活性电泳分析米曲霉沪酿3.042蛋白酶组分 被引量：7

1

作者 张贺迎 武金霞 闫博 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第12期162-164,共3页

建立了活性电泳分析蛋白酶组分的方法。在制备分离胶时,加入终浓度为0.5%的SDS和1%的酪蛋白,4℃下电泳,以2.5%Triton-X100洗去SDS,在不同条件下温浴,可得到清晰的蛋白酶谱。采用该方法在沪酿3.042的成曲浸提液中检测到7种蛋白酶组分,这... 建立了活性电泳分析蛋白酶组分的方法。在制备分离胶时,加入终浓度为0.5%的SDS和1%的酪蛋白,4℃下电泳,以2.5%Triton-X100洗去SDS,在不同条件下温浴,可得到清晰的蛋白酶谱。采用该方法在沪酿3.042的成曲浸提液中检测到7种蛋白酶组分,这些组分在pH中性条件下都有活性,其中3种蛋白酶在pH酸性条件下仍然有很强的活性。这些发现与对米曲霉蛋白酶的传统认识有很大的不同。 展开更多

关键词 酱油 米曲霉沪酿3.042 蛋白酶 活性电泳

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小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活性的变化 被引量：5

2

作者 张新胜 张顺利 +2 位作者 郭玫 张文学 徐存拴 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 1999年第3期302-310,共9页

采用活性电泳方法对小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活性进行了研究。结果发现：（1）出生前，胃和大肠蛋白酶种类少，活性弱；出生后，胃和大肠蛋白酶的种类多，活性增加；（2）胃肠蛋白酶可能与其结构的构建和功能建立有密切关系；（... 采用活性电泳方法对小白鼠发育过程中胃和大肠蛋白酶活性进行了研究。结果发现：（1）出生前，胃和大肠蛋白酶种类少，活性弱；出生后，胃和大肠蛋白酶的种类多，活性增加；（2）胃肠蛋白酶可能与其结构的构建和功能建立有密切关系；（3）食物的刺激可能对胃肠蛋白酶有显著影响。 展开更多

关键词 小白鼠 发育 蛋白酶 活性电泳

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牛脾脏中μ-钙激活酶的分离纯化方法研究 被引量：4

3

作者 黄明 藏大存 +2 位作者 徐幸莲 赵莲 周光宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期541-544,共4页

本试验旨在通过采用多种生物学分离手段和多个分离步骤从牛脾脏中分离纯化μ-钙激活酶。对宰后30min黄牛脾脏通过匀浆后利用超高速冷冻离心、离子交换层析、疏水层析、分子筛等技术,从中分离纯化出了μ-钙激活酶,最后得到的μ-钙激活酶... 本试验旨在通过采用多种生物学分离手段和多个分离步骤从牛脾脏中分离纯化μ-钙激活酶。对宰后30min黄牛脾脏通过匀浆后利用超高速冷冻离心、离子交换层析、疏水层析、分子筛等技术,从中分离纯化出了μ-钙激活酶,最后得到的μ-钙激活酶的比活力为38.4U/mg。并对分离纯化过程中各主要步骤μ-钙激活酶的总活性、比活力等参数变化进行了测定,同时采用不连续十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和活性电泳(caseinzymography)对纯化过程中的样品进行了鉴定。 展开更多

关键词 μ-钙激活酶 纯化 柱层析 活性电泳 变性不连续电泳

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荷斯坦奶牛瘤胃微生物脲酶的分离与鉴定 被引量：4

4

作者 赵圣国 王加启 +3 位作者 刘开朗 李旦 于萍 卜登攀 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期692-696,共5页

