摘要
研究旨在建立1种检测鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)的实时荧光定量TaqManRT-PCR检测方法。制备含有GAstV目的基因的标准质粒,以10倍比稀释的GAstV标准品建立标准曲线,测定敏感性。同时采用5个稀释度的标准品验证该方法的批内和批间重复性,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测。结果:建立的实时荧光定量TaqMan RT-PCR方法仅在鹅星状病毒RNA样本中检出荧光信号。最低检出量为7.51×10^(2)copies/μL,敏感性良好,是常规RT-PCR的1000倍;线性范围达8个数量级。该方法重复性良好,批内和批间的变异系数均在1.4%以下。通过检测临床样本并结合常规RT-PCR的检出结果,计算二者的符合率高达96.15%,证明该法准确性高,可用于临床、生产实际的检测。综上该方法具有良好的特异性、敏感性、重复性以及准确性,用于GAstV的临床诊断、流行病学调查,降低GAstV给养鹅业带来的影响。
出处
《养禽与禽病防治》
2024年第3期19-24,共6页
Poultry Husbandry and Disease Control
