(IL)-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。构建LncRNA PVT1和CHI3L1的野生型(WT)和突变型(MT)荧光素酶报告质粒,单独或同时与miR-149-5p mimic共转染293T细胞,采用双荧光素酶实验分析并计算各组细胞荧光素酶相对活性。结果与模型组相比,AR+shPVT1组小鼠行为学评分降低;血清中IgE、IL-5和TNF-α水平降低;鼻黏膜组织中LncRNA PVT1 mRNA表达水平降低,miR-149-5p mRNA表达水平升高,CHI3L1 mRNA及蛋白水平均降低,鼻黏膜组织炎症反应减轻。双荧光素酶实验证实LncRNA PVT1通过竞争性结合miR-149-5p,上调miR-149-5p靶基因CHI3L1的表达。结论在AR模型小鼠中异常高表达的LncRNA PVT1通过发挥竞争性内源RNA作用抑制miR-149-5p表达而上调CHI3L1的表达,引发小鼠鼻黏膜组织的炎性症状并促进过敏反应。 展开更多

关键词 鼻炎 过敏性 RNA 长链非编码 小鼠 近交BALB C 壳多糖酶3样蛋白质1 LncRNA PVT1 miR149-5p

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miR-302b-3p在变应性鼻炎小鼠模型中的作用与机制研究 被引量：1

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作者 唐桥斐 张爽 闫智永 《现代免疫学》 CAS 北大核心 2022年第5期381-386,420,共7页

为探讨miR-302b-3p对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)所致变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠炎症反应的调控作用,将12只4周龄BALB/c小鼠随机分为4组:sham组、AR组、anti-miR-302b-3p NC组、anti-miR-302b-3p组。使用OVA制备AR模型,在建模后... 为探讨miR-302b-3p对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)所致变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)小鼠炎症反应的调控作用,将12只4周龄BALB/c小鼠随机分为4组:sham组、AR组、anti-miR-302b-3p NC组、anti-miR-302b-3p组。使用OVA制备AR模型,在建模后期,采用anti-miR-302b-3p NC或anti-miR-302b-3p抑制载体进行鼻内滴注。评估小鼠鼻部症状;采用H-E染色法观察鼻黏膜病变情况;qRT-PCR检测miR-302b-3p及B细胞淋巴瘤6(B-cell lymphoma 6,BCL6)mRNA水平;ELISA检测IL-4、IL-5及IL-13的水平;Western blotting检测BCL6、NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)、包含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、前体Caspase-1(pro-Caspase-1)、活化的Caspase-1 p20亚基[cleaved-Caspase-1(p20)]及成熟IL-1β(mature-IL-1β)蛋白表达水平。结果显示,与sham组比较,AR组小鼠的鼻部过敏症状明显,鼻黏膜组织炎症反应较重,IL-4、IL-5及IL-13的分泌显著增加,NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1(p20)及mature-IL-1β的蛋白表达水平较高,miR-302b-3p表达增加,BCL6 mRNA及蛋白水平显著减少(均P<0.01);与anti-miR-302b-3p NC组比较,anti-miR-302b-3p组小鼠鼻部过敏症状减轻,鼻黏膜炎症反应减轻,上皮结构趋于完整,IL-4、IL-5及IL-13的分泌显著减少,NLRP3、ASC、cleaved-Caspase-1(p20)及mature-IL-1β的蛋白表达水平下降,miR-302b-3p表达减少,BCL6 mRNA及蛋白水平显著增加(均P<0.01)。该研究提示,miR-302b-3p可能通过靶向抑制BCL6调节NLRP3/ASC及下游炎症信号通路,进而促进AR进展。 展开更多

关键词 变应性鼻炎 卵清蛋白 微小RNA-302b-3p B细胞淋巴瘤6

原文传递

血管内皮生长因子C蛋白在喉鳞癌中的表达与颈淋巴结转移的关系 被引量：2

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作者 邰旭辉 季文樾 +4 位作者 王玎 张萍 唐桥斐 徐振明 孙兴和 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期976-978,共3页