本研究旨在从荷斯坦奶牛瘤胃中分离活性脲酶。从奶牛瘤胃中收集瘤胃内容物,通过离心和超声破碎的方法得到不含菌体细胞的瘤胃液(CFRF)和瘤胃菌体蛋白液(RCP),利用85%硫酸铵盐析,并透析后,用HiTrap Capto Q离子交换层析柱纯化脲酶。将纯... 本研究旨在从荷斯坦奶牛瘤胃中分离活性脲酶。从奶牛瘤胃中收集瘤胃内容物,通过离心和超声破碎的方法得到不含菌体细胞的瘤胃液(CFRF)和瘤胃菌体蛋白液(RCP),利用85%硫酸铵盐析,并透析后,用HiTrap Capto Q离子交换层析柱纯化脲酶。将纯化后的脲酶用活性PAGE分离,并利用改良的Fishbein染色法,确定脲酶条带位置,切胶,经胰蛋白酶消化后,用LC-MS/MS分析,并用SEQUEST软件在NCBI数据库搜索与质谱信号相匹配的肽段和蛋白质。结果表明从CFRF和RCP中分离出较高活性的脲酶,但经染色后只有RCP脲酶显示活性条带。经质谱分析,最终鉴定出了3种微生物来源脲酶,分别与嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、唾液链球菌(Streptococcus salivarius)和嗜碱芽孢杆菌(Bacillus halodurans)相似。这说明绕过纯培养微生物,直接从瘤胃中分离脲酶,来研究其性质和来源是可行的,尤其适合对未培养微生物的研究。 展开更多

关键词 瘤胃脲酶 分离纯化 活性电泳 LC-MS/MS 蛋白质组

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枯草芽孢杆菌内切木聚糖酶的分离纯化与鉴定 被引量：1

5

作者 袁小平 姚惠源 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第5期54-55,共2页

目的 :建立一种简便、快速的木聚糖酶分离和提取方法。方法 :采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合 ,分离纯化枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)固体培养基发酵产物中的木聚糖酶 ,进一步用薄层色谱和高压液相色谱对木聚糖酶进... 目的 :建立一种简便、快速的木聚糖酶分离和提取方法。方法 :采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合 ,分离纯化枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)固体培养基发酵产物中的木聚糖酶 ,进一步用薄层色谱和高压液相色谱对木聚糖酶进行鉴定。结果 :采用活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合 ,从枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)固体培养基发酵产物中分离得到了两种内切木聚糖酶 ,酶解桦木木聚糖的产要产物以木二糖和木三糖为主。结论 :活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和均质提取法相结合是一种新的分离纯化木聚糖酶的简便、有效方法。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 活性电泳 木聚糖酶

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猕猴生殖、泌尿、免疫系统各器官蛋白水解酶种类和性质 被引量：3

6

作者 吉爱玲 赵晓进 +4 位作者 李彦章 伍雁 杨春玲 封青川 徐存拴 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期195-199,共5页

为了系统研究太行山猕猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔａｔｃｈｅｌｉｅｎｓｉｓ）生殖、泌尿、免疫系统各器官蛋白水解酶的种类和性质，用活性单向电泳（１Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）和活性双向电泳（２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）方法研究了太行山猕猴生... 为了系统研究太行山猕猴（Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔａｔｃｈｅｌｉｅｎｓｉｓ）生殖、泌尿、免疫系统各器官蛋白水解酶的种类和性质，用活性单向电泳（１Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）和活性双向电泳（２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ）方法研究了太行山猕猴生殖系统、泌尿系统和免疫系统中蛋白水解酶种类和酶活性的ｐＨ依赖性。结果表明：（１）同一系统功能相近的器官之间蛋白水解酶非常相似，不同系统的器官之间，中性和碱性蛋白水解酶种类有很大差异；（２）同一器官的酸性蛋白水解酶种类与它的中性和碱性蛋白水解酶种类迥异，而且３个系统中各器官均具有３１、３０和２９ｋＤ３种酸性蛋白水解酶，但它们在不同器官中的活性有较大差异；（３）用２Ｄ－Ｇ－ＰＡＧＥ测得在ｐＨ７．０条件下。 展开更多

关键词 器官 蛋白水解酶 活性电泳 猕猴

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产纤溶酶乳酸菌筛选及安全性评估 被引量：3

7

作者 尹梦雯 周倩 +1 位作者 雷婵 胡欣洁 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2017年第10期28-33,共6页

