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不同辐射抗拒鼻咽癌细胞微小RNA差异表达的研究 被引量：25
1
作者 王旭丹 杨惠玲 +7 位作者 郭禹标 梁志慧 赵睿颖 夏云飞 苏勇 Mong-Hong Lee 王瑾 郑芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1045-1048,共4页
目的:在验证鼻咽癌(nasopharygycarcinoma,NPC)细胞CNE-1和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上,探索微小RNA(miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达差异。方法:通过观察X线照射对CNE-1和CNE-2细胞克隆形成数目的影响,利用SigmaPlot软件进行分析及线性... 目的:在验证鼻咽癌(nasopharygycarcinoma,NPC)细胞CNE-1和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上,探索微小RNA(miRNA)在CNE-1和CNE-2中的表达差异。方法:通过观察X线照射对CNE-1和CNE-2细胞克隆形成数目的影响,利用SigmaPlot软件进行分析及线性二次模型拟合存活曲线,比较CNE-1和CNE-2细胞剂量存活曲线及其生物学参数;采用Paraflo microfluidic microRNA芯片检测,用激光扫描器收集杂交的图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan3·1数据库资料(http:∥www·targetscan·org),预测CNE-1和CNE-2细胞microRNA差异表达与NPC放射敏感性差异的关系。结果:发现在CNE-1和CNE-2细胞中miRNA的差异表达,即与CNE-2细胞比,在检测的326个microRNA中,CNE-1细胞中有20个miRNA上调,13个miRNA下调,其中检测量的绝对值在2000以上且两者相差在3倍以上的miRNA有hsa-miR-152、hsa-miR-7、hsa-miR-205和hsa-miR-572;分析结果提示明显差异表达的miRNA与放疗敏感性密切相关。结论:不同辐射抗拒NPC细胞株CNE-1和CNE-2细胞的microRNA的表达有差异;差异表达的miRNA与放疗敏感有关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 cne-1细胞 cne-2细胞 MICRORNA 辐射
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2Gy多分割不同顺序照射对鼻咽癌CNE-2细胞生物效应的研究 被引量：24
2
作者 李金高 叶建明 +1 位作者 陈文学 王小平 《实用癌症杂志》 2009年第2期125-128,共4页
目的探讨总剂量为2 Gy时部分分割和顺序照射对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应的差异。方法采用克隆形成法和四唑盐(MTT)比色法,检测2 Gy剂量照射后鼻咽癌CNE-2细胞的细胞生存率和具有代谢活性细胞比例。结果在多个等分割照射中,较小分割(≤0... 目的探讨总剂量为2 Gy时部分分割和顺序照射对鼻咽癌CNE-2细胞的杀伤效应的差异。方法采用克隆形成法和四唑盐(MTT)比色法,检测2 Gy剂量照射后鼻咽癌CNE-2细胞的细胞生存率和具有代谢活性细胞比例。结果在多个等分割照射中,较小分割(≤0.5 Gy)多次照射的细胞存活率均明显低于单次照射组(2 Gy),差异有统计学意义(P<0.05),而较大分割(1 Gy)照射与单次照射组细胞生存率差异无统计学意义;在2个部分分割和3个部分分割照射中,随着S分割剂量的增大,各S-L和S-S-L照射组细胞生存率呈逐渐下降趋势,至S分割为0.4 Gy(S-L)或者0.5Gy(S-S-L)组时细胞生存率最低;大部分S-L照射组细胞生存率明显低于L-S照射组,大部分S-S-L照射组细胞生存率和相对细胞生存率明显低于L-S-S照射组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论总剂量为2 Gy照射时,分割剂量大小和照射顺序是影响鼻咽癌CNE-2细胞放射治疗生物效应的重要因素。 展开更多
关键词 鼻咽癌 cne-2细胞 低剂量照射 低剂量放射超敏感性 分割剂量排列顺序
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人参多糖介导Wnt/β-catenin信号转导诱导人鼻咽癌细胞CNE-2的凋亡 被引量：17
3
作者 范家铭 刘泽洪 +3 位作者 李静 王亚平 杨绿源 黄江菊 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第19期3332-3337,共6页
