鱼类尾鳍推进机理及游泳能力影响参数分析 被引量：4

1

作者 初文华 员庆 +3 位作者 孔祥洪 张忠 李浩然 钱卫国 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1224-1234,共11页

鱼类以其高效灵活的游泳能力成为生物学家与仿生学研究者长期以来的重要研究对象。研究选取以尾鳍推进游泳方式的鱼类为研究对象,构建仿生鱼几何模型与运动控制模型,利用计算流体力学方法(computational fluid dynamics,CFD)结合动网格... 鱼类以其高效灵活的游泳能力成为生物学家与仿生学研究者长期以来的重要研究对象。研究选取以尾鳍推进游泳方式的鱼类为研究对象,构建仿生鱼几何模型与运动控制模型,利用计算流体力学方法(computational fluid dynamics,CFD)结合动网格技术,对其游泳行为进行数值模拟,研究分析其尾鳍摆动的推进机理,并在此基础上通过改变尾拍频率、摆动幅值、鱼体体波波长及鱼体体型等参数,结合鱼类的突进运动、游泳方式及体型进化等生物学特性探究不同参数对鱼类游泳能力的影响规律。研究结果表明:鱼类尾鳍摆动时尾部流场中形成的反卡门涡街是推进力的主要成因;尾拍频率和摆动幅值的增加,可使鱼类在短时间内获得较高的突进速度;当λ=0.75 L,a(x)_(max)=0.1,为获得1.0 L/s的游泳速度,尾拍频率需达到2 Hz左右;鱼体摆动时体波波长(λ)的改变将引起游泳方式的变化,当λ达到0.75 L左右,鱼体可以以0.5 L/s的速度向前游动,且推进力随体波波长增加逐渐增大;细长体型鱼类相比头大身小体型鱼类游动时产生的压差阻力小,因此,在相同的尾鳍推进模式下能够获得更大的推力。本文的研究结果可以为仿生鱼水下航行器的快速性优化设计提供一定的参考。 展开更多

关键词 鱼类 推进机理 游泳能力 影响参数 数值模拟

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基于数值的鲫鱼游泳能力影响参数分析

2

作者 初文华 员庆 +2 位作者 郭慧琴 武树龙 张忠 《工程科学与技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期136-145,共10页

鱼类游泳行为机理及游泳能力的影响因素是目前鱼类仿生学研究的热点问题。本文选取鲹科游动模式(carangiform)的典型—鲫鱼(crucian carp)作为研究对象,采用数值模拟的方法,利用动网格技术结合用户自定义函数(UDF),围绕运动参数、鱼体... 鱼类游泳行为机理及游泳能力的影响因素是目前鱼类仿生学研究的热点问题。本文选取鲹科游动模式(carangiform)的典型—鲫鱼(crucian carp)作为研究对象,采用数值模拟的方法,利用动网格技术结合用户自定义函数(UDF),围绕运动参数、鱼体体型及游泳环境(壁面边界),以仿生鲫鱼到达动态稳定的巡游速度这一过程衡量鲫鱼游泳能力,对鲫鱼游泳能力的影响开展研究。结果表明:当摆动频率在0.07~5.50 Hz之间,摆幅系数在0.03~0.06之间,随着鱼体摆动频率和摆动幅度的增大,仿生鲫鱼获得动态稳定巡游速度的时间逐渐缩短,且巡航游速相应增加。将不同厚长比、体长的鲫鱼经过量化处理后进行数值计算,研究结果表明:以相同的摆幅和摆频向前游动,厚长比与游泳速度呈负相关,当厚长比小于0.166,仿生鲫鱼可获得更快的游泳速度;体长方面,将仿生鱼的体长设置为L,仿生稚鱼可更快速地到达巡游阶段,但到达动态稳定的巡航游速较低,约为0.6L s^(–1),仿生幼鱼在加速阶段速度较快,巡游阶段与仿生成鱼的动态稳定巡航游速基本一致,约为1L s^(–1);鱼体在壁面附近游动所产生的壁面效应会导致游泳速度降低,且双侧壁面对仿生鲫鱼游泳速度的影响较单侧壁面更为显著,当鱼体距单侧壁面0.5L,距双侧壁面0.8L时将不受壁面的影响。本文的研究结果可为鱼类仿生学研究提供有益参考。 展开更多

