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褪黑素对大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及免疫功能受抑状态的影响 被引量:12
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作者 钟历勇 沈自尹 +3 位作者 杨志红 王惠 宋萍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期761-764,共4页
目的 :探讨外源性褪黑素对下丘脑 垂体 肾上腺轴及免疫功能受抑状态的影响。方法 :采用放射免疫法及细胞免疫技术分别观察了两个不同剂量 (10 0、2 0 0 μg kg)褪黑素连续 14天腹腔注射 ,对皮质酮诱导的HPA轴及免疫功能受抑大鼠血浆ACT... 目的 :探讨外源性褪黑素对下丘脑 垂体 肾上腺轴及免疫功能受抑状态的影响。方法 :采用放射免疫法及细胞免疫技术分别观察了两个不同剂量 (10 0、2 0 0 μg kg)褪黑素连续 14天腹腔注射 ,对皮质酮诱导的HPA轴及免疫功能受抑大鼠血浆ACTH ,皮质酮水平以及淋巴细胞增殖 ,NKCC杀伤活性和ConA诱生的IL 2水平的影响。结果 :褪黑素 10 0 μg kg处理动物 ,其明显下降的血浆ACTH及皮质酮水平均有上升趋势 ,但在统计学上无显著意义 ,而褪黑素 2 0 0 μg kg处理动物 ,其血浆ACTH及皮质酮水平的上升与皮质酮对照组相比有显著意义 (P <0 0 5 )。对免疫功能的影响 ,无论褪黑素 10 0 μg kg还是 2 0 0μg kg处理动物 ,其被抑制的细胞免疫功能 (淋巴细胞增殖、NKCC及IL 2水平 )均有所恢复 ,且与皮质酮对照组相比 ,差异显著(P <0 0 5 )。结论 :外源性褪黑素可改善皮质酮诱导的大鼠HPA轴及免疫功能受抑状态。 展开更多
关键词 褪黑素 皮质酮 HPA轴 免疫功能 丘脑 垂体 肾上腺轴 放射免疫法 细胞免疫技术
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P^(16)抑癌基因产物在肺癌中的表达及临床意义 被引量:14
2
作者 傅晓颖 +2 位作者 曹晓运 周决 曹世龙 《上海医科大学学报》 CSCD 1997年第2期83-86,共4页
研究P16在肺癌中的表达与临床病理的关系。用免疫组织化学ABC法检测60例肺癌石蜡标本P16蛋白的表达水平。结果:8例小细胞肺癌P16蛋白的阳性表达率为100%。52例非小细胞肺癌P16蛋白的阳性表达率为57.6%,其中伴有淋巴结转移的肺癌P1... 研究P16在肺癌中的表达与临床病理的关系。用免疫组织化学ABC法检测60例肺癌石蜡标本P16蛋白的表达水平。结果:8例小细胞肺癌P16蛋白的阳性表达率为100%。52例非小细胞肺癌P16蛋白的阳性表达率为57.6%,其中伴有淋巴结转移的肺癌P16蛋白的阳性表达率(18.1%)显著低于无淋巴结转移者(P16阳性表达率为86.6%,P<0.01),低分化肺癌P16蛋白的阳性表达率(30%)显著低于中、高分化肺癌P16蛋白的阳性表达率(75%),P<0.05。P16蛋白表达阳性的病人的3a生存率为64.8%。而P16蛋白表达阴性者其3a生存率仅20.3%(P<0.05)。P16蛋白的表达与病人年龄、性别无关。结论:P16蛋白表达与肺癌组织类型、分化程度及转移有关。P16蛋白的状态可作为判断非小细胞肺癌预后的指标。 展开更多
关键词 肺肿瘤 P16 抑癌基因 基因表达 免疫组织化学
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PCR-SSCP银染技术筛检HBV基因突变实验方法的建立 被引量:10
3
作者 李瀚晣 盛国光 +2 位作者 晏雪生 明安萍 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 1999年第2期109-110,共2页
