姜黄素对脂多糖激活的小胶质细胞iNOS表达的抑制及抗氧化作用 被引量：24

1

作者 杨开艳 顾建兰 +1 位作者 殷冬梅 沈勤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期938-945,共8页

用姜黄素预处理小胶质细胞株BV,1h后加用脂多糖(200ng/ml)进行刺激,通过MTT检测细胞活性;硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;Western印迹、免疫细胞化学染色检测细胞活化后形态及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达;瞬... 用姜黄素预处理小胶质细胞株BV,1h后加用脂多糖(200ng/ml)进行刺激,通过MTT检测细胞活性;硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)的含量;Western印迹、免疫细胞化学染色检测细胞活化后形态及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白的表达;瞬时转染和荧光素酶报告基因鉴定iNOS和NF-κB基因表达活性;SOD和GSH-Px检测姜黄素的抗氧化能力.结果证明,脂多糖可促使小胶质细胞活化,使iNOS和NF-κB基因表达活性显著增强;iNOS蛋白表达明显上调,NO释放增多;细胞内SOD和GSH-Px活性明显下降.而姜黄素(10μmol/L)可以显著抑制活化后小胶质细胞NO的产生、iNOS蛋白的表达及iNOS-Luc、NF-κB-Luc的表达活性,其机制可能通过NF-κB的信号转导途径抑制iNOS的表达.姜黄素可通过提高细胞内SOD和GSH-Px的活性发挥抗氧化作用. 展开更多

关键词 小胶质细胞 姜黄素 诱导型一氧化氮合酶 氧化应激

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关于提高医学生物化学实验教学质量的思考 被引量：13

2

作者 吴小梅 苏建友 +1 位作者 周亚军 朱俐 《交通医学》 2008年第2期209-210,共2页

医学生物化学是医学生非常重要的一门基础课，也是实践性较强的科学。培养综合型人才，除了必须具备扎实的理论外，还应该有过硬的操作技能和开拓创新的研究思维，而良好的实验教学为培养医学大学生的动手能力及研究思维提供坚实的平台... 医学生物化学是医学生非常重要的一门基础课，也是实践性较强的科学。培养综合型人才，除了必须具备扎实的理论外，还应该有过硬的操作技能和开拓创新的研究思维，而良好的实验教学为培养医学大学生的动手能力及研究思维提供坚实的平台。实验教学是生物化学教学的重要组成部分，可以使学生牢固掌握生物化学研究的基本方法与实验技术，加深对基本理论知识的理解，提高对未知生命现象的兴趣，培养学生严谨求实、勤奋进取的科学态度。本人通过在教学实践中的研究和探索，就如何提高生物化学实验教学质量提出几点想法。 展开更多

关键词 生物化学 实验教学 教学质量

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切割海马伞海马中56kD差异蛋白的质谱分析 被引量：8

3

作者 朱蕙霞 秦建兵 +2 位作者 田美玲 陈蓉 金国华 《南通大学学报（医学版）》 2006年第6期408-410,413,共4页

目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功... 目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了33组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、核酸水解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割海马伞海马中56kD差异蛋白中含有功能涉及神经干细胞迁移、分化的蛋白质。 展开更多

关键词 56 kD蛋白 切割海马伞 海马 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 质谱分析

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生物化学实验教学多元化考核体系改革探讨 被引量：7

4

作者 翟旭光 吴娟娟 张亚莉 《基础医学教育》 2013年第4期387-388,共2页

生物化学是高等医学院校的一门重要的基础学科,生物化学实验是生物化学的一个重要内容。重视生物化学实验教学改革,培养学生严谨的科学作风、独立工作的能力及科学的思维能力,对于提高学生的科学素质具有重要的意义。文章对传统生物化... 生物化学是高等医学院校的一门重要的基础学科,生物化学实验是生物化学的一个重要内容。重视生物化学实验教学改革,培养学生严谨的科学作风、独立工作的能力及科学的思维能力,对于提高学生的科学素质具有重要的意义。文章对传统生物化学实验教学中考核方法进行了探索和创新,针对生物化学实验的考核方式、考核内容、考核标准进行改革,力求更全面、客观地评价学生的实验学习成绩。强调学生注重基本操作和实验过程、强化能力培养,为更好地培养基础理论扎实、具有创新精神和实践能力的高素质应用型人才提供有力保障。 展开更多

