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草鱼NK-lysin基因的克隆、原核表达与活性分析 被引量:6
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作者 王改玲 王明成 +2 位作者 李传凤 潘磊 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1500-1511,共12页
为研究草鱼抗菌肽NK-lysin基因的组成结构、在组织中的表达差异及其抑菌活性,实验根据已知鱼类NK-lysin基因保守区序列设计上下游引物,采用RT-PCR和RACEPCR技术克隆草鱼NK-lysin基因(Cinkl),RT-PCR进行各组织间的表达分析,并构建Cinkl... 为研究草鱼抗菌肽NK-lysin基因的组成结构、在组织中的表达差异及其抑菌活性,实验根据已知鱼类NK-lysin基因保守区序列设计上下游引物,采用RT-PCR和RACEPCR技术克隆草鱼NK-lysin基因(Cinkl),RT-PCR进行各组织间的表达分析,并构建Cinkl成熟肽的原核表达载体,采用琼脂糖孔穴扩散法检测重组蛋白的抑菌活性。结果显示,Cinkl c DNA全长768 bp,编码121个氨基酸;基因组DNA全长3 361 bp,包含4个外显子和3个内含子。经多序列比对分析和结构域预测表明,Ci Nkl氨基酸序列具有SAPLIP家族的特征:含有6个保守的半胱氨酸和saposin B蛋白结构域,与斑马鱼Nklc、Nkld的相似性分别为57.98%和63.03%。构建NK-lysin氨基酸序列系统进化树,发现Ci Nkl与斑马鱼Nklc、Nkld聚为一支。RT-PCR检测结果显示,Cinkl m RNA在所有检测的草鱼组织中均有表达,在脾脏中表达量最高,心脏、鳃、中肾和头肾的表达量次之,皮肤、脑、肝脏和肠有微量表达。p ET-28b-MBP与Ci Nkl成熟肽序列构建的原核表达质粒在宿主菌Rosetta(DE3)表达出约57 ku的可溶性融合蛋白,利用Ni-NTA His·Bind树脂进行纯化,Ci Nkl重组蛋白对G–细菌如大肠杆菌M15株、嗜水气单胞菌,以及G+细菌如金黄色葡萄球菌均具有抑菌活性。基于草鱼NK-lysin的组织表达特征和重组蛋白的抑菌活性,推测NK-lysin在草鱼的先天性免疫防御中发挥调节作用。 展开更多
关键词 草鱼 NK-lysin 基因克隆 组织表达 抑菌活性
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从法制到法治:学校法治教育的学术史考察
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作者 《科教导刊》 2022年第15期73-75,共3页
法治教育是我国学校教育的重要议题。改革开放之后,我国法治教育研究的发展经历两个时期:法制教育研究集中时期、法治教育研究集中时期。未来学校法治教育研究应关注学科逻辑,进一步拓展研究内容,合理借鉴域外经验,研究中国现实问题。
关键词 法治教育 法制 学术史
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“脆弱性”或“易感性”对儿童问题行为影响的理论探索
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作者 王琼 葛操 《医学与哲学》 北大核心 2022年第12期58-62,共5页
儿童问题行为的发生与发展与其个体本身、家庭环境以及与家庭有关的各种因素息息相关。遗传因素在环境因素与内外化问题行为的关系中扮演重要的调节作用,但有时会符合不同的理论模型,主要包括素质-压力模型和差别易感性模型。在不同时... 儿童问题行为的发生与发展与其个体本身、家庭环境以及与家庭有关的各种因素息息相关。遗传因素在环境因素与内外化问题行为的关系中扮演重要的调节作用,但有时会符合不同的理论模型,主要包括素质-压力模型和差别易感性模型。在不同时期、采用不同研究方法是导致结果不同的重要原因,因此需要区分年龄阶段,区分特定气质,区分测量方法,进行更加系统的横向研究,问题行为发展的理论模型遵循一贯性原则还是发展性原则需要在横向研究的基础上展开纵向研究加以验证。 展开更多
关键词 素质-压力模型 差别易感性模型 气质 问题行为
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自我聚焦和情景聚焦认知重评的差异研究概述