为了对乙肝患者HBV 基因突变进行大样本大面积筛检,我们建立了稳定简便快速的PCR- SSCP银染技术筛检HBV 基因突变的实验方法。结果显示本法具有很高的特异性和较高的敏感性。PCR- SSCP银染技术筛检出的HBV ... 为了对乙肝患者HBV 基因突变进行大样本大面积筛检,我们建立了稳定简便快速的PCR- SSCP银染技术筛检HBV 基因突变的实验方法。结果显示本法具有很高的特异性和较高的敏感性。PCR- SSCP银染技术筛检出的HBV 基因突变的阳性标本经直接测序证实全部存在HBV 基因突变,并证实该方法能特异性的检出1898 位或1901 位发生了G→A,出现了TAG终止密码的突变,具有一定的推广应用价值。 展开更多
关键词 PCR SSCP 银染技术 HBV 基因突变
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p16基因重组质粒的构建及其对人肺癌细胞的抑制作用 被引量:5
4
作者 付晓颖 曹世龙 +4 位作者 邵东敏 张颂文 申宗候 顾建新 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第1期9-12,共4页
人p16基因是最近发现的一种肿瘤抑制基因.p16蛋白作为一种细胞增殖的负调控因子,在恶性肿瘤发生发展中起重要作用.为了进一步探讨p16基因的抗肿瘤特性,我们通过运用分子克隆技术构建重组人p16基因表达载体(pcDNA3-p16),并通过电穿孔方法... 人p16基因是最近发现的一种肿瘤抑制基因.p16蛋白作为一种细胞增殖的负调控因子,在恶性肿瘤发生发展中起重要作用.为了进一步探讨p16基因的抗肿瘤特性,我们通过运用分子克隆技术构建重组人p16基因表达载体(pcDNA3-p16),并通过电穿孔方法将p16基因导入到人肺腺癌NCI-H460细胞中,经G418筛选获得可稳定表达p16的人肺腺癌细胞,观察p16基因对人肺腺癌细胞周期的影响和细胞增殖的作用.结果表明,导入p16基因能使人肺腺癌细胞生长速度较对照细胞明显减慢,克隆形成率下降,细胞周期G1阻滞.结果证明人p16基因能抑制人肺腺癌细胞的生长.本研究为人肺腺癌p16实验性基因治疗提供了实验依据,说明基于恢复p16肿瘤抑制基因功能的基因治疗在治疗人肺腺癌方面有广阔的应用前景. 展开更多
关键词 P16基因 基因治疗 肺肿瘤 质粒
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放射诱导HL-60细胞凋亡及其与克隆存活率的关系 被引量:2
5
作者 付晓颖 曹世龙 +4 位作者 沈兆忠 罗建民 周决 黄抗美 《上海医科大学学报》 CSCD 1998年第1期3-6,共4页
目的研究放射诱导的HL-60细胞凋亡及其与放射后细胞克隆存活率的关系。方法应用电子显微镜、琼脂糖电泳、流式细胞术和TdT介导的缺口和末端标记法(TUNEL)等方法分析放射诱导HL-60细胞凋亡,应用有限稀释法测定放射... 目的研究放射诱导的HL-60细胞凋亡及其与放射后细胞克隆存活率的关系。方法应用电子显微镜、琼脂糖电泳、流式细胞术和TdT介导的缺口和末端标记法(TUNEL)等方法分析放射诱导HL-60细胞凋亡,应用有限稀释法测定放射后细胞克隆形成率。结果放射后HL-60细胞表现出细胞体积缩小、染色质固缩致密化、边缘化、染色体断裂、出现凋亡小体、细胞膜保持完整和电泳时DNA“梯谱”等典型的细胞凋亡特征。放射诱导HL-60细胞凋亡有明显的时间、剂量效应,照射后4h细胞凋亡已比较明显,放射诱导HL-60细胞凋亡随着照射剂量增加而增加。但是,放射引起HL-60细胞克隆存活率的减少比放射诱导HL-60细胞凋亡更敏感,如8Gy照射后克隆存活率减少到0.0016,而此剂量时的细胞凋亡水平几乎与对照组水平相同。结论放射能诱导HL-60细胞凋亡,并有明显的时间、剂量效应关系。但是,放射诱导HL-60细胞凋亡并不能解释HL-60细胞克隆存活率的减少。 展开更多
关键词 细胞凋亡 克隆存活率 HL-60 白血病 放射疗法
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肺癌P16基因纯合缺失、突变、表达及临床意义 被引量:2
6
