广西狂犬病野毒株N和G基因的克隆与序列分析 被引量：9

1

作者 罗廷荣 南松剑 余克伦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期245-249,共5页

从广西南宁、隆安和巴马分离到三株狂犬病病毒野毒株,分别编号为GXN119、GXLA和GXBM。对三株的N基因和GXN119、GXBM株的G基因进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。将测序所得结果和收集到的国内外已发表毒株相应基因进行了核苷酸和推定氨基... 从广西南宁、隆安和巴马分离到三株狂犬病病毒野毒株,分别编号为GXN119、GXLA和GXBM。对三株的N基因和GXN119、GXBM株的G基因进行了RT-PCR扩增、克隆和测序。将测序所得结果和收集到的国内外已发表毒株相应基因进行了核苷酸和推定氨基酸的序列进行比较分析。三株野毒之间N基因的核苷酸同源性分别为:89.1%(GXN119/GXBM)、89.7%(GXN119/GXLA)和89.4%(GXLA/GXBM),G基因的核苷酸同源性为86.7%(GXN119/GXBM)。比较N基因推导氨基酸序列同源性,分别为:97.8%(GXN119/GXBM)、97.8%(GXN119/GXLA)和99.1%(GXLA/GXBM),表明N基因同义变异较多。将两株野毒株GXN119、GXBM与人用疫苗3aG株和兽用疫苗ERA株的G基因进行了核苷酸序列比较,同源性介于82.7%～84.0%之间,推定氨基酸同源性在88.0%～91.6%之间。N蛋白的第40位Ser和106位Asp显示了广西狂犬病流行病学的区域特异性。 展开更多

关键词 狂犬病病毒 N基因 G基因 序列分析

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广西12株狂犬病野毒株的g基因序列测定与分析 被引量：9

2

作者 熊毅 罗廷荣 +5 位作者 刘棋 李华明 南松剑 郭建钢 邓朝阳 兰斌 《中国病毒学》 CAS CSCD 2006年第2期131-135,共5页

对广西12株狂犬病病毒株g基因全序列进行测序分析,结果显示:广西毒株属于I型,可分为3个群,即Ⅰ群、Ⅱ群和Ⅲ群。GX01、GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXLA8株为Ⅰ群,GX219、GX074、GXBM3株为Ⅱ群,GXN119株为Ⅲ群。Ⅰ群的广... 对广西12株狂犬病病毒株g基因全序列进行测序分析,结果显示:广西毒株属于I型,可分为3个群,即Ⅰ群、Ⅱ群和Ⅲ群。GX01、GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXLA8株为Ⅰ群,GX219、GX074、GXBM3株为Ⅱ群,GXN119株为Ⅲ群。Ⅰ群的广西毒株g基因核苷酸的同源性为97.6%～99.9%,氨基酸同源性在97.7%～100%之间;Ⅱ群的核苷酸的同源性为98.2%～99.0%,氨基酸的同源性在98.5%～99.2%之间。糖蛋白在主要的抗原位点GI、GⅡ区以及与中和抗原有关的36、263、367位氨基酸没有变异,GⅢ区上只有Ⅱ群在332位缬氨酸变异为异亮氨酸,G蛋白上的氨基酸主要在-2、-5、-13、-14、-15、-16、90、96、132、140、156、168、170、204、241、249、253、264、289、332、382、427、436、445、463、474位共26个氨基酸发生了变异,这些氨基酸的变异具有群的特异性。 展开更多