关键词 生物化学 实验教学 多元化考核体系

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O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达的抑制对tau蛋白磷酸化作用的影响 被引量：7

5

作者 杨江勇 顾建兰 +2 位作者 施建华 刘飞 沈勤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期346-352,共7页

研究HEK293T细胞中O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达抑制对与AD密切相关的tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响.以OGT基因为靶点设计三段siRNA(OGT-siRNA1～3),用脂质体的方法转染OGT-siRNA1～3进入HEK293T细胞,通过RT-PCR检测OGT-siRNA1～... 研究HEK293T细胞中O-GlcNAc糖基转移酶(OGT)基因表达抑制对与AD密切相关的tau蛋白磷酸化与糖基化修饰的影响.以OGT基因为靶点设计三段siRNA(OGT-siRNA1～3),用脂质体的方法转染OGT-siRNA1～3进入HEK293T细胞,通过RT-PCR检测OGT-siRNA1～3对OGT mRNA的抑制.将pEGFP/OGT与OGT-siRNA1～3共转染HEK293T细胞,24h后在倒置荧光显微镜下观察各组GFP/OGT的表达,根据GFP/OGT的表达量来评价OGT-siRNA1～3对OGT基因表达的抑制率.将筛选出的具有最佳沉默效果的OGT-siRNA与质粒pCI/tau441共转染HEK293T细胞,48h后Western blot检测tau蛋白糖基化与磷酸化修饰的变化.OGT-siRNA3在100nmol/L的终浓度时对OGT基因的抑制效率最高.与Mock组相比,对OGT基因mRNA及蛋白质水平的抑制率分别可达80.0%与51.3%左右.OGT基因表达的下调使tau蛋白糖基化水平下降,而磷酸化水平增高,证实tau蛋白的糖基化负调节其磷酸化,葡萄糖摄入减少或代谢降低可能在AD的发生发展中起关键作用. 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 TAU蛋白 O-GlcNAc糖基转移酶 RNA干扰

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姜黄素对脂多糖激活的小胶质细胞诱导型一氧化氮合酶表达的抑制作用 被引量：5

6

作者 杨开艳 顾建兰 +1 位作者 施建华 沈勤 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2007年第2期105-110,共6页

目的：观察姜黄素对脂多糖激活的小胶质细胞NO的产生及iNOS表达的影响。方法：用脂多糖（200ng／m1）刺激小胶质细胞株BV的同时用不同浓度姜黄素进行干预，应用MTT方法检测细胞活性；硝酸还原酶法检测细胞上清液中NO的含量；Western—b... 目的：观察姜黄素对脂多糖激活的小胶质细胞NO的产生及iNOS表达的影响。方法：用脂多糖（200ng／m1）刺激小胶质细胞株BV的同时用不同浓度姜黄素进行干预，应用MTT方法检测细胞活性；硝酸还原酶法检测细胞上清液中NO的含量；Western—blot及免疫细胞化学染色方法检测iNOS蛋白的表达。结果：姜黄素在2．5～20μmol／L范围内对细胞活性无影响；脂多糖作用24h后，NO释放量明显增加，iNOS蛋白表达明显增强；使用姜黄素干预后，浓度在10μmol／L时可以显著抑制脂多糖激活的小胶质细胞NO的产生和iNOS蛋白的表达。结论：姜黄素能够有效抑制脂多糖激活的小胶质细胞iNOS蛋白的表达以及NO的产生。 展开更多