作者 曹晓运 +3 位作者 涂宣林 傅晓颖 宋后燕 曹世龙 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1998年第3期210-214,共5页
目的探讨P16基因的改变与肺癌生物学行为的关系。方法控制正常细胞对肿瘤组织污染后,用聚合酶链反应一单链构型多态性分析(PCR-SSCP)和免疫组织化学法对60例肺癌组织P16基因纯合缺失、突变、表达进行了研究。结果小细胞肺癌无P16基... 目的探讨P16基因的改变与肺癌生物学行为的关系。方法控制正常细胞对肿瘤组织污染后,用聚合酶链反应一单链构型多态性分析(PCR-SSCP)和免疫组织化学法对60例肺癌组织P16基因纯合缺失、突变、表达进行了研究。结果小细胞肺癌无P16基因纯合缺失、突变和蛋白表达异常。非小细胞肺癌P16基因纯合缺失率和突变率分别为40.5%和5.7%且与肿瘤细胞的分化程度、组织类型、转移和预后明显相关。非小细胞肺癌P16蛋白表达缺失率为42.3%,与p16基因纯合缺失有高度的一致性,两者的缺失符合率为76%。结论P16基因异常和失活可能与非小细胞肺癌的组织学类型、分化和预后有一定关系。 展开更多
关键词 肺肿瘤 P16基因 聚合酶链反应 多态性 基因缺失
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砷对大鼠胚胎p16和iNOS基因表达的影响 被引量:1
7
作者 李勇 朱惠刚 《中国地方病防治》 1998年第6期321-323,共3页
为进一步阐明三氧化二砷的发育毒性和致畸作用机制,本实验用非放射性原位杂交等技术研究了砷诱导畸胎发生过程中p16和iNOS基因表达的变化。腹腔注射砷剂量依次为0、1、4和10mg/kg。结果发现砷对SD大鼠胚胎的发育毒性与剂量正比关系,10mg... 为进一步阐明三氧化二砷的发育毒性和致畸作用机制,本实验用非放射性原位杂交等技术研究了砷诱导畸胎发生过程中p16和iNOS基因表达的变化。腹腔注射砷剂量依次为0、1、4和10mg/kg。结果发现砷对SD大鼠胚胎的发育毒性与剂量正比关系,10mg/kg时,发育正常胚胎仅为16.7%。原位杂交结果显示在对照和1mg/kg砷组可见p16mRNA阳性表达信号,但iNOSmRNA表达阴性;在4和10mg/kg组p16mRNA阳性杂交信号未检出,而iNOSmRNA大量表达。p16蛋白缺失与胚胎细胞分裂周期有关;iNOS过表达可导致内源性NO产量增高,进而对胚胎造成氧化性损伤。扫描电镜下,可见≥4mg/kg砷对胚胎表皮细胞、卵黄囊胎盘间皮和内皮细胞表面的微绒毛及细胞膜均有明显的损害作用。 展开更多
关键词 胚胎 P16基因 INOS基因 致畸作用 毒性
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应用PCR-SSCP银染技术检测HBV基因点突变 被引量:2
8
作者 盛国光 李瀚旻 +4 位作者 王伯祥 张建军 晏雪生 明安萍 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2001年第4期216-217,共2页
为了对乙型肝炎患者HBV基因突变进行大样本大面积筛检,建立简便可靠的检测HBV基因突变的方法。方法:采用单链构象多态性(SSCP)银染技术,检测HBV Pre-C基因突变。结果:在10份HBeAg阳性标本中,有8份PCR阳性,SSCP显示有2份标本有HBV Pre-C... 为了对乙型肝炎患者HBV基因突变进行大样本大面积筛检,建立简便可靠的检测HBV基因突变的方法。方法:采用单链构象多态性(SSCP)银染技术,检测HBV Pre-C基因突变。结果:在10份HBeAg阳性标本中,有8份PCR阳性,SSCP显示有2份标本有HBV Pre-C基因突变,直接测序证实为非终止密码突变。48份抗-HBe阳性标本中,有12份为PCR阳性,有8份SSCP显示PCR产物单链泳运状态异常,其中4份标本经直接测序证实在1898位发生了G→A变异,出现TAG终止密码突变。结论:PCR-SSCP银染技术检测HBV Pre-C基因点突变有很高的特异性和敏感性,该方法稳定、简便、快速,能基本满足临床大面积大样本筛检的需要。 展开更多
关键词 PCR-SSCP HBV 基因点突变 银染技术