关键词 鲫鱼 自主游动 数值模拟 影响参数 壁面效应

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专业基础课程线上线下混合式教学建设探索——以海洋工程水力学课程为例 被引量：1

3

作者 初文华 张健 +2 位作者 张硕 叶旭昌 员庆 《高教学刊》 2022年第21期57-60,共4页

随着互联网时代的发展,在线教学正逐渐成为高校力推的新型教学模式,而其中,线上线下混合课程的建设更是对传统课程,特别是一些专业基础课程提出新的挑战。这种全新的混合教学模式能够最大限度地实现教学资源的有效利用,未来也将成为教... 随着互联网时代的发展,在线教学正逐渐成为高校力推的新型教学模式,而其中,线上线下混合课程的建设更是对传统课程,特别是一些专业基础课程提出新的挑战。这种全新的混合教学模式能够最大限度地实现教学资源的有效利用,未来也将成为教育模式的主流,助力我国教育事业迈向新的发展阶段。文章以海渔专业基础课海洋工程水力学为例,探讨专业基础课程的线上线下混合式教学建设的思路与方法,以期在今后的专业课程建设过程中积累一定的经验与参考。 展开更多

关键词 专业基础课程 线上线下混合 课程建设

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新兵亚健康状态的调查分析 被引量：48

4

作者 李燕华 王玲 +5 位作者 朱国军 员庆玲 王正美 邹建荣 林强 公丕安 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2000年第3期192-193,共2页

目的 :探讨新兵亚健康发生原因 ,为进行科学干预提供依据。方法 :以问卷式调查及严格体检筛选亚健康人群 ,进行原因探讨。结果 :4 4 0名新兵中 ,亚健康 6 3人 ,占 14.32 % ,均为轻度心身失调 ,较普通人群发生率低。父母文化程度、父亲... 目的 :探讨新兵亚健康发生原因 ,为进行科学干预提供依据。方法 :以问卷式调查及严格体检筛选亚健康人群 ,进行原因探讨。结果 :4 4 0名新兵中 ,亚健康 6 3人 ,占 14.32 % ,均为轻度心身失调 ,较普通人群发生率低。父母文化程度、父亲职业和偏爱养育与亚健康的发生存在一定的关系。新兵自身人格气质、对生活的态度、行为特征、能否良好地适应军营生活、处理好人际关系则是构成亚健康的更重要的因素。结论 :科学的心理干预 ,包括心理训练与心理治疗是预防新兵这一特殊群体中亚健康发生的重要措施。 展开更多

关键词 新兵 亚健康状态 调查分析

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加筋结构对V型网板水动力性能的影响研究 被引量：3

5

作者 张怀志 初文华 +3 位作者 尹纯晴 员庆 叶旭昌 叶谦 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2022年第3期360-374,共15页

网板作为拖网渔具的重要属具,其水动力性能对拖网渔具的可操作性和渔获效率均有十分重要的影响。以我国近海拖网渔船配置的加筋V型网板为研究对象,通过与传统无筋V型网板的水动力性能对比分析,研究加强筋对V型网板水动力性能的影响机理... 网板作为拖网渔具的重要属具,其水动力性能对拖网渔具的可操作性和渔获效率均有十分重要的影响。以我国近海拖网渔船配置的加筋V型网板为研究对象,通过与传统无筋V型网板的水动力性能对比分析,研究加强筋对V型网板水动力性能的影响机理,并通过开展动水槽实验对数值计算结果的有效性进行验证。在此基础上,通过改变展弦比、板面折角、加强筋尺寸等设计参数,研究其对加筋V型网板水动力性能的影响规律。结果表明,在大冲角(40°以上)时,加筋V型网板的升、阻力系数与传统V型网板相比呈显著下降趋势;加强筋的存在较为明显地降低了V型网板在最佳工作冲角(10°左右)下的升阻比;增设加强筋后,V型网板的最大升阻比依然会随展弦比的增加而呈逐渐增大的趋势,但不同的展弦比下V型网板的最大升阻比有较为明显的降低;加筋V型网板的板面折角变化引起最佳冲角的改变,但最大升阻比会随板面折角的增加呈现显著增大的趋势;加强筋间距较大时会引起V型网板最大升阻比的明显降低,其尺寸的增加也会在一定程度上降低网板的升阻比。 展开更多

