包虫病诊断技术与预防疫苗的研究进展 被引量：24

1

作者 赵莉 张旭 +4 位作者 张壮志 马正海 古努尔.吐尔逊 张文宝 石保新 《疾病预防控制通报》 2013年第2期84-87,94,共5页

目的综述目前包虫病相关研究的进展。方法从包虫病流行现状、细粒棘球绦虫的结构及生活史、包虫病的检测和诊断技术以及包虫病预防疫苗等方面的研究进展进行综述。结果目前,分子生物学和免疫学技术的发展为包虫病诊断新技术的建立提供... 目的综述目前包虫病相关研究的进展。方法从包虫病流行现状、细粒棘球绦虫的结构及生活史、包虫病的检测和诊断技术以及包虫病预防疫苗等方面的研究进展进行综述。结果目前,分子生物学和免疫学技术的发展为包虫病诊断新技术的建立提供了机遇,也促使包虫病患者早期诊断技术有了重大突破;包虫病中间宿主预防性疫苗在动物实验中已经能够产生很好的保护效果,但仍需进行大规模的现场试验以推进疫苗早日进入临床。结论彻底消除包虫病的传播还很困难,故在包虫病控制中还应该采取措施抑制终末宿主犬体内细粒棘球绦虫(E.g)成虫虫卵的产生,使用先进的诊断技术,提早发现病原,从而减少地方性包虫病的流行。 展开更多

关键词 包虫病 细粒棘球绦虫 诊断技术 疫苗

原文传递

犬细粒棘球绦虫粪抗原夹心ELISA检测方法的建立 被引量：13

2

作者 张旭 古努尔.吐尔逊 +11 位作者 米晓云 石保新 张睿 巫剑 赵莉 阿布力克木 张玲 丁晓玲 阿布力兹 李国庆 卡那提拜克.开比热 张壮志 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第3期19-23,共5页

为建立特异性和敏感性高的检验犬细粒棘球绦虫感染的方法。用细粒棘球绦虫(简称,Eg)成虫抗原分别免疫兔和绵羊,收集高免血清,纯化的高免抗体。依据抗体夹心ELISA工作原理,以兔抗体包被,检测感染Eg、不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样... 为建立特异性和敏感性高的检验犬细粒棘球绦虫感染的方法。用细粒棘球绦虫(简称,Eg)成虫抗原分别免疫兔和绵羊,收集高免血清,纯化的高免抗体。依据抗体夹心ELISA工作原理,以兔抗体包被,检测感染Eg、不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,绵羊抗体扑捉抗原,HRP标记兔抗绵羊IgG(1∶8 000)催化显色,用酶标仪测定OD 405nm吸光度,用以确定其特异性和敏感性。试验结果表明,敏感性为82.69%(43/52),特异性为85.88%(140/163);粪抗原在感染细粒棘球绦虫16d后可检出,最低抗原浓度为9.7ng/mL即犬感染5条成虫时可检测出阳性。该检测方法具有较好的特异性和灵敏性,为进一步研制检测细粒棘球绦虫虫体抗原ELISA检测试剂盒奠定了基础。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 粪抗原 双抗夹心ELISA 特异性 敏感性

下载PDF 职称材料

绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95)免疫试验 被引量：13

3

作者 张壮志 石保新 +12 位作者 张文宝 古努尔.吐尔逊 王进成 吐尔洪.伊米提 哈斯也提 康强 艾尔肯 俞进 席耐 宋迎春 古丽鲜 崔德胜 早日克 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期252-256,共5页

