钩藤对致痫大鼠海马脑片诱发场电位的影响 被引量：34

1

作者 徐淑梅 何津岩 +2 位作者 林来祥 郑开俊 仇晓菁 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期259-261,共3页

目的 :研究钩藤对癫痫模型海马脑片诱发场电位的影响。方法 :以毛果芸香碱致痫大鼠为实验对象 ,采用脑片旁滴注给药 ,用细胞外玻璃微电极记录方法 ,观察钩藤对癫痫模型离体海马脑片CA1区锥体细胞诱发群锋电位(populationspike,PS)的影... 目的 :研究钩藤对癫痫模型海马脑片诱发场电位的影响。方法 :以毛果芸香碱致痫大鼠为实验对象 ,采用脑片旁滴注给药 ,用细胞外玻璃微电极记录方法 ,观察钩藤对癫痫模型离体海马脑片CA1区锥体细胞诱发群锋电位(populationspike,PS)的影响。结果 :给予钩藤后使致痫大鼠海马脑片PS幅度平均降低 2 7.64% ,平均 8.71min恢复(n =14,P <0 .0 1)。结论 :钩藤能降低致痫大鼠海马脑片CA1区顺向诱发PS幅度 ,提示钩藤对中枢神经系统的突触传递过程有明显的抑制效应 。 展开更多

关键词 钩藤 癫痫 海马脑片 群锋电位 药理

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柴胡对癫痫模型电活动的调制 被引量：18

2

作者 徐淑梅 郑开俊 +2 位作者 何津岩 仇晓菁 林来祥 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期294-296,共3页

目的 :研究柴胡对癫痫发作的影响。方法 :以家兔和大鼠为实验对象 ,用毛果芸香碱致痫 ,采用脑电图和细胞外玻璃微电极记录技术 ,观察柴胡对癫痫模型大脑皮层放电及海马脑片场电位的影响。结果 :腹腔注射柴胡后可使癫痫发作次数及发作持... 目的 :研究柴胡对癫痫发作的影响。方法 :以家兔和大鼠为实验对象 ,用毛果芸香碱致痫 ,采用脑电图和细胞外玻璃微电极记录技术 ,观察柴胡对癫痫模型大脑皮层放电及海马脑片场电位的影响。结果 :腹腔注射柴胡后可使癫痫发作次数及发作持续时间显著减少 ,发作间隔时间显著延长 ,(P <0 .0 5 ) ,脑片旁滴注柴胡后使致痫大鼠海马脑片诱发场电位幅度平均降低 2 0 .4 1% ,恢复时间平均为 6 .86min ,(P <0 .0 1)。结论 :柴胡注射液能明显抑制癫痫模型电活动 。 展开更多

关键词 柴胡 癫痫模型 电活动 调制 脑电图 场电位 中药治疗

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构建医学生思想政治教育教学体系的探索与实践——以天津医科大学为例 被引量：18

3

作者 何津岩 袁立军 +3 位作者 孙雨霞 魏屹晗 郭睿 李晓霞 《医学教育管理》 2020年第5期447-451,共5页

医学生是健康中国战略的践行者,承载国家医学事业发展的未来。强化对医学生的思想政治教育,是培养德高医粹医学人才的重要保障。充分发挥课程育人主渠道作用,加强医学院校各类课程与思想政治理论课的协同发展,坚持知识传授与价值引领相... 医学生是健康中国战略的践行者,承载国家医学事业发展的未来。强化对医学生的思想政治教育,是培养德高医粹医学人才的重要保障。充分发挥课程育人主渠道作用,加强医学院校各类课程与思想政治理论课的协同发展,坚持知识传授与价值引领相结合、理论和实践相结合,引导学生学思悟践、知行合一,是医学生思政教育的重要环节。以天津医科大学为例,介绍构建医学生思想政治教育教学体系的探索与实践,探讨医学生思政教育的有效路径。 展开更多

