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湖南省怀化地区白纹伊蚊核糖体18S rRNA和线粒体cox 1基因的序列测定及分析 被引量:11
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作者 李中波 侯强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第8期2736-2745,共10页
为探究湖南省怀化地区白纹伊蚊的基因变异、遗传多样性及其遗传进化关系,本试验以收集于怀化地区的30只白纹伊蚊为研究对象,利用PCR技术扩增其核糖体18S rRNA及细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并对其基因变异、遗传多样性及遗传... 为探究湖南省怀化地区白纹伊蚊的基因变异、遗传多样性及其遗传进化关系,本试验以收集于怀化地区的30只白纹伊蚊为研究对象,利用PCR技术扩增其核糖体18S rRNA及细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并对其基因变异、遗传多样性及遗传进化关系进行分析。结果显示,所获全部样品的18S rRNA和cox 1基因序列长度均为489和1004 bp;基于18S rRNA基因序列,怀化地区白纹伊蚊的种内差异为0~2.9%,种间差异为28.74%~61.46%;基于cox 1基因序列,怀化地区白纹伊蚊的种内差异为0~0.2%,种间差异为6.08%~12.65%。基于18S rRNA、cox 1基因序列所构建的进化树发现,来自于怀化市的白纹伊蚊全部位于同一分支上。结果表明,怀化地区白纹伊蚊之间存在一定程度的基因变异和遗传多样性,但它们之间的亲缘关系较近,且其18S rRNA、cox 1基因序列的种内差异小、种间差异大,可作为白纹伊蚊鉴定的理想遗传标记。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 18S rRNA cox 1基因 遗传多样性 生物进化
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鸡蛔虫COX2和NAD4rDNA的序列测定及分析 被引量:8
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作者 李淼 侯强 +3 位作者 蔡丝丝 李奔 李林波 侯利兰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期19-21,共3页
本试验旨在阐明湖南省鸡蛔虫分离株线粒体细胞色素C氧化酶第Ⅱ亚基(cox2)基因部分序列(pcox2)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位IV基因(nad4)部分序列(pnad4)的遗传变异情况。利用聚合酶链式反应(PCR)扩增鸡蛔虫的pcox2and pna... 本试验旨在阐明湖南省鸡蛔虫分离株线粒体细胞色素C氧化酶第Ⅱ亚基(cox2)基因部分序列(pcox2)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位IV基因(nad4)部分序列(pnad4)的遗传变异情况。利用聚合酶链式反应(PCR)扩增鸡蛔虫的pcox2and pnad4,应用clustalx1.81程序对序列进行比对,结果显示,所获得的cox2(pcox2)and nad4(pnad4)序列长度一致,为350bp(pcox2)and 400bp(pnad4)。由于鸡蛔虫pcox2and pnad4序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记,从而为鸡蛔虫的分类鉴定及进一步的分子流行病学调查提供了基础。 展开更多
关键词 鸡蛔虫 线粒体DNA cox2基因 nad4基因 种系发育关系
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不同地区褐黄血蜱的基因变异及遗传进化分析 被引量:8
3
作者 李中波 尧国民 +4 位作者 罗维 王湘 程天印 刘国华 侯强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第6期2150-2159,共10页