关键词 水动力性能 影响参数 数值模拟 加筋V型网板

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协同两类腈水合酶高效催化烟酰胺及丙烯酰胺生物合成

6

作者 赵凯阳 黄微煜 +5 位作者 蔡宋佳 陈员庆 吴超城 周丽 程中一 周哲敏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期48-52,共5页

腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)可以将腈类物质通过水合作用转化生成更有利用价值的酰胺类化合物,在工业上被用于生产烟酰胺、丙烯酰胺等重要化学品。然而,尚无兼具对底物和产物耐受性高以及催化活性高的腈水合酶,导致底物不能被彻... 腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)可以将腈类物质通过水合作用转化生成更有利用价值的酰胺类化合物,在工业上被用于生产烟酰胺、丙烯酰胺等重要化学品。然而,尚无兼具对底物和产物耐受性高以及催化活性高的腈水合酶,导致底物不能被彻底利用、酰胺产物的产量受限。该研究协同表达了高催化活性的低分子质量腈水合酶(L-NHase)和高耐受性的高分子质量腈水合酶(H-NHase),并优化两类酶在质粒上的排列位置。其中BAE-BAG菌株对底物、产物的耐受性与H-NHase菌株相仿;在以烟腈或者丙烯腈为底物进行全细胞催化时,该菌株的催化速率与L-NHase菌株相仿,最终烟酰胺产量可达到516 g/L,是目前报道的最高产量;丙烯酰胺产量比原始BAE或BAG菌株提高19.1%以上。该文成功协同两类腈水合酶,同时提高了合成烟酰胺和丙烯酰胺的催化反应速率及产量,对工业应用具有一定的指导意义。 展开更多

关键词 腈水合酶 协同表达 烟酰胺 丙烯酰胺 全细胞催化

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灾后医护人员对伤员实施心理干预知识的现状调查

7

作者 张焕芳 李红玉 员庆博 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期82-84,共3页

目的了解灾后医护人员对伤员实施心理干预知识的掌握情况。方法采用整群抽样法,抽取辽宁省锦州市三甲医院、成都市三甲医院在岗医护人员392名,自行设计问卷调查医护人员对伤员进行心理干预知识的掌握情况。结果不同地区医院、是否主动... 目的了解灾后医护人员对伤员实施心理干预知识的掌握情况。方法采用整群抽样法,抽取辽宁省锦州市三甲医院、成都市三甲医院在岗医护人员392名,自行设计问卷调查医护人员对伤员进行心理干预知识的掌握情况。结果不同地区医院、是否主动为伤员提供过心理帮助、是否参加过心理干预培训的医护人员问卷得分比较,差异均有统计学意义(P<0.05);参加过心理干预培训的医护人员与没有参加过心理干预培训的医护人员问卷各纬度(急性应激障碍、慢性创伤性应激障碍、自杀)得分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论医护人员心理干预意识较差,灾害救援经验不足,应加强对医护人员的灾后伤员心理干预知识的教育。 展开更多

关键词 卫生人员 心理干预知识 灾后

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猪增生性肠炎病原学和致病机制的研究进展 被引量：7

8

作者 王龙 钟梦龙 +4 位作者 李复坤 邱茜茜 李易 员晓庆 张浩吉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第21期52-56,共5页

猪增生性肠炎(porcine proliferative enteropathy,PPE)是由胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis,LI)导致的一种以猪肠隐窝上皮细胞增生为特征的传染性肠道疾病。因为传播途径简单、感染率高和容易引起继发感染的特性常给养殖业带来巨... 猪增生性肠炎(porcine proliferative enteropathy,PPE)是由胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis,LI)导致的一种以猪肠隐窝上皮细胞增生为特征的传染性肠道疾病。因为传播途径简单、感染率高和容易引起继发感染的特性常给养殖业带来巨大的经济损失。由于该菌在体外难以培养,即使培养成功也复制不出其在肠道内的致病机制,以至于对该菌防控、治疗的研究仍处于大量使用抗生素的阶段。文章对胞内劳森菌的致病机理、导致的临床症状和病理变化以及疾病综合防治等几个方面进行了综述,以期为猪增生性肠炎的病原学研究及探索致病机致提供参考。 展开更多