以从传统发酵食品中分离出的2株产纤溶酶的粪肠球菌HYD09与HYN06为对象,测定其发酵上清液酶活,对菌株进行安全性评估。选较安全的菌株进行胃肠道生存能力测试;同时对发酵上清液进行蛋白酶处理试验;从发酵液中获得粗酶液,进行活性电泳。... 以从传统发酵食品中分离出的2株产纤溶酶的粪肠球菌HYD09与HYN06为对象,测定其发酵上清液酶活,对菌株进行安全性评估。选较安全的菌株进行胃肠道生存能力测试;同时对发酵上清液进行蛋白酶处理试验;从发酵液中获得粗酶液,进行活性电泳。结果表明:HYD09和HYN06发酵上清液酶活分别为115.3 U/mL和107.2 U/mL;HYD09和HYN06吲哚试验、硝酸盐还原酶试验、氨基脱羧酶试验、溶血试验均为阴性,对14种抗生素无多重耐药性;HYD09无毒力基因检出,HYN06检出esp毒力基因。证明HYD09菌株是安全的。进一步研究发现,菌株HYD09有一定的耐酸耐胆盐能力;HYD09发酵上清液经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理仍具有纤溶活性;且菌株HYD09发酵上清液的粗酶中有2种主要的组分,但具有纤溶活性的组分只有1种。 展开更多

关键词 纤溶酶 乳酸菌 鉴定 安全性 活性电泳

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萝卜过氧化物酶对番茄幼苗生长发育的影响 被引量：1

8

作者 李建军 王琳 +3 位作者 李小娟 蔡林林 陈淑龙 王林嵩 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期132-135,共4页

为了研究萝卜过氧化物酶对植物生长的影响.用萝卜过氧化物酶对番茄种子浸种和幼苗叶面喷洒后;分别于番茄幼苗3叶1心期和4叶1心期测量番茄幼苗的株高、鲜质量和干质量等形态指标,测定幼苗根部的可溶性蛋白含量和过氧化物酶的活性;并用活... 为了研究萝卜过氧化物酶对植物生长的影响.用萝卜过氧化物酶对番茄种子浸种和幼苗叶面喷洒后;分别于番茄幼苗3叶1心期和4叶1心期测量番茄幼苗的株高、鲜质量和干质量等形态指标,测定幼苗根部的可溶性蛋白含量和过氧化物酶的活性;并用活性电泳和PCR检测萝卜过氧化物酶和番茄过氧化物酶的差异.结果表明:萝卜过氧化物酶能显著促进番茄幼苗的生长,并且使番茄幼苗根部的蛋白含量有明显地增加,显著提高其过氧化物酶活性.由此可见,外源过氧化物酶对番茄幼苗的生理和形态指标均有一定的影响. 展开更多

关键词 番茄 过氧化物酶 活性电泳 生长发育

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活性电泳切胶法分离白腐菌(Trametes sp.B1)2种漆酶同工酶及其性质研究 被引量：2

9

作者 刘友勋 黄娟 +3 位作者 闫明阳 张文博 赵春澎 张煜 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第9期54-57,共4页

对白腐菌(Trametes sp.)菌株B1的固体发酵粗酶液进行活性电泳后发现含有5种漆酶同工酶。硫酸铵沉淀、离子交换柱层析和Sephadex G100柱层析的收集液中包含有2种带电荷和分子量接近的漆酶同工酶,进一步利用活性电泳切胶法纯化出这2种同工... 对白腐菌(Trametes sp.)菌株B1的固体发酵粗酶液进行活性电泳后发现含有5种漆酶同工酶。硫酸铵沉淀、离子交换柱层析和Sephadex G100柱层析的收集液中包含有2种带电荷和分子量接近的漆酶同工酶,进一步利用活性电泳切胶法纯化出这2种同工酶,用SDS-PAGE证明为单一漆酶,它们的分子量分别为64 ku(Lac1)和62 ku(Lac2),并对其理化性质进行了研究。Lac1漆酶反应的最适p H值为2.2,最适温度为50℃,氧化ABTS的Km值为1.952 mmol/L;Lac2漆酶反应的最适p H值为2.2,最适温度为40℃,氧化ABTS的Km值为0.255 mmol/L。 展开更多

