摘要
目的 探讨山柰酚在人牙周韧带源性间充质干细胞(h PDL MSC)活力、增殖和克隆形成中的作用及对p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的调控作用。方法 体外培养hPDL MSC细胞系,分为0μmol·L^(-1)、0.01μmol·L^(-1)、0.1μmol·L^(-1)、1μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)、100μmol·L^(-1)山柰酚组,SB203580组,10μmol·L^(-1)山柰酚+SB203580组。分别采用细胞计数试剂盒-8法、5-乙基-2’-脱氧尿苷法、平板克隆法、Western blotting法检测细胞活力、增殖、克隆形成及p38 MAPK通路蛋白水平。结果 药物处理48 h后,与0μmol·L^(-1)山柰酚组相比,0.1μmol·L^(-1)、1μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)山柰酚组细胞活力升高(P <0.05),且细胞形状从细长变成更立方体;药物处理48 h后,与0μmol·L^(-1)山柰酚组相比,0.1μmol·L^(-1)、1μmol·L^(-1)和10μmol·L^(-1)山柰酚组EDU阳性率升高,1μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)山柰酚组克隆形成数增多,10μmol·L^(-1)山柰酚组p-p38蛋白表达升高(P <0.05);与10μmol·L^(-1)山柰酚+SB203580组相比,10μmol·L^(-1)山柰酚组p-p38蛋白水平、EDU阳性率、克隆形成数较高,而SB203580组p-p38蛋白表达、细胞活力、EDU阳性率、克隆形成数较低(P <0.05)。结论 山柰酚可促进hPDL MSC细胞活力、增殖和克隆形成能力,且激活p38 MAPK通路是其分子机制之一。
Objective To explore the role of Kaempferol in the activity,proliferation and clonal formation of human periodontal ligamentderived mesenchymal stem cells(hPDL MSC)and the regulatory effect of p38 mitogen-activated protein kinase(MAPK)signaling pathway.Methods The hPDL MSC cell line was cultured in vitro and divided into 0μmol·L^(-1),0.01μmol·L^(-1),0.1μmol·L^(-1),1μmol·L^(-1),10μmol·L^(-1),100μmol·L^(-1) Kaempferol group,SB203580 group,and 10μmol·L^(-1) Kaempferol+SB203580 group.Cell activity,proliferation,clonal formation and p38 MAPK pathway protein levels were detected by cell counting kit-8 method,5-ethyl-2‘-deoxyuridine method,plate colony method and Western blotting method,respectively.Results Compared with the 0μmol·L^(-1) Kaempferol group,cell activity of 0.1μmol·L^(-1),1μmol·L^(-1) and 10μmol·L^(-1) Kaempferol group was higher after 48 hours of drug treatment(P<0.05),and the cell shape changed from a slender shape to a more cubic shape.Compared with the 0μmol·L^(-1) Kaempferol group,after 48 hours of drug treatment,the 5-ethynyl-2-deoxyuridine(EdU)positive rate in the 0.1μmol·L^(-1),1μmol·L^(-1) and 10μmol·L^(-1) Kaempferol group increased,the number of clones formation in the 1μmol·L^(-1) and 10μmol·L^(-1) kaempferol group increased,and the expression of p-p38 protein in the 10 μmol·L^(-1) Kaempferol group increased (P <0.05). Compared with the 10 μmol·L^(-1) Kaempferol + SB203580 group, the level of p-p38 protein, EdU positive rate and the number of clones formation were higher in the 10 μmol·L^(-1) Kaempferol group, while the expression of p-p38 protein, cell activity, EdU positive rate and the number of clones formation were lower in the SB203580 group (P <0.05). Conclusion Kaempferol can promote cell activity, proliferation and clonal formation of hPDL MSC cells, and the activation of p38 MAPK pathway is one of its molecular mechanisms.
作者
李召宝
王婧
郭香君
吴帅楠
王建琪
LI Zhaobao;WANG Jing;GUO Xiangjun;WU Shuainan;WANG Jianqi(Department of Stomatology,Cangzhou Central Hospital,Cangzhou 061000,China)
出处
《长春中医药大学学报》
2023年第9期980-984,共5页
Journal of Changchun University of Chinese Medicine
基金
2021年度河北省医学科学研究项目(20210670)。
关键词
山柰酚
人牙周韧带源性间充质干细胞
P38丝裂原活化蛋白激酶
细胞活力
增殖
克隆形成
Kaempferol
human periodontal ligament-derived mesenchymal stem cells
p38 mitogen-activated protein kinase
cell activity
proliferation
clonal formation