关键词 姜黄素 脂多糖 小胶质细胞 诱导型一氧化氮合酶

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NOV蛋白在切割海马伞大鼠海马中表达的变化 被引量：4

7

作者 秦建兵 朱蕙霞 +3 位作者 王磊 谭雪锋 田美玲 金国华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期624-628,共5页

通过切割右侧海马伞制备大鼠海马伞损伤模型,应用Westernblotting、免疫组织化学技术,观察切割海马伞后不同时程海马中肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白表达的变化,并对结果进行图像处理和统计学分析。Westernblotting结果显示,NOV蛋白... 通过切割右侧海马伞制备大鼠海马伞损伤模型,应用Westernblotting、免疫组织化学技术,观察切割海马伞后不同时程海马中肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)蛋白表达的变化,并对结果进行图像处理和统计学分析。Westernblotting结果显示,NOV蛋白在切割海马伞后3d表达开始上升,14d达高峰后缓慢下降。切割海马伞后14d切割侧和正常侧相比较,海马CA1-CA3区的锥体细胞层及齿状回颗粒层NOV阳性细胞数目无显著性差异(P>0.05),但切割侧NOV阳性细胞明显比正常侧深染,两侧比较平均灰度值有显著性差异(P<0.01)。结合本课题组以往的工作,本研究结果提示,切割海马伞后海马中高表达的NOV蛋白可能参与了诱导神经干细胞迁移和向神经元分化的过程。 展开更多

关键词 肾母细胞瘤过度表达基因蛋白 蛋白质印迹 免疫组化 切割海马伞 海马 大田

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海马放射状胶质细胞激活后Rest和Runx1t1基因的表达变化 被引量：2

8

作者 施金洪 金国华 +4 位作者 李浩明 张新化 朱蕙霞 田美玲 秦建兵 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期7-12,共6页

目的探讨经切割穹隆海马伞侧海马提取液诱导而激活的海马放射状胶质细胞的基因表达变化。方法将分离、纯化后的海马放射状胶质细胞分别加入正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液,7d后利用免疫荧光法检测两组细胞的数量和生长情况;利用基... 目的探讨经切割穹隆海马伞侧海马提取液诱导而激活的海马放射状胶质细胞的基因表达变化。方法将分离、纯化后的海马放射状胶质细胞分别加入正常侧和切割穹隆海马伞侧海马提取液,7d后利用免疫荧光法检测两组细胞的数量和生长情况;利用基因芯片分析细胞内基因表达情况;利用实时定量PCR分析神经干细胞向神经元分化的相关基因Rest和Runx1t1的转录情况。结果与正常组相比,切割组放射状胶质细胞的数量明显增多,胞体增大,突起增粗变长。基因芯片结果显示,在所检测的709个基因中,切割组中10个基因表达明显上调,10个基因明显下调;实时定量PCR结果表明,切割组Rest和Runx1t1的转录水平均显著高于正常组(P<0.05)。结论切割穹隆海马伞海马提取液可诱导海马放射状胶质细胞的激活,提高Rest和Runx1t1基因转录水平。 展开更多

关键词 海马 放射状胶质细胞 REST Runx1t1 免疫荧光 实时定量聚合酶链式反应 大鼠

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阿尔茨海默病模型建立及干预实验研究进展 被引量：2

9

作者 杨开艳 沈勤 《南通大学学报（医学版）》 2007年第2期151-153,共3页

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种与衰老相关，以认知功能下降为特征的渐进性脑退行性疾病。AD患者整个大脑弥散性萎缩并出现明显的病理组织学改变——老年斑和神经纤维缠结（neurofibrillary tangle，NFT）。并伴神经... 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种与衰老相关，以认知功能下降为特征的渐进性脑退行性疾病。AD患者整个大脑弥散性萎缩并出现明显的病理组织学改变——老年斑和神经纤维缠结（neurofibrillary tangle，NFT）。并伴神经元减少，其中以基底前脑核海马区胆碱能神经元最严重。神经元细胞外淀粉样蛋白（amyloid β—protein，Aβ）沉积形成老年斑。晚期Aβ沉积激活小胶质细胞和星形胶质细胞引发了炎性反应，活化的胶质细胞围绕在斑块周围。由于AD是多因素引起。涉及多种病理机制的多因异质性疾病，因此建立一种理想的AD模型困难重重，影响了AD的深入研究．本文就近年来国内外AD动物模型的建立及相关的干预实验作一综述。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 模型 干预实验 渐进性脑退行性疾病