关键词 白腐菌 漆酶同工酶 纯化 活性电泳 酶学性质

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酮古龙酸菌山梨酮脱氢酶的原核表达及活性鉴定 被引量：1

10

作者 张谷青 陈微微 +3 位作者 熊向华 汪建华 游松 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2012年第4期511-514,共4页

目的:克隆酮古龙酸菌Y25的山梨酮脱氢酶基因sndh2,在大肠杆菌中进行表达,并检测表达产物的活性。方法:以酮古龙酸菌Y25基因组DNA为模板,PCR扩增sndh2基因,连接到pET22b表达载体后转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达;对菌体裂解液进... 目的:克隆酮古龙酸菌Y25的山梨酮脱氢酶基因sndh2,在大肠杆菌中进行表达,并检测表达产物的活性。方法:以酮古龙酸菌Y25基因组DNA为模板,PCR扩增sndh2基因,连接到pET22b表达载体后转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达;对菌体裂解液进行SDS-PAGE分析;以D-木糖为底物,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后活性染色及DCIP检测法鉴定表达产物的脱氢酶活性。结果:扩增得到1290 bp的山梨酮脱氢酶基因;构建了表达质粒pET22b-sndh2,SDS-PAGE结果显示获得相对分子质量为43.1×103的可溶性表达产物;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳胶上出现的蓝黑色条带及DCIP检测液颜色的变化说明表达产物在以D-木糖为底物时表现出脱氢酶活性。结论:在大肠杆菌中表达的山梨酮脱氢酶具有生物活性。 展开更多

关键词 山梨酮脱氢酶 酮古龙酸菌 原核表达 活性电泳 生物活性

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黑斑蛙早期胚胎发育过程中蛋白酶活性

11

作者 张文学 张新胜 +3 位作者 薛德明 马茹 马全祥 徐存拴 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第4期54-57,共4页

本文采用活性电泳方法，对黑斑蛙（Ｒａｎａ ｎｉｇｒｏｍ ａｃｕｌａｔａ）早期胚胎发育过程中蛋白酶活性进行了研究．结果如下：尾芽期以前未检测到蛋白酶活性；中性条件下，心跳期检出分子量分别为８０、７２、６６ｋＤ的三种蛋白酶... 本文采用活性电泳方法，对黑斑蛙（Ｒａｎａ ｎｉｇｒｏｍ ａｃｕｌａｔａ）早期胚胎发育过程中蛋白酶活性进行了研究．结果如下：尾芽期以前未检测到蛋白酶活性；中性条件下，心跳期检出分子量分别为８０、７２、６６ｋＤ的三种蛋白酶；随着胚胎的发育，蛋白酶的种类逐渐增多、活性逐渐增强；三种ｐＨ 条件下各时期所检出的酶的种类及活性并不相同，但以中性条件下酶的种类多、活性强． 展开更多

关键词 黑斑蛙 早期 胚胎发育 蛋白酶 活性电泳

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豇豆胰蛋白酶抑制剂不同组分的制备方法 被引量：1

12

作者 金宪雷 张泉霖 +1 位作者 杜林方 刘科 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2012年第B12期118-121,共4页

以豇豆种子为材料,经脱脂、乙酸钠抽提、硫酸铵分级沉淀得到胰蛋白酶抑制剂粗提物。再经凝胶过滤、离子交换层析和FPLC,分别得到了豇豆蛋白酶抑制剂的不同组分,并进行了SDS-PAGE分析。同时通过明胶活性电泳,证实了各部分均具备专一的胰... 以豇豆种子为材料,经脱脂、乙酸钠抽提、硫酸铵分级沉淀得到胰蛋白酶抑制剂粗提物。再经凝胶过滤、离子交换层析和FPLC,分别得到了豇豆蛋白酶抑制剂的不同组分,并进行了SDS-PAGE分析。同时通过明胶活性电泳,证实了各部分均具备专一的胰蛋白酶抑制剂活性。 展开更多