关键词 狂犬病病毒 糖蛋白基因 测序 广西毒株

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微酸性电生功能水在奶牛场的消毒效果研究 被引量：10

3

作者 南松剑 王朝元 +4 位作者 曹薇 马启军 王树华 李保明 侯占清 《中国奶牛》 2009年第10期34-37,共4页

微酸性电生功能水（Slightly Acidic Electrolyzed Functional Water,SAEFW）是在无隔膜电解槽内将一定比例的低浓度氯化钠和稀盐酸电解生成。其pH介于4.5-6.5之间,有效氯以HClO形态存在,杀菌力强,作用后可迅速分解且无化学污染。本研... 微酸性电生功能水（Slightly Acidic Electrolyzed Functional Water,SAEFW）是在无隔膜电解槽内将一定比例的低浓度氯化钠和稀盐酸电解生成。其pH介于4.5-6.5之间,有效氯以HClO形态存在,杀菌力强,作用后可迅速分解且无化学污染。本研究在自行设计的微酸性电生功能水装置的基础上,对SAEFW在奶牛场奶牛乳头药浴、挤奶杯、人员和毛巾等环节消毒效果进行了研究。结果表明,随着有效氯浓度的增加,SAEFW杀菌率逐渐提高,当有效氯为40mg/L时,杀菌率达到91.21%,与乳浴常用消毒剂“滴宝”的杀菌率91.97%相当;结果还表明奶牛乳房药浴必须有一定的停留时间。用低浓度有效氯20mg/L的SAEFW直接冲洗乳房皮肤,除菌率达93.59%,不低于用有效氯40mg/L的SAEFW和“滴宝”浸泡药浴效果,且综合了清水冲洗和乳房药浴两个步骤,简化了生产程序。SAEFW在挤奶杯、污染毛巾和挤奶员手消毒方面均有明显效果,优于相同有效氯的NaClO的杀菌率。SAEFW杀菌作用受有机物等环境因素影响,连续乳房药浴和挤奶杯消毒最好制备有效氯浓度稍高的SAEFW,或在事先充分清洗基础上再行消毒。本试验结果为SAEFW在奶牛场的消毒应用提供了一定的参考。 展开更多

关键词 微酸性电生功能水 奶牛 消毒 乳房炎

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广西狂犬病野毒株N基因的测序与分析 被引量：6

4

作者 熊毅 罗廷荣 +5 位作者 刘棋 李华明 南松剑 颜健华 郭建钢 邓朝阳 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期147-151,共5页

目的对广西狂犬病野毒株N基因进行测序和分析,了解其遗传特点和进化规律。方法2003至2004年从广西各地采集595份动物脑材料,经RT-PCR法确定16份为阳性。对此16株狂犬病野毒株N基因全序列进行RT-PCR扩增、克隆和测序分析。结果广西狂犬... 目的对广西狂犬病野毒株N基因进行测序和分析,了解其遗传特点和进化规律。方法2003至2004年从广西各地采集595份动物脑材料,经RT-PCR法确定16份为阳性。对此16株狂犬病野毒株N基因全序列进行RT-PCR扩增、克隆和测序分析。结果广西狂犬病病毒株属于Ⅰ型,可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ群。GX01、GX08、GX09、GX014、GX091、GX195、GX260、GXLA、GXHX和GXSL株的同源性在97.6%～99.8%,为Ⅰ群,它们与其他毒株的同源性为89.0%～89.7%;GX219、GX074、GX304、GXBM和GXPX株的核苷酸同源性在98.4%～99.9%,为Ⅱ群,它们与其他各株的同源性为88.6%～89.7%;GXN119株为Ⅲ群,与泰国的8738THA株核苷酸同源性为95.3%。遗传进化分析表明,389位磷酸化位点、主要的4个抗原区及Th细胞表位区非常保守。N蛋白上的氨基酸变异主要集中在42、90、110、128、135、332、379和397位氨基酸上,这些氨基酸的变异与同源性分群结果一致。结论根据基因同源性、遗传进化树及氨基酸变异分析,广西狂犬病野毒株分3群,呈地区性分布。 展开更多

