DNA修复相关基因甲基化与肺癌A549细胞顺铂化疗耐药的相关性研究 被引量：15

1

作者 骆海军 李丽丽 +5 位作者 李伟 张青梅 陶建蜀 高波 余宗涛 张吉才 《中华实用诊断与治疗杂志》 2014年第2期122-124,共3页

目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-Cde)对顺铂耐药株肺癌A549/DDP细胞DNA修复相关基因hMLH1、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响。方法 A549细胞(A549细胞组)、A549/DDP细胞(A549/DDP组)、A549/DD... 目的探讨5-氮杂-2脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-Cde)对顺铂耐药株肺癌A549/DDP细胞DNA修复相关基因hMLH1、MGMT基因启动子区DNA甲基化状态及其表达的影响。方法 A549细胞(A549细胞组)、A549/DDP细胞(A549/DDP组)、A549/DDP细胞5、10、20μmol/L 5-Aza-Cde组,分别采用甲基化特异性PCR检测细胞hMLH1、MGMT基因甲基化状态,反转录-PCR法检测用药前、后细胞hMLH1mRNA、MGMT mRNA表达情况。结果A549细胞组hMLH1基因呈非甲基化状态且高表达,MGMT呈部分甲基化状态且高表达,A549-DDP细胞组hMLH1、MGMT基因均呈高甲基化状态,mRNA表达下调,10、20μmol/L 5-Aza-Cde组hMLH1和MGMT均呈非甲基化状态;A549/DDP细胞组、5μmol/L 5-Aza-Cde组hMLH1mRNA与MGMT mRNA表达量均低于A549细胞组(P<0.05),20μmol/L 5-Aza-Cde组与A549细胞组比较差异无统计学意义(P>0.05);10μmol/L 5-Aza-Cde组MGMT mRNA表达量低于A549细胞组(P<0.05),hMLH1mRNA表达量与A549细胞组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hMLH1、MGMT基因甲基化修饰程度与mRNA表达有一定相关性,hMLH1、MGMT基因甲基化可能是肺癌A549细胞对顺铂耐药的因素之一。 展开更多

关键词 DNA甲基化 耐药 5-氮杂-2’脱氧胞苷 顺铂

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多重耐药鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶基因检测及分布研究 被引量：13

2

作者 吕军 侯玲俐 +4 位作者 杨宏伟 赵颖 张吉才 高波 余宗涛 《中华实用诊断与治疗杂志》 2010年第9期932-934,共3页

目的:了解本院鲍曼不动杆菌多重耐药现状,指导临床用药;分析多重耐药菌株的超广谱β-内酰胺酶基因存在状况和菌株的亲缘性,揭示鲍曼不动杆菌的耐药机制。方法:自临床分离的鲍曼不动杆菌205株,采用纸片扩散(K-B)法进行药物敏感试验,用PC... 目的:了解本院鲍曼不动杆菌多重耐药现状,指导临床用药;分析多重耐药菌株的超广谱β-内酰胺酶基因存在状况和菌株的亲缘性,揭示鲍曼不动杆菌的耐药机制。方法:自临床分离的鲍曼不动杆菌205株,采用纸片扩散(K-B)法进行药物敏感试验,用PCR方法检测20株多重耐药鲍曼不动杆菌的超广谱β-内酰胺酶基因。用多分子标志分型法,以13种基因为分子标志行检测结果的样本聚类分析,检测菌株的亲源性。结果:205株鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦耐药率18%,对其他抗生素耐药率均在80%左右。PCR检测20株多重耐药鲍曼不动杆菌,bla TEM基因阳性率为50%,bla PER基因阳性率70%,bla VEB基因阳性率10%,bla CARB基因阳性率10%,bla GIM基因阳性率5%,bla DHA基因阳性率15%;未检出bla SHV,bla OXA,bla GES,bla SPM,bla VIM,bla IMP,oprD2基因。聚类分析结果提示本院鲍曼不动杆菌存在院内感染传播且存在暴发性流行。结论:分离菌株对多黏菌素全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦敏感性相对较高,对碳青酶烯类抗生素敏感性较低。多重耐药鲍曼不动杆菌携带bla TEM,bla PER,bla VEB,bla CARB,bla GIM,bla DHA等多种超广谱β-内酰胺酶基因。临床应根据药物敏感试验结果合理应用抗生素。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 多重耐药 院内感染 耐药机制

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肺癌组织细胞FHIT基因启动子甲基化和转录表达 被引量：8