目的验证绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95)对新疆羊源棘球蚴病预防效果。方法应用新西兰农牧科学院沃勒斯维尔动物研究中心提供的绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95),对新生新疆细毛羊、巴音布鲁克羊、山羊羔羊进行二免、三免、四免,以间接ELIS... 目的验证绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95)对新疆羊源棘球蚴病预防效果。方法应用新西兰农牧科学院沃勒斯维尔动物研究中心提供的绵羊包虫病基因工程疫苗(Eg95),对新生新疆细毛羊、巴音布鲁克羊、山羊羔羊进行二免、三免、四免,以间接ELISA法作血清抗体动态检测,在免疫42d、180d、365d、730d进行人工感染,于感染后180d剖解试验羊;试验羊二免后在包虫病的高发区放牧饲养180d、365d730d后剖解试验羊,检查免疫组与对照组羊的肝脏和肺脏荷囊数量,统计保护率(减囊率)。结果1.Eg95有体征反应,属于正常疫苗反应;2.免疫组与对照组血清IgG的OD值之比?2;3.二免后42d,人工感染的保护率:新疆细毛羊90.5%,山羊100%;4.二免后180d,人工感染的保护率:新疆细毛羊94.6%,山羊82.2%;自然感染的保护率:新疆细毛羊88.1%,巴音布鲁克羊83.6%。5.二免后365d,人工感染的保护率:新疆细毛羊97.4%;自然感染的保护率:新疆细毛羊83.6%,巴音布鲁克羊83.3%。6.二免后730d,人工感染的保护率:新疆细毛羊86.%;自然感染的保护率:87.1%;7.三免后180d,人工感染的保护率:新疆细毛羊99.2%。8.三免后365d,人工感染的保护率:新疆细毛羊95.6%,自然感染的保护率95.1%。9.四免后365d,人工感染的保护率:新疆细毛羊97.7%,自然感染的保护率95.5%。结论Eg95对新疆羊源棘球蚴病具有预防作用,免疫程序为新生羊羔初次2次,间隔期1个月(或4周),其后每年加强一次。 展开更多

关键词 包虫病 基因工程疫苗 免疫 新疆细毛羊 巴音布鲁克羊 山羊

下载PDF 职称材料

细粒棘球蚴-原头蚴体外培养成囊模型的建立 被引量：9

4

作者 袁丽英 张壮志 +10 位作者 石保新 古努尔.吐尔逊 米晓云 王进成 张文宝 阿依努尔 阿布里克木 阿不都 阿布利兹 张玲 岳城 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第7期29-31,共3页

建立原头蚴体外成囊发育的技术方法,为包虫病研究提供实验材料。在CO2培养箱中37℃条件下,单相培养体系中体外培养原头蚴,并用显微镜定期观察其大小及形态变化。结果发现:第10天原头蚴开始向囊发育;在第35～40天出现肉眼可见的囊,存活... 建立原头蚴体外成囊发育的技术方法,为包虫病研究提供实验材料。在CO2培养箱中37℃条件下,单相培养体系中体外培养原头蚴,并用显微镜定期观察其大小及形态变化。结果发现:第10天原头蚴开始向囊发育;在第35～40天出现肉眼可见的囊,存活时间达100 d,最大囊可达2 mm,原头蚴成囊率达90%。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 原头蚴 体外培养 囊

下载PDF 职称材料

牛源无乳链球菌对喹诺酮耐药的基因特征 被引量：2

5

作者 孟肖潇 吴建勇 +4 位作者 洪都孜·波拉提 李建军 古努尔·吐尔逊 努尔拜合提·努尔旦 杨学云 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第3期359-364,共6页

采用微量肉汤稀释法测定左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星3种喹诺酮类药物对110株奶牛隐性乳腺炎无乳链球菌(分离自中国10省区21个规模化奶牛养殖场)的最小抑菌浓度(MIC),通过PCR检测gyrA、gyrB、parC和parE基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR)... 采用微量肉汤稀释法测定左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星3种喹诺酮类药物对110株奶牛隐性乳腺炎无乳链球菌(分离自中国10省区21个规模化奶牛养殖场)的最小抑菌浓度(MIC),通过PCR检测gyrA、gyrB、parC和parE基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR),并分析其突变位点.结果表明:110株牛源无乳链球菌对左氧氟沙星、诺氟沙星和环丙沙星的耐药率分别为85.5%、98.2%、94.5%;左氧氟沙星耐药菌株对其他2种喹诺酮类药物耐药,且均发生了QRDR基因突变,氨基酸突变位点有GyrA的Ser81Leu、Glu85Lys,ParC的Ser79Phe、Asp83Tyr,ParE的Asp437Asn,其中,耐药菌基因最主要的突变类型是GyrA(Ser81Leu)+ParE(Asp437Asn),该突变类型对喹诺酮类药物呈中高度耐药;ParC的Ser79Phe或Asp83Tyr突变类型对喹诺酮类药物的敏感性下降,ParC的Ser79Phe突变与GyrA的Ser81Leu或Glu85Lys突变联合时,对喹诺酮类药物高度耐药.本研究结果对兽医临床上喹诺酮类药物的耐药控制及合理使用提供了一些依据. 展开更多