关键词 狂犬病病毒 核蛋白类 序列分析 逆转录聚合酶链反应 基因扩增

原文传递

日光温室气雾培生产系统的设计 被引量：7

5

作者 刘曙光 马云飞 +4 位作者 南松剑 张梅 徐箴言 车忠志 孙少宁 《农业现代化研究》 CSCD 北大核心 2017年第5期893-899,共7页

目前气雾培生产过程中存在环境调控准确度低、生产系统运行不稳定,种植面积小,导致先进新技术无法最大限度的实现高产、优质、高效的问题。本文以合理光照条件扩大种植面积及采用PLC快速、准确、灵活实现稳定植物生长环境的构建为设计核... 目前气雾培生产过程中存在环境调控准确度低、生产系统运行不稳定,种植面积小,导致先进新技术无法最大限度的实现高产、优质、高效的问题。本文以合理光照条件扩大种植面积及采用PLC快速、准确、灵活实现稳定植物生长环境的构建为设计核心,确定气雾培生产系统布局参数,优化气雾培生产系统结构组成、形式及工作、尺寸参数,确定PLC控制结构及参数,设计了适用于实际生产要求的日光温室气雾培生产系统。试验结果表明,各区域管路终端压力变化范围在3%以内;各区域终端栽培床内温度差异及各区域终端栽培床与贮液池内营养液温度差异均小于2℃;各区域终端栽培床内湿度变化小于1%;回流管路营养液回流时间小于30 min,所有测试指标均符合生产要求,为进一步推动气雾培技术在设施农业中的应用推广创造条件。 展开更多

关键词 日光温室 气雾培 生产系统 设计 PLC

原文传递

我国玉米秸秆收运机械化发展现状分析 被引量：7

6

作者 孔凡克 刘曙光 +2 位作者 纪中良 南松剑 董仁杰 《农机化研究》 北大核心 2019年第5期249-255,共7页

我国玉米秸秆资源丰富,综合利用发展潜力巨大。为此,详细归纳了目前我国玉米秸秆收运发展模式,分析了与玉米秸秆收运相关的主要机械类型、结构特点、工作流程、典型机型应用状况及机械化程度。从秸秆综合利用途径、经济效益、生产技术... 我国玉米秸秆资源丰富,综合利用发展潜力巨大。为此,详细归纳了目前我国玉米秸秆收运发展模式,分析了与玉米秸秆收运相关的主要机械类型、结构特点、工作流程、典型机型应用状况及机械化程度。从秸秆综合利用途径、经济效益、生产技术等方面分析了我国玉米秸秆收运机械化发展面临的困难,并针对我国玉米秸秆收运机械化程度较低、收运发展体系不完善等现状,从营造发展环境、拓展发展空间、构建供求新秩序、形成规模化经营与现代化管理模式、提供人才储备及创新产品技术等方面提出促进玉米秸秆资源综合高效利用和提高玉米秸秆收运机械化发展水平的建议,为玉米秸秆收运机械化快速、健康、稳定。 展开更多

关键词 玉米秸秆 收运机械化 组合模式 发展现状

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我国黄瓜产业标准体系建设研究

7

作者 王华阳 柳苏倩 +2 位作者 南松剑 程芊祎 于立芝 《农产品质量与安全》 2024年第2期84-90,共7页

为了促进我国黄瓜产业标准体系的建设,本文对我国黄瓜产业现行有效的国家、行业、地方、团体标准进行了分析研究。经分析,明确了各级各类标准数量分布、发布时间、涉及的技术内容,发现存在部分标准标龄过长、全产业链各环节标准数量不... 为了促进我国黄瓜产业标准体系的建设,本文对我国黄瓜产业现行有效的国家、行业、地方、团体标准进行了分析研究。经分析,明确了各级各类标准数量分布、发布时间、涉及的技术内容,发现存在部分标准标龄过长、全产业链各环节标准数量不均衡、科技赋能标准化生产效果不明显、标准制定数量区域差别大、标准执行效果不理想等问题。由此提出有必要加快标准修订与更新、优化标准结构布局、推动科技创新与标准融合发展、建立黄瓜产业标准评估机制。 展开更多