目的研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)蛋白在喉鳞癌和正常组织中的表达情况,探讨其与临床相关因素以及淋巴转移的关系,了解VEGF-C蛋白在喉癌颈淋巴结转移中的作用。方法采用免疫组化法分别检测46例喉鳞癌癌内组织、癌旁组织和正常组织中VE... 目的研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)蛋白在喉鳞癌和正常组织中的表达情况,探讨其与临床相关因素以及淋巴转移的关系,了解VEGF-C蛋白在喉癌颈淋巴结转移中的作用。方法采用免疫组化法分别检测46例喉鳞癌癌内组织、癌旁组织和正常组织中VEGF-C蛋白的表达,观察并分析其表达与肿瘤病理分化程度、T分期、肿瘤临床分型及颈淋巴结转移等临床病理因素之间的关系。结果喉鳞癌组织不同部位的VEGF-C蛋白表达明显不同。VEGF-C在癌内、癌旁及正常组织中均有表达,但癌内组织的表达阳性率明显高于癌旁组织和正常组织,其表达与肿瘤病理分化程度、T分期、肿瘤临床分型及颈淋巴结转移密切相关,而VEGF-C在癌旁组织中的表达与这些因素无显著相关。结论喉癌细胞分泌VEGF-C诱导癌内和癌周淋巴管增生扩张是喉癌发生颈淋巴结转移的重要因素之一,VEGF-C检测有望作为临床早期判断和预测颈淋巴结转移的指标之一。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子C 免疫组织化学 喉肿瘤 淋巴转移

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颈前胸舌转门肌皮瓣在下咽癌外科治疗喉功能保留中的应用 被引量：3

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作者 邰旭辉 孙兴和 +2 位作者 徐振明 张萍 唐桥斐 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期88-89,103,共3页

目的：探讨颈前胸舌转门肌皮褥在下咽癌外科治疗中喉功能保留的应用。方法：总结1991年3月～2001年5月共收治的48例下咽癌患者的临床及随访资料，其中40例应用颈前胸舌转门肌皮瓣一期重建喉及下咽，保留喉功能。另8例中，3例直接拉拔缝... 目的：探讨颈前胸舌转门肌皮褥在下咽癌外科治疗中喉功能保留的应用。方法：总结1991年3月～2001年5月共收治的48例下咽癌患者的临床及随访资料，其中40例应用颈前胸舌转门肌皮瓣一期重建喉及下咽，保留喉功能。另8例中，3例直接拉拔缝合修复创面，5倒患者因全身状况不允许（心肌梗死3例，严重肺气肿1例及本人拒绝行喉功能重建1例）未保留喉功能。结果：应用颈前胸舌转门肌皮瓣保留喉功能的40例患者全部恢复发音及吞咽功能，部分（15／40）恢复经喉呼吸功能。患者3年和5年生存率分别为50．0％和31．4％；术后并发症的发生率为37．5％（15／40）。结论：在下咽癌的外科治疗中应用颈前转门肌皮瓣，可以在重建下咽同时大大提高患者喉功能保留的机会，而且并不降低患者的生存率，不增加并发症，可以有效地提高患者术后的生存质量，临床值得推广应用。 展开更多

关键词 下咽肿瘤/外科学 外科皮瓣 喉 人工

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老年变应性鼻炎患者血清TNF-α和IL-2的表达水平及临床意义

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作者 唐桥斐 程阳 +3 位作者 张爽 姜玉秋 闫智永 李赛楠 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期674-675,共2页

变应性鼻炎（AR）是特应性机体接触致敏原后由IgE介导的由多种细胞因子参与的鼻黏膜非感染性慢性炎性疾病，临床症状表现为鼻痒、打喷嚏、鼻塞、流鼻涕、头痛、嗅觉减退等。

关键词 变应性鼻炎 肿瘤坏死因子-Α 白细胞介素-2

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