为探究不同区域褐黄血蜱的基因变异情况及其遗传进化关系,试验以采集自湖南、河南省的20只褐黄血蜱为研究对象,通过PCR扩增其内转录间隔区Ⅱ(ITS-2)和烟酰胺脱氢酶亚基Ⅰ(nad1)基因序列,并对所获序列进行基因变异分析;在所获ITS-2和nad... 为探究不同区域褐黄血蜱的基因变异情况及其遗传进化关系,试验以采集自湖南、河南省的20只褐黄血蜱为研究对象,通过PCR扩增其内转录间隔区Ⅱ(ITS-2)和烟酰胺脱氢酶亚基Ⅰ(nad1)基因序列,并对所获序列进行基因变异分析;在所获ITS-2和nad1基因序列的基础上,对不同地区褐黄血蜱的遗传进化关系进行分析,并利用ITS-2和nad1基因序列分别构建褐黄血蜱的系统进化树。结果显示,褐黄血蜱ITS-2基因序列长度均为1160 bp,nad1基因序列长度均为285 bp;两省褐黄血蜱ITS-2及nad1基因的种内差异分别为0~1.9%和0~0.4%;湖南省褐黄血蜱的种内差异分别为0~1.4%和0~0.4%,而河南省的种内差异分别为0~1.2%和0~0.4%;两省褐黄血蜱ITS-2及nad1基因的种间差异分别为37.0%~52.0%和13.6%~24.8%。系统进化树结果显示,所有来自于两省的褐黄血蜱共处于同一分支上。结果表明,来自于两省的褐黄血蜱之间均存在基因变异的现象,但湖南省褐黄血蜱的基因变异程度和遗传多样性均高于河南省;两省褐黄血蜱之间的亲缘关系较近,暗示两省褐黄血蜱之间有基因交流,未出现遗传分化。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 ITS-2基因 nad1基因 基因变异 遗传进化
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猪圆环病毒2型Cap蛋白部分基因序列与大肠杆菌LTB成熟肽基因的融合表达及免疫原性研究 被引量:4
4
作者 侯强 余兴龙 +5 位作者 李微 李润成 罗维 刘浩 尹恒 刘忠华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期847-851,共5页
为了获得猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)衣壳蛋白(Cap)基因3’端396 bp的片段与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)成熟肽编码区融合基因的高效表达,并检验重组蛋白的免疫保护效果。以含PCV-2全基因组的pMDT PCV-2质粒... 为了获得猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)衣壳蛋白(Cap)基因3’端396 bp的片段与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)成熟肽编码区融合基因的高效表达,并检验重组蛋白的免疫保护效果。以含PCV-2全基因组的pMDT PCV-2质粒为模板,用PCR的方法扩增PCV-2 Cap基因,并将其克隆到pET28a(+)中,构建得到pET-Cap质粒,利用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切切下Cap基因3’末端396 bp的片段,插入到pET-LTB原核表达质粒LTB基因的3’末端,从而构建pET-LTB△Cap原核表达质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS后,用IPTG诱导重组菌,用SDS-PAGE电泳和Western blot检测诱导物。表达产物经初步纯化后用昆明系小白鼠做免疫保护实验。结果表明:pET-LTB△Cap重组融合表达质粒在大肠杆菌中实现了高效表达,融合蛋白分子量约为29Ku,表达量约占菌体蛋白的36.67%,融合蛋白能被PCV-2阳性血清识别。攻毒后,所有小鼠临床表现正常。用PCR检测有1/8的免疫小鼠感染了PCV-2,而对照组8只小鼠都感染了PCV-21。PCV-2 Cap基因3’端396 bp的片段与LTB基因融合能实现高效表达,表达产物免疫的小白鼠可抵抗PCV-2的攻击此研究为PCV-2基因工程疫苗的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB) 融合表达 免疫原性
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一例鸡蛔虫病的诊断与防治 被引量:6
5
作者 李中波 蒋林波 +4 位作者 尧国民 罗维 李进军 胡辉 侯强 《湖北畜牧兽医》 2020年第3期18-19,共2页
介绍了湖南省怀化市其养殖场鸡蛔虫病的发病情况、临床症状、病理变化,最后采用阿笨达唑+烟叶丝对病鸡及健康鸡群进行驱虫,取得良好的效果。
关键词 蛔虫病 诊断 防治