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理论联系实际—多种教学手段在生物化学教学中的综合应用 被引量：4

10

作者 翟旭光 《现代医药卫生》 2010年第21期3348-3350,共3页

众多的生物化学的教学方法各有优势,将这些教学方法和手段充分利用起来,将更好的提高生物化学教学质量。在传统教学模式的基础上,利用PBL方法引入案例,可尽量利用网络或社会热点问题作为案例来提高学生兴趣,以多媒体(视频等)互联网等方... 众多的生物化学的教学方法各有优势,将这些教学方法和手段充分利用起来,将更好的提高生物化学教学质量。在传统教学模式的基础上,利用PBL方法引入案例,可尽量利用网络或社会热点问题作为案例来提高学生兴趣,以多媒体(视频等)互联网等方式表现案例,以有目标的提问为主线,让学生在案例教学中掌握重点、理解过程,开拓思路,提高素质,使生物化学教学在其乐融融的氛围中,达到最良好的效果。 展开更多

关键词 病例教学法 PBL教学模式 多媒体 因特网

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PD模型大鼠黑质中Nurr1和TH的表达变化及其意义 被引量：2

11

作者 谭雪锋 金国华 +4 位作者 刘娟 秦建兵 田美玲 李浩明 朱蕙霞 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期16-20,共5页

为探讨孤儿核受体(Nurr1)在多巴胺能神经元损伤修复过程中对特异性表型酪氨酸羟化酶(TH)的影响,本研究用6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤大鼠一侧前脑内侧束(MFB)制备单侧帕金森病(PD)模型,分别应用Western blot和免疫组织化学技术观察不同时... 为探讨孤儿核受体(Nurr1)在多巴胺能神经元损伤修复过程中对特异性表型酪氨酸羟化酶(TH)的影响,本研究用6-羟基多巴胺(6-OHDA)损伤大鼠一侧前脑内侧束(MFB)制备单侧帕金森病(PD)模型,分别应用Western blot和免疫组织化学技术观察不同时间点中脑黑质中Nurr1、TH蛋白表达的变化及其相关性。结果显示,Nurr1蛋白表达在术后1d损伤侧黑质中即明显下降,7d后开始逐渐上升,14d接近正常水平,28d明显升高;TH蛋白表达在术后1d损伤侧黑质中无明显变化,7d开始下降,14d达最低,28d开始上升。上述结果提示,在6-OHDA损伤黑质-纹状体通路后,Nurr1的表达先下降后上升,其表达变化早于TH,可能在PD模型大鼠的损伤修复中发挥重要作用。 展开更多

关键词 帕金森病 黑质 孤儿核受体 酪氨酸羟化酶 大鼠

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Brn-4在大鼠海马神经干细胞向神经元分化中的作用 被引量：2

12

作者 施金洪 田美玲 +4 位作者 朱蕙霞 秦建兵 谭雪锋 王磊 金国华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期431-435,共5页