关键词 豇豆 胰蛋白酶抑制剂 分离纯化 活性电泳

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基于光密度法的蛋白酶电泳定量评价胃蛋白酶的功效

13

作者 邢晟 梁翠荣 +3 位作者 巩丽萍 石峰 吴秀芸 王禄山 《药学研究》 CAS 2020年第3期142-145,152,共5页

目的以胃蛋白酶原料为研究对象,通过光密度定量蛋白酶谱法分析胃蛋白酶的功效。方法以Native-PAGE负染电泳以及光密度数据分析技术为依托,进行方法学验证,利用该方法对胃蛋白酶进行分析研究,对产品质量及功效直观评价。结果建立了可以... 目的以胃蛋白酶原料为研究对象,通过光密度定量蛋白酶谱法分析胃蛋白酶的功效。方法以Native-PAGE负染电泳以及光密度数据分析技术为依托,进行方法学验证,利用该方法对胃蛋白酶进行分析研究,对产品质量及功效直观评价。结果建立了可以直观表征及定量比较酶功效的电泳技术,通过光密度数据提取对4种胃蛋白酶原料功效进行比较,与传统效价测定方法比较,结果更加精确,能够直观反映酶制剂的比酶活信息。结论该法测定结果反映了实际活性成分,能够更加直接反映胃蛋白酶的功效及质量,具有较好的应用前景,该方法亦可应用在其他酶制剂的分析研究中。 展开更多

关键词 蛋白酶电泳 活性电泳 胃蛋白酶 光密度

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山梨醇脱氢酶的克隆、表达及活性检测

14

作者 陈微微 袁红杰 +3 位作者 熊向华 汪建华 马秀灵 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2011年第2期188-191,共4页

目的:从氧化葡糖杆菌H24中克隆山梨醇脱氢酶基因进行表达并检测其活性。方法:以氧化葡糖杆菌H24基因组DNA为模板,PCR扩增包括启动子、结构基因及其后的终止序列在内的山梨醇脱氢酶基因;将PCR产物插入pMD18T载体,转化大肠杆菌DH5α;通过... 目的:从氧化葡糖杆菌H24中克隆山梨醇脱氢酶基因进行表达并检测其活性。方法:以氧化葡糖杆菌H24基因组DNA为模板,PCR扩增包括启动子、结构基因及其后的终止序列在内的山梨醇脱氢酶基因;将PCR产物插入pMD18T载体,转化大肠杆菌DH5α;通过活性电泳检测山梨醇脱氢酶在大肠杆菌中的表达及活性。结果:从氧化葡糖杆菌H24中扩增得到山梨醇脱氢酶基因并在大肠杆菌中实现表达,重组菌株经活性电泳检测具有醇糖转化活性。结论:原核表达的山梨醇脱氢酶具有很强的醇糖转化活性。 展开更多

关键词 山梨醇脱氢酶 克隆 表达 活性电泳 生物活性

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酮古龙酸菌山梨醇脱氢酶的原核表达及活性检测

15

作者 赵楠 熊向华 +3 位作者 葛欣 汪建华 夏焕章 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2013年第6期810-813,共4页