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微小扇头蜱microRNA文库建立及miR-275靶蛋白Vg-2的生物信息学分析
6
作者 李中波 罗世民 +3 位作者 杨甜 侯强 舒鸣 黄翠琴 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期678-687,共10页
【目的】建立饱血状态雌性微小扇头蜱的microRNA文库,鉴定所含microRNA的种类,分析miR-275靶蛋白Vg-2的二、三级结构,检测其信号肽、跨膜结构域、磷酸化及糖基化位点,预测其优势抗原表位。【方法】以雌性、饱血状态的微小扇头蜱为研究对... 【目的】建立饱血状态雌性微小扇头蜱的microRNA文库,鉴定所含microRNA的种类,分析miR-275靶蛋白Vg-2的二、三级结构,检测其信号肽、跨膜结构域、磷酸化及糖基化位点,预测其优势抗原表位。【方法】以雌性、饱血状态的微小扇头蜱为研究对象,通过高通量测序技术建立其microRNA文库,利用软件miRDP及检索miRBase数据库,鉴定饱血状态雌性微小扇头蜱所含的microRNA种类;运用在线软件EXPASY、PRABI与SWISS-MODEL等分析Vg-2蛋白质理化性质,推断其二、三级结构;运用在线软件SignalP 5.0、TMHMM、NetPhos 3.1及NETCGlyc 1.0检测该蛋白的信号肽、跨膜结构域、磷酸化与糖基化位点;利用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL预测Vg-2蛋白的B、T细胞优势抗原表位。【结果】获得成熟的microRNA 383个,其中67个为已被鉴定和注释的microRNA,316个为新发现的microRNA;微小扇头蜱的Vg-2基因序列全长5040 bp,共编码1679个氨基酸;Vg-2蛋白为亲水性酸蛋白,分子大小为189.89 kDa,理论等电点(pI)为6.08,其二级结构以无规则卷曲为主要结构成分,而其三级结构却以β-折叠为主要结构成分;Vg-2蛋白存在268个磷酸位点,20个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构域,拥有58个B细胞优势抗原表位和8个T细胞优势抗原表位。【结论】在饱血状态雌性微小扇头蜱体内含有383个microRNA,受miR-275调控的Vg-2蛋白为结构不稳定的亲水性酸蛋白,具有良好的抗原性与免疫源性。 展开更多
关键词 微小扇头蜱 microRNA文库 miR-275 Vg-2蛋白 生物信息学 抗原表位
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一例牛肝片吸虫病的诊断与防治 被引量:5
7
作者 李中波 石剑锋 +5 位作者 尧国民 罗世民 罗维 李进军 胡辉 侯强 《湖北畜牧兽医》 2021年第2期15-16,共2页
牛肝片吸虫病主要在我国中南、东南部等地区流行,严重阻碍了我国养牛业的发展。在一例牛肝片吸虫病的诊治过程中,根据病原体的属性及流行特点,采用临床症状与分子检测相结合的方式对该病进行了诊断,并提出了科学合理的防治方法,以期为... 牛肝片吸虫病主要在我国中南、东南部等地区流行,严重阻碍了我国养牛业的发展。在一例牛肝片吸虫病的诊治过程中,根据病原体的属性及流行特点,采用临床症状与分子检测相结合的方式对该病进行了诊断,并提出了科学合理的防治方法,以期为临床诊疗该病提供参考。 展开更多
关键词 肝片吸虫病 诊断 治疗 预防
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一例疑似猪伪狂犬病的诊断与分析 被引量:5
8
作者 侯强 尧国民 +3 位作者 舒鸣 王湘 李中波 罗维 《畜禽业》 2019年第7期10-10,12,共2页
猪伪狂犬病(PR)是由猪伪狂犬病毒(PRV)感染引起的一种重要的传染病,可导致怀孕母猪流产、死胎,仔猪腹泻、呕吐和神经症状等,给我国养猪业造成巨大的经济损失。2019年4月初,怀化市某散养场从外地购入的仔猪爆发疑似PR的疫情,通过临床症... 猪伪狂犬病(PR)是由猪伪狂犬病毒(PRV)感染引起的一种重要的传染病,可导致怀孕母猪流产、死胎,仔猪腹泻、呕吐和神经症状等,给我国养猪业造成巨大的经济损失。2019年4月初,怀化市某散养场从外地购入的仔猪爆发疑似PR的疫情,通过临床症状和病理变化观察,结合实验室诊断,发病仔猪确诊为PRV感染。PCR及测序结果表明,引起该次疫情的PRV毒株,其gE基因序列与Genbank收录的PRV中国流行的河南株同源性最高,为99.7%,提示该毒株为变异株。通过对发病猪群紧急免疫PRV基因缺失弱毒疫苗有效地控制了该病的发生,研究对PR的诊断与防控提供借鉴。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病 诊断 GE基因 序列分析