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胃癌细胞肿瘤坏死因子受体的研究 被引量:1
9
作者 吴裕炘 +2 位作者 付华 何晓龙 曹世龙 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期28-31,共4页
目的 探讨人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体 ( TNFR)的数目与胃癌细胞分化程度以及与肿瘤坏死因子突变体 ( TNF- m)细胞毒效应之间的关系。方法 以12 5I- TNF- m为配体 ,用放射配体结合分析法 ,检测了高、中、低不同分化程度的体外培养胃... 目的 探讨人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体 ( TNFR)的数目与胃癌细胞分化程度以及与肿瘤坏死因子突变体 ( TNF- m)细胞毒效应之间的关系。方法 以12 5I- TNF- m为配体 ,用放射配体结合分析法 ,检测了高、中、低不同分化程度的体外培养胃癌细胞 ( MKN2 8、SGC790 1、MKN4 5)的 TNFR,同时用 MTT比色法研究了 TNF- m对三株胃癌细胞的细胞毒效应。结果 三株胃癌细胞 TNFR数目分别为每细胞 9.8× 10 -12 nmol、5.6× 10 -12 nmol、3.2× 10 -12 nmol,三者之间比较 ,TNFR数目差异有显著性 ( P<0 .0 5)。解离常数基本一致 ,同一温度时三株胃癌细胞 TNF- m的内化率几乎相等 ,且呈温度依赖关系。TNFR的半衰期大约为 90分钟 ,胞膜与胞浆 TNFR数目之比约为 1∶ 2 ,TNF- m对三株胃癌细胞的最大杀伤率分别为 86%、60 %、34 % ,差异有显著性 ( P<0 .0 5) ,且 39℃时的杀伤率高于37℃时的杀伤率。结论 胃癌细胞表面 TNFR数目与胃癌分化程度相关。 TNF- m的细胞毒效应与TNF数目及 TNF- m的内化量有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 受体 肿瘤坏死因子
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γ-干扰素对胃癌细胞TNF受体表达和TNF突变体代谢的影响
10
作者 吴裕炘 +4 位作者 孙建中 朱承谟 王国平 唐国忠 曹世龙 《中华核医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期201-203,共3页
为探讨γ干扰素(IFN)对胃癌细胞(SGC7901)肿瘤坏死因子(TNF)受体的影响及与肿瘤坏死因子突变体(TNFm)协同抗肿瘤的机制,以125ITNFm为配体,用放射受体分析法研究γIFN对SGC7901... 为探讨γ干扰素(IFN)对胃癌细胞(SGC7901)肿瘤坏死因子(TNF)受体的影响及与肿瘤坏死因子突变体(TNFm)协同抗肿瘤的机制,以125ITNFm为配体,用放射受体分析法研究γIFN对SGC7901细胞TNF受体表达及与TNFm内化和降解的影响。并用MTT法研究γIFN与TNFm协同抗肿瘤作用。结果:γIFN使SGC7901细胞TNF受体的数量由056×10-11nmol/细胞增至094×10-11nmol/细胞,而对受体的亲和力无影响(Kd为278×10-11和264×10-10mol/L,t=12,P>05);γIFN可明显增加TNFm内化和降解的绝对数量,而对其比率无影响。γIFN使TNFm对SGC7901细胞的最大杀伤率达到96%(t=52,P<001)。提示:γIFN通过上调TNF受体而加强TNFm的体外抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 Γ-干扰素 胃肿瘤 胃癌细胞 肿瘤坏死因子 受体
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肿瘤坏死因子突变体对胃癌细胞肿瘤坏死因子受体的调节