3

作者 余宗涛 袁亚莉 +2 位作者 张吉才 高琼 王元元 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期498-500,共3页

目的探讨FHIT(fragile histidine triad,脆性组氨酸三联体)基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法用实时定量PCR检测FHIT mRNA在肺癌组织、肺癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytid... 目的探讨FHIT(fragile histidine triad,脆性组氨酸三联体)基因表达水平及其启动子CpG岛甲基化状态与肺癌发生发展的关系。方法用实时定量PCR检测FHIT mRNA在肺癌组织、肺癌旁组织与去甲基化剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2’-deoxycytidine、5-Aza-CdR)处理前后A549细胞株中的表达,用甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测FHIT启动子CpG岛甲基化状态。结果FHIT mRNA在肺癌旁组织中全部表达,在肺癌组织中表达缺失率为48.89%(22/45),且表达量低于正常肺组织(t=-15.851,P<0.001),但在不同年龄和性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类的差异无显著性;FHIT基因启动子在肺癌组织中发生甲基化的频率为40%(18/45)、在癌旁组织中频率8.7%(2/23)(χ2=7.184,P<0.01),18份启动子区甲基化的肺癌标本中,10份同时伴有mRNA表达缺失。结论在肺癌组织中,FHIT基因启动子甲基化频率明显升高,其表达缺失或下调,提示FHIT启动子甲基化可在肺癌发生和发展中起一定作用。 展开更多

关键词 肺癌 CPG岛甲基化 MS-PCR FHIT基因

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头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌β-内酰胺酶基因研究 被引量：8

4

作者 杨宏伟 侯玲俐 +5 位作者 吕军 张吉才 陶建蜀 陈武 高波 余宗涛 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期3092-3095,共4页

目的了解十堰地区鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因存在状况,揭示多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法回顾性分析2009年鲍氏不动杆菌的耐药率,PCR检测20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因。结果 2009年分离到鲍氏不... 目的了解十堰地区鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因存在状况,揭示多药耐药鲍氏不动杆菌的耐药机制。方法回顾性分析2009年鲍氏不动杆菌的耐药率,PCR检测20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌的β-内酰胺酶基因。结果 2009年分离到鲍氏不动杆菌205株,除头孢哌酮/舒巴坦的耐药率在18.0%,黏菌素全部敏感之外,对其他抗菌药物的耐药率均约90.0%;20株头孢哌酮/舒巴坦敏感鲍氏不动杆菌通过PCR检出blaTEM、blaPER、blaVEB、blaCARB、blaGIM、blaDHA;未检出blaSHV、blaOXA、blaGES、blaSPM、blaVIM、blaIMP、oprD2基因。结论目前分离株对黏菌素全部敏感,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感性相对较高,对其他抗菌药物的敏感性较低,多药耐药鲍氏不动杆菌携带多种β-内酰胺酶基因,临床应根据药敏结果合理使用抗菌药物。 展开更多

关键词 医院感染 鲍氏不动杆菌 多药耐药 耐药基因

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HBV感染与肝癌组织CDKN2A基因甲基化关系的研究 被引量：7

5

作者 张吉才 余宗涛 +4 位作者 吕军 李海平 冯景 吴健民 胡丽华 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第12期892-895,共4页

目的:探讨HBV感染和CDKN2A异常甲基化之间的潜在关联及其相互作用在肝癌形成过程中的作用。方法:对44例肝癌患者癌组织及癌旁组织CDKN2A甲基化状况、血清HBV感染标志物等到进行了检测分析。血清HBV、HCV感染标志物采用全自动化学发光分... 目的:探讨HBV感染和CDKN2A异常甲基化之间的潜在关联及其相互作用在肝癌形成过程中的作用。方法:对44例肝癌患者癌组织及癌旁组织CDKN2A甲基化状况、血清HBV感染标志物等到进行了检测分析。血清HBV、HCV感染标志物采用全自动化学发光分析仪进行检测。采用酚、氯仿法抽提组织DNA,用CDKN2A甲基化特异性引物进行PCR扩增,并检测特异性产物。患者按HBV感染情况进行分组,统计分析。结果:CDKN2A甲基化产物在肝癌组织中的总检出率为70.5%(31/44)。其中,HBV相关肝癌组和非病毒相关肝癌组CDKN2A甲基化率为90.6%(29/32)和16.7%(2/12),P=0.000。对HBV相关肝癌进一步分组分析,HBsAg+/HBeAg+、HBsAg+/HBeAg-及HBcAb+/HBcAb-三组,三组之间差异无统计学意义(P=0.568)。经非参数相关和logistic回归分析,发现:CDKN2A甲基化与性别、肿瘤分化程度无明显相关(R2=0.11,P=0.650),而与HBV感染,特别是HBsAg密切相关(R2=0.37,P=0.02)。结论:在肝癌形成过程中,HBV可能通过促进抑癌基因,如CDKN2A等的异常甲基化,使CDKN2A失活,肝细胞正常的生长调控机制失常,形成肝癌,这也可能是HBV导致肝癌形成的机制之一。 展开更多