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湖南和河南两省来源的褐黄血蜱遗传多样性及遗传进化关系分析 被引量:5
9
作者 李中波 尧国民 +4 位作者 罗维 王湘 程天印 刘国华 侯强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第19期90-95,共6页
为了探究湖南和河南两省来源的褐黄血蜱遗传多样性及遗传进化关系,试验采用PCR方法扩增来自于湖南、河南两省的20只褐黄血蜱的核糖体ITS-1及线粒体cox1基因序列,通过DNAStar、MegAlign、ClustalX、PhyML 3.0及MEGA 5.0软件分析其遗传多... 为了探究湖南和河南两省来源的褐黄血蜱遗传多样性及遗传进化关系,试验采用PCR方法扩增来自于湖南、河南两省的20只褐黄血蜱的核糖体ITS-1及线粒体cox1基因序列,通过DNAStar、MegAlign、ClustalX、PhyML 3.0及MEGA 5.0软件分析其遗传多样性及遗传进化关系。结果表明:褐黄血蜱ITS-1和cox1基因序列的长度分别为1500 bp和850 bp,经校准、对齐后的长度分别为1302 bp和800 bp;来自于湖南省褐黄血蜱ITS-1及cox1基因序列的种内差异分别为0~1.3%、0~0.4%;来自于河南省褐黄血蜱ITS-1、cox1基因序列的种内差异分别为0.1%~1.0%、0~0.1%,两省褐黄血蜱ITS-1、cox1基因序列的种内差异分别为0~1.3%、0~0.4%,种间差异分别为50.66%~52.77%、2.5%~14.3%;ITS-1基因序列的A+T和G+C含量分别为46.1%~46.3%、53.7%~53.9%;cox1基因序列的A+T和G+C含量分别为60.6%~62.6%、37.4%~39.4%;在构建的2个遗传进化树中,来自于湖南与河南两省的褐黄血蜱均处于一个分支上,两者亲缘关系较近。说明尽管来自于两省的褐黄血蜱之间均存在遗传变异现象,但亲缘关系较近,未出现遗传分化。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 ITS-1 cox1 遗传多样性 遗传进化
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O型口蹄疫病毒代表性抗原VP1基因的人工合成与表达及其免疫原性检测 被引量:4
10
作者 李润成 余兴龙 +4 位作者 白霞 侯强 罗维 刘忠华 向卫军 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期333-337,共5页
通过对GenBank近10年内收录的O型口蹄疫(FMD)病毒VP1基因序列的同源性比较分析,并根据中国、老挝、缅甸等国家FMDV流行毒株的基因序列,设计并合成了有群内抗原代表性的结构蛋白VP1全基因序列.将合成的序列克隆到原核表达载体pET-28a(+)... 通过对GenBank近10年内收录的O型口蹄疫(FMD)病毒VP1基因序列的同源性比较分析,并根据中国、老挝、缅甸等国家FMDV流行毒株的基因序列,设计并合成了有群内抗原代表性的结构蛋白VP1全基因序列.将合成的序列克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,构建了VP1的表达质粒pETVP1.SDS-PAGE和Western-blot分析表明,该质粒的BL21(DE3)LysS转化菌在IPTG诱导下可特异性表达VP1蛋白,该重组蛋白以包涵体的形式存在,相对分子质量约30 000,能与口蹄疫病毒(FMDV)阳性血清发生特异性反应.动物接种试验表明,重组蛋白能诱导小白鼠产生特异性抗FMDV抗体. 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 VP1基因 合成 表达 免疫原性
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湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及种系发育关系分析 被引量:3
11
作者 李中波 侯强 +1 位作者 李晖 舒鸣 《河南农业科学》 北大核心 2022年第4期130-137,共8页