目的:克隆酮古龙酸菌Y25的山梨醇脱氢酶基因sldh,在大肠杆菌中进行表达并检测表达产物的活性。方法:以酮古龙酸菌Y25基因组DNA为模板,PCR扩增sldh基因,连接到表达载体pTIG,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;取表达菌体、菌体裂解上... 目的:克隆酮古龙酸菌Y25的山梨醇脱氢酶基因sldh,在大肠杆菌中进行表达并检测表达产物的活性。方法:以酮古龙酸菌Y25基因组DNA为模板,PCR扩增sldh基因,连接到表达载体pTIG,转入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达;取表达菌体、菌体裂解上清和沉淀进行SDS-PAGE分析;以山梨醇为底物,通过活性电泳、体外转化及休止细胞转化进行sldh基因表达产物的活性检测。结果:扩增得到1740 bp的山梨醇脱氢酶基因,构建了表达质粒pTIG-sldh并在大肠杆菌中获得表达,SDS-PAGE结果显示表达产物为可溶性形式,相对分子质量约58×103;活性电泳结果说明表达产物在以山梨醇为底物时表现出脱氢酶活性,而经体外转化和休止细胞转化后薄层层析检测出转化产物山梨糖的存在。结论:在大肠杆菌中实现了酮古龙酸菌山梨醇脱氢酶的可溶性表达,且表达的重组脱氢酶能将山梨醇脱氢生成山梨糖。 展开更多

关键词 酮古龙酸菌 山梨醇脱氢酶 原核表达 生物活性 活性电泳

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动情周期中小白鼠子宫蛋白酶的变化

16

作者 张新胜 张文学 +2 位作者 郭玫 张顺利 徐存拴 《四川解剖学杂志》 1998年第2期91-94,共4页

本文采用活性电泳方法对小白鼠动情周期各个时期子宫蛋白酶进行了研究。结果发现：（1）子宫中蛋白酶主要为中性蛋白酶和酸性蛋白酶。碱性蛋白酶种类少，活性弱。（2）子宫中105kd、94kd的中性蛋白酶和67kd的酸性蛋白酶随小白鼠的动情... 本文采用活性电泳方法对小白鼠动情周期各个时期子宫蛋白酶进行了研究。结果发现：（1）子宫中蛋白酶主要为中性蛋白酶和酸性蛋白酶。碱性蛋白酶种类少，活性弱。（2）子宫中105kd、94kd的中性蛋白酶和67kd的酸性蛋白酶随小白鼠的动情周期而发生明显改变。 展开更多

关键词 动情周期 子宫 蛋白酶 小白鼠 活性电泳

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酿造激活剂对不同曲霉菌株蛋白酶组分及活性的影响

17

作者 张贺迎 武金霞 闫博 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第3期88-90,共3页

以活性电泳比较了不同来源酱油生产菌株的蛋白酶组分,研究了激活对蛋白酶组分表达及活性的影响。结果表明,不同来源菌株蛋白酶组分数量各不相同,其中米曲霉GM蛋白酶组分数量最多,其他菌株的蛋白酶组分均少于米曲霉GM。激活后多数蛋白酶... 以活性电泳比较了不同来源酱油生产菌株的蛋白酶组分,研究了激活对蛋白酶组分表达及活性的影响。结果表明,不同来源菌株蛋白酶组分数量各不相同,其中米曲霉GM蛋白酶组分数量最多,其他菌株的蛋白酶组分均少于米曲霉GM。激活后多数蛋白酶组分的活性都有提高,其中对GM的组分4、AS3.324的组分4、336-2的组分1、3042-HL的组分4、3042-ZH的组分4和3.042KG的组分7激活作用明显。激活剂还能诱导336-2新的蛋白酶组分表达。 展开更多

关键词 激活酿造 曲霉 蛋白酶组分 活性电泳

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黑葡萄穗霉高环境适应性

18

作者 张梦雪 杜雨珊 +1 位作者 徐圣阳 张小梅 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期117-122,共6页