目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,... 目的:观察人参多糖(ginseng polysaccharide,GPS)对人鼻咽癌细胞CNE-2的增殖和凋亡的影响以及可能的机制探讨。方法:CCK8法观察人参多糖对人鼻咽癌CNE-2细胞生长的影响。取对数生长期的CNE-2细胞,用不同质量浓度人参多糖(GPS)0,0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1分别作用48 h后,流式细胞术检测其对CNE-2细胞凋亡的诱导作用;Hoechst-33258染色和电镜观察细胞的形态改变。Real-time PCR检测细胞β-catenin mRNA的表达。采用免疫荧光染色检测细胞中β-catenin,TCF4蛋白定位及表达量的变化。Western blot检测细胞中β-catenin,Bcl-2,Bax蛋白的变化。结果:CCK8法测得人参多糖能明显抑制CNE-2细胞的增殖,其抑制作用呈剂量、时间依赖性,GPS处理细胞48 h的IC50为0.39 g·L-1;质量浓度分别为0.1,0.2,0.3,0.4 g·L-1的GPS作用人鼻咽癌CNE-2细胞48 h后细胞凋亡率分别为(5.69±0.29)%,(10.3±0.63)%,(15.4±0.74)%,(35.7±1.86)%,与对照组(2.08±0.11)%比较均有显著性差异(P<0.05);Hoechst-33258染色结果显示细胞凋亡特征。电镜下可见0.4 g·L-1GPS诱导48 h后可使CNE-2细胞出现凋亡小体。Real-time PCR显示β-catenin mRNA表达明显降低。激光共聚焦结果显示人参多糖作用48 h后β-catenin和TCF4在胞核中表达明显减少,β-catenin表达区域由胞核向胞膜转移。Western blot结果显示经浓度梯度增加的人参多糖作用CNE-2细胞48 h后,β-catenin和抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显减弱;而促凋亡蛋白Bax表达上调(P<0.05)。结论:人参多糖可明显抑制CNE-2细胞增殖促进细胞凋亡。Wnt/β-catenin信号通路的受阻可能是GPS诱导人鼻咽癌细胞CNE-2凋亡的一个重要机制。 展开更多
关键词 人参多糖 cne-2细胞 细胞增殖 凋亡 WNT Β-CATENIN
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相同遗传背景不同辐射抗拒鼻咽癌细胞miRNA差异表达的研究 被引量：9
4
作者 曲昌菊 王旭丹 +6 位作者 杨惠玲 郭禹标 梁志慧 赵睿颖 夏云飞 Lee Mong-hong 郑芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期484-488,共5页
目的:在验证相同遗传背景鼻咽癌(NPC)细胞CNE-2R和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上,探索微小RNA(miRNA)在CNE-2R和CNE-2中的表达差异与肿瘤辐射抗拒的关系。方法:通过观察X线照射对CNE-2R和CNE-2细胞克隆形成数目的影响,利用SigmaPlot软件... 目的:在验证相同遗传背景鼻咽癌(NPC)细胞CNE-2R和CNE-2不同辐射抗拒性的基础上,探索微小RNA(miRNA)在CNE-2R和CNE-2中的表达差异与肿瘤辐射抗拒的关系。方法:通过观察X线照射对CNE-2R和CNE-2细胞克隆形成数目的影响,利用SigmaPlot软件进行分析及线性二次模型拟合存活曲线,比较CNE-2R和CNE-2细胞剂量存活曲线及其生物学参数;采用μParafloTM微流体芯片检测,用激光扫描仪(GenePix4000B,Molecular Device)采集杂交图像,经LOWESS滤器规范信号后分析数据差异,根据Targetscan311数据库资料(http://www.targetscan.org),预测CNE-2R和CNE-2细胞miRNA差异表达与NPC不同辐射抗拒的关系。结果:发现在CNE-2R和CNE-2细胞中存在miRNA的差异表达,即与CNE-2细胞比,在检测到的719个miRNA中,CNE-2R细胞中有37个上调,29个下调,其中检测量的绝对值≥2000且两者相差≥2倍的miRNA共12个:hsa-miR-200b、hsa-miR-224、hsa-miR-26b、hsa-miR-125a-5p、hsa-miR-205、hsa-let-7e、hsa-let-7g、hsa-miR-19b、hsa-miR-24、hsa-miR-103、hsa-miR-106b和hsa-miR-93。分析结果表明显著差异表达的miRNA与辐射抗拒密切相关。结论:相同遗传背景不同辐射抗拒NPC细胞株CNE-2R和CNE-2细胞的miRNA表达存在差异;差异表达的miRNA与辐射抗拒相关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 cne-2细胞 cne-2R细胞 MICRORNA 辐射抗拒
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HMME-PDT对CNE-2细胞增殖的抑制作用 被引量：9
5
作者 李燕 阴慧娟 +4 位作者 曾百乐 李晓原 胡黎平 潘实清 刘小星 《热带医学杂志》 CAS 2006年第9期F0002-F0004,共3页
目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用。方法以血卟啉单甲醚为光敏剂,532nm激光为激发光源的光动力学疗法作用于鼻咽癌CNE-2细胞。细胞用5、10、20!g/ml浓度的光敏剂孵育2h后,用0.6、1.2、2.4... 目的探讨血卟啉单甲醚介导的光动力学疗法(HMME-PDT)对鼻咽癌CNE-2细胞的抑制作用。方法以血卟啉单甲醚为光敏剂,532nm激光为激发光源的光动力学疗法作用于鼻咽癌CNE-2细胞。细胞用5、10、20!g/ml浓度的光敏剂孵育2h后,用0.6、1.2、2.4、4.8、9.6J/cm2剂量的激光照射;激光功率密度为10mW/cm2。MTT法检测在HMME和激光两种变量下PDT对细胞活性的抑制作用;光镜观察PDT作用后细胞形态的变化;免疫组化法检测PCNA的表达。结果在HMME剂量为5!g/ml、10!g/ml及20!g/ml时,细胞的抑制率随着激光剂量从0.6J/cm2增加至9.6J/cm2而逐渐增加;并且和HMME及激光剂量密切相关;光镜观察结果表明PDT组与对照组相比细胞密度明显减少,细胞核浓聚、碎裂。免疫组化结果显示PDT作用后PCNA表达减少。结论HMME-PDT对CNE-2细胞的增殖有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 血卟啉单甲醚 光动力疗法 cne-2细胞