关键词 胞内劳森菌 猪增生性肠炎 致病机理 临床症状 综合防治

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畜禽养殖中氨气的危害及防控措施 被引量：6

9

作者 李复坤 员晓庆 +2 位作者 张浩吉 李家洲 马新燕 《广东畜牧兽医科技》 2020年第4期20-24,共5页

随着畜禽养殖研究的不断深入,各种影响畜禽生长繁殖的因素被逐步发现,氨是其中一个重要因素。高浓度的氨对畜禽业造成一定的威胁,同时还危害生态环境和人类健康。因此,减少氨气的产生和排放具有重要的现实意义。文章综述了畜禽养殖中氨... 随着畜禽养殖研究的不断深入,各种影响畜禽生长繁殖的因素被逐步发现,氨是其中一个重要因素。高浓度的氨对畜禽业造成一定的威胁,同时还危害生态环境和人类健康。因此,减少氨气的产生和排放具有重要的现实意义。文章综述了畜禽养殖中氨气的来源及危害,总结分析了氨气的防控措施,以期为畜禽养殖的健康、可持续发展提供参考。 展开更多

关键词 氨 来源 危害 防控措施

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养殖废水净化处理研究进展 被引量：4

10

作者 员晓庆 李复坤 +1 位作者 李家洲 张浩吉 《广东畜牧兽医科技》 2020年第4期12-14,36,共4页

养殖废水污染一直困扰养殖业,尤其富含的氮、磷等大量养殖废弃物,给环境造成很大的压力,如何净化养殖废水污染是社会关注的热点。本文主要根据养殖废水的来源,介绍常规理化或生物法处理养殖废水及水培蔬菜等非常规处理方式,以期为养殖... 养殖废水污染一直困扰养殖业,尤其富含的氮、磷等大量养殖废弃物,给环境造成很大的压力,如何净化养殖废水污染是社会关注的热点。本文主要根据养殖废水的来源,介绍常规理化或生物法处理养殖废水及水培蔬菜等非常规处理方式,以期为养殖废水净化提供参考。 展开更多

关键词 养殖废水 水培植物 净化处理

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巴泰病毒研究进展 被引量：1

11

作者 李丽霞 员晓庆 +6 位作者 唐甜 梁晓彤 陈盛楠 张浩吉 黄良宗 司兴奎 刘昊 《特产研究》 2021年第3期110-112,126,共4页

巴泰病毒(BATV)是一种虫媒病毒,属于布尼亚病毒科布尼亚病毒属成员,在世界范围内广泛存在。BATV可通过蚊虫传播给家畜、野生动物、家禽甚至人类等,并引起非特异性发热、脑膜炎和家禽产蛋量下降等症状。BATV基因组分3个节段。因此,可发... 巴泰病毒(BATV)是一种虫媒病毒,属于布尼亚病毒科布尼亚病毒属成员,在世界范围内广泛存在。BATV可通过蚊虫传播给家畜、野生动物、家禽甚至人类等,并引起非特异性发热、脑膜炎和家禽产蛋量下降等症状。BATV基因组分3个节段。因此,可发生基因重配现象,产生新毒株并引起人类的发热甚至死亡,给公共卫生安全带来严重威胁。本文对BATV的病原学、临床症状、诊断和疫病防控等方面进行了简要的阐述,以期为预防和控制病毒的出现和流行提供参考。 展开更多

关键词 巴泰病毒 基因组 临床特征 诊断方法

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阿龙山病毒VP2蛋白原核表达纯化以及抗原性鉴定 被引量：1

12

作者 员晓庆 李丽霞 +7 位作者 梁晓彤 王泽东 魏正凯 司兴奎 张浩吉 刘全 金宁一 刘昊 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第3期208-212,共5页

