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创新型生命科学人才培养的实践与探索 被引量:15
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作者 丁乃 刘艳平 +1 位作者 李善妮 刘新发 《医学教育探索》 2010年第12期1606-1608,共3页
在此介绍了中南大学生物科学与技术学院应用型人才培养体系,包括开展实验教学和实习模式改革、增加课外科技活动、实行本科生导师制和多渠道强化学生科研培训等方面的实践与探索,总结了新教学体系对应用型创新人才培养的影响和效果。
关键词 创新能力 应用型人才 生命科学 教学改革
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浅谈发育生物学实验教学改革及创新能力培养 被引量:14
2
作者 丁乃 李善妮 《生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期103-105,共3页
实验教学是培养具有创新精神和实践能力的应用型人才的重要途径。发育生物学是一门新兴学科,其实验教学存在教学内容参差不齐和教学环节薄弱等诸多问题,实行教学改革迫在眉睫。通过对发育生物学实验教学改革的实践经验进行总结,以期对... 实验教学是培养具有创新精神和实践能力的应用型人才的重要途径。发育生物学是一门新兴学科,其实验教学存在教学内容参差不齐和教学环节薄弱等诸多问题,实行教学改革迫在眉睫。通过对发育生物学实验教学改革的实践经验进行总结,以期对同类高校该课程实验教学有所借鉴和参考,共同完善发育生物学实验教学环节。 展开更多
关键词 创新能力 素质教育 发育生物学 实践教学
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鸡贫血病毒哈尔滨分离株全基因克隆和序列分析 被引量:5
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作者 何成强 丁乃 +1 位作者 李景鹏 李云龙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期436-441,共6页
通过PCR方法克隆了从哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒 (CAV)的全基因 ,并对其进行了测序 ,该病毒基因组为环状 ,全长 2 2 98bp ,含有三个互相重叠的开放读码框和一个调控区。将克隆的基因与GenBank收录的CAV基因比较 ,同源性至少为 97% ,未... 通过PCR方法克隆了从哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒 (CAV)的全基因 ,并对其进行了测序 ,该病毒基因组为环状 ,全长 2 2 98bp ,含有三个互相重叠的开放读码框和一个调控区。将克隆的基因与GenBank收录的CAV基因比较 ,同源性至少为 97% ,未发现与本次克隆的CAV基因完全一致的分离株。与德国分离株Cux la、2 6p4和马来西亚分离株分别有 42、42和72个核苷酸不同 ,同源性分别为 98 2 %、98 2 %和 96 9%。与德国分离株Cux 1b相比 ,除在调控区内少一个类似增强子的重复序列外 ,尚有 3 9处核苷酸不同。它与分离于欧洲的几株CAV的亲源性要比来自亚洲的马来西亚株近。对CAV哈尔滨分离株、2 6p4、Cux 1b、Cux 1a和马来西亚株的VP1、VP2和VP3蛋白比较 。 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 哈尔滨分离株 全基因克隆 序列分析
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从基因敲除看生殖激素的作用 被引量:4
4
作者 魏鹏 丁乃 杨增明 《生殖医学杂志》 CAS 2002年第5期316-320,共5页
基因敲除技术已成为研究基因功能的一种重要手段 ,本综述主要介绍了雌激素受体、孕酮受体、前列腺素受体、促性腺激素释放激素、黄体生成素受体、卵泡刺激素受体、雄激素受体、催产素、泌乳素及其受体等主要的生殖激素或受体基因敲除后... 基因敲除技术已成为研究基因功能的一种重要手段 ,本综述主要介绍了雌激素受体、孕酮受体、前列腺素受体、促性腺激素释放激素、黄体生成素受体、卵泡刺激素受体、雄激素受体、催产素、泌乳素及其受体等主要的生殖激素或受体基因敲除后对小鼠生殖系统的发育、功能以及生殖行为的影响 ,并对这些激素可能的作用机理进行了讨论。 展开更多
关键词 基因敲除 生殖激素 雌激素 孕酮
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应用聚合酶链反应快速检测沙门氏菌 被引量:7
5
作者 李景鹏 李成梅 +3 位作者 丁乃 吴丹 周静 石绍业 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 1997年第1期79-83,共5页
