目的构建含有白细胞介素8(IL-8)基因的重组腺病毒,并观察其对BT549乳腺癌细胞增殖、细胞周期以及迁移能力的影响。方法以143B细胞c DNA为模版,PCR扩增IL-8基因,与穿梭质粒p Ad Track-TO4连接,构建重组穿梭质粒p Ad Track-TO4-IL-8,由Pm...目的构建含有白细胞介素8(IL-8)基因的重组腺病毒,并观察其对BT549乳腺癌细胞增殖、细胞周期以及迁移能力的影响。方法以143B细胞c DNA为模版,PCR扩增IL-8基因,与穿梭质粒p Ad Track-TO4连接,构建重组穿梭质粒p Ad Track-TO4-IL-8,由PmeⅠ线性化并电转入Ad Easier细菌中,获得重组腺病毒质粒p Ad IL-8,PacⅠ酶切经LipofectamineTM2000介导转入HEK293细胞进行包装扩增,检测滴度;反转录PCR检测BT549细胞中IL-8 mRNA的水平,ELISA检测BT549细胞培养上清液中IL-8的水平;流式细胞术检测细胞周期情况;MTT法检测细胞增殖能力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力。结果PCR以及测序证实p Ad Track-TO4-IL-8构建成功;p Ad IL-8经酶切证实重组正确;重组腺病毒Ad IL-8感染BT549细胞,可高表达IL-8。过表达IL-8的BT549细胞迁移能力增强,但其增殖活性无明显变化、将细胞周期阻滞于S期。结论过表达IL-8可促进BT549细胞的迁移。展开更多
目的:通过系统评价和Meta分析,以确定眼部水溶液样本中IL-8水平与糖尿病视网膜病变(DR)之间的关系。方法:检索PubMed、Embase和Web of Science数据库,检索时间为2010-01/2021-06。采用随机效应模型合并结果,通过敏感性分析确定运算结果...目的:通过系统评价和Meta分析,以确定眼部水溶液样本中IL-8水平与糖尿病视网膜病变(DR)之间的关系。方法:检索PubMed、Embase和Web of Science数据库,检索时间为2010-01/2021-06。采用随机效应模型合并结果,通过敏感性分析确定运算结果是否稳定可靠,并且采用亚组分析寻找异质性可能的来源。结果:共纳入25篇病例对照研究。DR患者的IL-8水平明显高于非DR患者(SMD:1.57,95%CI:1.19~1.95,P<0.01)。敏感性分析提示随机效应的运算结果是稳定可靠的。基于检测方法、地区、样本来源、DR类型的亚组分析显示,这些因素的选择在很大程度上会影响IL-8水平与DR患者的关系。其中,来自Bead-based法(I^(2)=18%,P=0.27)、欧洲(I^(2)=38%,P=0.17)和非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR)(I^(2)=0%,P=0.49)样本的一致性比较好。而ELISA、美洲、亚洲、玻璃体液、增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)等因素都可能会加大效应量。结论:眼部水溶液中IL-8水平升高与DR的发生风险有关,IL-8可作为DR的潜在预测因子或治疗靶点。展开更多
文摘目的构建含有白细胞介素8(IL-8)基因的重组腺病毒,并观察其对BT549乳腺癌细胞增殖、细胞周期以及迁移能力的影响。方法以143B细胞c DNA为模版,PCR扩增IL-8基因,与穿梭质粒p Ad Track-TO4连接,构建重组穿梭质粒p Ad Track-TO4-IL-8,由PmeⅠ线性化并电转入Ad Easier细菌中,获得重组腺病毒质粒p Ad IL-8,PacⅠ酶切经LipofectamineTM2000介导转入HEK293细胞进行包装扩增,检测滴度;反转录PCR检测BT549细胞中IL-8 mRNA的水平,ELISA检测BT549细胞培养上清液中IL-8的水平;流式细胞术检测细胞周期情况;MTT法检测细胞增殖能力;划痕愈合实验检测细胞迁移能力。结果PCR以及测序证实p Ad Track-TO4-IL-8构建成功;p Ad IL-8经酶切证实重组正确;重组腺病毒Ad IL-8感染BT549细胞,可高表达IL-8。过表达IL-8的BT549细胞迁移能力增强,但其增殖活性无明显变化、将细胞周期阻滞于S期。结论过表达IL-8可促进BT549细胞的迁移。
文摘目的:通过系统评价和Meta分析,以确定眼部水溶液样本中IL-8水平与糖尿病视网膜病变(DR)之间的关系。方法:检索PubMed、Embase和Web of Science数据库,检索时间为2010-01/2021-06。采用随机效应模型合并结果,通过敏感性分析确定运算结果是否稳定可靠,并且采用亚组分析寻找异质性可能的来源。结果:共纳入25篇病例对照研究。DR患者的IL-8水平明显高于非DR患者(SMD:1.57,95%CI:1.19~1.95,P<0.01)。敏感性分析提示随机效应的运算结果是稳定可靠的。基于检测方法、地区、样本来源、DR类型的亚组分析显示,这些因素的选择在很大程度上会影响IL-8水平与DR患者的关系。其中,来自Bead-based法(I^(2)=18%,P=0.27)、欧洲(I^(2)=38%,P=0.17)和非增殖性糖尿病视网膜病变(NPDR)(I^(2)=0%,P=0.49)样本的一致性比较好。而ELISA、美洲、亚洲、玻璃体液、增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)等因素都可能会加大效应量。结论:眼部水溶液中IL-8水平升高与DR的发生风险有关,IL-8可作为DR的潜在预测因子或治疗靶点。