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PCR法快速检测鸭疫里氏杆菌的研究 被引量:26
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作者 杨建远 邓舜洲 何后军 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期439-442,共4页
根据Gen-Bank中25株鸭疫里氏杆菌(RA)的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,在其高度保守区设计了一对特异性引物,成功地建立了鸭疫里氏杆菌的快速、准确PCR检测方法。RA参考菌株J04(2型)、J07(JX1型)均能扩增出671bp的特异性目的条带,而对鸭源大... 根据Gen-Bank中25株鸭疫里氏杆菌(RA)的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,在其高度保守区设计了一对特异性引物,成功地建立了鸭疫里氏杆菌的快速、准确PCR检测方法。RA参考菌株J04(2型)、J07(JX1型)均能扩增出671bp的特异性目的条带,而对鸭源大肠杆菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门氏菌、鸭源葡萄球菌的扩增结果均为阴性。PCR产物经EcoRI酶切鉴定得494bp和177bp两个预期条带。最低检出基因组DNA浓度为800fg。用全菌体进行PCR时,本实验室分离鉴定的60株RA均能够扩增出特异性目的条带。25份临床疑似病例的分离菌株的PCR扩增阳性率与生化鉴定率完全一致。该方法表明能从病料组织培养8h的混合菌群中快速、准确地检测到RA,可用于RA的快速诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 鸭疫里氏杆菌 快速检测 PCR法 PCR检测方法 多杀性巴氏杆菌 流行病学调查 特异性引物 PCR产物 dna浓度 PCR扩增 基因序列 外膜蛋白 大肠杆菌 沙门氏菌 葡萄球菌 酶切鉴定 分离鉴定 生化鉴定 分离菌株 疑似病例 组织培养
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碳纳米管修饰金电极检测特定序列DNA 被引量:14
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作者 唐婷 彭图治 时巧翠 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第22期2042-2046,共5页
利用化学偶联法将末端修饰氨基的寡聚核苷酸固定在表面修饰有羧基化碳纳米管(CNTs-COOH)的金电极表面,制备新型核酸探针,可以特异性结合目标单链寡聚核苷酸.以阿霉素作为嵌合指示剂,利用示差脉冲法测定杂交的结果.经过实验条件的优化,测... 利用化学偶联法将末端修饰氨基的寡聚核苷酸固定在表面修饰有羧基化碳纳米管(CNTs-COOH)的金电极表面,制备新型核酸探针,可以特异性结合目标单链寡聚核苷酸.以阿霉素作为嵌合指示剂,利用示差脉冲法测定杂交的结果.经过实验条件的优化,测定DNA浓度在1.0×10^(-6)~1.0×10^(-9)mol/L呈良好的线性关系.检测限为:2.54×10^(-10)mol/L.碳纳米管特有的纳米结构对检测结果的放大作用,提高了该传感器的检测限和灵敏度. 展开更多
关键词 羧基化碳纳米管 dna杂交 阿霉素 示差脉冲伏安法 修饰金电极 dna浓度 碳纳米管 检测结果 寡聚核苷酸 序列 特异性结合 电极表面 表面修饰
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十六烷基溴化吡啶与脱氧核糖核酸作用的共振光散射光谱及其分析应用 被引量:8
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作者 冯素玲 刘雪平 樊静 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第3期377-380,共4页
在碱性条件下,十六烷基溴化吡啶(CPB)与脱氧核糖核酸(DNA)共存时,体系产生较强的共振光散射,其强度与DNA浓度呈线性关系,据此提出了基于阳离子表面活性剂的共振光散射法定量测定DNA.在最佳实验条件下,测得小牛胸腺DNA(ctDNA)和鱼精子DNA... 在碱性条件下,十六烷基溴化吡啶(CPB)与脱氧核糖核酸(DNA)共存时,体系产生较强的共振光散射,其强度与DNA浓度呈线性关系,据此提出了基于阳离子表面活性剂的共振光散射法定量测定DNA.在最佳实验条件下,测得小牛胸腺DNA(ctDNA)和鱼精子DNA(fsDNA)的线性范围分别为0.2~2.0 mg/L和0.2~1.25 mg/L,检出限分别为0.07 mg/L和0.05 mg/L.该方法已应用于合成样品及实际样品中DNA含量的测定. 展开更多
关键词 CPB 脱氧核糖核酸 dna含量 共振光散射光谱 精子 定量测定 dna浓度 烷基溴 吡啶 溴化