阿龙山病毒(ALSV)是一种新发现的分节段黄病毒,可通过蜱虫叮咬感染家畜和人。为了获得高纯度ALSV-VP2蛋白,利用密码子优化软件对ALSV H3株VP2蛋白质氨基酸序列进行优化。将优化后的基因克隆到原核表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET30a-... 阿龙山病毒(ALSV)是一种新发现的分节段黄病毒,可通过蜱虫叮咬感染家畜和人。为了获得高纯度ALSV-VP2蛋白,利用密码子优化软件对ALSV H3株VP2蛋白质氨基酸序列进行优化。将优化后的基因克隆到原核表达载体pET-30a中,构建重组质粒pET30a-VP2,重组质粒转化到E.coli BL21(DE3)表达菌株利用IPTG、16℃低温诱导,表达的蛋白再通过亲和层析(Ni-IDA树脂)得到纯度较高ALSV-VP2蛋白。SDS-PAGE电泳结果显示,在27 kDa处出现目的条带,与预期相符合,BCA检测蛋白浓度为0.236 mg/mL,证明ALSV-VP2蛋白在大肠杆菌中高效表达。经Westen blot分析,该重组蛋白具有良好特异性。本研究为ALSV的流行病学监测和致病机制研究奠定基础。 展开更多

关键词 阿龙山病毒 VP2基因 原核表达

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巴泰病毒N_(5aa-90aa)重组肽段的原核表达纯化及多克隆抗体的制备

13

作者 唐甜 李丽霞 +7 位作者 员晓庆 梁晓彤 陈盛楠 黄良宗 杨秋艳 陈永 金宁一 刘昊 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第5期194-201,共8页

巴泰病毒(BATV)是一种虫媒病毒,属于布尼亚病毒科成员,其核衣壳N蛋白具有高度保守性,可诱导机体产生较好的抗体反应,常用做诊断抗原。本研究通过对N蛋白强抗原性肽段N_(5aa-90aa)进行密码子优化,将其插入到pET-32a(+)载体,并转化到大肠... 巴泰病毒(BATV)是一种虫媒病毒,属于布尼亚病毒科成员,其核衣壳N蛋白具有高度保守性,可诱导机体产生较好的抗体反应,常用做诊断抗原。本研究通过对N蛋白强抗原性肽段N_(5aa-90aa)进行密码子优化,将其插入到pET-32a(+)载体,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达,通过不同IPTG浓度和诱导时间确定最佳蛋白表达条件。利用镍柱亲和层析方法对rHis-N_(5aa-90aa)肽段进行纯化。通过Western blot对rHis-N5aa-90aa肽段进行验证,将rHis-N_(5aa-90aa)肽段免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,间接ELISA测定其抗体效价。结果显示:本研究成功构建了pET-32a-N_(5aa-90aa)重组质粒,在IPTG终浓度为0.1 mmol/L、37℃诱导5 h可获得大量重组蛋白;SDS-PAGE电泳结果显示重组rHis-N_(5aa-90aa)肽段分子质量约28.6 kDa,蛋白浓度为0.256 mg/mL;经Western blot分析纯化的rHis-N_(5aa-90aa)肽段与His-tag抗体呈阳性反应,证明rHis-N_(5aa-90aa)成功表达,间接ELISA测定制备的兔抗N_(5aa-90aa)肽段多克隆抗体的效价为1∶25600,并且Western blot和间接免疫荧光分析其具有良好的特异性。本研究表达并纯化了BATV的rHis-N_(5aa-90aa)肽段,为BATV的ELISA诊断方法的建立和基因疫苗的研制奠定基础。 展开更多

关键词 巴泰病毒 N蛋白 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体

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巴泰病毒诱导小鼠神经母细胞瘤细胞凋亡

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作者 唐甜 李丽霞 +6 位作者 梁晓彤 员晓庆 黄良宗 廖洁丹 赵秀宇 金宁一 刘昊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1399-1404,共6页