为探讨Brn-4在海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备切割海马伞侧和正常侧海马提取液,将鼠胚海马神经干细胞球分成3组:(1)切割组加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(2)正常组加入含正... 为探讨Brn-4在海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)向神经元分化过程中的作用,分别制备切割海马伞侧和正常侧海马提取液,将鼠胚海马神经干细胞球分成3组:(1)切割组加入含切割侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(2)正常组加入含正常侧海马提取液的DMEM/F12无血清培养基;(3)对照组加入单纯的DMEM/F12无血清培养基。培养后第14d行Brn-4/MAP-2免疫荧光双标染色。在荧光显微镜下分别计数每个视野下Brn-4单标神经元和Brn-4/MAP-2双标神经元的数量,并测量双标神经元的胞体面积、细胞周长以及Brn-4的免疫荧光强度。用图像处理系统和Stata7.0软件对所得数据进行统计学分析。结果显示:Brn-4/MAP-2双标神经元数在切割组中较多、胞体较大、突起较丰富,且Brn-4的免疫荧光亦较强;正常组次之,对照组最差。上述数据经组间比较分析,3组间差异有显著性意义(P<0.01)。本研究结果提示Brn-4在海马神经干细胞向神经元分化过程中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 Brn-4 海马 神经干细胞 分化 神经元

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反义寡核苷酸阻断乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶的表达和意义 被引量：2

13

作者 殷冬梅 吴娟娟 +2 位作者 井园 王新 葛锦涛 《同济大学学报（医学版）》 CAS 2009年第6期40-45,共6页

目的探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的基因试剂MBO-asGCS逆转乳腺癌多药耐药的作用机制及其意义。方法MBO-asGCS处理体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药型MCF-7/AdrR,采用细胞毒性分析测定MBO-asGCS对M... 目的探讨靶向葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)的基因试剂MBO-asGCS逆转乳腺癌多药耐药的作用机制及其意义。方法MBO-asGCS处理体外培养的人乳腺癌细胞MCF-7及其耐药型MCF-7/AdrR,采用细胞毒性分析测定MBO-asGCS对MCF-7-AdrR存活率的影响,RT-PCR和Western印迹分析对耐药型细胞GCS的表达变化,检测对caspase 3/7的活性影响及流式细胞仪测定MBO-asGCS对耐药型细胞的凋亡情况。结果MBO-asGCS转染人耐药型乳腺癌细胞MCF-7/AdrR后,与未转染组细胞的IC50分别是0.18μmol/L和12.50μmol/L,药物敏感性提高了69倍;MBO-asGCS抑制GCS的mRNA表达70%,减少GCS蛋白表达39%(P<0.01);转染MBO-asGCS后耐药型细胞的caspase 3/7活性上升53%(P<0.05),细胞凋亡率上升5.6倍(P<0.01)。结论GCS过表达是耐药型乳腺癌细胞的特征,靶向人GCS的反义寡核苷酸可直接抑制GCS的过表达,诱导耐药细胞凋亡,有效逆转其耐药性,GCS可能是治疗耐药型乳腺癌的一个潜在靶点。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤细胞 反义寡核苷酸 葡萄糖神经酰胺合成酶 药物耐药

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大麦麦芽品质表型效应的关联因子分析 被引量：3

14

作者 平军娇 王大忠 +2 位作者 罗素元 翟旭光 钱刚 《中国种业》 2010年第8期48-51,共4页

采用碘量法和密度瓶法分别测定103份贵州地方栽培大麦的糖化力和麦芽无水浸出率,并分析糖化力与无水浸出率之间相关性,以及受资源产地、棱型的影响。结果表明,参试大麦材料的糖化力（68.12-297.37WK°）和无水浸出率（29.56%-78.50... 采用碘量法和密度瓶法分别测定103份贵州地方栽培大麦的糖化力和麦芽无水浸出率,并分析糖化力与无水浸出率之间相关性,以及受资源产地、棱型的影响。结果表明,参试大麦材料的糖化力（68.12-297.37WK°）和无水浸出率（29.56%-78.50%）表现出性状分布的多态性,其中2份大麦资源麦芽品质符合国家啤酒大麦生产的行业标准。相关性分析结果发现,糖化力与无水浸出率之间成不显著负相关（r=-0.127）,意味着从大样本量材料中分别检测糖化力和无水浸出率才可能筛选到适宜的啤酒大麦种质资源;本研究也提示选育四棱和六棱啤酒大麦可成为丰富国内啤酒大麦种质资源遗传多样性的重要途径,稳定优质啤酒大麦资源遗传力是保持最佳啤酒麦芽品质的重要育种环节。 展开更多

