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青岛地区2007-2009年人肠道病毒71型的分子流行病学研究 被引量：11
1
作者 刘晓琳 汪照国 +1 位作者 杨婷婷 弋英 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期382-384,共3页
目的了解2007-2009年青岛地区引起手足口病的人肠道病毒71（EV71）型VPI基因编码区（CDS）分子流行病学特征。方法采用荧光定量PCR对咽拭子标本进行总肠道病毒（EV）、柯萨奇病毒A16（CA16）和EV71检测。选取部分EV71检测阳性的标本进行... 目的了解2007-2009年青岛地区引起手足口病的人肠道病毒71（EV71）型VPI基因编码区（CDS）分子流行病学特征。方法采用荧光定量PCR对咽拭子标本进行总肠道病毒（EV）、柯萨奇病毒A16（CA16）和EV71检测。选取部分EV71检测阳性的标本进行VP1基因CDS序列的扩增及测序，对所获得的序列进行进化树分析。结果青岛市2007-2009年的51株EV71病毒核苷酸和氨基酸的差异性分别为5.3％和1．7％，所有病毒均属于C4亚型中的C4a簇。2008和2009年的基凶进化树均有多个分支产生，但每年都有一个主要分支（即优势株）。2008年的优势株与2007年山东省临沂市优势株高度同源，2008年的次优势株和2009年的优势株同与2008年安徽省阜阳市优势株高度同源。2007年的2株EV71与2007年山东省临沂市流行株高度同源。结论青岛市2008和2009年的EV71均有多个传播链存在，2008年的主传播链至2009年变为次传播链，但2008年的次传播链至2009年发展为主传播链。 展开更多
关键词 手足口病 人肠道病毒71型 VP1基因 分子流行病学
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环境内分泌干扰物对儿童早期性别角色行为影响的研究进展 被引量：2
2
作者 程盼盼 王炳玲 +2 位作者 孙忠清 张秀莲 逄淑涛 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2015年第2期169-173,共5页
环境内分泌干扰物能够影响人类的神经发育。已有研究表明多氯联苯、二英、邻苯二甲酸酯及大豆异黄酮等能够影响性别角色行为,其可能机制是通过干扰在大脑发育中起关键调节作用的下丘脑-垂体-甲状腺或下丘脑-垂体-性腺轴,影响性激素分泌... 环境内分泌干扰物能够影响人类的神经发育。已有研究表明多氯联苯、二英、邻苯二甲酸酯及大豆异黄酮等能够影响性别角色行为,其可能机制是通过干扰在大脑发育中起关键调节作用的下丘脑-垂体-甲状腺或下丘脑-垂体-性腺轴,影响性激素分泌,从而影响神经发育。但环境内分泌干扰物如何调控性激素对性别角色行为作用的具体机制尚不清楚。该文在现有研究的基础上,综述了环境内分泌干扰物对儿童性别角色行为的影响及可能作用机制。 展开更多
关键词 环境内分泌干扰物 性别角色行为 性激素 前列腺素E2
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野生型及突变型乙型肝炎病毒X基因在pGEX-6P-2系统中的克隆、表达、纯化及免疫鉴定 被引量：5
3
作者 张晓慧 王昌源 +5 位作者 谭炳芹 李程 杜磊 王永康 张洪花 董格峰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期427-432,共6页
构建野生型和A1762T/G1764A双突变型乙型肝炎病毒(HBV)X基因原核表达系统,为深入研究HBV X基因及其双突变后对HBV慢性感染者病情发展和肿瘤发生的作用奠定基础。从慢性乙型肝炎患者血清中抽提HBV基因组DNA,经PCR扩增和基因测序,证实并... 构建野生型和A1762T/G1764A双突变型乙型肝炎病毒(HBV)X基因原核表达系统,为深入研究HBV X基因及其双突变后对HBV慢性感染者病情发展和肿瘤发生的作用奠定基础。从慢性乙型肝炎患者血清中抽提HBV基因组DNA,经PCR扩增和基因测序,证实并获得野生型及A1762T∕G1764A双突变型HBV X基因。应用TA克隆及亚克隆技术将2基因分别插入pGEX-6P-2载体,构建pGEX-6P-2-hbvxw(野生型)及pGEX-6P-2-hb-vxm(A1762T∕G1764A突变型)重组表达载体;转化入宿主菌进行诱导表达;包涵体复性后,GSTrap FF蛋白纯化柱纯化带有GST标签的野生型和A1762T∕G1764A突变型HBV x抗原(HBxAg);应用SDS-PAGE、Westernblot和ELISA方法对表达的野生型和突变型HBxAg进行鉴定。结果SDS-PAGE证实本研究构建的2个表达系统均能高效表达目的蛋白;复性、纯化后野生型和突变型GST-HBxAg分别达到4.88mg/mL和5.07mg/mL;Western blot鉴定证实所纯化的野生型和突变型HBxAg均能被特异性的单克隆抗体所识别;ELISA方法检测显示2种抗原都能成功包被于微量滴定板上并与乙肝患者血清反应。证实本研究成功地构建了野生型和A1762T∕G1764A突变型HBxAg表达系统,为进一步研究A1762T∕G1764A基因突变对肿瘤发生学和慢性HBV感染者疾病进展的作用和分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 乙肝病毒x抗原 野生型 A1762T/G1764A突变型 融合表达 纯化 免疫鉴定
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EB病毒相关胃癌中病毒分型的研究 被引量：2
4
作者 杨婷婷 王云 +3 位作者 刘霞 李欣 逄增昌 罗兵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期29-34,共6页
收集236例胃癌组织标本及135份健康人群咽漱液(throat washings,TWs)标本,采用原位杂交、PCR-Southern blot筛选出17例EB病毒相关胃癌(EBVaGC)(7.2%)和33例EBV阳性的TWs标本(24.4%);应用PCR-RFLP、巢式PCR及DNA测序等方法,检测EBV阳性... 收集236例胃癌组织标本及135份健康人群咽漱液(throat washings,TWs)标本,采用原位杂交、PCR-Southern blot筛选出17例EB病毒相关胃癌(EBVaGC)(7.2%)和33例EBV阳性的TWs标本(24.4%);应用PCR-RFLP、巢式PCR及DNA测序等方法,检测EBV阳性标本病毒1/2分型、F/f分型、I/i分型及LMP1XhoI(+)/(-)等四种基因变异。EBVaGC及健康对照均为F型变异,未检测到f型变异。EBVaGC中1/2型、I/i型及LMP1XhoI(+)/(-)型的例数及比例分别为:17(100%)/0(0)、1(5.9%)/16(94.1%)及0(0)/15(88.2%);而TWs中上述分型的相应数据为25(75.8%)/8(24.2%)、11(33.3%)/19(57.6%)及12(36.4%)/18(54.5%),各位点两种基因型在EBVaGC和健康人中的分布不同(1/2:P=0.047;I/i:P=0.048;XhoI(+)/(-):P=0.012)。综合分析表明在3种基因多态性均能确定的标本中,EBVaGC均为1/i/XhoI(-)亚型(15/15,100%),明显高于健康对照中该亚型的比率(4/28,14.3%)(x2=29.098,P<0.0001),提示1/i/XhoI(-)型EBV可能是与山东地区EB-VaGC相关的变异型。 展开更多
关键词 EB病毒 胃癌 基因分型
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