11
作者 付华 +2 位作者 吴裕炘 孙建忠 曹世龙 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1996年第5期257-260,共4页
本文采用放射配基结合分析法和蛋白合成抑制试验研究了肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)对SGC7901细胞TNF受体的影响。结果表明,TNF-m可显著降低SGC7901细胞表面TNF受体数目并呈剂量、时间、温度依赖关系,... 本文采用放射配基结合分析法和蛋白合成抑制试验研究了肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)对SGC7901细胞TNF受体的影响。结果表明,TNF-m可显著降低SGC7901细胞表面TNF受体数目并呈剂量、时间、温度依赖关系,对受体亲和力无影响,TNF-m可使胞浆TNF受体数目增加,去除TNF-m3h后,膜TNF受体大约可恢复60%,显著高于胰蛋白酶处理组TNF受体的恢复率,放线菌素D对TNF-m处理的细胞TNF受体的抑制作用显著低于对照组,且TNF受体的半衰期约为90min.据此认为,TNF-m通过介导TNF受体的内化从而使膜TNF受体数降低。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤坏死因子 受体 突变体
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干扰素—γ对胃癌细胞肿瘤坏死因子受休的调控
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作者 孙建中 +3 位作者 吴裕炘 付华 王国平 曹世龙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期429-432,共4页
为了探讨干扰素-γ对胃癌细胞(SGC_(7901))肿瘤坏死因子(TNF)受体的影响及干扰素—γ肿瘤坏死因子突变体(TNF—m)协同抗肿瘤的机制,以_(125)I-肿瘤坏死因子突变体(^(123)I—TNF—m)为配体,用放射配体结合分析法研究了干扰素-γ对SGC_(79... 为了探讨干扰素-γ对胃癌细胞(SGC_(7901))肿瘤坏死因子(TNF)受体的影响及干扰素—γ肿瘤坏死因子突变体(TNF—m)协同抗肿瘤的机制,以_(125)I-肿瘤坏死因子突变体(^(123)I—TNF—m)为配体,用放射配体结合分析法研究了干扰素-γ对SGC_(7901)细胞TNF受体表达及TNF—m内化和降解的影响。外用MTT法研究了干扰素-γ与TNF-m协同抗肿瘤作用。结果表明:干扰素-γ使SGC_(7901)细胞TNF受体数目由0.56×10^(-11) nmol/细胞增加到0.94×10^(-11)nmol/细胞(P<0.01),而对受体亲和力无影响(kd值:2.78×10^(-10)mol对2.64×10^(-10) mol.P>0.5);干扰素-γ可明显增加TNF—m内化和降解的绝对数量而对其比率无影响。干扰素-γ使TNF—m对SGC_(7901)细胞的最大杀伤率由60.48%上升到96.76%(P<0.01)。提示:干扰素-γ通过上调TNF受体而加强TNF—m的体外抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 放射配位体测定 肿瘤坏死因子 干扰素-Γ 胃肿瘤
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放射诱导HL-60细胞凋亡的流式细胞计量术分析
13
作者 傅晓颖 曹世龙 +4 位作者 沈兆忠 罗建民 周决 黄抗美 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1999年第4期304-307,共4页