关键词 医学生 思政课程 课程思政

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高等院校课程思政专业课程建设的调研与分析 被引量：13

4

作者 孙雨霞 何津岩 +1 位作者 穆德超 李晓霞 《中国高等医学教育》 2020年第1期65-66,共2页

高等医学教育要把立德树人作为人才培养的中心环节,专业课程应结合专业特点,不断完善课程思政专业课程建设,实现全程育人,全方位育人。通过对天津医科大学立项建设的27门课程思政专业课进行效果调研和分析,为课程思政建设提供有效数据分... 高等医学教育要把立德树人作为人才培养的中心环节,专业课程应结合专业特点,不断完善课程思政专业课程建设,实现全程育人,全方位育人。通过对天津医科大学立项建设的27门课程思政专业课进行效果调研和分析,为课程思政建设提供有效数据分析,以便更快更广泛地推动课程思政专业课建设。 展开更多

关键词 高等教育 课程思政 调研

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桂枝对致痫大鼠海马CA1区诱发场电位的影响 被引量：7

5

作者 徐淑梅 何津岩 +2 位作者 林来祥 郑开俊 仇晓菁 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期916-918,共3页

目的　探讨桂枝对癫痫模型海马脑片诱发场电位的影响。方法　以毛果芸香碱致痫大鼠为实验对象 ,用细胞外玻璃微电极记录方法 ,观察桂枝对癫痫模型离体海马脑片 CA1区锥体细胞诱发群峰电位 (population spike,PS)的影响。结果　桂枝提取... 目的　探讨桂枝对癫痫模型海马脑片诱发场电位的影响。方法　以毛果芸香碱致痫大鼠为实验对象 ,用细胞外玻璃微电极记录方法 ,观察桂枝对癫痫模型离体海马脑片 CA1区锥体细胞诱发群峰电位 (population spike,PS)的影响。结果　桂枝提取液使致痫大鼠海马脑片 PS幅度平均降低 2 8.73% ,平均 16 .8m in恢复。结论　桂枝能降低致痫大鼠海马脑片 CA1区顺向诱发 PS幅度 。 展开更多

关键词 桂枝 癫痫 海马脑片 群峰电位 大鼠 中医药治疗

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孤束核微注射5-羟色胺系统药物对大鼠睡眠-觉醒的影响及机制 被引量：7

6

作者 姜岩岩 徐淑梅 何津岩 《天津医药》 CAS 北大核心 2009年第3期209-211,I0004,共4页

目的:探讨孤束核(NST)微注射5-羟色胺(5-HT)系统药物对大鼠睡眠-觉醒的影响及其机制。方法:选用雄性SD大鼠,分7组,孤束核分别微注射5-羟基色氨酸(5-HTP)、非特异性5-HT受体阻断剂麦角新碱(MS)、5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)激动剂8-OH-DPAT... 目的:探讨孤束核(NST)微注射5-羟色胺(5-HT)系统药物对大鼠睡眠-觉醒的影响及其机制。方法:选用雄性SD大鼠,分7组,孤束核分别微注射5-羟基色氨酸(5-HTP)、非特异性5-HT受体阻断剂麦角新碱(MS)、5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)激动剂8-OH-DPAT、5-HT1AR拮抗剂spiperone、cAMP、cAMP依赖的蛋白激酶A(PKA)拮抗剂H89和生理盐水(NS)后,采用光电脑电机记录脑电和肌电;采用免疫组化ABC法检测NST处5-HT1AR及5-HT表达情况。结果:与处理前相比,NS组和MS组大鼠睡眠-觉醒各期差异均无统计学意义,5-HTP组、8-OH-DPAT组和H89组给药后均显示觉醒期(W)缩短,异相睡眠(PS)延长(P<0.05或P<0.01),8-OH-DPAT组和H89组慢波睡眠(SWS)延长(P<0.01或P<0.05);spiperone组和cAMP组W延长(P<0.01或P<0.05),SWS缩短(P<0.01或P<0.05),spiperone组PS缩短(P<0.05)。免疫组化结果显示,与NS组相比,5-HTP组的5-HT1AR阳性细胞数较多,5-HT能神经纤维末梢5-HT表达增强,MS组则结果相反。结论:作为睡眠诱发区,孤束核很可能是通过5-羟色胺作用于5-HT1AR,使cAMP生成减少,PKA磷酸化减少而发挥使觉醒减少、睡眠增加的生物学效应。 展开更多