关键词 肝肿瘤/病毒学 肝肿瘤/遗传学 肝炎病毒 乙型 DNA甲基化

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LC-MS/MS用于辅助诊断嗜铬细胞瘤1例

6

作者 肖雪 余宗涛 陆桥 《湖北医药学院学报》 CAS 2024年第1期85-86,F0002,共3页

嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PCC)是一种起源于嗜铬组织的肿瘤,肿瘤组织会阵发性或持续性分泌过量的儿茶酚胺[1-2]。对该疾病的常规诊断需结合影像及术后肿块免疫组化结果进行,而对于无高血压、头痛、心悸、多汗表现的患者,其术前诊断... 嗜铬细胞瘤(pheochromocytoma,PCC)是一种起源于嗜铬组织的肿瘤,肿瘤组织会阵发性或持续性分泌过量的儿茶酚胺[1-2]。对该疾病的常规诊断需结合影像及术后肿块免疫组化结果进行,而对于无高血压、头痛、心悸、多汗表现的患者,其术前诊断较为困难。本文报道1例采用具有高检测灵敏度的液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)对患者血液和尿液中儿茶酚胺(catecholamines,CAs)及代谢产物进行定量分析,用于嗜铬细胞瘤的辅助诊断,以供参考。 展开更多

关键词 嗜铬细胞瘤 儿茶酚胺 液相色谱-串联质谱法

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宫颈癌中多药耐药相关蛋白基因表达及意义 被引量：6

7

作者 高波 杨丰美 +2 位作者 余宗涛 张吉才 陶建蜀 《中华实用诊断与治疗杂志》 2012年第1期41-43,共3页

目的探讨多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance-associated protein,MRP)基因在宫颈癌组织中的表达情况及临床意义。方法采用RT-PCR技术检测47份宫颈癌组织和12份正常宫颈组织中MRP基因mRNA的表达情况。结果正常宫颈组织中MRP mRNA... 目的探讨多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance-associated protein,MRP)基因在宫颈癌组织中的表达情况及临床意义。方法采用RT-PCR技术检测47份宫颈癌组织和12份正常宫颈组织中MRP基因mRNA的表达情况。结果正常宫颈组织中MRP mRNA的表达为0.20±0.11,宫颈癌组织中为0.51±0.28,宫颈癌组织MRP基因表达高于正常宫颈组织(t=6.04,P<0.01)。MRP表达在肿瘤直径、有无淋巴转移、不同肿瘤分化程度、组织学分型及不同临床分期上差异无统计学意义(P>0.05)。结论 MRP基因可能参与宫颈癌原发性耐药的产生,检测其表达对制订治疗方案有一定价值。 展开更多

关键词 宫颈癌 逆转录聚合酶链反应 多药耐药相关蛋白基因 表达

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非小细胞肺癌中肺耐药蛋白的表达及与临床病理特征的关系 被引量：6

8

作者 余宗涛 高琼 +2 位作者 高波 吕军 张吉才 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第9期1042-1044,共3页

目的探讨肺耐药蛋白(LRP)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征的关系。方法运用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)检测47例肺癌组织和14例正常组织LRP mRNA的表达。结果 LRP mRNA在癌组织、正常组织中表达阳性率分别为74.5%(35/... 目的探讨肺耐药蛋白(LRP)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与临床病理特征的关系。方法运用荧光定量-聚合酶链反应(FQ-PCR)检测47例肺癌组织和14例正常组织LRP mRNA的表达。结果 LRP mRNA在癌组织、正常组织中表达阳性率分别为74.5%(35/47)、14.3%(2/14),正常组织中LRP mRNA表达值为0.19±0.17,癌组织中为0.58±0.24,癌组织中LRP mRNA表达明显高于正常组织,差异有统计学意义(t=5.72,P=0.001);LRP mRNA表达与患者年龄、性别、组织学分型、淋巴转移及临床分期无关(P>0.05),而与肿瘤分化程度有关(P=0.001)。结论 NSCLC中存在原发性耐药现象,LRP mR-NA高表达在NSCLC对顺铂的原发性耐药中可能起重要作用。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 癌 非小细胞肺 抗药性 多药