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作者 王琼 葛操 《医学与哲学》 北大核心 2021年第23期38-42,共5页
自我聚焦重评和情景聚焦重评是认知重评情绪调节策略的两种亚型,其解释方式和调节角度差异明显。从行为学角度来看,两种重评策略虽然都能在一定程度上调节情绪,但对于上调负性情绪、不同效价情绪刺激调节的普适性存在差异,对情绪材料的... 自我聚焦重评和情景聚焦重评是认知重评情绪调节策略的两种亚型,其解释方式和调节角度差异明显。从行为学角度来看,两种重评策略虽然都能在一定程度上调节情绪,但对于上调负性情绪、不同效价情绪刺激调节的普适性存在差异,对情绪材料的记忆和对随后认知控制的影响也有所不同;从神经机制看,两种情绪调节的过程都涉及到认知控制的重要脑区——前额皮层和杏仁核系统,但激活的大脑前额部位不同,二者有效调节情绪与晚期正电位降低的相关性不同。在特定情况选择合适的情绪调节策略,可以起到更好的效果,并有利于身心健康。 展开更多
关键词 情绪调节策略 认知重评 自我聚焦重评 情景聚焦重评 记忆
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教科书审定制度研究述评
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作者 《中国教育法制评论》 CSSCI 2017年第1期280-292,共13页
我国教科书审定制度的研究主要围绕教科书审定制度存在之必要性、制度的关键要素以及与国外相关制度的比较研究展开,具体包含:国家是否有权审定教科书;教科书的审定标准、审定主体、审定程序;英、美、日、德等国教科书审定制度的比较。... 我国教科书审定制度的研究主要围绕教科书审定制度存在之必要性、制度的关键要素以及与国外相关制度的比较研究展开,具体包含:国家是否有权审定教科书;教科书的审定标准、审定主体、审定程序;英、美、日、德等国教科书审定制度的比较。未来研究应着重以下方面:关注立法研究,推进教科书审定法制化;强化程序研究,提高教科书审定的科学性;注重实证研究,建设有中国特色的教科书审定制度。 展开更多
关键词 教科书 教科书审定制度 研究述评
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酿酒酵母在糖质燃料乙醇中的发酵工艺优化 被引量:4
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作者 代勇华 +2 位作者 宋超 胡国全 何明雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1076-1083,共8页
低成本、高产量的发酵工艺是实现工业燃料乙醇经济和环境可持续性发展的关键,而不需要重大基础设施改变或投资.为获得酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)利用甘蔗汁生产燃料乙醇的最优发酵工艺,首先对发酵体系的氮源条件进行优化;其次... 低成本、高产量的发酵工艺是实现工业燃料乙醇经济和环境可持续性发展的关键,而不需要重大基础设施改变或投资.为获得酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)利用甘蔗汁生产燃料乙醇的最优发酵工艺,首先对发酵体系的氮源条件进行优化;其次,在单因素试验基础上,以乙醇发酵效率为响应值,通过响应面法优化了燃料乙醇生产的发酵工艺,并通过补料分批发酵技术在5 L发酵罐中进一步扩大发酵.结果表明,以1.0 g/L (NH)SO和1.0 g/L酵母提取物作为发酵氮源,乙醇发酵效率和得率比对照可分别提高4.80%、9.52%.响应面设计获得的最优发酵工艺条件为在总糖浓度150.0 g/L、酵母提取物浓度2.0 g/L、发酵时间24.5 h、pH5.0、外加(NH)SO浓度1.0 g/L时,最高乙醇发酵效率可达到91.10%.在5 L发酵罐中采用补料分批发酵获得的最终乙醇浓度达到98.92 g/L,发酵效率维持在90%左右,乙醇生产力最高达到3.81 g Lh.本研究获得了一种高效生产糖质燃料乙醇的发酵工艺,可在较短时间内获得高浓度乙醇且消耗较少氮源,结果可为进一步利用糖质原料进行高效生物炼制及高浓度乙醇工业化生产提供参考.(图6表6参30) 展开更多
关键词 燃料乙醇 酿酒酵母 甘蔗 响应面法 补料分批发酵
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