为探究湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及其种系发育关系,以采自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫为研究对象,PCR扩增其核糖体18S rRNA、线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并分析其单倍型多态性及种系发育关系。结果表明,湘... 为探究湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及其种系发育关系,以采自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫为研究对象,PCR扩增其核糖体18S rRNA、线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并分析其单倍型多态性及种系发育关系。结果表明,湘西地区吕氏泰勒虫核糖体18S rRNA基因序列的长度为384 bp,含9个变异位点、7个单倍型(A1—A7),单倍型多样性Hd为0.775;cox1基因序列的长度为1 092 bp,存在2个变异位点、4个单倍型(B1—B4),单倍型多样性Hd为0.625;在18S rRNA+cox1重组的基因序列中,共含有11个变异位点、10个单倍型(C1—C10),单倍型多样性Hd为0.925;其中,A1、A4、B1、B3、B4、C1、C8与C9均为古老单倍型。系统发育分析结果显示,供试的16株羊源吕氏泰勒虫均处于系统发育树的同一分支上。这说明来自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫之间尽管存在一定程度的基因变异现象和单倍型多样性,但它们之间存在共同古老的单倍型,表明其个体之间和单倍型之间均具有较近的亲缘关系,未出现遗传分化。 展开更多
关键词 吕氏泰勒虫 18S rRNA cox1基因 基因变异 单倍型多样性 种系发育 湘西地区
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不同种群白纹伊蚊单倍型多态性、遗传分化及种系发育关系分析
12
作者 李中波 侯强 段德勇 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1452-1460,共9页
【目的】试验旨在探究湖南怀化地区不同种群白纹伊蚊单倍型多态性、遗传分化情况及种系发育关系。【方法】于湖南怀化地区采集30只白纹伊蚊样本,PCR扩增其核糖体18S rRNA及线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因部分序列。利用Clustal... 【目的】试验旨在探究湖南怀化地区不同种群白纹伊蚊单倍型多态性、遗传分化情况及种系发育关系。【方法】于湖南怀化地区采集30只白纹伊蚊样本,PCR扩增其核糖体18S rRNA及线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因部分序列。利用ClustalX软件对其变异位点进行分析;运用Dnasp 5.0、Network 4.6及Arlequin version 3.0软件进行单倍型多态性与遗传分化分析;利用PhyML 3.0及Mega 5.0软件对白纹伊蚊的种系发育关系进行分析。【结果】所获全部样本的18S rRNA和cox 1基因序列长度均为489和1004 bp。白纹伊蚊18S rRNA基因序列中共存在30个变异位点,17个单倍型(A1~A17,Hd=0.9149),其中单倍型A5为最古老的单倍型,白纹伊蚊18S rRNA的基因分化系数(Gst)、遗传分化系数(Fst)和基因流(Nm)分别为0.05614、0.24001和0.792;白纹伊蚊的cox 1基因序列中共存在2个变异位点,3个单倍型(B1~B3,Hd=0.1908),其中单倍型B1为最古老的单倍型,白纹伊蚊cox 1基因的Gst、Fst和Nm分别为0.05000、0.04762和4.999。系统发育树中,来源于怀化地区的30只白纹伊蚊均分别处于2个发育树的一个分支。【结论】来源于湖南怀化地区的白纹伊蚊个体和种群之间存在一定程度基因变异和单倍型多态性现象,但各单倍型及其个体之间具有较近的亲缘关系,且两种群白纹伊蚊个体间发生了较为频繁的基因交流,未出现遗传分化。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 单倍型多态性 基因流 遗传分化 种系发育关系
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一例鸡绦虫与前殖吸虫病混合感染的诊断与防治 被引量:3
13
作者 李中波 罗春光 +3 位作者 尧国民 罗世民 侯强 杨旭 《中国动物保健》 2022年第4期129-130,共2页