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肺癌患者血浆miR-3151表达水平与临床病理特征的相关性研究 被引量：5

9

作者 赵格 高琼 +2 位作者 余宗涛 彭春艳 张吉才 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第5期28-32,共5页

目的探讨肺癌患者血浆中miR-3151的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法收集十堰市太和医院2018年10月~2019年10月确诊的120例肺癌患者(肺癌组)及同期120例体检健康者(对照组)的血浆样本,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PC... 目的探讨肺癌患者血浆中miR-3151的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法收集十堰市太和医院2018年10月~2019年10月确诊的120例肺癌患者(肺癌组)及同期120例体检健康者(对照组)的血浆样本,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测两组血浆miR-3151的表达水平,分析血浆miR-3151的表达与肺癌患者临床病理特征的关系。受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)用以评估血浆miR-3151单独及联合细胞角蛋白19片段(cytokeratin-19 fragment,CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)和癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)对肺癌的诊断价值。结果肺癌组血浆miR-3151(nmol/L)显著高于对照组[86.356(19.893,305.155)vs 8.871(4.620,14.037)],差异有统计学意义(Z=-10.039,P<0.001)。血浆miR-3151的表达上调与肺癌患者淋巴结转移(Z=-2.336,P=0.019)和临床分期(Z=-2.628,P=0.009)相关。血浆miR-3151,CYFRA21-1,NSE及CEA单独用于诊断肺癌的曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0.875(95%CI:0.830~0.919),0.704(95%CI:0.639~0.770),0.769(95%CI:0.707~0.830)和0.632(95%CI:0.562~0.702),当miR-3151联合NSE时,诊断肺癌的AUC增加至0.909(95%CI:0.872~0.946),较单独诊断时有明显提高。结论miR-3151在肺癌患者血浆中表达上调,与肿瘤进展相关,有成为肺癌诊断标志物的潜能。 展开更多

关键词 miR-3151 肺癌 病理特征 诊断

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血浆miRNA-544a表达水平在肺癌诊断及治疗中的意义 被引量：6

10

作者 程欣怡 余宗涛 +2 位作者 金丽 彭春艳 张吉才 《肿瘤研究与临床》 CAS 2018年第12期830-833,837,共5页

目的探讨血浆miRNA-544a(miR-544a)表达水平检测在肺癌诊断与治疗中的临床价值。方法收集十堰市太和医院2017年6月至2018年3月确诊的Ⅰ~Ⅱ期肺癌患者110例,其中初诊未治疗50例,肺癌根治术后1周33例,同等剂量化疗1周后27例。收集肺部良... 目的探讨血浆miRNA-544a(miR-544a)表达水平检测在肺癌诊断与治疗中的临床价值。方法收集十堰市太和医院2017年6月至2018年3月确诊的Ⅰ~Ⅱ期肺癌患者110例,其中初诊未治疗50例,肺癌根治术后1周33例,同等剂量化疗1周后27例。收集肺部良性结节患者35例及同期健康体检者64名为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测健康人、肺癌患者及肺部良性结节患者外周血浆的miR-544a表达水平。50例初诊患者中,非小细胞肺癌42例,小细胞肺癌8例。用Mann-WhitneyU检验比较各组血浆中miR-544a的表达水平,应用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评估miR-544a诊断肺癌的效能。结果血浆中miR-544a在初诊未治疗肺癌组、术后1周组、化疗1周组、健康对照组与肺部良性结节组中的表达水平[中位数(P25,P75)]分别为1.40nmol/L(0.55nmol/L,8.76nmol/L)、33.52nmol/L(3.64nmol/L,250.47nmol/L)、8.87nmol/L(0.68nmol/L,125.43nmol/L)、0.31nmol/L(0.17nmol/L,1.19nmol/L)、1.04nmol/L(0.31nmol/L,4.62nmol/L),未治疗肺癌组与其他4组分别比较,差异均有统计学意义(Z=-4.483,P<0.001;Z=-4.274,P<0.001;Z=-2.562,P=0.01;Z=-2.152,P=0.031)。非小细胞肺癌组与小细胞肺癌组miR-544a的表达水平分别为1.40nmol/L(0.66nmol/L,8.76nmol/L)、1.37nmol/L(0.26nmol/L,36.97nmol/L),非小细胞肺癌组与健康对照组和肺部良性结节组比较,差异均有统计学意义(Z=-4.463,P<0.001;Z=-2.026,P=0.043)。相对健康人,miR-544a诊断肺癌的ROC曲线AUC为0.841,灵敏度为87.5%,特异度为68.0%;相对肺部良性结节患者,miR-544a诊断肺癌的AUC为0.638,灵敏度为45.7%,特异度为80.0%。结论血浆中miR-544a表达水平在早期肺癌的诊断及鉴别诊断中有一定意义,尤其是对非小细胞肺癌的诊断意义较大。血浆中miR-544a表达在手术或化疗后增高,提示其表达可能与肺癌的发生、发展相关,miR-544a可能成为一个新的癌症治疗靶点。 展开更多

