摘要
〕目的:探讨石斛酚对LUCAT1的调控及对高糖诱导的人肾小管上皮细胞损伤的影响。方法:肾小管上皮细胞分为对照组(5.5 mmol/L的D-葡萄糖),高糖组(30 mmol/L的D-葡萄糖),高糖+石斛酚低、中、高剂量组(30 mmol/L的D-葡萄糖+1.25μmol/L、2.5μmol/L、5.0μmol/L石斛酚)、高糖+si-NC组(30 mmol/L的D-葡萄糖+转染si-NC),高糖+si-LUCAT1组(30 mmol/L的D-葡萄糖+转染si-LUCAT1),高糖+石斛酚组(30 mmol/L的D-葡萄糖+5.0μmol/L石斛酚),高糖+石斛酚+pcDNA组(30 mmol/L的D-葡萄糖+5.0μmol/L石斛酚+转染pcDNA),高糖+石斛酚+pcDNA-LUCAT1组(30 mmol/L的D-葡萄糖+5.0μmol/L石斛酚+转染pcDNA-LUCAT1)。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、细胞计数试剂盒8(CCK-8)、流式细胞术、Western blot和比色法检测肾小管上皮细胞中LUCAT1、miR-140-5p表达、细胞增殖、凋亡、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。双荧光素酶报告实验分析LUCAT1与微小RNA(miRNA)-140-5p的靶向关系。结果:低、中、高剂量石斛酚降低高糖诱导的肾小管上皮细胞中LUCAT1表达量、细胞凋亡率、Bax蛋白表达量、MDA水平,提高miR-140-5p表达量、细胞增殖、Bcl-2蛋白表达量,SOD水平升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。干扰LUCAT1降低高糖诱导的肾小管上皮细胞中LUCAT1表达量、凋亡率、Bax蛋白表达量、MDA水平,提高miR-140-5p表达量、细胞增殖、Bcl-2蛋白表达量、SOD水平(P<0.05)。LUCAT1可逆转石斛酚对高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡氧化应激的影响。LUCAT1靶向miR-140-5p。结论:石斛酚可以促进高糖诱导的人肾小管上皮细胞增殖,减轻凋亡和氧化应激,机制与下调LUCAT1靶向miR-140-5p有关。
出处
《中国中西医结合肾病杂志》
2022年第8期707-711,共5页
Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Nephrology