关键词 大麦 麦芽品质 糖化力 麦芽浸出率

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TDP-43与神经退行性疾病 被引量：2

15

作者 顾建兰 刘飞 《南通大学学报（医学版）》 2012年第6期520-523,共4页

TDP-43(transactive response DNA-binding protein of 43 ku)是一种组织中分布广泛、功能多样的核蛋白。研究表明,病理性TDP-43存在于多种神经退行性疾病中。本文就TDP-43的结构、功能及其与神经退行性疾病之间的关系作一综述。

关键词 TDP-43 阿尔茨海默病 肌萎缩侧索硬化症 泛素阳性包涵体额颞叶变性

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番茄NAC家族基因的鉴定及其功能预测 被引量：2

16

作者 张亚莉 张铖 +2 位作者 陈晓旭 刘爱香 孙利军 《安徽农业科学》 CAS 2014年第20期6549-6552,6561,共5页

利用生物信息学方法对番茄NAC转录因子家族成员、序列、保守区、分子量、等电点等基本信息进行分析,结果显示,番茄NAC家族包含101个蛋白质,分为12亚族(I^XII)。功能预测显示,20个NAC基因可能与植物抗逆相关,8个NAC基因可能与植物所参与... 利用生物信息学方法对番茄NAC转录因子家族成员、序列、保守区、分子量、等电点等基本信息进行分析,结果显示,番茄NAC家族包含101个蛋白质,分为12亚族(I^XII)。功能预测显示,20个NAC基因可能与植物抗逆相关,8个NAC基因可能与植物所参与的渗透胁迫和衰老有关,24个NAC基因可能与发育相关。该研究为番茄NAC转录因子家族基因功能分析提供信息基础,从而对番茄品种的改良提供候选基因。 展开更多

关键词 番茄 NAC转录因子 功能预测

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医学生物化学留学生实验课教学的新思路探索 被引量：3

17

作者 尹晓敏 钱慰 殷冬梅 《现代医药卫生》 2015年第23期3660-3661,共2页

该文针对留学生医学生物化学的培养目标,从留学生实验教学的内容、方法及考核形式等多各方面探讨了留学生实验教学改革的新思路,以满足现代留学生医学教育的新需求。生物化学实验教学注重理论与实践相结合,在实验教学过程中更应使用启... 该文针对留学生医学生物化学的培养目标,从留学生实验教学的内容、方法及考核形式等多各方面探讨了留学生实验教学改革的新思路,以满足现代留学生医学教育的新需求。生物化学实验教学注重理论与实践相结合,在实验教学过程中更应使用启发和演示教学手段为主,在理解实验内容和原理的基础上结合医学生物化学本身的特点,提高留学生实践和科研能力,培养合格的医学人才。 展开更多

关键词 教育 医学 本科 生物化学 教育改革 学生 质量控制

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核受体相关因子1基因转染神经干细胞移植治疗帕金森病 被引量：1

18

作者 田美玲 谭雪锋 +4 位作者 金国华 秦建兵 李浩明 朱蕙霞 张蕾 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期600-604,共5页