目的 定性和定量地分析放射诱导HL60 细胞凋亡。 方法 以人类白血病细胞系HL60 为材料,应用光学显微镜和电子显微镜及琼脂糖电泳定性分析60 Co 放射线诱导HL60 细胞凋亡的发生,应用DNA流式细胞计量术和... 目的 定性和定量地分析放射诱导HL60 细胞凋亡。 方法 以人类白血病细胞系HL60 为材料,应用光学显微镜和电子显微镜及琼脂糖电泳定性分析60 Co 放射线诱导HL60 细胞凋亡的发生,应用DNA流式细胞计量术和末端转移酶(TdT) 介导的缺口末端标记法(TUNEL) 的流式细胞定量检测HL60 细胞凋亡。 结果 (1) 放射后HL60 出现细胞体积缩小,染色质固缩致密化、边缘化,染色体断裂,凋亡小体和细胞膜保持完整等形态学特征。(2) 琼脂糖电泳表现为特征性DNA“梯谱”。(3)流式细胞计量术发现放射诱导HL60 细胞凋亡在照射后6h 已较明显,而且细胞凋亡百分比随着照射剂量增加而增加。TUNEL法检测细胞凋亡百分比值比DNA流式细胞分析的方法得到的值要小,但差异无显著意义。 结论 流式细胞计量术结合细胞形态学检查和( 或) 琼脂糖电泳能较好、简便、迅速地分析放射诱导HL60 展开更多
关键词 白血病 细胞凋亡 HL-60细胞 放射诱导 DNA
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酞胺哌啶酮对大鼠门脉高压血流动力学影响 被引量:1
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作者 王建华 蔡同年 +3 位作者 范跃祖 高萍 楼丽广 《上海铁道大学学报》 CAS 1999年第11期15-17,共3页
目的 评价酞胺哌啶酮对实验门脉高压大鼠的治疗作用及和肿瘤坏死因子的关系。方法 采用门脉缩窄门脉高压鼠模型(PVL)。PVL鼠从术后当天到术后2 周分别口服酞胺哌啶酮和水,于术后2 周时测定血流动力学改变和血浆肿瘤坏死因子(TNF)水平... 目的 评价酞胺哌啶酮对实验门脉高压大鼠的治疗作用及和肿瘤坏死因子的关系。方法 采用门脉缩窄门脉高压鼠模型(PVL)。PVL鼠从术后当天到术后2 周分别口服酞胺哌啶酮和水,于术后2 周时测定血流动力学改变和血浆肿瘤坏死因子(TNF)水平,并与对照组鼠进行比较。结果 酞胺哌啶酮能明显增加PVL鼠的平均动脉压,降低其门脉压力和血浆TNF水平。结论 酞胺哌啶酮通过降低TNF水平,改善门脉高压高动力循环状态。 展开更多
关键词 门脉高压症 酞胺哌啶酮 血流动力学 大鼠
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佛波酯对人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体的调节
15
作者 付华 +2 位作者 王国平 唐国忠 曹世龙 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期189-193,共5页
为探讨佛波酯对胃癌细胞肿瘤坏死因子(TNF)受体的调变机制。以标记的肿瘤坏死因子突变体为配体,用放射配体结合分析法和MTT比色法研究了佛波酯对TNF受体的调节以及对肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)细胞毒效应的影响。结... 为探讨佛波酯对胃癌细胞肿瘤坏死因子(TNF)受体的调变机制。以标记的肿瘤坏死因子突变体为配体,用放射配体结合分析法和MTT比色法研究了佛波酯对TNF受体的调节以及对肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)细胞毒效应的影响。结果表明:佛波酯可导致胃癌细胞(SGC7901)表面TNF受体数显著减少(由0.56×10-11nmol/细胞,下降到0.25×10-11nmol/细胞,P<0.01),而对受体的亲和力无影响;佛波酯不影响TNF-m的内化率、降解率和解离率,佛波酯也不改变胞浆TNF受体数目;佛波酯处理后的SGC7901细胞对肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)的耐受性显著增强。去除佛波酯后12h,TNF受体可恢复80%,其恢复率与胰酶处理组相似。 展开更多
关键词 胃肿瘤 肿瘤坏死因子 受体 调节 佛波酯