关键词 无乳链球菌 喹诺酮耐药决定区 喹诺酮类药物 奶牛乳腺炎

下载PDF 职称材料

用抗虫体表膜抗原抗体测定犬细粒棘球绦虫粪抗原 被引量：6

6

作者 古努尔·吐尔逊 米晓云 +8 位作者 张壮志 石保新 吐尔洪·依米提 张旭 巫剑 赵莉 阿曼古丽·马木提 金映红 张文宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期845-850,共6页

利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接... 利用Echinococcus granulosus(Eg)成虫表膜抗原抗体夹心ELISA方法检测犬细粒棘球绦虫感染的粪抗原。首先提取E g成虫表膜抗原,制备抗E g成虫表膜抗原的血清,然后用间接ELISA和Western blotting方法检测其抗原抗体反应及免疫原性,用间接免疫组化方法对E g成虫表膜蛋白进行组织定位。利用双抗体夹心ELISA方法检测感染E g的犬粪抗原。ELISA结果表明E g成虫表膜抗原具有良好的抗原性并能产生高效价抗体,抗体不与多头绦虫和泡状带绦虫抗原反应;Western blotting结果表明E g成虫表膜抗原与原头蚴、不成熟E g有共同蛋白成分。免疫组化结果证实虫体表膜蛋白分布在虫体表皮。该抗原抗体系统能检测到感染后13d的犬细粒棘球绦虫。结果表明该E g成虫表膜抗原抗体系统可用于诊断犬细粒棘球绦虫感染。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫成虫表膜抗原抗体 双抗体夹心ELISA 粪抗原

下载PDF 职称材料

绵羊副结核分枝杆菌的分离与分子分型 被引量：5

7

作者 洪都孜·波拉提 魏玉荣 +4 位作者 孟肖潇 杨学云 古努尔·吐尔逊 李建军 吴建勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期134-138,共5页

为了解绵羊副结核病的病原学特征,本研究对PCR检测阳性的绵羊肠系膜淋巴结样品开展细菌分离培养,对分离株进行形态观察,结果显示肠系膜淋巴结样品经培养后出现乳白色菌落;对分离菌株进行抗酸染色镜检后确定为抗酸染色阳性杆菌;PCR扩增该... 为了解绵羊副结核病的病原学特征,本研究对PCR检测阳性的绵羊肠系膜淋巴结样品开展细菌分离培养,对分离株进行形态观察,结果显示肠系膜淋巴结样品经培养后出现乳白色菌落;对分离菌株进行抗酸染色镜检后确定为抗酸染色阳性杆菌;PCR扩增该菌IS900基因与亚型分型片段,结果显示,IS900基因及亚型分型检测为Ⅱ型(牛型)副结核分枝杆菌(MAP);多位点短重复序列(MLSSR)和分枝杆菌散在分布重复单位-可变数目串联重复序列(MIRU-VNTR)分子分型结果显示,MLSSR和MIRU-VNTR分子分型数字代码分别为7+555555555和32632129。以上结果表明本研究分离的MAP是一种未曾报道的新基因型菌株,为首次在我国分离的绵羊源II型MAP。本研究为进一步开展绵羊MAP病原学和流行病学调查提供了参考资料。 展开更多

关键词 副结核分枝杆菌 分离鉴定 亚型鉴定 分子分型 绵羊

下载PDF 职称材料

EgM9免疫犬产生抗体变化规律的观察 被引量：7

8

作者 郭宝平 张壮志 +9 位作者 古努尔.吐尔逊 吐尔洪.依米提 石保新 哈斯也提.艾力 王进成 刘斌 张文宝 张玲 阿依努尔 阿布里米提 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期325-329,共5页