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眼镜蛇毒神经生长因子诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡作用的研究 被引量：6
6
作者 韦世秀 刘成军 +2 位作者 李牡艳 宋慧 李佳荃 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第22期1909-1912,共4页
目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)... 目的:研究广西眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve growth factor,NGF)对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖的抑制作用和诱导细胞凋亡。方法:应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定不同质量浓度(0.0125,0.025,0.05,0.1,0.2g.L-1)NGF处理24,48,72,96h对人鼻咽癌CNE-2生长的抑制率;Hoechst33342荧光染色观察凋亡细胞的形态;琼脂糖凝胶电泳测定DNA断裂状况;流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡率。结果:不同浓度的NGF能抑制CNE-2细胞增殖,并呈浓度-时间效应关系,作用24,48,72,96h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.213,0.095,0.048,0.033g.L-1;经NGF(0.1g.L-1)处理细胞48h后,荧光染色呈现典型的细胞凋亡形态学特征;DNA凝胶电泳可见凋亡细胞特有的DNA片段;0.05,0.1,0.2g.L-1NGF作用48h后,CNE-2细胞被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率分别为(28.2±2.0)%、(39.9±1.9)%、(50.3±1.3)%。结论:NGF通过诱导人鼻咽癌CNE-2细胞凋亡而产生抗鼻咽癌活性。 展开更多
关键词 广西眼镜蛇毒 神经生长因子 鼻咽癌 cne-2细胞 细胞凋亡
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鼻咽癌细胞株CNE-2连续照射期间细胞增殖状况的研究 被引量：6
7
作者 朱小东 曲颂 +3 位作者 李力 唐步坚 黎丹绒 张玮 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第8期1281-1284,共4页
目的:了解鼻咽癌细胞(CNE-2)照射过程中的增殖情况,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的时机,为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法:对接受^(60)Co-γ射线2Gy/天,每天1次,连续照射5天期间的CNE-2细胞,每天分别采... 目的:了解鼻咽癌细胞(CNE-2)照射过程中的增殖情况,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的时机,为临床上进行鼻咽癌后程加速超分割放射治疗提供理论依据。方法:对接受^(60)Co-γ射线2Gy/天,每天1次,连续照射5天期间的CNE-2细胞,每天分别采用四氮唑兰比色分析法(MTT法)检测CNE-2细胞存活率、细胞分裂指数法检测细胞分裂指数、流式细胞术检测照射后细胞周期分布情况。结果:MTT法、细胞分裂指数法和流式细胞术均检测出CNE-2细胞在连续照射的第3天增殖速度最快,增殖最旺盛;在第5天细胞增殖速度最缓慢,增殖活性最低。结论:鼻咽低分化鳞癌细胞连续分割照射中后期存在加速增殖现象。 展开更多
关键词 cne-2细胞 照射 加速增殖
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miR-106b在鼻咽癌组织中表达及对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响 被引量：6
8
作者 周士霞 王海莉 王豪勋 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第20期9-12,共4页