利用聚合酶链反应(PolymeraseChainReacticn,PCR)技术检测沙门氏菌。根据沙门氏菌鞭毛素I相抗原基因,设计了一对各长20个碱基的引物,扩增269bp的片段。并用8个标准标沙门氏菌株和3个阴性菌株... 利用聚合酶链反应(PolymeraseChainReacticn,PCR)技术检测沙门氏菌。根据沙门氏菌鞭毛素I相抗原基因,设计了一对各长20个碱基的引物,扩增269bp的片段。并用8个标准标沙门氏菌株和3个阴性菌株检查引物特异性,结果完全相符。采用50μL体积,NTPs200μmol,引物各1μmol,mg++3mmol,Taq酶2U。循环温度为97℃7min予变性后;94℃1min,60℃1min,35个循环后再延伸72℃7min。经电泳分析,灵敏度可达每毫升检出104个细胞,经二次扩增后,灵敏度还可提高。实验共检查了30个可疑样品,检出率明显高于生化检查和免疫学方法检查。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 沙门氏菌 检测
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黄体退化的分子机制及早期黄体钝化的某些原因探讨 被引量:5
6
作者 滕春波 丁乃 杨增明 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2002年第4期55-57,共3页
黄体退化是生殖过程中的一个重要过程 ,它控制着生殖周期的长短 ,与妊娠的建立和维持密切相关 ,已证实前列腺素F2α、催产素、内皮素 1及一氧化氮合酶等多种因素参与黄体退化过程。在黄体发育早期 ,外源PGF2α不能诱导黄体溶解 ,可能... 黄体退化是生殖过程中的一个重要过程 ,它控制着生殖周期的长短 ,与妊娠的建立和维持密切相关 ,已证实前列腺素F2α、催产素、内皮素 1及一氧化氮合酶等多种因素参与黄体退化过程。在黄体发育早期 ,外源PGF2α不能诱导黄体溶解 ,可能原因有 :(1)早期黄体内缺乏内皮素 1,(2 )黄体早期生物学反应减弱导致受体脱敏 ,(3)早期黄体中存在PGF2α代谢酶 ,(4) 展开更多
关键词 分子机制 早期黄体钝化 黄体退化 前列腺素F2Α 生殖周期 催产素 内皮素-1
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胰岛素样生长因子系统与哺乳动物生殖 被引量:4
7
作者 丁乃 滕春波 杨增明 《生殖医学杂志》 CAS 2002年第6期377-381,共5页
胰岛素样生长因子系统 ( IGFs)包括两种多肽、两种受体、6种结合蛋白 ( IGFBP-1~6 )以及一组 IGFBP蛋白酶组成。近年来研究发现 ,IGFs与哺乳动物生殖密切相关。在雌性生殖系统中 ,其作用主要促进卵泡发育 ,参与黄体的自然退化 ,调节子... 胰岛素样生长因子系统 ( IGFs)包括两种多肽、两种受体、6种结合蛋白 ( IGFBP-1~6 )以及一组 IGFBP蛋白酶组成。近年来研究发现 ,IGFs与哺乳动物生殖密切相关。在雌性生殖系统中 ,其作用主要促进卵泡发育 ,参与黄体的自然退化 ,调节子宫内膜的增殖和分化 ,控制胎盘生长以及促进胎儿生长等作用 ,而 IGFBP-1是胎儿生长的抑制因子。在雄性生殖系统中 。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子系统 哺乳动物 生殖 卵泡发育 黄体退化
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浅谈对生物科学专业本科生创新能力的培养 被引量:5
8
作者 李善妮 丁乃 《创新与创业教育》 2010年第2期63-65,共3页
创新是一个民族进步的灵魂,是国家兴旺发达的不竭动力。在全面推进素质教育,推行教育教学改革的今天,培养学生的创新能力成为教育教学的重中之重。本文介绍了中南大学生物科学与技术学院针对学生创新能力的培养所进行的改革,包括开展教... 创新是一个民族进步的灵魂,是国家兴旺发达的不竭动力。在全面推进素质教育,推行教育教学改革的今天,培养学生的创新能力成为教育教学的重中之重。本文介绍了中南大学生物科学与技术学院针对学生创新能力的培养所进行的改革,包括开展教学模式和课程体系改革、增加课外科技活动、实行本科生导师制和多渠道强化学生科研培训等方面的实践与探索,总结了新的教学体系对大学创新人才培养的影响和产生的效果。 展开更多
关键词 创新 科研 实践 教学改革
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牛病毒性腹泻病毒E2抗体的制备
9
作者 李胜文 王炜 +4 位作者 赵文栋 丁乃 王洪梅 何洪彬 何成强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第4期189-194,共6页