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两性离子表面活性剂作为共振光散射探针测定脱氧核糖核酸 被引量:6
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作者 陈展光 丁卫锋 +3 位作者 韩雅莉 卢峰 廖栩泓 陈小明 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期519-522,共4页
将两性离子表面活性剂用于DNA的共振光散射测定.在pH值为7.96~9.40较宽的范围内,DNA与椰油酰胺丙基-2-羟基-3-磺基丙基甜菜碱(HSB)在392 nm处有稳定的共振光散射增强,其强度与DNA浓度呈线性关系,建立了一种测定DNA的新方法.线性范围为0... 将两性离子表面活性剂用于DNA的共振光散射测定.在pH值为7.96~9.40较宽的范围内,DNA与椰油酰胺丙基-2-羟基-3-磺基丙基甜菜碱(HSB)在392 nm处有稳定的共振光散射增强,其强度与DNA浓度呈线性关系,建立了一种测定DNA的新方法.线性范围为0.02~4.25 mg/L;检出限达1.5 μg/L.该法简便、快速,用于合成样品中DNA的测定,重现性好,结果满意.同时探讨了有关机理. 展开更多
关键词 两性离子表面活性剂 共振光散射探针 脱氧核糖核酸 测定 共振光散射增强 丙基甜菜碱 dna浓度 酰胺丙基 线性关系 线性范围 合成样品 pH值 检出限 重现性 磺基 羟基
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麦类作物体细胞基因组原位杂交(GISH)效果影响因素的分析 被引量:12
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作者 林小虎 李兴锋 +2 位作者 王黎明 陆文辉 王洪刚 《实验生物学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期126-132,共7页
以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦-中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明:细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想... 以八倍体小滨麦、八倍体小黑麦、八倍体小偃麦、小麦-中间偃麦草双体异附加系为实验材料对影响麦类作物体细胞GISH技术实验效果的因素进行分析,研究结果表明:细胞分裂相多、染色体分散良好、无杂质影响的高质量的染色体制片是取得理想实验效果的基础;探针DNA浓度与封阻DNA浓度的比例及杂交后洗脱条件的控制是取得理想实验效果的关键。此外,还对麦类作物体细胞基因组原位杂交实验中出现的染色体丢失、外源染色体无杂交信号、杂交信号的强弱、杂交信号过多(杂交背景重)或过少、噪音信号及杂交污点产生的原因进行了分析,并提出了相应的解决方法或注意事项。 展开更多
关键词 麦类作物 基因组原位杂交 体细胞 dna浓度 八倍体小滨麦 八倍体小黑麦 八倍体小偃麦 双体异附加系 杂交信号 理想实验 中间偃麦草 染色体制片 染色体丢失 外源染色体 GISH 实验材料 细胞分裂 研究结果 杂质影响 洗脱条件
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番茄溃疡病菌分子检测技术 被引量:10
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作者 付鹏 郭亚辉 +1 位作者 张晓梅 郭坚华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期118-122,共5页
对中国三类检疫性有害生物番茄溃疡病菌(Clavibactermichiganensissubsp.michiganensis)进行PCR检测方法的研究。利用1对特异性引物ClaF1ClaR2,对5个番茄溃疡病菌进行特异性扩增,得到了一段长250bp的PCR产物,参试的其他棒形细菌以及其... 对中国三类检疫性有害生物番茄溃疡病菌(Clavibactermichiganensissubsp.michiganensis)进行PCR检测方法的研究。利用1对特异性引物ClaF1ClaR2,对5个番茄溃疡病菌进行特异性扩增,得到了一段长250bp的PCR产物,参试的其他棒形细菌以及其他属的植物病原细菌均无扩增产物。该检测方法特异性强、灵敏度高,在50pg的模板DNA浓度下还能检测到很强的条带。利用此引物可以检测到1×105个菌体。 展开更多
关键词 溃疡病菌 分子检测技术 番茄 检疫性有害生物 PCR检测方法 植物病原细菌 特异性引物 特异性扩增 PCR产物 dna浓度 扩增产物 sp. sub 灵敏度
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肝细胞癌病人血浆循环DNA定量分析及其临床意义 被引量:10
7
作者 任宁 钦伦秀 +3 位作者 屠红 刘银坤 张博恒 汤钊猷 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期134-138,共5页