关键词 黄瓜产业 标准体系 存在问题 对策建议

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不同比例麸皮和豆腐渣混合饲料对黑水虻幼虫生长特性的影响

8

作者 张浩洋 文亦强 +1 位作者 曲俊朋 南松剑 《湖北农业科学》 2024年第7期129-133,153,共6页

随机选取4日龄黑水虻(Hermetia illucens L.)幼虫1 500头,均匀分为5个处理,分别为G1组(100%麸皮)、G2组(75%麸皮+25%豆腐渣)、G3组(50%麸皮+50%豆腐渣)、G4组(25%麸皮+75%豆腐渣)、G5组(100%豆腐渣),每天测定体重、体长和投影面积。结... 随机选取4日龄黑水虻(Hermetia illucens L.)幼虫1 500头,均匀分为5个处理,分别为G1组(100%麸皮)、G2组(75%麸皮+25%豆腐渣)、G3组(50%麸皮+50%豆腐渣)、G4组(25%麸皮+75%豆腐渣)、G5组(100%豆腐渣),每天测定体重、体长和投影面积。结果表明,G2组黑水虻幼虫体重最高,且与其他组差异显著(P<0.05);G1组、G2组黑水虻幼虫体长较长,且体长明显大于其他组;G3组黑水虻幼虫投影面积最大,其次为G2组、G1组;G2组、G3组饲料利用率最高。由生长曲线可知,各组黑水虻幼虫大多经历缓慢生长、快速生长和平缓生长3个时期;从体重、体长及投影面积3项指标看,G2组具有延滞期短、快速增长期长的特点,收获时整体表现较好,而G5组整体表现较差。综上,使用75%麸皮+25%豆腐渣作为饲料有利于黑水虻幼虫的生长发育,且该组饲料转化率最高。 展开更多

关键词 黑水虻(Hermetia illucens L.)幼虫 混合饲料 麸皮 豆腐渣 生长特性

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一例猪瘟与猪蓝耳病混合感染的诊断 被引量：6

9

作者 谢金文 韩玲 +3 位作者 南松剑 苗立中 任艳玲 沈志强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第7期12-13,共2页

关键词 诊断中心 混合感染 猪瘟病毒 猪蓝耳病 猪繁殖与呼吸综合征病毒 流行病学调查 PCR试验 兽医技术

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施用环保酵素对松柳芽苗菜生长与品质的影响 被引量：1

10

作者 闫冰洁 邓子萱 +3 位作者 王一贺 任文卓 李俊阳 南松剑 《湖北农业科学》 2023年第7期73-79,共7页

采用单因素多水平法,研究不同稀释倍数的环保酵素稀释液及不同水肥搭配的施肥方式对松柳发芽、生长与品质的影响。测定各处理的发芽势、发芽率、单株鲜重、株高、根长、茎粗等生长指标,以及维生素C含量、可溶性糖含量、蛋白质含量等品... 采用单因素多水平法,研究不同稀释倍数的环保酵素稀释液及不同水肥搭配的施肥方式对松柳发芽、生长与品质的影响。测定各处理的发芽势、发芽率、单株鲜重、株高、根长、茎粗等生长指标,以及维生素C含量、可溶性糖含量、蛋白质含量等品质指标。结果表明,100倍的环保酵素稀释液对促进松柳种子的萌发效果最佳,其发芽势和发芽率较对照分别提高了15.15%、6.42%;100倍的环保酵素稀释液对促进松柳芽苗菜生长发育的效果最佳,其维生素C含量、可溶性糖含量和蛋白质含量较对照分别提高了32.85%、36.81%和14.11%;随着稀释倍数的增加,环保酵素对松柳各指标的促进效果均呈先上升后下降再趋于平稳的趋势;在不同水肥搭配模式中,浸种、浇灌和喷洒施肥都使用100倍的环保酵素稀释液对各指标的综合促进效果最佳。 展开更多

关键词 环保酵素 松柳 芽苗菜 生长 品质

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猪瘟病毒RT-PCR检测方法的研究 被引量：3

11

作者 谢金文 王金良 +3 位作者 管宇 肖跃强 南松剑 沈志强 《养猪》 2011年第1期77-79,共3页

为建立一种能够快速、确切诊断猪瘟(CSF)的方法,根据GenBank上已发表的猪瘟病毒(CSFV)核酸序列设计并合成了一对能特异性扩增CSFV基因片段的引物,经过条件优化后,建立了检测CSFV的RT-PCR方法,扩增病毒核酸片段长508bp。试验证明,该方法... 为建立一种能够快速、确切诊断猪瘟(CSF)的方法,根据GenBank上已发表的猪瘟病毒(CSFV)核酸序列设计并合成了一对能特异性扩增CSFV基因片段的引物,经过条件优化后,建立了检测CSFV的RT-PCR方法,扩增病毒核酸片段长508bp。试验证明,该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,简便、快速、高效,为CSFV的快速准确诊断及进一步的CSF流行病学研究提供了重要的技术手段。 展开更多