关键词 孤束核 血清素 受体 血清素 5-HT1A 睡眠 觉醒 大鼠 Sprague-Dawley

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疫情背景下医学在线教学质量的分析和建议 被引量：8

7

作者 袁立军 魏屹晗 +2 位作者 郭睿 李晓霞 何津岩 《高校医学教学研究（电子版）》 2020年第3期28-32,I0001-I0004,共9页

新冠肺炎疫情防控期间,全国实行“停课不停教、停课不停学”,大规模开展在线教学。为及时总结医学在线教学经验,不断提升在线教学质量,本文查阅了22篇医学院校的在线教学质量报告,分析了当前医学在线教学现状,梳理了目前在线教学面临的... 新冠肺炎疫情防控期间,全国实行“停课不停教、停课不停学”,大规模开展在线教学。为及时总结医学在线教学经验,不断提升在线教学质量,本文查阅了22篇医学院校的在线教学质量报告,分析了当前医学在线教学现状,梳理了目前在线教学面临的问题,并结合天津医科大学一个月来的在线教学实践经验,提出了对在线教学的思考和建议。 展开更多

关键词 新型冠状病毒肺炎 在线教学 医学院校 实践

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医学院校教师课程思政教学能力提升路径研究 被引量：1

8

作者 章楠 孙雨霞 +2 位作者 何津岩 田正 王岚 《中华医学教育杂志》 2024年第1期19-23,共5页

目的分析医学院校教师课程思政教学能力现状,探究医学院校教师组织承诺与自尊在工作投入与课程思政教学能力关系中的作用路径。方法2022年7月,采用便利抽样方法,以某医学院校239名教师为研究对象,调查其课程思政教学能力、组织承诺、自... 目的分析医学院校教师课程思政教学能力现状,探究医学院校教师组织承诺与自尊在工作投入与课程思政教学能力关系中的作用路径。方法2022年7月,采用便利抽样方法,以某医学院校239名教师为研究对象,调查其课程思政教学能力、组织承诺、自尊与工作投入的状况,采用Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis H非参数检验和Spearman相关分析进行数据分析;构建结构方程模型分析并验证课程思政教学能力、组织承诺、自尊和工作投入之间的作用路径。结果医学院校教师课程思政教学能力评分为118.0(23.0)分。教师课程思政教学能力评分在有无课程思政激励政策[119.0(20.0)分比113.0(24.5)分]、有无课程思政组织支持[119.0(20.3)分比108.0(19.5)分]、同事参与课程思政教学积极性的高低[121.0(17.0)分比110.0(15.0)分]、学生对课程思政教学是否支持[121.0(20.0)分比111.0(18.0)分]的差异均具有统计学意义(均P<0.05)。教师的组织承诺、自尊、工作投入与其课程思政教学能力之间存在正相关(r=0.34~0.61,P<0.001);组织承诺和自尊在工作投入和课程思政教学能力之间起平行中介作用,中介效应值分别为0.23和0.08。结论医学院校教师课程思政教学能力总分处于中等偏上水平。医学院校可以通过制定课程思政激励政策、完善课程思政组织支持、提高教师参与课程思政积极性和改善学生对课程思政教学的态度来提升教师课程思政教学能力。教师可以通过加大对课程思政教学的工作投入来提高组织承诺与自尊,进而促进其课程思政教学能力的提升。 展开更多