为获得牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2蛋白的多克隆抗体,本研究截短了BVDV E2氨基端前600个碱基,并构建原核表达载体pET28a-E2,优化E2序列并将重组载体转化到BL21感受态细胞中。37℃、1 mmol/L IPTG条件下诱导4 h,SDS-PAGE凝胶电泳观察在15 ... 为获得牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E2蛋白的多克隆抗体,本研究截短了BVDV E2氨基端前600个碱基,并构建原核表达载体pET28a-E2,优化E2序列并将重组载体转化到BL21感受态细胞中。37℃、1 mmol/L IPTG条件下诱导4 h,SDS-PAGE凝胶电泳观察在15 kDa处表达目的蛋白。Ni-NTA亲和层析纯化E2蛋白并免疫小鼠制备鼠抗血清。以获得的血清为一抗,Western blot检测pET28a-E2在BL21中表达的总蛋白,证明免疫性良好。利用BVDV感染MDBK细胞,Western blot成功检测到MDBK细胞表达的E2蛋白,证明E2抗体具有良好的特异性。ELISA检测E2多克隆抗体的效价达1∶128 000。本研究成功制备出BVDV E2多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的功能及BVDV活载体疫苗的鉴定提供了技术和材料支持。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 E2基因 原核表达 多克隆抗体
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鸡贫血病毒哈尔滨分离株VP2基因克隆 测序和比较 被引量:2
10
作者 何成强 丁乃 +1 位作者 李景鹏 李云龙 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2002年第11期8-11,共4页
通过 PCR方法克隆了从我国哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒 (CAV)的 VP2基因 ,并对之进行了测序 ,该基因的开放读码框由 6 5 1bp组成 ,编码 2 16个氨基酸。通过将本次克隆的基因与 Gen Bank收录的 CAV的 VP2基因比较 ,同源性至少为99% ,未... 通过 PCR方法克隆了从我国哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒 (CAV)的 VP2基因 ,并对之进行了测序 ,该基因的开放读码框由 6 5 1bp组成 ,编码 2 16个氨基酸。通过将本次克隆的基因与 Gen Bank收录的 CAV的 VP2基因比较 ,同源性至少为99% ,未发现与本次克隆的 VP2蛋白完全一致的 CAV分离株 ,与之同源性最好的是 CIA - 1的 VP2蛋白 ,相差 1个氨基酸 ,与Cux- 1也仅相差 2个氨基酸 ,因此从该蛋白看 CAV哈尔滨分离株的变异程度不很高。比较这 2 7株病毒的 VP2及其基因序列 ,发现共有 31处核苷酸发生变异 ,这些变异将导致 VP2的 12个氨基酸变化 ,尽管他们散布于整个 VP2 ,但在 186到 191号氨基酸区域存在一个没有报道过的变异程度相对较高的区域 ,CAV的 展开更多
关键词 哈尔滨分离株 基因克隆 鸡贫血病毒 VP2基因 序列分析 亚单位疫苗
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牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:1
11
作者 王炜 韩慧慧 +1 位作者 丁乃 何成强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期3131-3139,共9页
【目的】应用大肠杆菌表达系统表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白,纯化后免疫小鼠制备E0蛋白多克隆抗体用于BVDV的检测技术研究。【方法】采用PCR扩增BVDV的E0基因,将其连接至pET-28a(+)构建重组表达载体pET28a-E0。将重组质粒转化大肠... 【目的】应用大肠杆菌表达系统表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白,纯化后免疫小鼠制备E0蛋白多克隆抗体用于BVDV的检测技术研究。【方法】采用PCR扩增BVDV的E0基因,将其连接至pET-28a(+)构建重组表达载体pET28a-E0。将重组质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导、亲和层析纯化后,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定E0蛋白的表达情况。将纯化的E0蛋白免疫小鼠制备BVDV E0多克隆抗体,并通过Western blotting、细胞免疫荧光试验、ELISA等试验检测该多克隆抗体的特异性和效价,以及在BVDV检测中的应用。【结果】成功构建原核表达载体pET28a-E0,表达并纯化E0蛋白,制备的BVDV E0多克隆抗体可特异性识别纯化的E0蛋白及pET28a-E0在BL21中表达的总蛋白。进一步Western blotting、细胞免疫荧光试验、双抗夹心法ELISA证明制备的E0多克隆抗体可用于BVDV的检测。间接ELISA结果表明,E0多克隆抗体效价高于1∶64000。【结论】制备的BVDV E0多克隆抗体效价高、抗原结合特异性强,为BVDV E0蛋白的生物学功能研究及BVDV的检测提供了材料支持。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒(BVDV) E0基因 原核表达 多克隆抗体