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外源性p16基因对wtp53型人肺腺癌细胞生长的影响 被引量:5
16
作者 付晓颖 张颂文 +3 位作者 申宗候 顾建新 曹世龙 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期102-104,共3页
目的探讨p16基因对人肺腺癌的作用及p16基因治疗肺腺癌的可能性。方法运用分子克隆技术构建重组人p16基因表达载体,以电穿孔法将p16基因导入到该基因缺失的wtp53型的人肺腺癌A549和H460细胞中,得到稳定表达... 目的探讨p16基因对人肺腺癌的作用及p16基因治疗肺腺癌的可能性。方法运用分子克隆技术构建重组人p16基因表达载体,以电穿孔法将p16基因导入到该基因缺失的wtp53型的人肺腺癌A549和H460细胞中,得到稳定表达p16的人肺腺癌细胞。详细研究p16基因对wtp53型人肺腺癌细胞周期的影响和细胞增殖的作用。结果导入p16基因能使人肺腺癌A549和H460细胞生长速度较对照细胞明显减慢,细胞周期阻滞在G1期,克隆形成率下降,致瘤性减少。 展开更多
关键词 P16基因 基因治疗 肺腺癌 癌细胞生长
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控制正常细胞对肺癌细胞P^(16)基因缺失的污染的方法的建立及其应用 被引量:6
17
作者 曹晓运 +3 位作者 田昱 傅晓颖 宋后燕 曹世龙 《中华结核和呼吸杂志》 CSCD 北大核心 1997年第3期136-140,共5页
目的建立一种能有效提高从混有正常细胞的肿瘤组织中检测P16基因纯合缺失的灵敏度的方法,以及探讨该基因的状态与肺癌临床病理的关系。方法将野生型DNA与P16基因纯合缺失的DNA按一定比例混合,并将其有限稀释,以不同量的... 目的建立一种能有效提高从混有正常细胞的肿瘤组织中检测P16基因纯合缺失的灵敏度的方法,以及探讨该基因的状态与肺癌临床病理的关系。方法将野生型DNA与P16基因纯合缺失的DNA按一定比例混合,并将其有限稀释,以不同量的DNA为模板,用聚合酶链反应(PCR)扩增P16基因第二外显子及内对照基因片断,在此基础上,以特定量肺癌DNA为模板,用相同的PCR条件对上述片断进行扩增,对扩增出的第二外显子行单链构型多态性(SSCP)分析。结果DNA模板为5ng,野生型DNA不超过总DNA40%时,不掩盖P16基因纯合缺失。小细胞肺癌,癌旁肺无P16基因纯合缺失及突变,52例非小细胞肺癌中有21例P16基因纯合缺失,3例第二外显子SSCP异常,其中伴淋巴结转移的非小细胞肺癌P16基因的纯合缺失率(72%)显著高于无淋巴结转移者(16.6%)。同时还发现P16基因的异常与非小细胞肺癌的临床病理分级及预后明显相关。P16基因缺失的患者术后存活时间显著低于无P16基因缺失者。结论控制PCR中模板的量有助于提高检测P16基因缺失的灵敏度。P16基因异常可能参与非小细胞肺癌的恶性进展。 展开更多
关键词 肺肿瘤 基因缺失 P16 聚合酶链反应
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糖皮质激素对人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体的调节 被引量:1
18
作者 付华 +1 位作者 王国平 曹世龙 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期81-83,共3页
用放射配体结合分析法和MTT比色法研究了地塞米松对胃癌细胞肿瘤坏死因子受体数目和亲和力以及肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)细胞毒效应的影响。结果表明:地塞米松可显著降低TNF受体的亲和力而不改变受体的数目,地塞米松明... 用放射配体结合分析法和MTT比色法研究了地塞米松对胃癌细胞肿瘤坏死因子受体数目和亲和力以及肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)细胞毒效应的影响。结果表明:地塞米松可显著降低TNF受体的亲和力而不改变受体的数目,地塞米松明显抑制TNF-m的内化、降解,并增加与其受体的解离。地塞米松作用后的胃癌细胞对TNF-m的抗性增加,提示地塞米松上述调节作用可能是其抗炎、抗内毒素休克的机制之一。 展开更多