目的探讨转染核受体相关因子1(Nurr1)基因的神经干细胞(NSCs)移植至帕金森病(PD)大鼠纹状体后向多巴胺能神经元的分化及对PD大鼠行为的影响。方法应用脑立体定位技术构建单侧PD大鼠模型。将PD大鼠随机分为3组,每组8只。假手术组注射生... 目的探讨转染核受体相关因子1(Nurr1)基因的神经干细胞(NSCs)移植至帕金森病(PD)大鼠纹状体后向多巴胺能神经元的分化及对PD大鼠行为的影响。方法应用脑立体定位技术构建单侧PD大鼠模型。将PD大鼠随机分为3组,每组8只。假手术组注射生理盐水,NSCs组移植未转染的NSCs,Nurr1组先将重组质粒载体pEGFP-N1-Nurr1转染NSCs,用RT-PCR方法及免疫荧光染色检测Nurr1基因的表达效果,然后用转染Nurr1基因的NSCs进行移植。细胞用DIL标记后移植至PD大鼠右侧纹状体中,术后2周起用阿朴吗啡诱发旋转试验观测移植后大鼠行为改善情况,12周后用免疫荧光技术检测移植细胞中酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果重组质粒转染后Nurr1基因能在NSCs中过表达。移植后假手术组和NSCs组PD大鼠的旋转圈数均无下降趋势,两者差异无统计学意义(P>0.05);NSCs组移植区可见DIL阳性细胞,但TH免疫阳性细胞较少,平均每视野为(3.21±0.40)个;Nurr1组移植后PD大鼠的旋转圈数从第6周开始下降,移植区DIL/TH双标神经元每视野达(9.28±1.09)个。结论 Nurr1基因过表达能诱导NSCs在PD大鼠纹状体内分化为TH阳性的多巴胺能神经元,并在一定程度上改善大鼠的行为功能。 展开更多

关键词 核受体相关因子1 神经干细胞 帕金森病 基因转染 移植 免疫荧光 大鼠

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大鼠海马神经干细胞Brn-4基因的特异性siRNA研究

19

作者 朱蕙霞 施金洪 +2 位作者 金国华 田美玲 秦建兵 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期1021-1025,F0002,共6页

目的筛选出高效针对大鼠海马神经干细胞Brn-4基因沉默的特异性siRNA。方法设计4对抑制Brn-4基因表达的特异性siRNA序列,通过脂质体转染入体外培养的大鼠海马神经干细胞中,采用RT-PCR和免疫荧光检测转染细胞Brn-4基因的表达,筛选出沉默Br... 目的筛选出高效针对大鼠海马神经干细胞Brn-4基因沉默的特异性siRNA。方法设计4对抑制Brn-4基因表达的特异性siRNA序列,通过脂质体转染入体外培养的大鼠海马神经干细胞中,采用RT-PCR和免疫荧光检测转染细胞Brn-4基因的表达,筛选出沉默Brn-4基因最为有效的siRNA序列,并优化其转染条件。结果4对siRNA不同程度地阻断了海马神经干细胞Brn-4基因的表达,阻断效率最高的1^# siRNA最适转染剂浓度为0.5μmol/L,最佳转染时长为48 h。结论应用1^# siRNA可以高效率地沉默大鼠海马神经干细胞Brn-4基因的表达。 展开更多

关键词 海马 神经干细胞 SIRNA Brn-4 大鼠

原文传递

三氧化二砷抑制人肝癌细胞侵袭性的体外研究 被引量：1

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作者 周艳 于志坚 《南通大学学报（医学版）》 2010年第1期46-48,F0003,共4页

目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响,为As2O3用于原发性肝癌的治疗提供实验依据。方法:以0.25、0.5、1.0、2.0、4.0μg/ml的As2O3与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育24、48和72h后,应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT... 目的:研究三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞侵袭能力的影响,为As2O3用于原发性肝癌的治疗提供实验依据。方法:以0.25、0.5、1.0、2.0、4.0μg/ml的As2O3与人肝癌细胞株SMMC-7721孵育24、48和72h后,应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)观察As2O3对细胞生长的影响;应用Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭和运动实验,观察As2O3对肝癌细胞侵袭能力的影响。结果:应用As2O3处理后人肝癌SMMC-7721细胞生长受到抑制,且有时间-浓度依赖性;同时肝癌细胞过膜细胞数减少,侵袭能力受到抑制。结论:As2O3在体外能有效抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖和侵袭能力,且有浓度依赖性。 展开更多

关键词 三氧化二砷 肝癌细胞株 侵袭

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