关键词 院校 医学 课程思政 教学能力 工作投入 组织承诺 自尊

原文传递

钩藤对家兔癫癇模型电活动的调制 被引量：4

9

作者 郑开俊 徐淑梅 +2 位作者 何津岩 仇晓菁 林来祥 《天津医药》 CAS 北大核心 2003年第1期35-36,共2页

目的:研究钩藤对癫癇发作的影响。方法:采用脑电图描记术,观察钩藤对毛果芸香碱致癇家兔大脑皮层放电的影响。结果:腹腔注射钩藤后可使癫(?)发作次数及发作持续时间显著减少,发作间隔时间显著延长(P<0.05)。结论:钩藤注射液能明显抑... 目的:研究钩藤对癫癇发作的影响。方法:采用脑电图描记术,观察钩藤对毛果芸香碱致癇家兔大脑皮层放电的影响。结果:腹腔注射钩藤后可使癫(?)发作次数及发作持续时间显著减少,发作间隔时间显著延长(P<0.05)。结论:钩藤注射液能明显抑制癫痫模型电活动,提示钩藤具有抗癇作用。 展开更多

关键词 钩藤 癫痫 脑电描记术

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新冠疫情影响下医学生综合素养培养的实践与思考

10

作者 袁立军 穆得超 +2 位作者 郭睿 何津岩 李晓霞 《中国高等医学教育》 2024年第5期33-35,共3页

受新冠疫情影响,天津医科大学推进医学综合素养以疫情防控为实践“现场”的在线教学,取得不错的教学效果。随着疫情的有效控制,医疗工作回归正常,为维系医学生从医的信念和职业责任,提出几点思考和意见。

关键词 新冠疫情 综合素养培养 教学实践与思考

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医学生自尊、一般自我效能感与PBL学习成绩关系研究 被引量：4

11

作者 闫景瑞 曲之毅 +1 位作者 邸红军 何津岩 《中国高等医学教育》 2021年第4期10-11,共2页

目的:分析某医学院校临床医学专业学生的自尊、一般自我效能感与PBL学习成绩三者之间的关系,为提高PBL学习效果和改进PBL教学方法提供科学依据。方法:采用整群抽样的方法,抽取中国华北某医科大学临医学专业学生312人为研究对象进行调查... 目的:分析某医学院校临床医学专业学生的自尊、一般自我效能感与PBL学习成绩三者之间的关系,为提高PBL学习效果和改进PBL教学方法提供科学依据。方法:采用整群抽样的方法,抽取中国华北某医科大学临医学专业学生312人为研究对象进行调查,收回有效问卷294份。主要测量工具包括一般自我效能感量表(GSES)和自尊量表(SEI)。统计方法为t检验和相关分析。结果:(1)一般自我效能感、自尊与PBL成绩存在显著正相关关系;(2)一般自我效能感对PBL有非常显著的预测作用;(3)自尊在一般自我效能与PBL成绩间不起中介作用。结论:提升医学生的一般自我效能感,可能是提高学生自主学习能力和PBL教学效果的有效策略之一。 展开更多

关键词 医学生 自尊 一般自我效能感 PBL

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后疫情时代学生在线学习行为分析与策略研究

12

作者 张鹏 孙雨霞 +1 位作者 何津岩 程杰 《中国高等医学教育》 2023年第11期7-9,共3页

目的:研究高校学生在线学习行为,分析在线学习行为因素对学习效果的影响程度并提出相关建议。方法:选择天津医科大学2019级临床医学(“5+3”一体化)专业的学生共5个班级145人为研究对象,经过数据采集、专家咨询以及问卷调查设定在线学... 目的:研究高校学生在线学习行为,分析在线学习行为因素对学习效果的影响程度并提出相关建议。方法:选择天津医科大学2019级临床医学(“5+3”一体化)专业的学生共5个班级145人为研究对象,经过数据采集、专家咨询以及问卷调查设定在线学习行为因素指标,汇总分析学生在线学习行为数据进行并通过Person相关性检验和逐步多元线性回归分析,获得各行为因素指标对学习效果的影响程度。结果:在线学习行为因素的13个二级指标中,学生预习情况与最终学习成绩无显著相关性(P>0.05),视频学习完成率(β=0.313)、章节测验平均分(β=0.277)、课堂互动(β=0.236)、在线交流(β=0.199)、作业平均分(β=0.144)、在线学习时长(β=0.112)等因素与期末成绩有显著相关性(P<0.05)。结论:建设优质视频资源、培养学生自主学习能力、增强在线教学互动交流并提升在线课堂气氛有利于提高学生学习效果。 展开更多