目的用重组表达蛋白EgM9免疫实验犬,观察免疫犬的抗体变化及EgM9的免疫效果。方法用100μgEgM9及5mg的GST并辅以佐剂QuilA分别免疫实验犬,定期收集血清,以间接ELISA法检测血清中IgG及其亚类、IgM、IgA与IgE;感染45d后剖检实验犬,统计犬... 目的用重组表达蛋白EgM9免疫实验犬,观察免疫犬的抗体变化及EgM9的免疫效果。方法用100μgEgM9及5mg的GST并辅以佐剂QuilA分别免疫实验犬,定期收集血清,以间接ELISA法检测血清中IgG及其亚类、IgM、IgA与IgE;感染45d后剖检实验犬,统计犬体内虫体数量。结果免疫组和对照组血清IgG与IgA差异显著(P<0.05);而IgG1与IgG2免疫组和对照组差异极显著(P<0.01);IgM与IgE免疫组和对照组无显著差异(P>0.05);相对于对照组,免疫组的保护率达86%。结论用重组蛋白EgM9免疫犬后能产生很高的抗体水平,可以抑制细粒棘球绦虫的发育,EgM9或许有望作为一种有效的候选疫苗成分用于包虫病的防治。 展开更多

关键词 EgM9 免疫机理 抗体 细粒棘球绦虫 犬

下载PDF 职称材料

多房棘球绦虫—泡球蚴的体外培养研究 被引量：7

9

作者 米晓云 古努尔.吐尔逊 +5 位作者 张壮志 石保新 金映红 张旭 赵莉 张文宝 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第4期67-70,共4页

按照多房棘球绦虫幼虫-泡球蚴培养的培养基(RPMI-1640、M199和MEM)分为3组:Ⅰ组为含10%胎牛血清的RPMI-1640;Ⅱ组为含10%胎牛血清的MEM;Ⅲ组为含10%胎牛血清的M199。将泡球蚴在3种细胞培养液中进行培养,观察其存活、生长以及发育情况。... 按照多房棘球绦虫幼虫-泡球蚴培养的培养基(RPMI-1640、M199和MEM)分为3组:Ⅰ组为含10%胎牛血清的RPMI-1640;Ⅱ组为含10%胎牛血清的MEM;Ⅲ组为含10%胎牛血清的M199。将泡球蚴在3种细胞培养液中进行培养,观察其存活、生长以及发育情况。结果显示,培养9 d的泡球蚴的成活率分别为:Ⅰ组90.10%、Ⅱ组50.25%、Ⅲ组22.03%;成囊率分别为:Ⅰ组57.12%、Ⅱ组63.15%、Ⅲ组48.17%;头节外翻率分别为:Ⅰ组98.28%、Ⅱ组88.65%、Ⅲ组75.50%。可见,大多数虫体在早期向囊发育,一部分虫体头节外翻,并伴有规律的伸缩运动,但随时间的延长虫体运动减缓,又向囊蚴发育。通过对多房棘球绦虫泡球蚴的体外培养,初步表明含有10%小牛血清的细胞培养基RPMI-1640较适合泡球蚴的生长发育,为研究寄生虫发育提供了最基本的数据资料。 展开更多

关键词 多房棘球绦虫 泡球蚴 体外培养

下载PDF 职称材料

奶山羊CAEV感染血清抗体的消长规律

10

作者 王登峰 古努尔·吐尔逊 +4 位作者 李建军 洪都孜·波拉提 杨学云 孟肖潇 吴建勇 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1555-1560,共6页

【目的】研究山羊感染关节炎-脑炎病毒(Caprine arthritis encephalitis virus,CAEV)后血清总抗体的消长规律,为CAEV检疫、净化方案的制订提供参考数据。【方法】采用我国分离的CAEV山东株(试验组)、参考株ATCC VR-905(参考株对照组)和... 【目的】研究山羊感染关节炎-脑炎病毒(Caprine arthritis encephalitis virus,CAEV)后血清总抗体的消长规律,为CAEV检疫、净化方案的制订提供参考数据。【方法】采用我国分离的CAEV山东株(试验组)、参考株ATCC VR-905(参考株对照组)和细胞培养基(阴性对照组)经颈静脉注射感染3~5月龄关中奶山羊9只(每组3只),选用OIE推荐的CAEV/MVV总抗体检测试剂盒(IDEXX)定期检测抗体。【结果】阴性对照组始终为阴性,试验组和参考株对照组在感染后第24 d出现抗体转阳个体,试验组在第42 d时全部转阳,参考株对照组在第71 d时全部转阳,且在后续监测期内抗体OD值均处较高水平并。【结论】山羊感染CAEV后能够产生较好的体液免疫应答,前2个月内抗体水平差异较大,抗体刺激起来后将持续处在较高水平。血清中CAEV总抗体水平可作为山羊CAE检疫的判断标准,但必须进行间隔期不少于60 d的2次以上的检疫。 展开更多