为探究巴泰病毒(Batai virus,BATV)在体外能否引起小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)凋亡,本试验利用BATV(NM/12)株感染N2a细胞,主要通过WST-8法检测细胞感染后的活性,IFA确定细胞内的BATV。再利用Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞感染BATV不... 为探究巴泰病毒(Batai virus,BATV)在体外能否引起小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a)凋亡,本试验利用BATV(NM/12)株感染N2a细胞,主要通过WST-8法检测细胞感染后的活性,IFA确定细胞内的BATV。再利用Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞感染BATV不同时间和剂量后诱导细胞凋亡的情况。而且进一步通过Caspase-3活性检测分析BATV对细胞凋亡通路中主要调控分子的影响。WST-8试验结果显示,BATV感染可引起N2a细胞活性明显下降,IFA检测发现绿色荧光主要存在于细胞胞浆中,证明BATV可在N2a细胞中复制。流式细胞仪检测发现,BATV可诱导N2a细胞发生早期和晚期凋亡,并且凋亡程度随着病毒含量和感染时间的增加而加大。另外,Caspase-3活性检测结果显示,BATV在感染细胞过程中可活化凋亡相关因子Caspase-3,进一步证明BATV可以诱导N2a细胞凋亡。结果表明,BATV可诱导N2a细胞发生凋亡,并且能够促进细胞凋亡蛋白Caspase-3表达水平上升,为深入探究BATV调控神经细胞凋亡的分子机制及抗病毒药物的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 巴泰病毒 虫媒病毒 神经母细胞瘤 细胞凋亡 CASPASE-3

原文传递

阿卡斑病毒的研究进展

15

作者 唐甜 梁晓彤 +2 位作者 员晓庆 刘昊 李丽霞 《特产研究》 2022年第5期136-138,147,共4页

阿卡斑病毒是一种虫媒病毒,又名赤羽病毒(akabane virus,AKAV),在世界范围内广泛存在。AKAV可造成牛、羊的流产、死胎、先天性关节弯曲和积水性无脑等症状。AKAV同其他布尼亚病毒成员一样,存在着基因漂移和节段重组的特点,这增加了检测... 阿卡斑病毒是一种虫媒病毒,又名赤羽病毒(akabane virus,AKAV),在世界范围内广泛存在。AKAV可造成牛、羊的流产、死胎、先天性关节弯曲和积水性无脑等症状。AKAV同其他布尼亚病毒成员一样,存在着基因漂移和节段重组的特点,这增加了检测难度。因此我们从AKAV的病原学特征、流行情况、诊断方法和防控措施等方面进行简要阐述,以期为AKAV的预防和控制提供参考。 展开更多

关键词 阿卡斑病毒 形态学特征 流行病学 诊断方法

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施马伦贝格病毒研究进展

16

作者 梁晓彤 唐甜 +2 位作者 员晓庆 刘昊 李丽霞 《特产研究》 2022年第5期148-150,158,共4页

施马伦贝格病毒(schmallenberg virus,SBV)是一种由库蠓传播的虫媒病毒,在欧洲大陆广泛存在。SBV可感染牛、绵羊和山羊等反刍动物,病畜感染SBV后表现出发热、腹泻及乏力等症状,怀孕母畜感染后还可见流产、胎儿畸形等症状,严重危害欧洲... 施马伦贝格病毒(schmallenberg virus,SBV)是一种由库蠓传播的虫媒病毒,在欧洲大陆广泛存在。SBV可感染牛、绵羊和山羊等反刍动物,病畜感染SBV后表现出发热、腹泻及乏力等症状,怀孕母畜感染后还可见流产、胎儿畸形等症状,严重危害欧洲地区畜牧业安全,我国暂未见SBV病例报道。然而,SBV与其他布尼亚病毒目成员结构相似,存在节段重组和基因漂移的特点,这使得SBV检测较为困难。本文对SBV的病原学、临床症状、流行病学、诊断方法和疫病防控等方面进行简要阐述,以期为SBV的预防、控制病毒的出现和流行提供理论参考。 展开更多

关键词 施马伦贝格病毒 流行病学 诊断方法 反刍动物

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巴泰病毒G1_(189aa-239aa)肽段的原核表达、纯化及间接ELISA方法的建立

17

作者 员晓庆 李丽霞 +9 位作者 唐甜 陈盛楠 梁晓彤 黄良宗 司兴奎 张浩吉 孙秀涛 段文学 金宁一 刘昊 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3770-3778,共9页