目的探讨miR-106b在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响。方法选取68例份初治鼻咽癌患者的手术切除标本和45例份鼻咽炎患者的鼻咽部活检组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-106b表达,分析miR-106b表达与鼻咽... 目的探讨miR-106b在鼻咽癌组织中的表达及其对鼻咽癌CNE-2细胞生物学特性的影响。方法选取68例份初治鼻咽癌患者的手术切除标本和45例份鼻咽炎患者的鼻咽部活检组织标本,采用实时荧光定量PCR法检测miR-106b表达,分析miR-106b表达与鼻咽癌患者临床病理参数的关系。取体外培养的对数生长期人鼻咽癌细胞株CNE-2分为四组(1×106个/组)。miR-106b模拟物组、miR-106b抑制物组分别转染miR-106b模拟物及miR-106b抑制物序列,阴性对照组转染阴性对照序列,空白对照组不处理;采用实时荧光定量PCR技术检测各组miR-106b表达,MTT法检测各组细胞增殖情况(以吸光度值表示),流式细胞仪检测各组细胞周期,Transwell试验检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果鼻咽癌及鼻咽炎组织miR-106b相对表达量分别为1.57±0.15、1.14±0.12,二者比较P<0.05;miR-106b相对表达量与鼻咽癌患者淋巴结转移、侵犯颈动脉鞘和侵犯颅底有关(P均<0.05)。各组miR-106b相对表达量:miR-106b模拟物组高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,miR-106b抑制物组低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞增殖情况:miR-106b模拟物组细胞接种后24、48、72和96 h时吸光度值均高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,而miR-106b抑制物组低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞周期:miR-106b模拟物组S期细胞比例高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,而miR-106b抑制物组细胞S期比例低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05;各组细胞迁移和侵袭情况:miR-106b模拟物组迁移和侵袭细胞数均高于miR-106b抑制物组、阴性对照组和空白对照组,且miR-106b抑制物组均低于阴性对照组和空白对照组,P均<0.05。结论 miR-106b在鼻咽癌组织中呈高表达;miR-106b过表达可促进鼻咽癌CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 鼻咽癌 微小RNA-106b cne-2细胞 细胞增殖 细胞迁移
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千斤藤素对鼻咽癌细胞CNE-2多药耐药性的研究 被引量：3
9
作者 汪建 梁传余 林代诚 《广东医学》 CAS CSCD 2001年第10期945-946,共2页
目的　研究千斤藤素 (cepharanthine ,CEP)逆转多药耐药的能力。方法　用MTT法检测药物敏感性 ,用流式细胞技术检测p170蛋白的表达。结果　CEP能明显提高鼻咽癌细胞株对平阳霉素 (pingyangcin ,PYM)的敏感性 ,并能明显降低p170蛋白的表... 目的　研究千斤藤素 (cepharanthine ,CEP)逆转多药耐药的能力。方法　用MTT法检测药物敏感性 ,用流式细胞技术检测p170蛋白的表达。结果　CEP能明显提高鼻咽癌细胞株对平阳霉素 (pingyangcin ,PYM)的敏感性 ,并能明显降低p170蛋白的表达。结论　CEP可能通过抑制p170蛋白膜外转运功能逆转CNE -2细胞对PYM的耐药 。 展开更多
关键词 千斤藤素 平阳霉素 多药耐药性 鼻咽癌 cne-2细胞 MTT法
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姜黄素衍生物B50对不同辐射抗拒的同源鼻咽癌细胞增殖及凋亡的作用 被引量：4
10
作者 刘嘉伟 张剑威 +5 位作者 杨广鑫 陈淑英 方乐堃 梁广 肖健 杨惠玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1077-1083,共7页
目的:比较姜黄素衍生物(B50)抑制不同辐射抗拒的同源鼻咽癌细胞CNE-2与CNE-2R作用的差异。方法:采用MTT法和克隆形成实验检测B50对细胞活力及增殖的影响,以流式细胞仪检测B50对细胞周期分布、细胞凋亡及线粒体膜电位的影响。结果:B50可... 目的:比较姜黄素衍生物(B50)抑制不同辐射抗拒的同源鼻咽癌细胞CNE-2与CNE-2R作用的差异。方法:采用MTT法和克隆形成实验检测B50对细胞活力及增殖的影响,以流式细胞仪检测B50对细胞周期分布、细胞凋亡及线粒体膜电位的影响。结果:B50可抑制CNE-2R细胞的活力[24 h、48 h、72 h的IC50分别为(8.06±0.14)、(2.49±0.02)、(1.42±0.02)μmol/L],且呈时间浓度依赖性,其抑制作用明显优于对CNE-2细胞的作用[24 h、48 h、72 h的IC50分别为(8.18±0.12)μmol/L、(3.00±0.04)μmol/L、(1.75±0.01)μmol/L],P<0.01;同时B50抑制CNE-2R细胞增殖的作用明显优于对CNE-2的作用[48 h的IC50分别为(0.55±0.01)μmol/Lvs(0.82±0.01)μmol/L],P<0.01;药物作用48 h后,B50使CNE-2R细胞G2/M期的比例升高(7.1%→34.9%),明显优于CNE-2细胞(12.4%→35.7%)(P<0.01);B50作用于CNE-2R细胞24 h后早期凋亡率升高(3.7%→19.5%),明显优于CNE-2细胞(4.4%→14.8%)(P<0.01);B50作用24 h后,CNE-2R细胞线粒体膜电位下降了(43.17±3.11)%,明显优于对CNE-2细胞的降低率[(35.06±1.07)%](P<0.01)。结论:与CNE-2相比,B50能更显著地抑制辐射抗拒CNE-2R细胞的细胞活力及增殖能力,且更明显地调控细胞周期停滞于G2/M期,诱导细胞凋亡及降低线粒体膜电位。这些结果提示B50具有逆转辐射抗拒的潜在价值。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 cne-2细胞 cne-2R细胞 姜黄素衍生物 辐射抗拒