关键词 奶山羊 动物感染试验 山羊关节炎-脑炎病毒 抗体消长规律

下载PDF 职称材料

动物狂犬病的研究进展 被引量：3

11

作者 洪都孜·波拉提 吴建勇 +2 位作者 古努尔·吐尔逊 穆妮热·喀迪尔 钟旗 《兽医导刊》 2019年第16期190-191,222,共3页

狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RV)引起的以狂犬病是由狂犬病病毒引起的几乎所有温血动物都易感的神经系统病变为特征的高度致死性人畜共患病,也是我国目前患病率与死亡率高的烈性传染病之一。近年来,狂犬病报告死亡数一直... 狂犬病(Rabies)是由狂犬病毒(Rabies virus,RV)引起的以狂犬病是由狂犬病病毒引起的几乎所有温血动物都易感的神经系统病变为特征的高度致死性人畜共患病,也是我国目前患病率与死亡率高的烈性传染病之一。近年来,狂犬病报告死亡数一直位居我国法定报告传染病前列,给人民群众生命健康带来严重威胁。因此做好预防措施是目前最行之有效的方法。本文将对当前RABV病原学,流行病学,诊断检测技术及疫苗研制等方面的研究进展做一综述,为该病的有效防控提供参考资料。 展开更多

关键词 狂犬病病毒 病原学 流行病学 诊断与检测 疫苗

下载PDF 职称材料

细粒棘球绦虫Hsp70基因的克隆、表达及抗体制备 被引量：3

12

作者 赵莉 陈皓斐 +8 位作者 张文宝 马正海 张壮志 张旭 古努尔·吐尔逊 米晓云 金映红 薛晶 石保新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2491-2501,共11页

【目的】克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL... 【目的】克隆细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,E.g)热休克蛋白家族基因Hsp70,在原核细胞中表达、纯化Hsp70蛋白并制备其特异性抗体。【方法】从包囊中分离原头蚴,提取RNA,RT-PCR扩增EgHsp70基因的cDNA,将其构建至原核表达载体pMAL-p2x,转化大肠杆菌BL-21菌株。通过改变诱导温度、IPTG浓度和诱导时间筛选出EgHsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件。并用麦芽糖亲和层析法纯化该蛋白。纯化蛋白经皮下多点注射免疫新西兰白兔制备抗血清,ELISA和Western blotting检测血清效价和特异性。【结果】RT-PCR扩增获得EgHsp70基因的cDNA,酶切和测序结果表明EgHsp70基因已克隆入pMAL-p2x。表达条件优化实验结果筛选出Hsp70融合蛋白可溶性表达的最佳条件为:当A600为0.6时,以0.3 mmol.L-1 IPTG于30℃条件下诱导表达4 h。SDS-PAGE显示Hsp70融合蛋白相对分子质量约为68.6kD,经麦芽糖亲和层析法纯化获得了Hsp70融合蛋白,其表达量为2.5 mg.L-1。Western blotting检测证明制备的抗血清与EgHsp70融合蛋白、原头蚴粗提抗原、E.granulosis虫体蛋白和E.granulosis虫体表面蛋白均能特异性结合,ELISA检测表明获得的抗血清效价达到1﹕256 000。【结论】在大肠杆菌中表达并纯化获得了EgHsp70融合蛋白,并制备了高效价的兔抗EgHsp70蛋白抗血清,为研制包虫病疫苗及相关诊断试剂奠定了基础。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 热休克蛋白家族基因Hsp70 抗血清

下载PDF 职称材料

细粒棘球绦虫成虫表膜糖抗原的免疫性分析 被引量：3

13

作者 古努尔·吐尔逊 米晓云 +8 位作者 张壮志 石保新 吐尔洪.依米提 金映红 张妹 程小波 张旭 赵莉 张文宝 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期4713-4719,共7页