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小鼠FAAP蛋白对细胞黏附的影响 被引量:2
12
作者 胡劲松 丁乃 +1 位作者 滕俊林 陈建国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第1期88-94,共7页
黏着斑相关蛋白(focal adhesion associated protein,FAAP)由小鼠D10Wsu52e基因编码,在进化上十分保守,但该蛋白质的生物学功能并不清楚.为此,首先通过细胞组分分离的方法研究了FAAP蛋白分布的细胞组分,结果表明FAAP主要存在于细胞质和... 黏着斑相关蛋白(focal adhesion associated protein,FAAP)由小鼠D10Wsu52e基因编码,在进化上十分保守,但该蛋白质的生物学功能并不清楚.为此,首先通过细胞组分分离的方法研究了FAAP蛋白分布的细胞组分,结果表明FAAP主要存在于细胞质和细胞膜中.细胞蛋白表达量分析表明,细胞中FAAP与黏连蛋白受体(LR)表达量呈现正相关性.同时,细胞黏附实验表明,FAAP与LR对细胞黏附影响类似,也能够抑制细胞的黏附.这些实验结果为深入研究FAAP蛋白功能提供了依据. 展开更多
关键词 小鼠 D10Wsu52e基因 FAAP 67ku层粘连蛋白受体 细胞黏附
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RtcB功能的研究进展 被引量:2
13
作者 曾超 杜燕 丁乃 《生命的化学》 CAS CSCD 2017年第2期147-152,共6页
RtcB是后生动物中一种重要的RNA连接酶,能完成2′,3′-环磷酸酯和5′-羟基末端的连接。在tRNA的成熟和XBP1 mRNA的剪接中起着重要的作用。它可以连接tRNA成熟过程中产生的2′,3′-环磷酸末端和5′-羟基末端,从而产生成熟的tRNA。另外,... RtcB是后生动物中一种重要的RNA连接酶,能完成2′,3′-环磷酸酯和5′-羟基末端的连接。在tRNA的成熟和XBP1 mRNA的剪接中起着重要的作用。它可以连接tRNA成熟过程中产生的2′,3′-环磷酸末端和5′-羟基末端,从而产生成熟的tRNA。另外,可以连接XBP1前体mRNA产生成熟的XBP1 mRNA,调节UPR反应,从而维持内质网稳态。另外,RtcB对动物胚胎发育和抗体分泌具有重要调节作用,并且与多种神经性疾病的发生密切相关。本文将对RtcB的发现、连接酶功能以及生理功能进行综述,为以后更好地研究其功能及相关机制打下基础。 展开更多
关键词 RtcB RNA连接酶 RNA剪接
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治疗性单克隆抗体研究的新趋势兔源单克隆抗体 被引量:2
14
作者 李镇安 王行明 丁乃 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期863-866,共4页
治疗性抗体正在成为新药开发的新亮点,这些都得益于它可特异的识别靶位。众所周知,目前常用的单克隆抗体多为鼠源,在临床应用方面受到多种限制。与之相比,由于兔的免疫系统自身的特点,兔源单克隆抗体(RabMAbs)具有更高的亲和力和特异性... 治疗性抗体正在成为新药开发的新亮点,这些都得益于它可特异的识别靶位。众所周知,目前常用的单克隆抗体多为鼠源,在临床应用方面受到多种限制。与之相比,由于兔的免疫系统自身的特点,兔源单克隆抗体(RabMAbs)具有更高的亲和力和特异性,能识别更多的抗原表位。RabMAbs已在生命科学研究领域中广泛应用,其作为生物标志物已应用到临床诊断和新药研发之中。随着谱系引导的人源化改变(mutational lineage-guided humanization)理论提出和进一步深入研究,使得RabMAbs的人源化不但相对容易还可以对抗原互补决定区与框架区进行人源化。因此,有理由相信治疗性RabMAbs的开发和应用前景更为广阔。文中就RabMAbs的特点、优势、诊断和治疗性RabMAbs的发展状况做一综述。 展开更多
关键词 治疗性抗体 兔单克隆抗体 谱系引导的人源化改变
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XBP1在小鼠早期妊娠子宫的表达和调节 被引量:1
15
作者 郭思维 于雯 +4 位作者 王煦 刘健慧 张新月 何成强 丁乃 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期208-216,共9页