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不同浓度二磷酸氯喹和雷帕霉素对CNE-2细胞自噬的影响 被引量：6
11
作者 潘闻燕 朱小东 +4 位作者 赵伟 曲颂 李龄 苏芳 李小宇 《中国癌症防治杂志》 CAS 2011年第4期280-283,共4页
目的探讨不同浓度二磷酸氯喹和雷帕霉素对人鼻咽低分化鳞癌(CNE-2)细胞自噬的影响。方法利用Western-blot技术检测CNE-2细胞经不同浓度二磷酸氯喹(chloroquine disphosphate,CDP)和雷帕霉素(rapamycin)处理后自噬相关蛋白LC3-II和p62的... 目的探讨不同浓度二磷酸氯喹和雷帕霉素对人鼻咽低分化鳞癌(CNE-2)细胞自噬的影响。方法利用Western-blot技术检测CNE-2细胞经不同浓度二磷酸氯喹(chloroquine disphosphate,CDP)和雷帕霉素(rapamycin)处理后自噬相关蛋白LC3-II和p62的表达情况。以碘化丙啶(propidineiodide,PI)染色技术分别检测CNE-2细胞经抑制自噬最明显的CDP及rapamycin浓度处理后的细胞凋亡率。结果 Western-blot结果示,CNE-2细胞经不同浓度CDP和rapamycin处理后LC3-II和p62蛋白均有不同程度表达。CDP处理组中20.60mg/L浓度组LC3-II和p62表达水平均明显高于其他各浓度组(F1=719.388,F2=73.885,P均<0.01);rapamycin处理组中18.28μg/L浓度组LC3-II表达水平明显高于其他各浓度组(F=375.120,P<0.01),而p62表达水平却明显低于其他浓度组(F=70.770,P<0.01)。PI染色检测结果显示,20.60mg/LCDP组及18.28μg/Lrapamycin组的细胞凋亡率与对照组间无明显差异(F=0.371,P=0.705)。结论二磷酸氯喹可以抑制CNE-2细胞的自噬功能,且在20.60mg/L浓度时抑制功能最显著,而不引起细胞凋亡;雷帕霉素可以诱导CNE-2细胞发生自噬,且在18.28μg/L浓度时自噬现象最为明显,而不影响细胞增殖。 展开更多
关键词 二磷酸氯喹 雷帕霉素 自噬 cne-2细胞
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放射线和加热诱导CNE-2细胞系发生凋亡:几种检测方法的比较 被引量：4
12
作者 王凤玮 殷蔚伯 +3 位作者 梁克 沈瑜 盛修贵 董秀月 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1998年第11期796-799,共4页
比较了荧光显微镜观察法，流式细胞仪检测法及ＴｄＴ末端标记法检测高能Ｘ线及加热诱导人鼻咽癌细胞系的凋亡指数。结果发现ＣＮＥ－２细胞系受照２、４、８、１２及２０Ｇｙ后三种检测方法的凋亡指数荧光法分别为１５％、２０％、３１... 比较了荧光显微镜观察法，流式细胞仪检测法及ＴｄＴ末端标记法检测高能Ｘ线及加热诱导人鼻咽癌细胞系的凋亡指数。结果发现ＣＮＥ－２细胞系受照２、４、８、１２及２０Ｇｙ后三种检测方法的凋亡指数荧光法分别为１５％、２０％、３１％、３８％及４８％；流式法为１６．５％、２０．１％、３３％、４２．３％及４７．５％；ＴｄＴ法为２４．６％、３０．０％、４０．６％、５０．１％及５８．７％。我们使用ＴｄＴ法作为加热诱导凋亡的检测方法，发现于４１℃培养０．５、１、１．５、２．５ｈ后凋亡指数分别为１６．７％、２４．５％、３０．７％及４３％。结果提示ＴｄＴ末端标记法是比较敏感的检测方法，ＣＮＥ－２细胞系是对放。 展开更多
关键词 肿瘤 放射疗法 加温 cne-2细胞 细胞凋亡 TdT法
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人参多糖对鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及其可能的机制 被引量：4
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作者 范家铭 李静 +3 位作者 姜蓉 王亚平 李春莉 黄江菊 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期538-543,共6页
