摘要
目的 探讨糖尿病肾病(DKD)大鼠转化生子因子(TGF)-β1调控胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)1活化的作用。方法 TGF-β1 (2 ng/ml)和(或)SCAP抑制剂(Fatostatin)、S1P抑制剂(AEBSF)、PI3K抑制剂(LY294002,Wortmainin)、Akt抑制剂(Akt inhibitorⅧ)、mTOR抑制剂(rapamycin)、TβR1抑制剂(SB431542)处理培养的大鼠肾小球系膜细胞(MC),免疫荧光和Western印迹检测SREBP1的核移位和蛋白表达水平;Western印迹检测FN和CTGF蛋白表达;p3TP-Lux荧光素酶报告质粒和pCMV-β-gal或SREBP1 siRNA转染至MC或Smad3 WT/KO MC,TGF-β1处理24 h后检测p3TP-Lux荧光素酶活性。结果 与AdLacZ组大鼠肾组织中SREBP1蛋白水平相比,AdTGF-β1组明显增加(P<0.05)。与Con组MC中SREBP1蛋白的核表达荧光强度相比,TGF-β1组明显增加(P<0.05),与TGF-β1组MC中SREBP1蛋白的核表达荧光强度相比,T+fato组明显降低(P<0.05)。与Con组mSREBP1蛋白表达相比,TGF-β1组明显升高(P<0.05)。与TGF-β1组mSREBP1蛋白表达相比,T+fato组和T+AEBSF组均明显降低(P<0.01)。与Con组GFP荧光强度相比,TGF-β1组明显增加(P<0.05)。与TGF-β1组GFP荧光强度相比,T+fato组明显降低(P<0.05)。与TGF-β1组mSREBP1表达相比,T+LY组、T+Wort组、T+Akti组和T+rapa组均明显降低(均P<0.05)。与TGF-β1组相比,T+RIinh组明显抑制了mSREBP1蛋白的表达(P<0.01)。与ConB组mSREBP1表达相比,TGF-β1B组明显升高。ConB组Smad3 KO MC的p3TPLux荧光素酶活性与TGF-β1B组有显著差异(P<0.05)。TGF-β1A组和TGF-β1B组mSREBP1蛋白表达无明显差异(P>0.05)。与ConB组p3TP-Lux荧光素酶活性相比,TGF-β1D组明显增加(P<0.01);与TGF-β1D组p3TP-Lux荧光素酶活性相比,T+fatoA组明显抑制(P<0.01)。TGF-β1 E组p3TP-Lux荧光素酶活性明显高于TGF-β1 F组(P<0.05)。与ConD组SREBP1下游促纤维化蛋白CTGF和FN蛋白相比,TGF-β1D组均明显升高(P<0.05);与TGF-β1D组SREBP1下游促纤维化蛋白CTGF和FN蛋白相比,T+fatoA组则明显降低(P<0.05)。结论 TGF-β1诱导S
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2022年第12期3040-3044,共5页
Chinese Journal of Gerontology
基金
国家级大学生创新创业训练计划项目(201910222020)
黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD2017020)
黑龙江中医药大学校级课题(201839)
佳木斯大学优秀学科团队基础医学学科团队(JDXKTD-2019002)。