关键词 胃肿瘤 癌细胞 肿瘤坏死因子 地塞米松
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肿瘤坏死因子突变体的碘标记及其质量的检测 被引量:1
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作者 王国平 +2 位作者 唐国忠 朱承谟 曹世龙 《核技术》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第5期284-287,共4页
用Iodogen法对肿瘤坏死因子突变体进行碘标记,用放射纸层析法及自身取代分析法对产物的放化纯度及比放射性活度进行了计算。结果表明:碘的利用率为72.76%,纯化后标记物的游离碘为2.12%,放化纯度为93.14%,... 用Iodogen法对肿瘤坏死因子突变体进行碘标记,用放射纸层析法及自身取代分析法对产物的放化纯度及比放射性活度进行了计算。结果表明:碘的利用率为72.76%,纯化后标记物的游离碘为2.12%,放化纯度为93.14%,比放射性活度为1.2TBq/g。标记后的肿瘤坏死因子突变体的细胞毒效应只下降4.38%,提示Iodogen法标记肿瘤坏死因子突变体可获良好效果。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 突变体 氯甘脲标记法 碘标记
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伴刀豆蛋白A对人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体的调节及对肿瘤坏死因子突变体细胞毒效应的影响
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作者 付华 +1 位作者 王国平 曹世龙 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 1996年第6期523-526,共4页
目的:探讨伴刀豆蛋白A(ConA)对人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体(TNFR)的调节机制及肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)细胞毒效应与TNFR之间的关系。方法:以125I-TNF-m作为放射配体,用放射配体结合分析法、M... 目的:探讨伴刀豆蛋白A(ConA)对人胃癌细胞肿瘤坏死因子受体(TNFR)的调节机制及肿瘤坏死因子突变体(TNF-m)细胞毒效应与TNFR之间的关系。方法:以125I-TNF-m作为放射配体,用放射配体结合分析法、MTT比色法对ConA作用前后的人胃癌细胞(SGC7901)TNFR的数目,亲和力,以及TNF-m的细胞毒效应进行了检测,结果:ConA可快速增加细胞表面TNF-m的结合位点(0.56×10-11对0.91×10-11nmol·细胞-1,P<0.01)而不影响受体的亲和力(Kd:2.78×10-10对2.63×10-10mol·L-1,P>0.5)。ConA不增加受体蛋白的合成和胞浆受体的数目;ConA作用组TNF-m的内化和降解(分别为1.24×10-6和0.18×10-6nmol)显著低于对照组的内化和降解(分别为0.6×10-6和0.07×10-6nmol);ConA作用组TNF-m对胃癌细胞的最大抑制率(8.4%)显著低于对照组TNF-m的最大抑制率(60%)、P<0.01。结论:伴刀豆蛋白A通过抑制TNFR的内化而增加膜TNFR的数目;TNF-m的生物效应与TNFR介导的信号传递(受体后? 展开更多
关键词 伴刀豆蛋白A 肿瘤坏死因子 受体 突变体 胃癌
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