转录因子X盒结合蛋白1(X-box binding protein-1,XBP1)在未折叠蛋白反应中起关键作用。本研究旨在分析XBP1在小鼠早期妊娠过程中的表达和调节,探讨其与胚胎着床的相关性。分别建立小鼠早期妊娠、人工诱导蜕膜化、发情周期和激素调节模型... 转录因子X盒结合蛋白1(X-box binding protein-1,XBP1)在未折叠蛋白反应中起关键作用。本研究旨在分析XBP1在小鼠早期妊娠过程中的表达和调节,探讨其与胚胎着床的相关性。分别建立小鼠早期妊娠、人工诱导蜕膜化、发情周期和激素调节模型,通过免疫组织化学染色和实时定量RT-PCR技术检测XBP1在这些动物模型中的表达模式。结果显示,XBP1在小鼠早期妊娠子宫中呈现动态的变化,第1~4天主要表达在腔上皮和腺上皮,第5~8天主要表达在蜕膜区;在人工诱导蜕膜化的子宫中XBP1主要存在于蜕膜区;在小鼠发情周期模型中,Xbp1、Xbp1u、Xbp1s mRNA在发情前期的表达量最高;在卵巢切除的子宫中,雌激素处理后腔上皮和腺上皮细胞XBP1的表达上调。以上结果表明,XBP1参与小鼠胚胎着床和蜕膜化,其在早期妊娠子宫腔上皮和腺上皮中的表达受到雌激素调控。 展开更多
关键词 小鼠 X盒结合蛋白1 早期妊娠 子宫 胚胎着床
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BVDV Singer_Arg株全基因组克隆及其感染性RNA制备
16
作者 秦春雪 宋现梅 +3 位作者 王洪梅 丁乃 何洪彬 何成强 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第5期43-49,共7页
克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获得其感染性RNA。将病毒基因组分段克隆后再拼接成全长cDNA;通过巨细胞病毒即早期启动子控制病毒cDNA转录,5'-UTR上游的锤头状核酶和3'-UTR下游的丁肝病毒核酶控制转录产物5'-... 克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获得其感染性RNA。将病毒基因组分段克隆后再拼接成全长cDNA;通过巨细胞病毒即早期启动子控制病毒cDNA转录,5'-UTR上游的锤头状核酶和3'-UTR下游的丁肝病毒核酶控制转录产物5'-UTR和3'-UTR的完整性和准确性,以获得不经体外转录,直接转染细胞产生病毒感染性RNA的反向遗传操作系统;并通过Western blot、RT-PCR技术、免疫荧光等方法对子代病毒进行了一系列鉴定与遗传稳定性分析。获得了Singer_Arg株全基因组序列并通过反向遗传拯救出该毒株。成功构建了基于Singer_Arg株的BVDV反向遗传操作系统,为BVDV疫苗研发和基础研究提供了技术平台。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 反向遗传学 全基因组克隆
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RTCB在小鼠不同组织中的表达 被引量:1
17
作者 郝海霞 王富龙 +4 位作者 艾桂青 李冉 赵娜 何成强 丁乃 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期346-350,共5页
目的检测RTCB在小鼠各种组织中的表达和分布。方法提取小鼠胃、前列腺、子宫、卵巢等组织的总蛋白,利用免疫印迹技术,检测RTCB在各组织的相对表达量;通过免疫组织化学技术,检测RTCB在各组织的表达定位情况。结果免疫印迹结果显示,小鼠1... 目的检测RTCB在小鼠各种组织中的表达和分布。方法提取小鼠胃、前列腺、子宫、卵巢等组织的总蛋白,利用免疫印迹技术,检测RTCB在各组织的相对表达量;通过免疫组织化学技术,检测RTCB在各组织的表达定位情况。结果免疫印迹结果显示,小鼠17种组织中RTCB均有表达,输卵管、骨骼肌、肾脏的相对表达量较高,而在膀胱和小肠的相对表达量较低。免疫组织化学结果显示,RTCB在不同组织或同一组织的不同细胞中免疫染色存在差异,尤其在睾丸、附睾、卵巢、子宫、输卵管、小肠等组织某些特定细胞中免疫染色较强。结论 RTCB可能参与小鼠生殖系统功能的维持。 展开更多
关键词 RTCB 组织表达 免疫印迹法 免疫组织化学 小鼠
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鸡贫血病毒vp3基因克隆、序列分析和比较 被引量:1
18
作者 丁乃 何成强 +1 位作者 李云龙 李景鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期130-133,共4页
克隆了从我国哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒 (CAV)的 vp3基因 ,并对之进行了测序。该基因的开放读码框由36 6 bp组成 ,编码 12 1个氨基酸 ,氨基酸组成具有已报道 VP3的典型特点。本次克隆的基因与 Gen Bank收录的 CAV的 vp3基因进行序列比... 克隆了从我国哈尔滨分离的一株鸡贫血病毒 (CAV)的 vp3基因 ,并对之进行了测序。该基因的开放读码框由36 6 bp组成 ,编码 12 1个氨基酸 ,氨基酸组成具有已报道 VP3的典型特点。本次克隆的基因与 Gen Bank收录的 CAV的 vp3基因进行序列比较 ,同源性至少为 98%。与国内报道的山东株 SJ1的 vp3基因有 3个核苷酸的差异 ,表明国内的 CAV毒株已经产生了一些分化。在 EMBL 中比较本次克隆的 VP3蛋白一级结构 ,与之差异最大的是马来西亚分离株的 VP3,有 5个氨基酸残基不同 ,同源性为 96 %。同时收集 EMBL 中的 CAV的 VP3蛋白绘制进化树 ,我国哈尔滨分离的 CAV毒株与 CIA进化关系最近 ,而与 Cux- 1的 2个衍生株 QDWX1、QDWX3进化关系最远。这些结果进一步证明了 CAV在遗传方面是较保守的病毒 ,来自哈尔滨的 CAV不是 CAV的一个独立分支。 展开更多