目的 探讨人参多糖（ginseng polysaccharide，GPS）对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞，经裸鼠背部皮下注射，1×10^7个／（0.2ml·只），待瘤体最大径为4～6mm时... 目的 探讨人参多糖（ginseng polysaccharide，GPS）对人鼻咽癌细胞CNE-2裸鼠移植瘤的放疗增敏作用及可能的机制。方法取对数生长期的鼻咽癌CNE-2细胞，经裸鼠背部皮下注射，1×10^7个／（0.2ml·只），待瘤体最大径为4～6mm时，取20只模型裸鼠，随机分为4组：对照组（经腹腔注射生理盐水）、放疗组（每次每只裸鼠经肿瘤局部给予5GyX射线照射，每3d照射1次，共3次）、GPS组（经腹腔注射GPS，30mg／kg，每次0.3ml，每72h给药1次，共5次）和GPS联合放疗组（经腹腔注射GPS，30mg／kg，每次0.3ml，每72h给药1次，共5次；末次给药48h后开始放疗，每只每次经肿瘤局部给予5Gy X射线照射，每3d照射1次，共3次）。开始给药3周后处死裸鼠，取瘤体，称重，测量肿瘤的长、短径，计算肿瘤体积及抑制率；HE染色观察移植瘤组织病理学改变；Real-time PCR检测移植瘤组织中β-eatenin基因mRNA的转录水平；免疫组织化学和Western blot法检测移植瘤组织中β-catenin蛋白的表达水平。结果与对照组相比，GPS组、放疗组和GPS联合放疗组的肿瘤体积及瘤重均明显下降（P〈0.05），抑制率分别为29.87％、52.60％和74.68％；镜下观察可见，GPS联合放疗组细胞凋亡明显，多数细胞核完全溶解，细胞结构消失，坏死的肿瘤组织呈现均质红染表现；GPS联合放疗组移植瘤中β-cateninmRNA及蛋白的表达水平均显著下降（P均〈0.05）。结论GPS可抑制CNE-2细胞在裸鼠体内的生长，且对鼻咽癌的放疗具有增敏作用，其机制可能与抑制β-catenin的表达有关。 展开更多
关键词 人参多糖 鼻咽癌 cne-2细胞 放疗 敏感性 Β-CATENIN
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青天葵总黄酮对人鼻咽癌CNE-2荷瘤裸鼠皮下肿瘤的抑制作用 被引量：1
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作者 秦晓辉 刘智强 +4 位作者 刘俊阳 黄春想 王可盈 宋家乐 周燕园 《陕西中医》 CAS 2024年第5期593-599,共7页
目的:研究青天葵总黄酮(TFNF)对BALB/c裸鼠人鼻咽癌细胞皮下种植模型中TGF-β1/Erk/MAPK通路的调控作用。方法:BALB/c裸鼠皮下接种CNE-2细胞(1.0×107细胞/ml)建立鼻咽癌荷瘤模型,苏木精-伊红染色(HE)行病理判断,免疫组化法(IHC)观... 目的:研究青天葵总黄酮(TFNF)对BALB/c裸鼠人鼻咽癌细胞皮下种植模型中TGF-β1/Erk/MAPK通路的调控作用。方法:BALB/c裸鼠皮下接种CNE-2细胞(1.0×107细胞/ml)建立鼻咽癌荷瘤模型,苏木精-伊红染色(HE)行病理判断,免疫组化法(IHC)观察细胞周期调节蛋白-67(Ki67)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平。免疫印迹法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶(Erk)、p-Erk、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p-MAPK的蛋白表达水平。试剂盒法评估肾脏、肝脏、脾脏中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)水平。结果:与模型组比较,高剂量TFNF显著抑制荷瘤小鼠肿瘤体积与质量,显著降低Ki67(55.19%)、PCNA(46.65%)表达水平,提高肾脏、肝脏、脾脏中SOD水平至3.88、2.98、3.71U/mgprot,降低肾脏、肝脏、脾脏的MDA水平至2.19、1.05、2.85nmol/mgprot。TFNF可降低肿瘤组织中TGF-β1(47.36%)、p-Erk/Erk(81.13%)、p-MAPK/MAPK(19.80%)的蛋白表达水平。结论:TFNF可调控TGF-β1/Erk/MAPK通路抑制肿瘤生长,并减轻荷瘤裸鼠主要脏器的氧化损伤发生。 展开更多
关键词 鼻咽癌 青天葵总黄酮 TGF-β1/Erk/MAPK信号通路 cne-2细胞 BALB/C裸鼠 氧化损伤
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山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响 被引量：4
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作者 陈育华 吴国才 +1 位作者 王珍 周碧云 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第5期616-619,共4页
目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处... 目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。 展开更多
关键词 山奈酚 cne-2细胞 细胞周期 CDK1 CYCLINB1 鼻咽癌
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洛铂抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖及其机制的初探 被引量：4
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作者 邹宇 邓梦夏 鲁欣 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期155-159,共5页