【目的】探索细粒棘球绦虫成虫表膜糖抗原的免疫性。【方法】细粒棘球绦虫成虫虫体冻融产物,经蛋白酶K消化,离心上清作为粗提表膜糖抗原,SDS-PAGE鉴定糖抗原成分,硫酸-蒽酮法测定多糖浓度,ELISA、Western-blot和IFA法分别检测免疫小鼠... 【目的】探索细粒棘球绦虫成虫表膜糖抗原的免疫性。【方法】细粒棘球绦虫成虫虫体冻融产物,经蛋白酶K消化,离心上清作为粗提表膜糖抗原,SDS-PAGE鉴定糖抗原成分,硫酸-蒽酮法测定多糖浓度,ELISA、Western-blot和IFA法分别检测免疫小鼠抗血清抗体效价和特异性以及确定抗原在虫体组织中的位置。【结果】SDS-PAGE图谱显示无蛋白条带出现,表明成虫膜蛋白被蛋白酶K完全降解;制备的糖抗原浓度为2.54mg.mL-1,初步确定为糖抗原。ELISA结果显示,随着免疫次数增加,抗血清中特异性抗体(IgG、IgM和IgA)效价也随之升高。与阴性血清相比,IgG、IgM和IgA的P/N值分别为4.9、3.2和6.4。未检测到特异性IgE。Wenstern-blot检测结果显示,抗血清与原头蚴粗提虫体蛋白、细粒棘球绦虫成虫表膜蛋白、表膜糖抗原有效识别。IFA显色结果显示糖抗原在细粒棘球绦虫虫体表膜中有表达。【结论】经蛋白酶K消化后提取的细粒棘球绦虫表膜糖抗原具有良好的的免疫原性和免疫反应性,有望用于包虫病的诊断和免疫。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 表膜糖抗原 抗血清

下载PDF 职称材料

多重PCR方法鉴定牛结核分枝杆菌的研究 被引量：5

14

作者 张喜悦 呼西旦 +5 位作者 曹瑞 杜鹏飞 努尔拜合提 古努尔.吐尔逊 孙照刚 范伟兴 《中国动物检疫》 CAS 2013年第7期68-71,共4页

牛结核病主要是由牛结核分枝杆菌引起的是一种人畜共患病,该病确诊需要病原分离与鉴定。我们采集了病牛的结核结节,接种于培养基上,获得了临床分离菌株,灭活后经Ziehl-Neelsen(Z-N)方法染色镜鉴怀疑为分枝杆菌。用分枝杆菌群多重PCR鉴定... 牛结核病主要是由牛结核分枝杆菌引起的是一种人畜共患病,该病确诊需要病原分离与鉴定。我们采集了病牛的结核结节,接种于培养基上,获得了临床分离菌株,灭活后经Ziehl-Neelsen(Z-N)方法染色镜鉴怀疑为分枝杆菌。用分枝杆菌群多重PCR鉴定,结果MYCGEN引物扩增有1030bp片段,TB1引物扩增有372bp片段,证实分离菌株属于结核分枝杆菌群。用分枝杆菌群内多重PCR对其鉴定,结果分离菌株的16SrRNA、Rv0577、IS1561和Rv38774对引物扩增均为阳性,片段大小依次为543bp、786bp、943bp和999bp;而Rv1510、Rv1970和Rv31203对引物扩增为阴性,证实分离菌株为牛结核分枝杆菌。 展开更多

关键词 牛结核分支杆菌 细菌分离 多重PCR

下载PDF 职称材料

EgM9蛋白免疫犬肠系膜淋巴结中抗体的免疫荧光组织化学定位 被引量：4

15

作者 石保新 巫剑 +8 位作者 张壮志 张文宝 米晓云 古努尔.吐尔逊 岳城 吐尔洪.依米提 张旭 赵莉 郝呈普 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期406-409,共4页

以EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬及感染原头蚴犬3个组的肠系膜淋巴结为材料,用FITC标记羊抗犬IgG和羊抗兔IgG,分别采用一步法和三步法免疫荧光技术检测EgM蛋白免疫犬肠系膜淋巴结上的IgG和特异性IgG。结果显示,EgM蛋白免疫... 以EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬及感染原头蚴犬3个组的肠系膜淋巴结为材料,用FITC标记羊抗犬IgG和羊抗兔IgG,分别采用一步法和三步法免疫荧光技术检测EgM蛋白免疫犬肠系膜淋巴结上的IgG和特异性IgG。结果显示,EgM蛋白免疫犬、EgM蛋白免疫后感染原头蚴犬的肠系膜淋巴结组织有清楚可见的荧光点,而感染原头蚴犬的肠系膜淋巴结荧光较弱。两种方法均证明,EgM蛋白免疫犬后在其肠系膜淋巴结中可以产生特异性抗体。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 原头蚴 犬 抗体反应 免疫荧光组织化学

原文传递

5%AVM水悬液对绵羊胃、肠道线虫驱除试验 被引量：2

16

作者 王进成 张壮志 +9 位作者 古努尔.吐尔逊 俞进 石保新 党新生 席耐 古丽仙 宋迎春 韩俊杰 陈长明 苗英 《草食家畜》 2002年第2期55-56,共2页

本试验再次证实阿维菌素的确是一种低毒高效广谱抗体内寄生虫的驱虫药 ,不同剂量 5 %AVM水悬液0 .5mg/kgb .w .、1mg/kgb .w .、1.5mg/kgb .w .与 1%阿维菌素注射液 0 .2mg/kgb .w .驱虫效果一致 ,虫卵减少率和粗计驱虫率均达 10 0 %。

关键词 AVM 水悬液 绵羊 胃 肠道线虫 驱除试验 阿维菌素 体内寄生虫

下载PDF 职称材料

奶牛副结核病流行牛场的处置方案分析 被引量：2

17

作者 吴建勇 杨学云 +5 位作者 李建军 古努尔·吐尔逊 孟肖潇 洪都孜·波拉提 金映红 王登峰 《中国奶牛》 2020年第1期28-32,共5页

为协助新疆某副结核病严重流行的奶牛场抑制该病的流行,2014-2015年间采用副结核分枝杆菌(MAP)间接ELISA抗体检测试剂盒对该牛场的965头牛进行了4次血清抗体检测,并通过淘汰部分阳性牛控制该病的流行。结果显示,在两年内累计检测出297... 为协助新疆某副结核病严重流行的奶牛场抑制该病的流行,2014-2015年间采用副结核分枝杆菌(MAP)间接ELISA抗体检测试剂盒对该牛场的965头牛进行了4次血清抗体检测,并通过淘汰部分阳性牛控制该病的流行。结果显示,在两年内累计检测出297头阳性牛,检出率为30.78%(297/965)。首次检测发现104头阳性牛,检出率为13.51%(104/770)。淘汰处理后,间隔3个月再次检出2.91%(19/652)的阳性牛,再次淘汰阳性牛后进行了两次监测,其中间隔11个月时检测阳性率为7.55%(41/543),间隔17个月时检出率为33.33%(171/513)。同时,检测结果显示:抗体阳性牛的检出率随年龄的增加而呈现上升趋势,在4~5岁检出率最高,而0.5~1和7~8岁牛中检出率较低。统计分析发现,在副结核病严重流行的奶牛场开展该病的控制或净化时,检测和主动淘汰的间隔期设置为3个月时的控制效果优于11个月和17个月(P<0.001)。虽本次处置未达到预期目标,但根据检测数据和处置措施效果,结合现有的研究数据,初步制订了牛群副结核病流行程度的划分标准和防控、净化方案。本研究将为牛副结核病的防控提供案例借鉴和防控方案。 展开更多