鸡绦虫病主要是由隶属于戴文科赖利属的几种绦虫寄生于鸡的小肠内所引起的并以腹泻、体重减轻、生长迟缓、产蛋量下降、肠道阻塞等为特征性临床症状的一类常见的寄生虫病;前殖吸虫病是由隶属于前殖科前殖属的几种前殖吸虫寄生于鸡、鸭... 鸡绦虫病主要是由隶属于戴文科赖利属的几种绦虫寄生于鸡的小肠内所引起的并以腹泻、体重减轻、生长迟缓、产蛋量下降、肠道阻塞等为特征性临床症状的一类常见的寄生虫病;前殖吸虫病是由隶属于前殖科前殖属的几种前殖吸虫寄生于鸡、鸭等禽类的输卵管、直肠、腔上囊和泄殖腔内所引起的以输卵管炎、产蛋机能紊乱及排石灰样稀粪为病理特征的一类家禽寄生虫病。两病呈世界性分布,既可单独致病也可混合感染。一旦混合感染,患鸡主要表现出精神萎靡、渐进性消瘦、生长发育迟缓、产蛋量下降、产畸形蛋及排石灰样的稀粪;后期时常并发腹膜炎而导致病鸡死亡。此外,鸡绦虫病与前殖吸虫病的流行均具有明显的季节性,两病常暴发于温暖潮湿的季节,严重影响鸡的生长发育,极大阻碍了世界养禽业的发展。在本次诊疗过程中,笔者结合临床症状、病理剖解及实验室检查结果确诊该病为鸡绦虫与前殖吸虫混合感染。在此基础上,采用吡喹酮+阿苯达唑+甲砜霉素对鸡群进行驱虫和治疗,取得良好的治疗效果。 展开更多
关键词 绦虫病 前殖吸虫病 诊断 治疗 预防
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大肠杆菌野生株F18菌毛蛋白粘附亚单位基因的克隆与表达 被引量:4
14
作者 罗维 余兴龙 +3 位作者 白霞 李润成 侯强 尹恒 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期298-301,共4页
根据Z26520中fedF序列设计1对引物,从发病仔猪的腹泻粪便分离获得的大肠杆菌中扩增得到fedF基因,经纯化、连接、转化,将其成功克隆到pMD18-T中,所克隆fedF基因序列与GenBank中收录的其他fedF基因序列的同源性达97.8%~99.2%.另设计1对引... 根据Z26520中fedF序列设计1对引物,从发病仔猪的腹泻粪便分离获得的大肠杆菌中扩增得到fedF基因,经纯化、连接、转化,将其成功克隆到pMD18-T中,所克隆fedF基因序列与GenBank中收录的其他fedF基因序列的同源性达97.8%~99.2%.另设计1对引物,利用基因工程方法将所克隆的fedF的编码序列亚克隆到表达载体pBV220中,转化大肠杆菌BL21(DE3)获得表达重组菌.测序结果表明,插入编码序列与预期序列一致.SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析表明,重组菌在诱导后可以表达特异性的相对分子质量为30 100的FedF蛋白. 展开更多
关键词 大肠杆菌 fedF基因 克隆 表达
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黑斑蛙“白内障”病原菌分离及药敏试验 被引量:4
15
作者 王湘 侯强 +2 位作者 舒鸣 白玲 张光友 《畜禽业》 2019年第12期13-13,16,共2页
为探明湖南怀化芷江某青蛙养殖场患病黑斑蛙(白内障)的致病原,对患病蛙进行解剖后利用营养琼脂培养基对病原进行分离纯化,并用细菌16SrRNA引物进行PCR基因扩增。同时,采用19种抗菌药物对分离细菌进行药敏试验。通过试验,对黑斑蛙养殖户... 为探明湖南怀化芷江某青蛙养殖场患病黑斑蛙(白内障)的致病原,对患病蛙进行解剖后利用营养琼脂培养基对病原进行分离纯化,并用细菌16SrRNA引物进行PCR基因扩增。同时,采用19种抗菌药物对分离细菌进行药敏试验。通过试验,对黑斑蛙养殖户进行指导性用药,减少养殖户的经济损失的同时为病害的防治提供了可靠的依据。 展开更多
关键词 黑斑蛙 气单胞菌 分离鉴定 药敏试验
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湖南省鸡蛔虫线粒体nad4基因序列的测定及分析 被引量:4
16
作者 李淼 蔡丝丝 +3 位作者 姚明锐 刘升 李许梅 侯强 《现代农业科技》 2012年第4期321-321,325,共2页
为阐明鸡蛔虫湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4(nad4)基因部分序列(pnad4)遗传变异情况,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增鸡蛔虫的pnad4,并对序列进行比对。结果表明:所获得的pnad4序列长度均为408 bp。由于鸡蛔虫p... 为阐明鸡蛔虫湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位4(nad4)基因部分序列(pnad4)遗传变异情况,利用聚合酶链式反应(PCR)扩增鸡蛔虫的pnad4,并对序列进行比对。结果表明:所获得的pnad4序列长度均为408 bp。由于鸡蛔虫pnad4序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记,从而为鸡蛔虫的分类鉴定及进一步的分子流行病学调查奠定基础。 展开更多