关键词 肺肿瘤 miRNA-544a 诊断 治疗

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肺癌患者血浆、支气管肺泡灌洗液中FHIT基因启动子异常甲基化的检测 被引量：3

11

作者 余宗涛 袁亚莉 +2 位作者 张吉才 高琼 周有利 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1704-1708,共5页

目的探讨肺癌组织及外周血浆、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluids,BALF)中脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因启动子异常甲基化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异PCR方法对肺癌患者癌组织、... 目的探讨肺癌组织及外周血浆、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavagefluids,BALF)中脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因启动子异常甲基化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异PCR方法对肺癌患者癌组织、癌旁组织及相应血浆、BALF进行FHIT异常甲基化检测。结果45例肺癌组织中,FHIT基因启动子异常甲基化率为40%(18/45),相应血浆中FHIT的甲基化检出率为31.11%(14/45),BALF检出率为33.33%(15/45),而癌旁组织中的FHIT启动子甲基化检出率为8.70%(2/23)、正常对照血浆、非肺癌患者BALF中未检出甲基化,只检出未甲基化的FHIT。血浆、BALF中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.01);FHIT异常甲基化与肿瘤淋巴结转移显著相关(P<0.01);但与患者年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度及肿瘤分类的差异无显著性(P>0.05)。结论血浆FHIT基因异常甲基化改变的检测在肺癌的特异诊断和淋巴结恶性转移等方面有一定的应用价值。 展开更多

关键词 肺癌 DNA甲基化 FHIT基因 血浆 PCR

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宫颈癌中MRP、GST-π的表达及意义 被引量：4

12

作者 高波 陶建蜀 +3 位作者 李海平 余宗涛 吕军 张吉才 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第10期2151-2154,共4页

目的:检测多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance-associated protein,MRP)、胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase-π,GST-π)在宫颈癌(cervical cancer,CC)中的表达,探讨其在宫颈癌多药耐药(multi-drug resistance,MDR... 目的:检测多药耐药相关蛋白(multi-drug resistance-associated protein,MRP)、胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase-π,GST-π)在宫颈癌(cervical cancer,CC)中的表达,探讨其在宫颈癌多药耐药(multi-drug resistance,MDR)形成中的作用和相互关系。方法:运用荧光定量PCR(flurescence quantitative-PCR,FQ-PCR)检测47例宫颈癌组织及12例正常宫颈组织中耐药基因MRP、GST-πmRNA的表达情况,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果:MRP、GST-π在宫颈癌中的表达分别为0.51±0.28、0.44±0.24,正常宫颈组织中的表达分别为0.20±0.11、0.18±0.10,耐药基因在宫颈癌中的表达高于正常宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。MRP、GST-π表达与病人的淋巴转移、肿瘤分化程度、临床分期之间差异无统计学意义(P>0.05)。MRP与GST-π之间的表达具有统计学意义。结论:MRP、GST-π基因高表达可能在宫颈癌原发性耐药中起重要作用,检测MRP、GST-π基因的表达情况对预测宫颈癌的化疗效果、协助临床选择化疗方案可能有一定意义。 展开更多

关键词 宫颈癌 MRP基因 GST-Π基因 荧光定量PCR 表达

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原发性肝癌组织及细胞系中DNMT mRNA表达的检测及意义 被引量：3