目的 定量检测肝细胞癌 (HCC)病人血浆循环DNA并探讨其临床价值。方法 收集 79例肝功能正常的HCC病人术前血浆样本以及 2 0例健康志愿者、2 0例代偿期肝硬化病人和 2 0例活动性乙型肝炎病人的血浆样本 ,抽提血浆循环DNA。将血浆循环DN... 目的 定量检测肝细胞癌 (HCC)病人血浆循环DNA并探讨其临床价值。方法 收集 79例肝功能正常的HCC病人术前血浆样本以及 2 0例健康志愿者、2 0例代偿期肝硬化病人和 2 0例活动性乙型肝炎病人的血浆样本 ,抽提血浆循环DNA。将血浆循环DNA与荧光染料SYBRgreenⅠ按比例稀释并充分混匀后通过紫外与可见光成像分析系统定量。结果 HCC、肝硬化和肝炎病人血浆循环DNA浓度分别为 (47.1± 4 3.7)ng/mL、(30 .0± 1 3.3)ng/mL和 (6 5 .3± 71 .6 )ng/mL ,均明显高于健康人群血浆循环DNA浓度 (1 7.6± 9.5 )ng/mL ,差异在统计学上有显著性 (P =0 .0 0 0 ;P =0 .0 0 2 ;P =0 .0 0 1 ) ,而HCC和肝硬化病人以及病毒性肝炎病人两组之间的血浆循环DNA浓度无明显差异 (P =0 .1 91 ;P =0 .6 85 )。伴肝内播散灶或脉管癌栓的 4 1例HCC病人的血浆循环DNA浓度 (5 4 .3± 4 1 .6 )ng/mL明显高于不伴肝内播散灶或脉管癌栓的 38例病人 (39.3± 4 5 .0 )ng/mL(P=0 .0 0 2 )。血浆循环DNA浓度与HCC病人肿瘤大小、TNM分期、2年无瘤生存率、1年和 2年总体生存率密切相关 (P =0 .0 0 8;P =0 .0 4 0 ;P =0 .0 1 0 ;P =0 .0 1 6 ;P =0 .0 0 1 ) ,而与肿瘤数目、肿瘤包膜、肿瘤分化、血清AFP浓度及 1年无瘤生存率无明显关系。多因素分? 展开更多
关键词 血浆循环 肝细胞癌病人 dna定量 临床意义 分析及 dna浓度 循环dna 无瘤生存率 肝炎病人 血浆样本 肝内播散 HCC 健康志愿者 肝功能正常 green 肝硬化病人 TNM分期 血清AFP 多因素分析 临床价值 定量检测 病人术前 SYBR 荧光染料 分析系统 健康人群 肿瘤大小
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FFPE组织提取DNA样本质量评价的多中心调研 被引量:11
8
作者 杨军 张标 +1 位作者 马恒辉 叶庆 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期691-695,共5页
中性福尔马林固定石蜡包埋(formalin fixed paraffin embedded,FFPE)一直是病理科处理组织样本的标准程序,也是病理科形态学诊断的基石。随着医学的发展,靶向药物在临床治疗中被广泛地使用,FFPE的组织块还必须用于药物靶点的基因诊断... 中性福尔马林固定石蜡包埋(formalin fixed paraffin embedded,FFPE)一直是病理科处理组织样本的标准程序,也是病理科形态学诊断的基石。随着医学的发展,靶向药物在临床治疗中被广泛地使用,FFPE的组织块还必须用于药物靶点的基因诊断,特别是体细胞突变相关基因诊断,为患者提供基因的诊断结果以指导临床诊疗。 展开更多
关键词 多中心调研 FFPE dna浓度 dna纯度 dna完整性
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梨树RAPD分析条件的优化 被引量:7
9
作者 曲柏宏 金香兰 陈艳秋 《延边大学农学学报》 2002年第4期231-234,共4页
以黄花梨为试材,建立了梨树RAPD分析的优化反应条件,即25μL反应体系中含有Tris-HCl(pH9.0)10mmol/L,KCl50mmol/L,MgCl22.0mmol/L,dNTP200μmol/L,模板DNA10ng,引物400μmol/L,TaqDNA聚合酶1.5U.适宜的扩增程序为94℃120s,1个循环;94℃... 以黄花梨为试材,建立了梨树RAPD分析的优化反应条件,即25μL反应体系中含有Tris-HCl(pH9.0)10mmol/L,KCl50mmol/L,MgCl22.0mmol/L,dNTP200μmol/L,模板DNA10ng,引物400μmol/L,TaqDNA聚合酶1.5U.适宜的扩增程序为94℃120s,1个循环;94℃60s、37℃75s、72℃120s,45个循环;72℃10min,1个循环. 展开更多
关键词 梨树 RAPD分析 dna浓度 引物浓度 dNTP浓度
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基于磁性微球的无标记化学发光端粒传感新技术 被引量:4
10
作者 曹志娟 刘彩云 +2 位作者 夏鹰 甲菲雅亮 卢建忠 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期407-410,共4页