关键词 鸡蛔虫 线粒体DNA pnad4基因 序列分析
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不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系分析
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作者 李中波 侯强 +1 位作者 舒鸣 程天印 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期60-66,共7页
为了探究不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系,本试验以采自于湖南、河南两省的褐黄血蜱(各10只,共20只)为研究对象,通过PCR扩增其细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cox1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅳ(nad4)基... 为了探究不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系,本试验以采自于湖南、河南两省的褐黄血蜱(各10只,共20只)为研究对象,通过PCR扩增其细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cox1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅳ(nad4)基因序列,对其单倍型多态性(Hd)、遗传分化和种系发育关系进行分析。结果显示,cox 1基因序列(849 bp)包含4个变异位点,5个单倍型(h=5,A1~A5,Hd=0.653),其基因分化系数(Gst)=0.061,遗传分化系数(Fst)=-0.047,基因流(Nm)=-5.625;nad 4基因序列(626 bp)包含3个变异位点,3个单倍型(h=3,B1~B3,Hd=0.363),其Gst=0.004,Fst=0.074,Nm=3.125;cox 1+nad 4基因序列包含7个变异位点,7个单倍型(h=7,C1~C7,Hd=0.768),其Gst=-0.010,Fst=-0.015,Nm=-16.560;在所构建的种系发育树中,20只褐黄血蜱均处于种系发育树的一个分支。结果表明,湖南、河南两省的褐黄血蜱个体之间虽表现出单倍型多态性,但它们之间具有较近的亲缘关系,尚未出现遗传分化。 展开更多
关键词 褐黄血蜱 cox 1 nad 4 基因变异 单倍型多态性 遗传分化 种系发育关系
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湘西山区猪2型圆环病毒血清学调查 被引量:3
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作者 李进军 侯强 +3 位作者 庞培 毛玉 邓治邦 薛立群 《经济动物学报》 CAS 2016年第3期159-162,167,共5页
2013年8月至2014年12月,从湖南湘西未接种任何疫苗(除猪瘟苗外)的山区小型猪场、农村传统饲养户以及部分野猪场采集了1 390份猪血清样品,通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),血清学检测猪2型圆环病毒(Porci... 2013年8月至2014年12月,从湖南湘西未接种任何疫苗(除猪瘟苗外)的山区小型猪场、农村传统饲养户以及部分野猪场采集了1 390份猪血清样品,通过酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),血清学检测猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV2)的血清抗体,对已确认为PCV2抗体阳性的血清进行猪蓝耳病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),以及猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的血清抗体检测。