13

作者 高波 李海平 +2 位作者 余宗涛 吕军 张吉才 《检验医学》 CAS 2013年第8期716-719,共4页

目的检测原发性肝癌组织及细胞系Hep3B、HepG2中甲基化转移酶(DNMT)mRNA的表达,分析乙型肝炎病毒(HBV)感染与DNMT mRNA表达之间的关系。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测44例原发性肝癌组织及2种肝癌细胞系中DNMT1、DNMT2、DN... 目的检测原发性肝癌组织及细胞系Hep3B、HepG2中甲基化转移酶(DNMT)mRNA的表达,分析乙型肝炎病毒(HBV)感染与DNMT mRNA表达之间的关系。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测44例原发性肝癌组织及2种肝癌细胞系中DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B、GAPDH基因mRNA表达水平。结果 32例血清HBV标志物阳性患者肝癌组织中DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA表达水平明显高于12例血清HBV标志物阴性患者肝癌组织(P<0.05)。DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B mRNA在HBV相关细胞系Hep3B中相对表达分别为1.26±0.15、0.76±0.15、1.26±0.20、0.66±0.13,在非HBV相关肝癌细胞系HepG2中的相对表达分别为0.64±0.11、0.62±0.12、0.48±0.12、0.36±0.10,Hep3B细胞系中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B mRNA表达高于HepG2细胞系(P<0.01)。结论 HBV相关原发性肝癌组织和肝癌细胞系中存在DNMT mRNA表达增高;HBV感染可能刺激DNMT mRNA的表达,进而促进抑癌基因的甲基化。 展开更多

关键词 甲基化转移酶 乙型肝炎病毒 荧光定量聚合酶链反应 表达

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MDR1基因的表达与肝癌生物学行为指标的关系 被引量：4

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作者 李海平 高波 +3 位作者 余宗涛 吕军 李文翠 张吉才 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第1期129-132,共4页

目的:通过对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中多药耐药基因(multid-rug resistance gene 1,MDR1)表达和生物学行为指标HBV、AFP、AST的检测,探讨肝癌中MDR1的表达特点及其与肝癌生物学行为的相互关系。方法:运用荧光定量PCR(flures... 目的:通过对肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中多药耐药基因(multid-rug resistance gene 1,MDR1)表达和生物学行为指标HBV、AFP、AST的检测,探讨肝癌中MDR1的表达特点及其与肝癌生物学行为的相互关系。方法:运用荧光定量PCR(flurescence quantitative-PCR,FQ-PCR)技术检测MDR1基因在51例肝癌组织和10例正常肝组织中的表达,分析MDR1基因的表达与肝癌生物学特性之间的关系。结果:MDR1在肝癌中的表达为0.55±0.27,正常肝组织中的表达为0.23±0.10,(P<0.05)。表达与肿瘤Ed-mondson分级呈正相关(P<0.05)。HBV感染、AFP阳性、AST升高与MDR1基因表达明显呈正相关(r=0.463、0.473、0.299)。结论:肝癌中存在原发性耐药的现象,MDR1基因高表达在肝癌原发性耐药中可能起重要作用;HBV的检测可以作为肝癌化疗耐药的参考指标之一,血浆中AFP水平、AST变化可以作为动态监测MDR1表达的参考指标。 展开更多

关键词 多药耐药基因 肝癌 HBV感染 AFP 表达

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肝癌患者p16基因甲基化与DNMTs表达相关性分析 被引量：4

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作者 张吉才 余宗涛 +3 位作者 高波 吕军 骆海军 李海平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第13期991-994,共4页

目的:研究p16基因启动子区域异常甲基化所导致的基因表达异常在肝癌形成过程中的作用,探讨p16基因甲基化与DNMTs(DNMT1、DNMT2、DNMT3A和DNMT3B)表达之间的相关性。方法:检测肝癌患者癌组织、癌旁组织和肝硬化组织中p16基因的异常甲基... 目的:研究p16基因启动子区域异常甲基化所导致的基因表达异常在肝癌形成过程中的作用,探讨p16基因甲基化与DNMTs(DNMT1、DNMT2、DNMT3A和DNMT3B)表达之间的相关性。方法:检测肝癌患者癌组织、癌旁组织和肝硬化组织中p16基因的异常甲基化状态及p16、DNMTs基因mRNA的表达水平;采用甲基化特异性PCR技术检测甲基化状态,荧光定量技术检测mRNA的表达。结果:p16基因在肝癌组织、肝硬化组织和癌旁组织中的甲基化率分别为70.5%(31/44)、37.1%(13/35)和9.1%(4/44),肝癌组织和肝硬化组织中的甲基化改变与癌旁组织比较差异有统计学意义,P<0.01。31例甲基化阳性组织中17例p16基因表达降低或缺失,13例甲基化阴性组织中2例基因表达降低或缺失,甲基化阳性与阴性的p16基因表达水平存在明显差异。癌组织和肝硬化组织中4种DNMT mRNA水平均高于相应癌旁组织。其中DNMT1、DNMT3A和DNMT3BmRNA的表达水平差异有统计学意义,DNMT1:P值分别为0.009和0.020;DNMT3A:P值分别为0.005和0.010;DNMT3B:P值分别为0.039和0.036。DNMT2mRNA的表达水平虽然高于相应癌旁组织,但差异无统计学意义,P值分别为0.120和0.350。DNMT1、DNMT 3A和DNMT3B的表达与p16甲基化有相关性,P值分别为0.013、0.025和0.041。结论:p16基因甲基化是肝癌的早期、频发事件,其改变是其基因表达下降甚至失活的重要原因。DNMTs活性的改变可能促进p16基因的异常甲基化。 展开更多