目的:观察洛铂(LBP)对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其中机制.方法:将不同浓度的洛铂加入对数生长期的CNE-2细胞,采用倒置显微镜观察各细胞生长状态;四甲基氮唑蓝(MTT)法观察其对细胞的增殖抑制;共聚焦显微镜观察洛铂促凋亡作... 目的:观察洛铂(LBP)对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其中机制.方法:将不同浓度的洛铂加入对数生长期的CNE-2细胞,采用倒置显微镜观察各细胞生长状态;四甲基氮唑蓝(MTT)法观察其对细胞的增殖抑制;共聚焦显微镜观察洛铂促凋亡作用;Western blot方法分析CNE-2细胞内Bcl-2蛋白表达变化.结果:共聚焦显微镜下观察洛铂作用CNE-2细胞后出现明显的凋亡学形态特征.MTT法显示洛铂能抑制细胞增殖,并呈浓度及时间依赖关系.Western blot结果显示洛铂能使CNE-2细胞Bcl-2蛋白表达水平下降.结论:洛铂能明显抑制CNE-2细胞增殖,诱导凋亡,可能与调节Bcl-2蛋白表达水平相关. 展开更多
关键词 洛铂 鼻咽癌 cne-2细胞 BCL-2蛋白
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鼻咽癌细胞系中核迁移蛋白的表达及作用 被引量：3
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作者 陈彦球 李添应 +1 位作者 瞿申鸿 唐小江 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第6期708-712,共5页
背景与目的:核迁移是真核生物生长发育和细胞功能所必需的,核迁移蛋白(nucleardistributionC,NUDC)在核迁移中起着重要作用。本研究旨在检测NUDC在鼻咽癌细胞系CNE-2、HNE-2中的表达情况,初步探讨其抗体对癌细胞活性的影响。方法:在大... 背景与目的:核迁移是真核生物生长发育和细胞功能所必需的,核迁移蛋白(nucleardistributionC,NUDC)在核迁移中起着重要作用。本研究旨在检测NUDC在鼻咽癌细胞系CNE-2、HNE-2中的表达情况,初步探讨其抗体对癌细胞活性的影响。方法:在大肠杆菌中表达GST-NUDC重组蛋白并制备其多克隆抗体,间接免疫荧光染色法明确NUDC蛋白在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,Westernblot确定NUDC蛋白在鼻咽癌细胞系中表达情况,MTT法检测NUDC抗体对鼻咽癌细胞生长的影响。结果:鼻咽非癌组织及鼻咽癌细胞中均有NUDC蛋白表达,且其在鼻咽癌细胞中的表达量明显高于鼻咽非癌组织。NUDC蛋白在鼻咽癌细胞中主要位于细胞质核区附近,细胞核也可见少量表达。NUDC蛋白抗体可抑制鼻咽癌细胞生长,且存在着剂量-反应关系。结论:NUDC蛋白在鼻咽癌细胞系中高度表达,且NUDC蛋白抗体在体外可抑制鼻咽癌细胞的生长。 展开更多
关键词 核迁移蛋白 鼻咽肿瘤 cne-2细胞 HNE-2细胞 细胞培养 表达 细胞增殖
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姜黄素衍生物T83对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞凋亡的作用 被引量：2
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作者 王梦瑶 王苏美 +5 位作者 左应林 王杜娟 刘琴 王春华 卜宪章 杨惠玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期654-659,共6页
目的:比较4-芳甲叉类姜黄素衍生物T83对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞凋亡的作用差异。方法:采用MTT法、Hoechst 33342染色法、流式细胞术、Western blotting和qRT-PCR检测和比较T83对CNE-2R和CNE-2细胞活力、细胞凋亡及线粒体膜电位、细... 目的:比较4-芳甲叉类姜黄素衍生物T83对同源不同辐射抗性鼻咽癌细胞凋亡的作用差异。方法:采用MTT法、Hoechst 33342染色法、流式细胞术、Western blotting和qRT-PCR检测和比较T83对CNE-2R和CNE-2细胞活力、细胞凋亡及线粒体膜电位、细胞procaspase-3/procaspase-9/Cyt-C蛋白表达和细胞PTEN/Akt/p27mRNA水平的影响。结果:T83可抑制CNE-2R细胞的活性(24 h、48 h和72 h的IC50分别为0.9、0.4和0.2μmol/L),其抑制作用明显优于对CNE-2细胞的作用(24 h、48 h和72 h的IC50分别为1.8、0.5和0.4μmol/L;P<0.05);T83作用48 h后,CNE-2R和CNE-2细胞中均观察到染色质浓缩、边集和分割成块状;T83作用48 h后,CNE-2R细胞晚期凋亡率升高(1.57%→27.26%),明显高于CNE-2细胞(1.74%→8.15%;P<0.05);T83作用36 h后,CNE-2R细胞线粒体膜电位下降百分率(87.71%)明显高于CNE-2细胞(50.47%;P<0.05);T83作用48 h后,CNE-2R细胞中procaspase-3和procaspase-9蛋白表达明显低于CNE-2细胞,CNE-2R中Cyt-C蛋白表达明显高于CNE-2细胞。T83作用24 h后,PTEN和p27 mRNA水平明显上调,而Akt mRNA水平明显下调(P<0.05),且CNE-2R细胞的变化更加显著。结论:与CNE-2细胞相比,T83能更加明显地抑制PTEN/Akt/p27信号转导通路,启动线粒体凋亡途径,加速诱导CNE-2R细胞凋亡。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 cne-2R细胞 cne-2细胞 姜黄素衍生物 辐射抗性