近年来无标记型DNA传感技术的研究已成为病原基因测定和基因疾病诊断等领域新的研究热点之一.基于磁性微球分离和富集的方法,建立了一种新型的无标记化学发光检测技术,并成功地应用于特定序列DNA——端粒的检测.首先采用dT20修饰的磁性... 近年来无标记型DNA传感技术的研究已成为病原基因测定和基因疾病诊断等领域新的研究热点之一.基于磁性微球分离和富集的方法,建立了一种新型的无标记化学发光检测技术,并成功地应用于特定序列DNA——端粒的检测.首先采用dT20修饰的磁性微球,与连接有dA20的捕获探针DNA杂交,然后再与端粒进行第二步杂交反应.磁性分离洗涤后,利用端粒中富含的G碱基与3,4,5-三甲氧基苯乙二醛反应产生特异性化学发光,从而实现特定序列DNA——端粒的无标记检测.实验结果表明该法具有操作简便、分析快速、灵敏度高、专属性好等特点.目标DNA浓度在5×10-9~1×10-7mol/L浓度范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9918. 展开更多
关键词 端粒 磁性微球 诊断 dna浓度 基因测定 基因疾病 化学发光 杂交 原基 病原
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γ射线诱导DNA损伤中DNA浓度和剂量率的影响 被引量:5
11
作者 孔福全 王潇 +3 位作者 倪嵋楠 隋丽 杨明建 赵葵 《原子核物理评论》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期103-107,共5页
在进行辐射致DNA损伤中,DNA浓度和剂量率是两个重要的因素。利用γ射线在不同的剂量率下对不同浓度的质粒DNApUC19水溶液进行了辐照,利用凝胶电泳对辐照后的样品进行分析。结果表明,在同一剂量下被辐照的DNA样品,随浓度的降低DNA损伤越... 在进行辐射致DNA损伤中,DNA浓度和剂量率是两个重要的因素。利用γ射线在不同的剂量率下对不同浓度的质粒DNApUC19水溶液进行了辐照,利用凝胶电泳对辐照后的样品进行分析。结果表明,在同一剂量下被辐照的DNA样品,随浓度的降低DNA损伤越来越严重;通过分析软件和理论公式得到的每个DNA上的双链断裂数随着DNA浓度的变化呈现为非线性趋势。 展开更多
关键词 Γ射线 dna损伤 dna浓度 剂量率 pUC19
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辐射致DNA损伤中DNA浓度的影响 被引量:5
12
作者 孔福全 王潇 +3 位作者 倪嵋楠 隋丽 杨明建 赵葵 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2826-2831,共6页
利用重离子7Li和γ射线在同一剂量和不同浓度下对质粒DNA的水溶液和添加了甘露醇的溶液进行了辐照.凝胶电泳结果表明,随着DNA浓度的降低,经重离子7Li和γ射线辐照后,DNA损伤越来越严重.当添加了自由基清除剂甘露醇后,重离子7Li和γ射线... 利用重离子7Li和γ射线在同一剂量和不同浓度下对质粒DNA的水溶液和添加了甘露醇的溶液进行了辐照.凝胶电泳结果表明,随着DNA浓度的降低,经重离子7Li和γ射线辐照后,DNA损伤越来越严重.当添加了自由基清除剂甘露醇后,重离子7Li和γ射线辐照后的结果出现了很大的不同.γ射线辐照DNA后,DNA损伤很轻,只有开环形态出现轻微变化.重离子辐射后的结果表明在自由基被大部分清除的条件下,线性DNA依然存在且随着DNA浓度的降低而增加,进一步证明了在重离子辐照致DNA双链断裂中由于直接作用而诱发的DSB(double-strand break)是不能被清除的.对实验数据的计算与分析表明,当DNA浓度低于一定值(比如50ng/μL)后,重离子辐照过程中自由基的间接作用与电离的直接作用所造成的平均双链断裂损伤的比例是一定的,与DNA的浓度没有关系.随着浓度的增加,重离子辐照的直接作用在辐照损伤过程中所占的比重增加.还讨论了DNA浓度在重离子7Li和γ射线辐照过程中对DNA损伤影响的可能成因,诸如重离子的径迹结构、反应几率和DNA构象变化等. 展开更多
关键词 重离子 质粒dna dna浓度 Γ射线 链断裂
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新疆野生啤酒花DNA提取及RAPD反应体系的建立 被引量:3
13
作者 原俊凤 张霞 +2 位作者 王绍明 张玲 徐基平 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第1期73-77,共5页
采用 2种方法提取啤酒花的基因组DNA ,并分析了样品的不同状况和是否纯化对所提DNA质量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明 :采用改进的高盐低pH法优于CTAB法。以此法所提DNA为模板进行随机扩增多态DNA(RAPD)试验 ,分别测试了Mg2 +、dNTP... 采用 2种方法提取啤酒花的基因组DNA ,并分析了样品的不同状况和是否纯化对所提DNA质量及其RAPD扩增效果的影响。结果表明 :采用改进的高盐低pH法优于CTAB法。以此法所提DNA为模板进行随机扩增多态DNA(RAPD)试验 ,分别测试了Mg2 +、dNTP、Taq酶、模板DNA浓度和退火温度对反应结果的影响 。 展开更多