关键词 肝肿瘤 甲基化水平 P16基因 DNA甲基转移酶 基因表达

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肝癌组织中DNA甲基转移酶基因表达的分析 被引量：4

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作者 李海平 余宗涛 +2 位作者 范金波 高波 张吉才 《临床肝胆病杂志》 CAS 2013年第7期525-528,共4页

目的分析肝癌患者癌组织、癌旁组织、肝硬化组织中甲基转移酶(DNMT)基因的表达情况。方法应用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测44例分期及分化程度不同的肝癌患者癌组织、癌旁组织和35例肝硬化组织中DNMT基因mRNA的表达水平。不同组间DNMT表达... 目的分析肝癌患者癌组织、癌旁组织、肝硬化组织中甲基转移酶(DNMT)基因的表达情况。方法应用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测44例分期及分化程度不同的肝癌患者癌组织、癌旁组织和35例肝硬化组织中DNMT基因mRNA的表达水平。不同组间DNMT表达水平的差异采用ANOVA分析。结果与癌旁组织相比,癌组织及肝硬化组织中4种DNMTs mRNA表达水平均高于相应癌旁组织;肝硬化组织及癌组织中DNMT1的平均表达水平明显高于癌旁组织(癌组织P<0.01、肝硬化组织P=0.02);DNMT2水平虽比相应组织高,但没有统计学意义(癌组织P=0.12、肝硬化组织P=0.35);DNMT3A与DNMT3B的表达水平也明显高于相应癌旁组织(DNMT3A:癌组织P<0.01、肝硬化组织P=0.01;DNMT3B:癌组织P=0.03、肝硬化组织P<0.05)。不同年龄、性别、分化程度和分级肝癌中DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B表达水平差异无统计学意义(P=0.23、0.45、0.32、0.36)。结论肝癌患者癌组织及硬化组织中DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA明显高于癌旁组织;DNMT表达与肝癌发生或发展可能有关。 展开更多

关键词 DNA修饰甲基酶类 肝肿瘤 肝硬化

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肺癌患者RASSF1A启动子甲基化状态及其基因表达水平 被引量：3

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作者 余宗涛 袁亚莉 +2 位作者 张吉才 高琼 吕军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第9期1011-1014,共4页

目的探讨肺癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)启动子CpG岛甲基化状态和基因表达水平与肺癌发生的关系。方法用甲基化特异性PCR检测RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态,实时定量PCR检测RASSF1A mRNA的表达水平。结果在肺癌组织中RASSF1A启动子甲... 目的探讨肺癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)启动子CpG岛甲基化状态和基因表达水平与肺癌发生的关系。方法用甲基化特异性PCR检测RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态,实时定量PCR检测RASSF1A mRNA的表达水平。结果在肺癌组织中RASSF1A启动子甲基化频率为53.33%(24/45),在正常肺组织中发生甲基化的频率为13.04%(3/23)(P<0.05)。正常肺组织中RASSF1A mRNA全部表达,肺癌组织中表达缺失率为28.89%(13/45),且表达量低于正常肺组织(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类中其表达量无显著差异;RASSF1A甲基化与其mRNA表达水平下降密切相关。结论肺癌中RASSF1A基因启动子甲基化频率明显升高,其表达普遍下调或缺失,提示RASSF1A启动子甲基化在肺癌发生、发展中起一定作用。 展开更多