关键词 VP3基因 序列分析 贫血病毒 基因克隆
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鸡贫血病毒衣壳蛋白基因克隆、测序和比较 被引量:1
19
作者 何成强 丁乃 +1 位作者 李景鹏 李云龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期179-182,共4页
VP1 gene of chicken anemia virus in liver of infected chicken from Harbin was amplified by polymerase chain reaction and cloned into pUC18The recombinant vector was identified by restriction digestionThree clones ... VP1 gene of chicken anemia virus in liver of infected chicken from Harbin was amplified by polymerase chain reaction and cloned into pUC18The recombinant vector was identified by restriction digestionThree clones were sequenced with sequencing kit ABI PRISM by TaKaRa CoLtdThe open reading frame of the VP1 gene is made up of 1,350bpIt encodes 449 amino acid residuesIt was found that there is an abundant Arg region from position 3 to 46Its isoelectric point is up to 107 because of its abundant basic amino acidsComparing this Harbin isolate with 26p4,Cux-1,82-2,Del-rose,A2,Connb,L-028,TR20,CIA-1,CAV15,2A9 showed there were 168 nucleoside differences which lead to 26 amino acid changes of the VP1The amino acid changes may influence the antigenic character of different VP1sIt was also found that there is a hyper-mutation region from amino acids position 139-157,its mutation frequency is up to 42% among these CAV’s VP1s.It is necessary to research the function of this 展开更多
关键词 鸡贫血病毒 衣壳蛋白基因 克隆 测序
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蛋白质修饰与自身免疫
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作者 何成强 丁乃 《上海免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期66-69,共4页
细胞内蛋白质翻译后需经多种修饰 ,以维持蛋白质正常的结构和生理活动。蛋白质的修饰受到严格的调节 ,即使对异常修饰的蛋白质 ,细胞可通过各种蛋白酶加以降解 ,因此不会对人自身造成损伤。有些蛋白经异常的翻译后修饰作用 ,可出现新的... 细胞内蛋白质翻译后需经多种修饰 ,以维持蛋白质正常的结构和生理活动。蛋白质的修饰受到严格的调节 ,即使对异常修饰的蛋白质 ,细胞可通过各种蛋白酶加以降解 ,因此不会对人自身造成损伤。有些蛋白经异常的翻译后修饰作用 ,可出现新的抗原表位而形成新的自身抗原 ,引致人体针对这些抗原的异常免疫应答 ,出现各种自身免疫病。文章列举与蛋白修饰有关的常见自身免疫病 ,及每种抗原的修饰方式。并以EAE、SLE和CIA等典型的自身免疫病为例 ,阐述蛋白修饰与自身抗原形成的关系 ,还初步探讨蛋白修饰诱导自身免疫的可能机制。 展开更多
关键词 蛋白修饰 自由免疫 抗原决定簇
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