为探究纤维素降解菌黑葡萄穗霉的环境适应机制,分别将该属菌株S05培养于不同pH、不同碳源培养基中,检测其生长及胞外糖苷水解酶表达情况,并利用糖苷水解酶活性电泳展示各主要酶组分的多样性及其催化性质.结果显示,黑葡萄穗霉S05生长pH... 为探究纤维素降解菌黑葡萄穗霉的环境适应机制,分别将该属菌株S05培养于不同pH、不同碳源培养基中,检测其生长及胞外糖苷水解酶表达情况,并利用糖苷水解酶活性电泳展示各主要酶组分的多样性及其催化性质.结果显示,黑葡萄穗霉S05生长pH范围较宽,在pH 4.5-9.5范围内均能生长,且更适于中性偏碱性环境;胞外主要糖苷水解酶组分最适pH多为pH 6.5-8.5,pH稳定性较强;该菌株具有精细的表达调控体系,能及时根据环境条件的变化调整酶组分的组成.综上表明黑葡萄穗霉S05的高环境适应性与其胞外糖苷水解酶组分的性质密切相关,对其酶组分的深入研究可为寻找工业所需中性及偏碱性纤维素酶的来源提供可能. 展开更多

关键词 黑葡萄穗霉 糖苷水解酶 活性电泳 中性纤维素酶

原文传递

中华大蟾蜍尾退化过程中尾蛋白酶活性的变化

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作者 张新胜 张文学 +4 位作者 张顺利 王俐 于广丽 刘家栋 王雁北 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2001年第4期74-77,共4页

采用活性电泳方法对中华大蟾蜍尾退化过程中尾蛋白酶活性的变化进行了研究 ,结果显示 :(1)酸性条件 (p H3.5 )下 ,从 35期到 38期 ,检测到的蛋白酶带数目较少 ,活性较弱 ;碱性条件 (p H9.5 )下 ,除 2 5 k D的蛋白酶带之外 ,检测到的其... 采用活性电泳方法对中华大蟾蜍尾退化过程中尾蛋白酶活性的变化进行了研究 ,结果显示 :(1)酸性条件 (p H3.5 )下 ,从 35期到 38期 ,检测到的蛋白酶带数目较少 ,活性较弱 ;碱性条件 (p H9.5 )下 ,除 2 5 k D的蛋白酶带之外 ,检测到的其它酶带与酸性条件下相似 ;(2 )中性条件 (p H7.0 )下 ,从 35期到 38期 ,检测到的蛋白酶带逐渐增多 ,活性也明显增强 ,尤其是在尾退化的高峰期 (37期、38期 ) ,110 k D、92 k D、 74k D的酶带活性达到峰值 ;另外在尾退化的高峰期还检测到了 7条新酶带 ,其中 5 5 k D的酶带活性也达到峰值。以上结果提示 。 展开更多

关键词 尾退化 蛋白酶 细胞凋亡 活性电泳 中华大蟾蜍

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3种检测吡咯喹啉醌的方法比较 被引量：17

20

作者 杨延新 熊向华 +1 位作者 游松 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2011年第4期544-547,共4页

目的:研究和比较3种检测吡咯喹啉醌(PQQ)的方法,确定各种方法的特点和适用范围。方法:设计和改进了3种检测PQQ的方法,分别为活性电泳法、光谱法和NBT-Gly法,探讨其检测限和线性范围、精密度、样品检测和加样回收率。结果:活性电泳法专... 目的:研究和比较3种检测吡咯喹啉醌(PQQ)的方法,确定各种方法的特点和适用范围。方法:设计和改进了3种检测PQQ的方法,分别为活性电泳法、光谱法和NBT-Gly法,探讨其检测限和线性范围、精密度、样品检测和加样回收率。结果:活性电泳法专一性好,具有很高的灵敏度,可检测到12.6 ng/mL PQQ,可靠但准确性较差;NBT-Gly法操作简便,可用于大量样品的检测,但重复性不佳;光谱法精密度较好,但样品中存在吸光物质时对检测结果影响较大。结论:活性电泳法、光谱法和NBT-Gly法均可用于PQQ的检测,活性电泳法适于培养上清等复杂样品的粗略定量,NBT-Gly法适于大量样品的检测,光谱法适于纯度较高的PQQ的定量。 展开更多

关键词 吡咯喹啉醌 检测方法 活性电泳法 光谱法 NBT-Gly法

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