关键词 肺癌 RASSF1A 启动子 甲基化 表达

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肺癌患者PTEN基因启动子高甲基化的检测 被引量：4

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作者 余宗涛 高琼 +2 位作者 吕军 张吉才 袁亚莉 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第8期855-858,共4页

目的探讨肺癌患者组织、外周血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)启动子异常基因化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异性PCR方法检测组织、血浆及BALF中的PTEN基因启动子区CpG岛甲基化。结果45例... 目的探讨肺癌患者组织、外周血浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)启动子异常基因化状况及其在肺癌诊断中的价值。方法用甲基化特异性PCR方法检测组织、血浆及BALF中的PTEN基因启动子区CpG岛甲基化。结果45例肺癌患者中,PTEN基因启动子异常甲基化率组织为26.67%(12/45)、血浆为15.56%(7/45),BALF为22.22%(10/45);而非肺癌组织、正常对照血浆、非肺癌患者BALF中未检出甲基化;血浆、BALF中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.01)。结论血浆、BALF中PTEN基因异常甲基化改变的检测在肺癌的早期特异诊断等方面有一定的价值。 展开更多

关键词 肺癌 CPG岛甲基化 甲基化特异性聚合酶链反应 张力蛋白同源的磷酸酶基因

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食管鳞癌组织中TIG1基因甲基化及其mRNA表达的研究 被引量：4

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作者 童强 刘晓波 +5 位作者 罗和生 李胜保 余宗涛 张吉才 高波 蒙建超 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期2278-2282,共5页

目的:探讨他扎罗汀诱导基因1(tazarotene-induced gene-1,TIG1)基因甲基化及表达与食管鳞癌发生、发展的关系。方法:采用甲基化特异性PCR检测43例食管鳞癌组织、20例癌旁组织和15例正常组织中TIG1基因甲基化状态;实时荧光定量PCR法法检... 目的:探讨他扎罗汀诱导基因1(tazarotene-induced gene-1,TIG1)基因甲基化及表达与食管鳞癌发生、发展的关系。方法:采用甲基化特异性PCR检测43例食管鳞癌组织、20例癌旁组织和15例正常组织中TIG1基因甲基化状态;实时荧光定量PCR法法检测TIG1 mRNA的表达。结果:食管鳞癌组织TIG1基因启动子甲基化率为25.6%(11/43),癌旁组织5.0%(1/20),正常组织中未检测到其甲基化,差异有统计学意义(P<0.05);其甲基化水平与患者性别、年龄、肿瘤生长部位和分化程度无关(P>0.05),但与患者TNM分期(P<0.01)及淋巴结转移(P<0.05)有关。鳞癌组织TIG1 mRNA显著低于癌旁组织(P<0.05)及正常组织(P<0.01),甲基化组织TIGI mRNA表达显著低于非甲基化组织(P<0.01)。结论:甲基化可能是食管鳞癌中TIG1基因失活的重要机制,与患者病理分期及淋巴结转移有关。 展开更多

关键词 食管肿瘤 甲基化 他扎罗汀诱导基因-1 甲基化特异性PCR

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肝细胞癌中耐药基因的表达及意义 被引量：4

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作者 李海平 陶建蜀 +3 位作者 高波 余宗涛 李文翠 张吉才 《临床肝胆病杂志》 CAS 2011年第9期972-975,共4页

目的通过对肝细胞癌(HCC)中3种耐药基因MDR1、MRP、GST-π的检测,探讨肝细胞癌中耐药基因的表达特点及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测3种耐药基因在51例肝细胞癌组织和10例正常肝组织中的表达。结果 (1)MDR1、... 目的通过对肝细胞癌(HCC)中3种耐药基因MDR1、MRP、GST-π的检测,探讨肝细胞癌中耐药基因的表达特点及临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测3种耐药基因在51例肝细胞癌组织和10例正常肝组织中的表达。结果 (1)MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中的表达分别为0.55±0.27、0.62±0.29、0.64±0.31,正常肝组织中的表达分别为0.23±0.10、0.25±0.07、0.26±0.12,耐药基因在肝细胞癌中的表达高于正常肝组织,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)耐药基因的表达与肿瘤Edmondson分级呈正相关(P<0.05);(3)MRP与GST-π的表达相关。结论肝细胞癌中存在有原发性耐药的现象,且多种机制并存。MDR1、MRP、GST-π在肝细胞癌中有较高的表达。联合检测对制定科学有效的治疗方案有一定价值。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 基因表达

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