关键词 RAPD反应体系 啤酒花 dna提取 随机扩增多态dna(RAPD) 野生 新疆 基因组dna 高盐低pH法 CTAB法 dna浓度 扩增效果 DNTP Taq酶 退火温度 模板
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一种禽类血液基因组DNA高效提取通用方法的建立 被引量:4
14
作者 喻世刚 王钢 +1 位作者 廖娟 刘方庆 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第13期195-198,共4页
为了建立一种适合禽类血液的廉价、高效、通用的基因组DNA提取方法,试验采用鸡、鸭、鹅、鸽、火鸡、麻雀6种禽类血液为材料,提取的禽类血液DNA经微量分光光度计分析、基因组DNA凝胶成像分析以及PCR扩增效果检测。结果表明:提取的6种禽... 为了建立一种适合禽类血液的廉价、高效、通用的基因组DNA提取方法,试验采用鸡、鸭、鹅、鸽、火鸡、麻雀6种禽类血液为材料,提取的禽类血液DNA经微量分光光度计分析、基因组DNA凝胶成像分析以及PCR扩增效果检测。结果表明:提取的6种禽类血液DNA质量较好(OD260/OD280值范围为1.80-1.84,OD260/OD230值范围为2.21-2.30),基因组DNA电泳主条带和PCR扩增产物条带清晰、整齐、无拖带。说明本方法能够完全适用于大批量禽类血液基因组DNA的提取,且DNA纯度较好,满足后续相关分子生物学试验要求。 展开更多
关键词 禽类血液 基因组dna 提取方法 PCR dna浓度 dna纯度
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石蜡组织存放时间对提取DNA质量的影响 被引量:3
15
作者 李丹 刘亚丽 +5 位作者 刘静 李燕 刘玉 李江曼 袁果 王立东 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2014年第1期9-10,13,共3页
目的探讨储存时间对石蜡包埋组织提取DNA质量的影响。方法采用试剂盒方法,分别提取10例保存1~3a的石蜡组织样品DNA,NanoDrop-2000分光光度仪检测DNA浓度和OD260/OD280比值,质量分数2%琼脂糖进行电泳检测,采用单因素方差分析比较DNA质量... 目的探讨储存时间对石蜡包埋组织提取DNA质量的影响。方法采用试剂盒方法,分别提取10例保存1~3a的石蜡组织样品DNA,NanoDrop-2000分光光度仪检测DNA浓度和OD260/OD280比值,质量分数2%琼脂糖进行电泳检测,采用单因素方差分析比较DNA质量。结果琼脂糖凝胶电泳显示:石蜡包埋组织提取DNA降解明显。储存1~3a的石蜡包埋组织提取DNA的浓度有明显差异(P=0.04),储存时间越长,DNA浓度越低,但提取DNA的纯度无明显差异(P〉0.05)。结论石蜡包埋组织储存时间越长,提取DNA浓度越低,但纯度无明显差异。 展开更多
关键词 石蜡包埋组织 dna提取 dna浓度
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SEN virus does not affect treatment response in hepatitis C virus coinfected patients but SEN virus response depends on SEN virus DNA concentration 被引量:2
16
作者 Abdurrahman Sagin Ortwin Adams +3 位作者 OliverKirschberg AndreasErhardt TobiasHeintges Dieter Hussinger 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2004年第13期1893-1897,共5页
AIM: To clarify the effect of SEN virus (SENV) infection on a combination therapy including interferon alfa (IFN-α) or pegylated-IFN with ribavirin in patients with chronic hepatitis and the effect of a combination t... AIM: To clarify the effect of SEN virus (SENV) infection on a combination therapy including interferon alfa (IFN-α) or pegylated-IFN with ribavirin in patients with chronic hepatitis and the effect of a combination therapy on SENV.METHODS: SENV DNA was determined