关键词 猪瘟病毒 RT-PCR 检测 诊断

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猪链球菌山东分离株随机扩增DNA(RAPD)分析的研究 被引量：1

12

作者 耿艳红 南松剑 +1 位作者 王雪峰 王领超 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第3期381-388,共8页

通过优化反应条件和筛选随机引物,应用100条随机引物对山东省临床病例中分离的20株猪链球菌做随机扩增多态性DNA(RAPD)分型研究。结果有23条引物呈现良好的多态性和稳定性,可产生稳定、复杂的指纹图谱。采用SPSS12．0软件分析了不同菌... 通过优化反应条件和筛选随机引物,应用100条随机引物对山东省临床病例中分离的20株猪链球菌做随机扩增多态性DNA(RAPD)分型研究。结果有23条引物呈现良好的多态性和稳定性,可产生稳定、复杂的指纹图谱。采用SPSS12．0软件分析了不同菌株间的遗传距离,20株的遗传距离为0．041-0．727,平均距离为0．293,其中第9株和第12株的遗传距离最大,据此绘制出菌株间的亲缘关系树状图,20株猪链球菌可被分为四个聚类群。研究结果表叫,RAPD指纹图基因分型法具有分型率高、分辨力强、简捷快速等优点,不需要已知核酸系列,使各类疾病的分子流行病学调查及病原分离鉴定的比较理想的方法之一,应用前景广阔。 展开更多

关键词 猪链球菌 RAPD 优化反应条件

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环保酵素对麻豌豆芽苗菜生长发育的影响 被引量：1

13

作者 王一贺 栾可心 +2 位作者 邓子萱 闫冰洁 南松剑 《陕西农业科学》 2022年第9期51-57,共7页

试验研究了在麻豌豆芽苗菜生长的不同时期,施用环保酵素对其生长状况及品质的影响。采用三因素多水平方式研究浸种时间、酵素稀释倍数、施肥方式对麻豌豆芽苗菜发芽率、根长、芽长、鲜重、叶片数、叶面积以及叶绿素、蛋白质、可溶糖含... 试验研究了在麻豌豆芽苗菜生长的不同时期,施用环保酵素对其生长状况及品质的影响。采用三因素多水平方式研究浸种时间、酵素稀释倍数、施肥方式对麻豌豆芽苗菜发芽率、根长、芽长、鲜重、叶片数、叶面积以及叶绿素、蛋白质、可溶糖含量的影响。试验结果表明,在种子萌发阶段,12 h浸种、50倍酵素稀释液对麻豌豆萌发的促进效果最佳;在生长阶段,以50倍酵素稀释液施用对麻豌豆生长促进效果最佳,20倍、100倍时次之;施肥方式方面,喷施和灌溉混合施肥的促进作用最佳,喷施和灌溉两种方式分别施用的促进作用次之。研究证明了环保酵素的施用有助于促进芽苗菜生长、提高其产量及品质,为麻豌豆的生产实践提供理论依据,也为蔬菜废弃物综合利用开辟新途径。 展开更多