本研究旨在获得高纯度巴泰病毒(Batai virus,BATV)G1蛋白强抗原性肽段,并建立一种用于检测BATV羊血清抗体的间接ELISA方法。首先对G1蛋白51个氨基酸编码的189-239位氨基酸强抗原肽段进行密码子优化,基因合成后构建重组表达质粒pET-32a-G... 本研究旨在获得高纯度巴泰病毒(Batai virus,BATV)G1蛋白强抗原性肽段,并建立一种用于检测BATV羊血清抗体的间接ELISA方法。首先对G1蛋白51个氨基酸编码的189-239位氨基酸强抗原肽段进行密码子优化,基因合成后构建重组表达质粒pET-32a-G1_(189aa-239aa),转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达。优化表达条件获得大量rHis-G1_(189aa-239aa)肽段,利用镍柱亲和层析方法进行纯化,并用BCA试剂盒进行蛋白浓度的测定。通过Western blotting对rHis-G1_(189aa-239aa)肽段进行抗原特异性分析,以rHis-G1_(189aa-239aa)肽段为抗原,羊BATV阳性血清作为抗体,通过方阵滴定优化反应条件,建立BATV间接ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,rHis-G1_(189aa-239aa)肽段在大肠杆菌中主要以包涵体形式存在,分子质量为24.5 ku,在0.1 mmol/L的IPTG诱导5 h后rHis-G1_(189aa-239aa)肽段表达量达到峰值。通过镍柱亲和层析纯化后,测得蛋白浓度为0.296 mg/mL。Western blotting结果显示,rHis-G1_(189aa-239aa)肽段特异性较好。以rHis-G1_(189aa-239aa)肽段为抗原建立的间接ELISA方法,通过条件优化确定最佳抗原包被浓度为2.5μg/mL,血清和二抗稀释度为1∶60和1∶10000。样品D450 nm值≥0.367为阳性,D450 nm值≤0.319为阴性。该方法与山羊痘病毒和布鲁氏杆菌的阳性血清均无交叉反应,批内和批间的变异系数均<10%,阳性血清最高可稀释至1600倍,该方法具有特异性强、灵敏性高和重复性好的特点。利用本方法对云南地区的120份羊血清样本进行检测,血清阳性率为21.67%。本研究获得了特异性强和纯度较高的rHis-G1_(189aa-239aa)肽段,建立了间接ELISA方法,可应用于羊BATV血清流行病学调查,为疫病防控及致病机制研究奠定基础。 展开更多

关键词 巴泰病毒(BATV) G1蛋白 重组肽段 原核表达 蛋白纯化 ELISA

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浅谈测绘工程中GIS数据的建库思路

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作者 员晓庆 《市场周刊·理论版》 2019年第80期186-186,共1页

随着我国社会经济的不断发展,人们越来越关注工程建设的水平和质量。测绘工程作为工程建设的前提条件,受到了广泛的关注。测绘技术的精度控制是测绘工程的重要内容之一,为后续工程设计和施工提供更为准确的数据依据。目前,我国测绘技术... 随着我国社会经济的不断发展,人们越来越关注工程建设的水平和质量。测绘工程作为工程建设的前提条件,受到了广泛的关注。测绘技术的精度控制是测绘工程的重要内容之一,为后续工程设计和施工提供更为准确的数据依据。目前,我国测绘技术取得了长足进步,但测绘技术的精度控制还存在一些问题。该文就测绘工程技术精度控制进行全面探讨和研究,希望促进我国相关领域测绘水平的全面发展与提升。 展开更多

关键词 测绘工程 技术精度控制 策略

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全国人大内司委来我区调研老年人权益保障法律订工作

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作者 李刚 员霍庆国 《宁夏人大》 2012年第4期I0001-I0001,共1页

3月20日至24日，全国人大内司委副主任委员陈斯喜一行来我区调研老年人权益保障法修订工作，自治区人大常委会副主任张小素陪同调研。3月21日，调研组一行在自治区人大常委会机关召开了座谈会，听取和征求了我区对老年人权益保障法修订... 3月20日至24日，全国人大内司委副主任委员陈斯喜一行来我区调研老年人权益保障法修订工作，自治区人大常委会副主任张小素陪同调研。3月21日，调研组一行在自治区人大常委会机关召开了座谈会，听取和征求了我区对老年人权益保障法修订草案稿的意见和建议。22日至23日，调研组先后赴石嘴山市、吴忠市等地进行了实地查看和了毹，召开座谈会，广泛听取了两市人民政府有关部门负责人对老年人权益保障法修订草案稿的意见和建议。 展开更多

关键词 老年人权益保障法 全国人大 调研组 人大常委会机关 法律 区人大常委会 修订草案 部门负责人

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