by polymerase chain reaction in serum samples from 95 patients with chronic hepatitis C. Quantitative analysis was done for SENV H DNA.RESULTS: Twenty-one (22%) of 95 patients were positive for SENV DNA. There was no difference in clinical and biochemical parameters between patients with HCV infection alone and coinfected patients. The sustained response rate for HCV clearance after combination therapy did not differ between patients with SENV (52%) and without SENV(50%, n.s.). SENV DNA was undetectable in 76% of the initially SENV positive patients at the end of follow-up. SENV H response to combination therapy was significantly correlated with SENV DNA level (P=-0.05).CONCLUSION: SENV infection had no influence on the HCV sustained response rate to the combination therapy.Response rate of SENV to the combination therapy depends on SENV DNA level. 展开更多
关键词 Adult Antiviral Agents dna Virus Infections dna Viruses purification dna Viral Drug Therapy Combination Female HEPACIVIRUS Hepatitis C Chronic Humans Interferon Alfa-2a INTERFERON-ALPHA Male Middle Aged Polyethylene Glycols Prevalence RNA Viral RIBAVIRIN
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动物组织DNA试剂盒提取水牛精液基因组DNA效果观察 被引量:2
17
作者 李芳芳 郭亚芬 +11 位作者 江明生 李铭 潘堂峰 刘德玉 龙开旭 潘能庆 李美珍 邓祝新 覃孝杰 方奕雄 许鹏 王国利 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第9期192-193,共2页
为了快速、高效地提取水牛精液基因组DNA,试验采用动物组织DNA试剂盒并对一些步骤进行优化,以此方法抽提DNA。结果表明:使用动物组织DNA试剂盒可以获得水牛精液基因组DNA,DNA纯度(OD260/OD280值)为1.71±0.22,浓度为(61.38±... 为了快速、高效地提取水牛精液基因组DNA,试验采用动物组织DNA试剂盒并对一些步骤进行优化,以此方法抽提DNA。结果表明:使用动物组织DNA试剂盒可以获得水牛精液基因组DNA,DNA纯度(OD260/OD280值)为1.71±0.22,浓度为(61.38±20.68)ng/μL,水牛精液基因组DNA可直接用于PCR反应。 展开更多
关键词 动物组织dna试剂盒 水牛 冷冻精液基因组dna dna纯度 dna浓度
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质子剂量和DNA浓度对DNA损伤的影响 被引量:2
18
作者 隋丽 王潇 +5 位作者 周平坤 倪嵋楠 孔福全 杨磊 刘建成 赵葵 《核技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期447-451,共5页
利用HI-13串列加速器产生的16 MeV质子,使用凝胶电泳技术对添加和未添加甘露醇的pUC19质粒DNA溶液中DNA分子形态变化进行了观测,研究了同一剂量下不同DNA浓度及同一DNA浓度下不同剂量对DNA链断裂产额的影响。结果表明,未添加甘露醇溶液... 利用HI-13串列加速器产生的16 MeV质子,使用凝胶电泳技术对添加和未添加甘露醇的pUC19质粒DNA溶液中DNA分子形态变化进行了观测,研究了同一剂量下不同DNA浓度及同一DNA浓度下不同剂量对DNA链断裂产额的影响。结果表明,未添加甘露醇溶液中DNA浓度效应较明显。两种体系下DNA均表现出明显的剂量响应,即分子形态由完整的超螺旋形态逐渐向发生单链断裂的开环形态或双链断裂的线性形态变化,且未添加甘露醇的体系链断裂产额相对更高,表明甘露醇可清除自由基,有效降低质子致DNA单链和双链断裂的发生。此外,还研究了10 ng/μL和100 ng/μL DNA浓度下,不同剂量对DNA损伤的影响。结果显示,DNA溶液浓度越低,达到同样损伤所需的辐照剂量越小。 展开更多