检测结果显示PCV2血清抗体阳性率,小型猪场的为86%、农村传统饲养猪为78%、土猪场为69%、野猪场为25%。结果表明:湘西山区小型猪场、农村传统饲养户、部分野猪场的PCV2血清抗体阳性率不同,这种抗体阳性率的高低可能与饲养密度、饲养方式、品种和环境有关。本调查通过对湘西周边山区猪群的PCV2血清抗体阳性进行检测及统计分析,发现山区微小猪场及农户散养猪只具有较高的抗体阳性率,而抗体阳性率在一定程度上代表着PCV2的感染率。因此,加强PCV2免疫接种,将有利于防控PCV2相关性疾病的发生以及其他疾病继发的感染。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 血清学调查 抗体检测 酶联免疫吸附试验
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黄芪复方剂提取物总黄酮对四氯化碳致大鼠肝损伤保护作用研究 被引量:3
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作者 郭青春 周卫国 +3 位作者 侯强 李纯华 李国民 何秋玉 《中兽医医药杂志》 2012年第4期13-17,共5页
目的:探讨黄芪复方剂提取物总黄酮(EFA)对CCl4致大鼠肝氧化损伤的保护作用及机制。方法:将雄性SD大鼠60只随机分成4组,即灌胃灭菌生理盐水空白对照组和模型组、联苯双酯(100 mg/kg)溶液阳性药物对照组、黄芪复方剂提取物总黄酮(200 mg/... 目的:探讨黄芪复方剂提取物总黄酮(EFA)对CCl4致大鼠肝氧化损伤的保护作用及机制。方法:将雄性SD大鼠60只随机分成4组,即灌胃灭菌生理盐水空白对照组和模型组、联苯双酯(100 mg/kg)溶液阳性药物对照组、黄芪复方剂提取物总黄酮(200 mg/kg)组。除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外,其余各组腹腔注射四氯化碳玉米油(2 mL/kg)造成大鼠肝氧化损伤模型,后分别于12、24 h将相应大鼠处死,检测血清中ALT、AST、ALB含量与肝组织中MDA、SOD、GSH-PX活性。结果:与模型组比较,经黄酮药物组预防性治疗后,AST、ALT转氨酶明显降低(P<0.05),而ALB含量增加不明显;同时肝脏中MDA含量明显降低(P<0.05),SOD、GSH-PX活性接近空白组,且明显高于模型组(P<0.01)。结论:EFA对四氯化碳造成的大鼠肝氧化损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 黄芪复方剂提取物总黄酮 抗氧化性 丙氨酸氨基转移酶 天门冬氨酸氨基转移酶 白蛋白 丙二醛 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶
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基于ITS基因分析扩展莫尼茨绦虫种系发育关系 被引量:3
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作者 侯强 李进军 《经济动物学报》 CAS 2019年第2期107-109,114,共4页
为研究扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列的遗传变异情况,并利用ITS序列探讨扩展莫尼茨绦虫与其它带科绦虫的种群发育关系,本研究利用PCR对扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列进行扩增、测序及分析。结果表明:16株扩展莫尼茨绦虫分离... 为研究扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列的遗传变异情况,并利用ITS序列探讨扩展莫尼茨绦虫与其它带科绦虫的种群发育关系,本研究利用PCR对扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列进行扩增、测序及分析。结果表明:16株扩展莫尼茨绦虫分离株核糖体ITS序列长度一致,为1462~1473bP,且分离株与基因库扩展莫尼茨绦虫位于同一大分支,可以与其它带科绦虫有效鉴别。说明ITS序列种内较为保守,种间差异较大,可以作为扩展莫尼茨绦虫的种间遗传变异研究的分子标记。 展开更多
关键词 扩展莫尼茨绦虫 核糖体DNA ITS基因 序列分析 种系发育关系
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