关键词 环保酵素 麻豌豆 芽苗菜 生理特性

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设施农业工程图学多模块分段融合教学模式设计 被引量：2

14

作者 刘曙光 王承国 +3 位作者 南松剑 张梅 李林 马云飞 《安徽农业科学》 CAS 2017年第23期251-253,共3页

介绍了设施农业工程设计类课程体系特点、设施农业工程图学课程开设情况,分析目前设施农业工程图学教学模式在教学环境与要求、设计要求方面对整个课程体系的发展及学生知识体系的建立产生的不利影响,提出多模块分段融合教学模式的课程... 介绍了设施农业工程设计类课程体系特点、设施农业工程图学课程开设情况,分析目前设施农业工程图学教学模式在教学环境与要求、设计要求方面对整个课程体系的发展及学生知识体系的建立产生的不利影响,提出多模块分段融合教学模式的课程教学改革方案,并阐述多模块分段融合教学的设计思路、设计方法及设计内容,实现每一模块紧紧结合每门专业课程的各章节,贯穿于设计类课程体系始终,与相应的专业课同步一体化教学,改善设计主体各组成结构的教学应用环境,夯实了设计基础,提高了设计发展空间,作用辐射整个专业课程体系,使设施农业工程图学发挥更大作用,更好地适应专业课程体系的发展。 展开更多

关键词 设施农业科学与工程 分段融合教学 教学模式

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中性电解水用于温室土壤消毒的研究 被引量：2

15

作者 吕云 谢丽娜 南松剑 《农业与技术》 2014年第8期3-3,6,共2页

本文主要从使用中性电解水（pH6.0-7.5）浇灌温室土地消毒方面的效果进行探究。本文以日光温室大棚的土壤为研究对象。考察不同理化特性的中性电解水对土壤消毒的效果。本文主要进行了2个相关实验。使用不同处理时间的中性电解水直接浇... 本文主要从使用中性电解水（pH6.0-7.5）浇灌温室土地消毒方面的效果进行探究。本文以日光温室大棚的土壤为研究对象。考察不同理化特性的中性电解水对土壤消毒的效果。本文主要进行了2个相关实验。使用不同处理时间的中性电解水直接浇灌土壤消毒处理效果研究分析。不同处理时间的中性电解水对土壤浸出液消毒杀菌处理的效果研究分析。实验中的处理方式的杀菌率都可以达到99%以上,可见中性电解水在温室土壤消毒方面还是很有前景的。 展开更多

关键词 温室土壤消毒 中性电解水 杀菌效果 电处理

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果蔬尾菜酵素发酵条件与生物活性探究

16

作者 王一贺 田少腾 +1 位作者 靳金博 南松剑 《湖北农业科学》 2022年第20期33-39,共7页

为探究发酵条件对果蔬尾菜酵素质量和生物活性的影响,通过测定果蔬尾菜酵素pH、密度、细菌总数、真菌总数和大肠杆菌总数,及纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等功效酶活性,研究不同果蔬废弃物、添加剂(红糖、EM菌剂)对酵素品质的影响... 为探究发酵条件对果蔬尾菜酵素质量和生物活性的影响,通过测定果蔬尾菜酵素pH、密度、细菌总数、真菌总数和大肠杆菌总数,及纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等功效酶活性,研究不同果蔬废弃物、添加剂(红糖、EM菌剂)对酵素品质的影响。结果表明,果蔬尾菜酵素发酵过程中,菌落数总体呈先升高再趋于稳定或略有下降的趋势,功效酶活性不断增加,密度、pH总体呈现下降趋势。当料液比为3∶10,发酵底物均为水果废弃物,EM菌剂添加量为3 mL/L,糖添加量为100 g/L时发酵效果最佳,菌落总数高,大部分无大肠杆菌,纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶4种功效酶活性良好。 展开更多

关键词 果蔬尾菜酵素 发酵条件 酶活性 生物活性

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猪繁殖与呼吸道综合征病毒RT-PCR检测方法研究 被引量：1

17

作者 谢金文 王金良 +3 位作者 管宇 肖跃强 南松剑 沈志强 《现代畜牧兽医》 2010年第10期54-57,共4页

为建立一种能够快速、确切诊断猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的方法,根据Gen-Bank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核苷酸序列设计并合成了一对能特异性扩增PRRSV基因片段的引物,经过条件优化后,建立了检测PRRSV的RT-PCR方法,扩增... 为建立一种能够快速、确切诊断猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的方法,根据Gen-Bank上已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核苷酸序列设计并合成了一对能特异性扩增PRRSV基因片段的引物,经过条件优化后,建立了检测PRRSV的RT-PCR方法,扩增病毒核酸片段长432bp。试验证明,该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性和稳定性,简便、快速、高效,为PRRSV的快速准确诊断及进一步的PRRSV的流行病学研究提供了重要的技术手段。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸道综合征 RT-PCR 检测 诊断