关键词 牛副结核病 副结核分枝杆菌 血清学检测 检验淘汰 处置方案

下载PDF 职称材料

用ELISA方法检测原头节及EgM免疫犬IgG变化情况 被引量：4

18

作者 郭宝平 张壮志 +5 位作者 张文宝 石宝新 古努尔.吐尔逊 吐尔洪.依米提 哈斯也提艾力 王进成 《地方病通报》 2007年第4期1-4,共4页

目的用不同的抗原检测免疫犬后的血清,判定所引起的IgG变化和有无与其他虫种的交叉反应。方法在用原头节可溶性粗抗原和EgM家族重组表达蛋白对犬的免疫保护实验中,以原头节可溶性粗抗原、细粒棘球绦虫成虫可溶性粗抗原和多头绦虫可溶性... 目的用不同的抗原检测免疫犬后的血清,判定所引起的IgG变化和有无与其他虫种的交叉反应。方法在用原头节可溶性粗抗原和EgM家族重组表达蛋白对犬的免疫保护实验中,以原头节可溶性粗抗原、细粒棘球绦虫成虫可溶性粗抗原和多头绦虫可溶性粗抗原包被检测时,通过间接ELISA的方法检测其中的特异性抗体IgG的变化规律及与多头绦虫抗原有无交叉反应。结果原头节可溶性粗抗原检测出相对应免疫组实验犬IgG应答变化情况,同时用细粒棘球绦虫成虫包被抗原亦检测出IgG存在一定差异,但不十分明显,与多头绦虫无交叉反应。检测EgM重组蛋白免疫组IgG时它们存在一定差异,但不十分明显。结论原头节可溶性粗抗原免疫组通过ELISA的方法较为准确地检测出其IgG的应答情况;EgM重组蛋白免疫组的抗体检测仍需进一步完善。 展开更多

关键词 原头节 可溶性粗抗原 细粒棘球绦虫 多头绦虫 ELISA IGG

下载PDF 职称材料

EgM123免疫犬血清抗体监测 被引量：4

19

作者 赵莉 张壮志 +7 位作者 石保新 古努尔.吐尔逊 米晓云 吐尔洪.依米提 王进成 马正海 张文宝 李国庆 《草食家畜》 2011年第4期72-75,共4页

【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM 123)与弗氏佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgG)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】ELISA实验结果经统计学方法分... 【目的】探索EgM家族重组蛋白(EgM 123)与弗氏佐剂结合免疫犬后血清抗体变化规律。【方法】利用间接ELISA法检测免疫组与对照组血清特异性抗体(IgG)的变化规律,并以Western-blotting方法进行验证。【结果】ELISA实验结果经统计学方法分析显示,不中和免疫组与对照组血清抗体时,特异性抗体IgG差异不显著(P>0.05),但中和血清抗体时,差异显著(P<0.05)。【结论】中和血清抗体,能够更明显的看到EgM家族重组蛋白(EgM 123)引起的犬特异性免疫应答。 展开更多

关键词 重组蛋白EgM 123 特异性抗体 犬 ELISA Western—blotting

下载PDF 职称材料

细粒棘球绦虫高免动物血清的特异性和敏感性分析 被引量：4

20

作者 闫昊 张旭 +8 位作者 古努尔.吐尔逊 米晓云 石保新 薛晶 巫剑 赵莉 李丹 张睿 张壮志 《草食家畜》 2011年第4期76-79,共4页

目的获得用于诊断细粒棘球绦虫成虫感染时特异性和敏感性高的抗血清。方法用细粒棘球绦虫成虫抗原免疫兔2只,制备高免血清,血清用饱和硫酸铵沉淀、透析、获得比较纯化的抗体,测量浓度和效价后,3μg/ml兔抗体包被,检测感染了不同犬带科... 目的获得用于诊断细粒棘球绦虫成虫感染时特异性和敏感性高的抗血清。方法用细粒棘球绦虫成虫抗原免疫兔2只,制备高免血清,血清用饱和硫酸铵沉淀、透析、获得比较纯化的抗体,测量浓度和效价后,3μg/ml兔抗体包被,检测感染了不同犬带科绦虫的实验犬和空白犬粪样,单克隆抗体补捉抗原(1∶6000),再用HRP标记的兔抗小鼠IgM(1∶2000),OD 405nm读值,用以判定兔高免血清的特异性和敏感性。结果高免血清抗体效价均为16万,其敏感性为85%(34/40),特异性为87.5%(42/48)。结论此高免血清可以用于建立高敏感性和高特异性的诊断细粒棘球绦虫成虫感染的ELISA方法的建立和优化。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 高免血清 粪抗原 夹心法-ELISA

下载PDF 职称材料