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姜黄素对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3
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作者 李文全 曹忠胜 钱伟 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第35期4917-4919,4922,共4页
目的探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度(0、10、20、40、60μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest3325... 目的探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度(0、10、20、40、60μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest33258荧光染色法观察细胞凋亡情况。结果姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且随姜黄素浓度增加,CNE-2细胞抑制率呈上升趋势(P<0.05),姜黄素作用CNE-2细胞24、48、72h的半抑制浓度(IC50)分别为(23.54±0.36)、(18.31±0.42)、(8.56±0.37)μmol/L,即姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且呈现明显浓度、时间依赖性;流式细胞检测结果显示,0、10、20、40、60μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞,凋亡率随着姜黄素浓度增加而上升;荧光染色结果可见,CNE-2细胞未给予姜黄素处理,细胞呈圆形或者椭圆形,细胞核大小均匀一致,染色质分布均匀的淡蓝色荧光;10μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞胞体缩小,细胞核染色质凝聚,呈颗粒状亮蓝色荧光;20μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞出现胞体缩小,细胞核浓缩、染色质不均匀,出现凋亡小体,甚至出现核碎裂;40和60μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞凋亡小体数量增多,出现大量核碎裂。结论姜黄素对NPC细胞株CNE-2细胞增殖具有明显抑制作用,且促进CNE-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 姜黄素 鼻咽肿瘤 cne-2细胞 细胞增殖 凋亡
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ApoG2联合放疗对鼻咽癌CNE-2细胞自噬与凋亡的影响研究 被引量：3
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作者 刘洋 刘硕 孙建军 《疑难病杂志》 CAS 2015年第4期384-386,390,共4页
目的探讨ApoG2联合放射治疗对鼻咽癌(NPC)的CNE-2细胞自噬与凋亡的影响。方法将人NPC CNE-2细胞株分成空白对照组(仅加培养液,不加细胞)、放射治疗组、ApoG2组、联合组(放射+ApoG2),采用CCK-8法测定ApoG2+放射治疗对细胞增敏的作用,Hoec... 目的探讨ApoG2联合放射治疗对鼻咽癌(NPC)的CNE-2细胞自噬与凋亡的影响。方法将人NPC CNE-2细胞株分成空白对照组(仅加培养液,不加细胞)、放射治疗组、ApoG2组、联合组(放射+ApoG2),采用CCK-8法测定ApoG2+放射治疗对细胞增敏的作用,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态的变化,吖啶橙染色观察细胞自噬形态变化,检测细胞凋亡率的变化;Western bolt检测Beclin1、Bcl-2蛋白的表达情况变化。结果不同的放射剂量组间细胞增殖抑制率比较具有显著性差异(P<0.01),随着放射剂量的增加,鼻咽癌CNE-2细胞的抑制率也随之上升;不同的ApoG2药物浓度组间细胞增殖抑制率比较差异也具有显著性意义(P<0.01),随着药物浓度的增加,鼻烟癌CNE-2细胞的抑制率也上升。4组CNE-2细胞的凋亡率组间比较具有显著性差异,联合组凋亡率显著高于其他3组(F=140.2,P<0.01)。4组的Bcl-2、Beclinl的蛋白表达量组间比较差异具有统计学意义(Bel-2:F=71.24,P<0.01;Beclinl:F=107.53,P<0.01),其中联合组的Bcl-2蛋白表达量最低,Beclinl的蛋白表达量最高。结论ApoG2联合放疗能够通过诱导鼻咽癌CNE-2细胞的自噬与凋亡,从而抑制CNE-2细胞的增殖。 展开更多
关键词 ApoG2 鼻咽癌 cne-2细胞 自噬 凋亡
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