关键词 在线学习 学习行为

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重组pEGFP-C2-p100质粒构建及表达 被引量：2

13

作者 何津岩 东莉洁 +6 位作者 葛林 赵钢 邵洁 陆燕欣 李晓冬 姚智 杨洁 《天津医科大学学报》 2008年第2期135-137,共3页

目的:将人类p100基因定向连入pEGFP-C2质粒,使p100蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,为进一步研究p100蛋白的功能及定位奠定实验基础。方法:采用EcoRI和BamHI双酶切方法,从pSG5-p100质粒中获得p100蛋白的cDNA全长;将该cDNA连接... 目的:将人类p100基因定向连入pEGFP-C2质粒,使p100蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,为进一步研究p100蛋白的功能及定位奠定实验基础。方法:采用EcoRI和BamHI双酶切方法,从pSG5-p100质粒中获得p100蛋白的cDNA全长;将该cDNA连接入pEGFP-C2质粒。将构建成功的pEGFP-C2-p100质粒转染入HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达。结果:(1)将该质粒进行双酶切鉴定可见p100片段。(2)转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:(1)p100 cDNA全长成功载入pEGFP-C2质粒。(2)p100蛋白可与绿色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达。 展开更多

关键词 人类p100蛋白 PEGFP-C2 重组质粒 融合蛋白

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人类P100蛋白表达抑制稳定株的建立及其对HeLa细胞周期的影响 被引量：1

14

作者 何津岩 葛林 +5 位作者 邵洁 赵钢 东莉洁 方建飞 姚智 杨洁 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期240-243,共4页

目的构建针对人类P100(hP100)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒,转染后筛选P100表达抑制的稳定细胞株并鉴定其表达情况;同时检测其对细胞周期的影响。方法设计针对hP100基因的siRNA序列,构建pGenesil-shRNA-hP100质粒(... 目的构建针对人类P100(hP100)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)质粒,转染后筛选P100表达抑制的稳定细胞株并鉴定其表达情况;同时检测其对细胞周期的影响。方法设计针对hP100基因的siRNA序列,构建pGenesil-shRNA-hP100质粒(smallhairpinRNA,shRNA,小发夹RNA),经测序鉴定后转染入宫颈癌细胞HeLa;经G418筛选出稳定株;Western印迹检测稳定株之抑制率。流式细胞术检测hP100蛋白表达抑制对细胞周期的影响。结果成功构建了针对hP100的siRNA质粒,并用之筛选出hP100蛋白表达抑制的稳定株,瞬时转染及稳定株hP100表达明显降低。流式细胞术显示抑制hP100蛋白表达使G1期细胞比例增加,S期和G2/M期细胞比例降低。结论RNAi(RNA interference,RNA干扰)可持续稳定地抑制人类P100蛋白的表达,人类P100蛋白表达抑制对细胞周期有调节作用。 展开更多

关键词 人类P100蛋白 RNA干扰 稳定株 细胞周期

原文传递

医学院校网络通识课教育现状分析及问题研究 被引量：3

15

作者 张鹏 李晓霞 +1 位作者 孙雨霞 何津岩 《中国高等医学教育》 2020年第1期59-60,共2页

目的:通过分析研究医学院校本科生对通识课程的需求现状及问题,为通识教育改革提供理论依据。方法:汇总分析2018年春季学生选课结果,并对选课学生进行分层抽样调查。结论:不同年级学生对网络通识课不同模块的选择存在差异(P<0.05),... 目的:通过分析研究医学院校本科生对通识课程的需求现状及问题,为通识教育改革提供理论依据。方法:汇总分析2018年春季学生选课结果,并对选课学生进行分层抽样调查。结论:不同年级学生对网络通识课不同模块的选择存在差异(P<0.05),学校网络通识课程设置与学生学习需求有不一致的情况。 展开更多