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PRRSV GP5和PCV2 ORF2双基因共表达重组腺病毒的构建及鉴定 被引量：1

18

作者 于新友 沈志强 +4 位作者 管宇 南松剑 王金良 肖跃强 唐娜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期667-670,共4页

为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因和猪圆环病毒2(PCV2)ORF2双基因共表达重组腺病毒。将扩增的PRRSV GP5基因和PCV2 ORF2基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒。PmeⅠ酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1... 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5基因和猪圆环病毒2(PCV2)ORF2双基因共表达重组腺病毒。将扩增的PRRSV GP5基因和PCV2 ORF2基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒。PmeⅠ酶切线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacⅠ酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。PCR鉴定表明重组腺病毒含有GP5和ORF2基因,western blot检测结果表明GP5基因和ORF2基因在293A细胞内获得表达。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5基因 猪圆环病毒2型(PCV2) ORF2基因 重组腺病毒

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猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因的克隆及原核表达 被引量：1

19

作者 王金良 沈志强 +5 位作者 谢金文 南松剑 管宇 郝静 庄金秋 刘吉山 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第12期14-17,共4页

为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能，自行设计引物，通过PCR扩增的方法，获得VP2全基因，克隆到pMD18-T载体中进行测序，然后亚克隆到pET30a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，标记为pET30a—VP2。将阳性... 为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能，自行设计引物，通过PCR扩增的方法，获得VP2全基因，克隆到pMD18-T载体中进行测序，然后亚克隆到pET30a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，标记为pET30a—VP2。将阳性重组质粒转化进Rosetta^TM主菌中，通过改变IPTG浓度、诱导温度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定最佳诱导条件为：IPTG终浓度1．0amol/L、诱导温度37℃、诱导时间为3—4h。经SDS—PAGE和Western—blotting分析表明该重组蛋白相对分子量约为68ku，具有良好的免疫学活性。 展开更多

关键词 猪细小病毒 VP2基因 基因克隆 原核表达

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酸性电解水冰对黄花鱼的保鲜效果研究

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作者 王一贺 杜炳文 南松剑 《湖北农业科学》 2022年第22期139-145,共7页

为探究酸性电解水冰对冷藏大黄鱼品质变化的影响,将酸性电解水(Acidic electrolyzed water,AEW)和传统自来水(Traditional tap water,TW)冰冻后对新鲜黄花鱼进行保鲜处理,通过测定黄花鱼肉的感官评价、pH、总菌含量、挥发性盐基氮含量... 为探究酸性电解水冰对冷藏大黄鱼品质变化的影响,将酸性电解水(Acidic electrolyzed water,AEW)和传统自来水(Traditional tap water,TW)冰冻后对新鲜黄花鱼进行保鲜处理,通过测定黄花鱼肉的感官评价、pH、总菌含量、挥发性盐基氮含量、三甲胺含量及组织蛋白酶B活性等指标,研究酸性电解水冰对黄花鱼的保鲜效果。结果表明,酸性电解水冰的保鲜效果在各方面均优于传统自来水冰保鲜。使用AEW冰处理保鲜的黄花鱼感官品质更佳;AEW冰可减缓鱼肉变质引起的pH变化;使用AEW冰保鲜1 d对黄花鱼的杀菌效果可达95%,保鲜4 d对黄花鱼的杀菌效果可达到90%;使用AEW冰可以显著减少黄花鱼挥发性盐基氮及三甲胺的产生、降低组织蛋白酶B活性,能更有效地保持黄花鱼的品质,提高其商品经济价值。AEW冰具有高效的杀菌特点,可在各水产品的保鲜中加以推广应用,以获得更丰厚的经济收益和更优化的食品安全保障。 展开更多

关键词 黄花鱼 酸性电解水冰 保鲜效果 感官评价 菌落总数 生物活性

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