关键词 质子 质粒dna 双链断裂 dna浓度
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Mn-doped ZnS quantum dots/methyl violet nanohybrids for room temperature phosphorescence sensing of DNA 被引量:2
19
作者 HE Yu YAN XiuPing 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2011年第8期1254-1259,共6页
Mn-doped ZnS quantum dots/methyl violet nanohybrids were explored to develop a novel room temperature phosphorescence (RTP) sensor for the detection of DNA. Methyl violet (MV) as the electron acceptors was adsorbed on... Mn-doped ZnS quantum dots/methyl violet nanohybrids were explored to develop a novel room temperature phosphorescence (RTP) sensor for the detection of DNA. Methyl violet (MV) as the electron acceptors was adsorbed on the surface of the quantum dots (QDs) to quench the RTP of the Mn-doped ZnS QDs through an electron-transfer process under excitation. The addition of DNA recovered the RTP signal of the Mn-doped ZnS QDs due to the binding of MV with DNA and the removal of MV from the surface of the Mn-doped ZnS QDs. Under the optimal conditions, the enhanced RTP intensity of the Mn-doped ZnS QDs/MV nanohybrids linearly increased with the concentration of DNA from 0.08 to 12 mg L-1 with the detection limit of 33.6 μg L-1. The relative standard deviation for eleven replicate detections of the reagent blank was 3.7%. The developed method was applied to the detection of DNA in spiked urine samples with recoveries of 96%-103% without interference from nonspecific fluorescence. 展开更多
关键词 room temperature phosphorescence quantum dots photoinduced electron transfer sensor dna
原文传递
几种作物及品种DNA相对含量研究初报 被引量:2
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作者 任贤 刘常青 马振军 《宁夏农林科技》 1998年第5期1-4,共4页
利用陈永强“氯仿—异戊醇—核酸酶法”首次对普通小麦、燕麦、水稻、玉米、冰草5种作物以及同种作物的不同品种和不同器官的DNA进行提取,结果表明,不同作物的幼穗DNA浓度不同,冰草幼穗DNA浓度(0.75μg/ml)是燕... 利用陈永强“氯仿—异戊醇—核酸酶法”首次对普通小麦、燕麦、水稻、玉米、冰草5种作物以及同种作物的不同品种和不同器官的DNA进行提取,结果表明,不同作物的幼穗DNA浓度不同,冰草幼穗DNA浓度(0.75μg/ml)是燕麦幼穗的4倍,玉米和水稻的幼穗DNA浓度很接近,为0.363μg/ml和0.378μg/ml。同一种作物不同品种的幼穗DNA浓度也不同,爆裂玉米品种幼穗DNA浓度(0.55μg/ml)是掖单19号的3.1倍,水稻品种216的DNA浓度高于宁糯4号和51,通北燕麦的幼穗DNA浓度高于其它3种燕麦。同一种作物不同器官的DNA浓度也不一致,幼穗的DNA浓度高于幼茎。 展开更多
关键词 dna浓度 小麦 玉米 燕麦 水稻 冰草
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