关键词 通识课程 现状分析

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自主设计型生理实验教学模式的探索 被引量：2

16

作者 宋浩 蒋方 +4 位作者 刘奔 王春炅 何津岩 徐淑梅 何金龙 《中国高等医学教育》 2020年第1期99-100,共2页

目的:通过开放肾小球滤过率影响因素这一部分实验内容,探索生理学自主设计型实验教学的新模式。方法:针对天津医科大学2017级影像专业学生,开展自主设计型实验教学。通过问卷调查以及统计期末理论考试成绩,了解新实验教学模式的效果。结... 目的:通过开放肾小球滤过率影响因素这一部分实验内容,探索生理学自主设计型实验教学的新模式。方法:针对天津医科大学2017级影像专业学生,开展自主设计型实验教学。通过问卷调查以及统计期末理论考试成绩,了解新实验教学模式的效果。结果:新教学模式下学生的科研创新思维得到了培养,对于生理学理论知识的掌握更好。结论:新教学模式有利于学生科研素养的提升和理论知识的学习,值得进一步在生理实验教学中推广。 展开更多

关键词 自主设计型 实验教学 生理学 肾小球滤过率

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SND1低表达宫颈癌CasKi细胞稳定株的构建及其生物学功能变化 被引量：1

17

作者 孟浩 付晓 +4 位作者 张春燕 辛灵彪 任媛媛 杨洁 何津岩 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第21期1-4,共4页

目的构建SND1低表达的人宫颈癌CasKi细胞稳定株,探讨SND1低表达对CasKi细胞生物学功能的影响。方法 CasKi细胞随机分为六组,空白对照组不做处理,阴性对照组、干扰1~4组分别转染TRC2-p LKO-puro Vector的空载慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)... 目的构建SND1低表达的人宫颈癌CasKi细胞稳定株,探讨SND1低表达对CasKi细胞生物学功能的影响。方法 CasKi细胞随机分为六组,空白对照组不做处理,阴性对照组、干扰1~4组分别转染TRC2-p LKO-puro Vector的空载慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)慢病毒液,用嘌呤霉素筛选CasKi细胞稳定株。分别用Western blotting技术、RT-PCR技术检测CasKi细胞内SND1蛋白、mRNA表达,确认转染效率。用CCK-8法检测CasKi细胞增殖活力(OD_(450)值),用细胞划痕实验检测CasKi细胞相对迁移距离。结果空白对照组细胞全部死亡,阴性对照组及干扰1~4组细胞部分存活,证明细胞稳定株转染构建成功。干扰1~4组SND1蛋白、mRNA相对表达量与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05;干扰3、4组与其他组比较,P均<0.05。干扰3、4组OD_(450)值、相对迁移距离与空白对照组、阴性对照组比较,P均<0.05。结论成功构建了SND1低表达的CasKi细胞稳定株;SND1低表达的CasKi细胞增殖和迁移能力降低。 展开更多

关键词 子宫颈肿瘤 SND1蛋白 CASKI细胞 细胞增殖 细胞迁移

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GST-G3BP Domain 1～5原核表达质粒的构建及其表达 被引量：1

18

作者 葛林 何津岩 +4 位作者 邵洁 东莉洁 方建飞 李晓东 杨洁 《天津医科大学学报》 2008年第1期1-4,21,共5页

目的:构建GST-G3BP Domain1～5的融合表达质粒,并在大肠杆菌中稳定表达。方法:PCR扩增G3BP Domain1～5片段,利用限制性内切酶EcoRI和NotI将其连接至载体pGEX-4T-1,将连接产物转化大肠杆菌,挑取单菌落,提取质粒,经PCR和双酶切鉴定后测序... 目的:构建GST-G3BP Domain1～5的融合表达质粒,并在大肠杆菌中稳定表达。方法:PCR扩增G3BP Domain1～5片段,利用限制性内切酶EcoRI和NotI将其连接至载体pGEX-4T-1,将连接产物转化大肠杆菌,挑取单菌落,提取质粒,经PCR和双酶切鉴定后测序。将转化正确的大肠杆菌过夜培养,IPTG诱导融合蛋白表达,immobilized Glutathione beads钓取目的蛋白。结果:G3BP Domain1～5片段均成功连接至载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21中可得到稳定表达的融合蛋白。结论:GST-G3BP Domain1～5的融合表达质粒构建成功。 展开更多

