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过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响 被引量：7
1
作者 曾帆 高月 +6 位作者 伍家燕 李海玉 樊建军 李韵 张寒韬 刘革力 宋方洲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1066-1069,共4页
目的:研究过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:将重组慢病毒LV5-ALEX1及阴性对照LV5-NC分别感染乳腺癌MCF-7细胞。感染72 h后,采用实时定量PCR和Western blot分别检测感染后ALEX1的表达情况;感染24、48、72、96 h,CCK... 目的:研究过表达ALEX1对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:将重组慢病毒LV5-ALEX1及阴性对照LV5-NC分别感染乳腺癌MCF-7细胞。感染72 h后,采用实时定量PCR和Western blot分别检测感染后ALEX1的表达情况;感染24、48、72、96 h,CCK8法检测细胞增殖情况;感染72 h后,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:感染72 h后细胞ALEX1 mRNA表达水平明显上升(165.81±12.14 vs 52.29±2.32,P<0.01),实验组与对照组相比,细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加(20.55%±2.50%vs 3.60%±1.614%,P<0.05)。结论:过表达ALEX1能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 MCF-7细胞 细胞增殖 凋亡
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ALEX1在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞生物学行为的影响 被引量：6
2
作者 曾帆 伍家燕 +4 位作者 高月 张涵韬 白鑫 刘革力 宋方洲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1447-1451,共5页
目的研究ALEX1基因在宫颈癌组织与癌旁组织中的表达情况,探讨ALEX1基因对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法应用免疫组化检测临床宫颈癌组织与癌旁组织中ALEX1的表达情况,通过小干扰RNA技术沉默ALEX1,并通过流式细胞仪检测沉默ALEX1后He... 目的研究ALEX1基因在宫颈癌组织与癌旁组织中的表达情况,探讨ALEX1基因对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法应用免疫组化检测临床宫颈癌组织与癌旁组织中ALEX1的表达情况,通过小干扰RNA技术沉默ALEX1,并通过流式细胞仪检测沉默ALEX1后He La细胞的周期、凋亡变化情况,利用CCK-8检测其增殖情况及对抗癌药物白藜芦醇敏感性的影响。结果免疫组化结果显示,临床宫颈癌组织中ALEX1高表达。与对照组He La细胞相比,沉默ALEX1实验组细胞生长受到明显抑制,并且增强白藜芦醇对其的抑制作用,细胞周期阻滞在S期。结论沉默ALEX1能有效阻滞He La细胞的生长能力及增强白藜芦醇对He La细胞的抑制作用。 展开更多
关键词 ALEX1 宫颈癌 白藜芦醇 RNA干扰 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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miR-335对MDA-MB-231乳腺癌细胞生物学特性的影响 被引量：4
3
作者 伍家燕 高月 +6 位作者 曾帆 李海玉 樊建军 李韵 张寒韬 刘革力 宋方洲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期1406-1411,共6页
目的检测microRNA-335(miR-335)在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达,进一步研究miR-335对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及迁移能力的... 目的检测microRNA-335(miR-335)在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达,进一步研究miR-335对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法采用荧光实时定量PCR检测miR-335在乳腺癌细胞系BT474、T47D、MCF-7、SK-BR-3、MDA-MB-231和正常乳腺细胞系MCF-10A中的表达,以及在原发性乳腺癌和淋巴结转移性乳腺癌中的表达。体外培养MDA-MB-231细胞并将其分3组,分别为miR-335组、阴性对照组和空白对照组。miR-335组转染miR-335模拟物(has-miR-335 mimics),阴性对照组转染阴性对照序列(negative control,NC),空白对照组细胞不行任何转染。通过MTT实验检测过表达miR-335对细胞增殖能力的影响;流式细胞仪检测过表达miR-335对细胞凋亡的影响;Transwell实验检测对细胞迁移能力的影响。Western blot检测MMP-2和MMP-9蛋白的表达。结果各乳腺癌细胞系中miR-335表达水平均低于乳腺正常上皮细胞系MCF-10A,MDA-MB-231细胞中最低(P<0.01)。在随机配对的10例原发性乳腺癌和10例淋巴结转移性乳腺癌标本中,有7例淋巴结转移性乳腺癌中MiR-335的表达低于对应的原发性乳腺癌(P<0.05)。过表达miR-335对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、凋亡无明显影响(P>0.05),但能显著抑制细胞的迁移能力(P<0.05)。Western blot结果显示:miR-335组MMP-2和MMP-9蛋白的表达量均低于阴性对照组和空白对照组。结论 miR-335在高转移性乳腺癌细胞系和淋巴结转移性乳腺癌组织中明显低表达,过表达miR-335对MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡无明显影响,但抑制MDA-MB-231细胞的迁移能力。miR-335可能通过下调MMP2和MMP9的表达从而抑制MDA-MB-231细胞迁移。 展开更多