关键词 G3BP 质粒构建 GST-pull DOWN 融合蛋白

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针对人Tudor-SN蛋白T103位点的应激磷酸化抗体制备及分析 被引量：1

19

作者 高星杰 张毅 +7 位作者 苏超 付雪 史雪彬 尹洁 何津岩 王鑫廷 姚智 杨洁 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期55-60,共6页

目的:针对人Tudor-SN蛋白T103位点(103位苏氨酸,Thr103)制备兔源多克隆磷酸化抗体,并进行应激磷酸化的时相分析。方法:首先人工合成含磷酸化T103(pT103)位点的多肽,4次免疫新西兰大白兔后获取抗血清;然后以AKTA蛋白纯化系统进行纯化,并... 目的:针对人Tudor-SN蛋白T103位点(103位苏氨酸,Thr103)制备兔源多克隆磷酸化抗体,并进行应激磷酸化的时相分析。方法:首先人工合成含磷酸化T103(pT103)位点的多肽,4次免疫新西兰大白兔后获取抗血清;然后以AKTA蛋白纯化系统进行纯化,并利用Western blotting和细胞免疫荧光实验对纯化后的抗pT103抗体进行鉴定;最后以In-cell Western法进行Tudor-SN蛋白的应激磷酸化/去磷酸化时相性分析。结果:(1)确定并合成磷酸化多肽"TIENKpTPQGRC",收集约75 ml兔源抗血清,纯化后获取2.08 mg/ml抗pT103抗体;(2)当HeLa细胞受到氧化应激时,以pT103抗体检测的磷酸化信号增强,可在胞浆中检测到颗粒状信号,与内源性Tudor-SN应激颗粒存在共定位关系;(3)在氧化应激及应激去除后恢复过程中,T103位点的磷酸化水平呈现一定的波动性时相。结论:成功制备针对Tudor-SN蛋白T103位点的兔源多克隆抗pT103抗体,有助于从磷酸化修饰角度进行Tudor-SN在细胞应激方面的机制探讨。 展开更多

关键词 Tudor-SN 磷酸化 抗体 应激颗粒

原文传递

重组pCMV-N-Tudor-SN点突变质粒的构建及表达 被引量：1

20

作者 杨文栋 苏超 +5 位作者 张春燕 赵亚丽 任媛媛 高星杰 杨洁 何津岩 《天津医科大学学报》 2016年第1期5-8,共4页

目的:构建Tudor-SN蛋白的Serine426(S426)、Serine781(S781)、Threonine240(T240)和Threonine429(T429)的点突变质粒,并使该重组质粒能够在He La细胞中融合表达。方法:利用定点突变技术,对Tudor-SN蛋白进行S426A、S781A、T240A、T429A... 目的:构建Tudor-SN蛋白的Serine426(S426)、Serine781(S781)、Threonine240(T240)和Threonine429(T429)的点突变质粒,并使该重组质粒能够在He La细胞中融合表达。方法:利用定点突变技术,对Tudor-SN蛋白进行S426A、S781A、T240A、T429A点突变,通过双酶切的方法获得Tudor-SN.Mutants片段,最后将其连入到p CMV-N-Flag载体中。在He La细胞中转染该质粒,利用Western blot技术检测质粒表达效率。结果:(1)重组质粒经双酶切鉴定,可以观察到载体与Tudor-SN.Mutants的条带。(2)转染突变质粒后可看出He La细胞中有Flag蛋白表达。结论:质粒构建成功,可以用于下一步科学研究使用。 展开更多

关键词 人类Tudor-SN蛋白 pCMV-N-Flag 重组质粒 融合蛋白

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