关键词 miR-335 乳腺肿瘤 细胞增殖 细胞迁移
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沉默GRP78/BIP表达对人膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及机制 被引量：3
4
作者 伍家燕 樊建军 +6 位作者 曾帆 李海玉 李韵 张寒韬 白鑫 刘革力 宋方洲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1490-1493,共4页
目的:探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78/BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA,利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞,分别采用Realtime PCR、Western blot在mRN... 目的:探讨体外沉默葡萄糖调节蛋白GRP78/BIP表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响及可能机制。方法:设计、合成靶向GRP78基因的小干扰RNA,利用脂质体Liopfecta mineRNAIMAX转染入膀胱癌T24细胞,分别采用Realtime PCR、Western blot在mRNA和蛋白水平检测细胞内GRP78、MMP2、MMP9、Timp-2表达,采用Transwell实验及细胞划痕实验检测沉默GRP78表达对膀胱癌T24细胞侵袭及迁移的影响。结果:实验(siRNA-GRP78)T24细胞中GRP78表达显著降低,细胞侵袭迁移能力明显受到抑制,MMP2、MMP9表达降低,而Timp-2表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默GRP78能明显抑制人膀胱癌细胞的侵袭、迁移能力,其机制可能与影响MMP2、MMP9、Timp-2表达相关。 展开更多
关键词 GRP78 膀胱癌 侵袭与迁移
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多层面验证共培养微环境诱导法诱导骨髓间充质干细胞心肌样分化 被引量：3
5
作者 何林静 邓伏雪 +3 位作者 胡云凤 朱卫文 伍家燕 常静 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期414-421,共8页
为了多层面探讨共培养微环境诱导法定向诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌样分化的可行性,取第3代MSCs与原代心肌细胞(CMs)进行共培养。在显微镜下观察诱导1周后的MSCs形态学变化,用免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检... 为了多层面探讨共培养微环境诱导法定向诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌样分化的可行性,取第3代MSCs与原代心肌细胞(CMs)进行共培养。在显微镜下观察诱导1周后的MSCs形态学变化,用免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测诱导的MSCs中心肌肌钙蛋白I(cTnI)、α-肌动蛋白(α-actin)、Nkx-2.5和GATA-4的基因表达变化情况。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分别检测诱导组和对照组的代谢产物。诱导1周后的MSCs形态呈心肌样改变,cTnI、α-actin、Nkx-2.5和GATA-4的基因表达均明显升高,正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型显示诱导的MSCs代谢物向CMs转变趋势明显。通过多元和单元统计分析筛选差异变量,根据一级质谱和二级质谱比对结果,最终确定12种差异代谢物。与未经诱导的MSCs相比,经诱导的MSCs与CMs中变化趋势相同的差异代谢物有7种,变化趋势不同的差异代谢物有5种。实验结果表明,无论从形态、基因、蛋白质还是代谢层面看,MSCs通过与CMs间接接触共培养后均发生了心肌样改变,但是与CMs仍存在差异。 展开更多
关键词 共培养微环境 代谢组学 心肌样分化 骨髓间充质干细胞 心肌细胞
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BCL11A在宫颈癌中的表达及其临床意义 被引量：2
6
作者 白鑫 张寒韬 +4 位作者 李海玉 曾帆 伍家燕 刘革力 宋方洲 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期1658-1661,共4页
目的:深入研究BCL11A在宫颈癌组织及癌旁正常组织中的表达情况及其与临床病理因素的相关性。方法:收集62例宫颈癌组织及相对应的癌旁正常组织,制作成石蜡切片,并通过免疫组织化学法检测BCL11A蛋白在宫颈癌组织和癌旁正常组织中的表达,... 目的:深入研究BCL11A在宫颈癌组织及癌旁正常组织中的表达情况及其与临床病理因素的相关性。方法:收集62例宫颈癌组织及相对应的癌旁正常组织,制作成石蜡切片,并通过免疫组织化学法检测BCL11A蛋白在宫颈癌组织和癌旁正常组织中的表达,并结合患者资料,采用卡方检验分析BCL11A的表达与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结受累等临床病理因素之间的关系。结果:(1)免疫组化结果显示,相比癌旁宫颈正常组织,BCL11A在癌组织中表达显著升高,并且具有统计学意义(P<0.01)。(2)BCL11A在宫颈癌组织中的表达定位也具有差异性,BCL11A在宫颈癌组织中的表达主要定位于细胞核,而在癌旁正常组织中BCL11A的表达主要定位于细胞质。(3)BCL11A的表达与患者的年龄(P=0.436)、临床分级(P=0.683)、肿瘤大小(P=0.734)以及淋巴结转移数目(P=0.439)无关,但与淋巴结受累情况有关,出现淋巴结转移(N1-3)的患者中BCL11A蛋白的表达水平高于未出现淋巴结转移(N0)的患者(P=0.043)。结论:BCL11A在宫颈癌组织中高表达,在癌旁正常组织中表达较低;BCL11A的表达与宫颈癌患者的淋巴结转移情况相关,即出现淋巴结转移的患者BCL11A的表达较高;在宫颈癌组织中BCL11A的表达主要定位于在细胞核中,而在癌旁正常组织中,BCL11A的表达主要定位于细胞质中。BCL11A可能在宫颈癌的发生发展中起着重要作用。 展开更多
关键词 BCL11A 宫颈癌 免疫组化 淋巴结转移
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